生物學(xué)試驗(yàn)綜述

本文格式為Word版，下載可任意編輯——生物學(xué)試驗(yàn)綜述菊花組織培養(yǎng)綜述

學(xué)院：生命科學(xué)的學(xué)院姓名：張啟慧學(xué)號(hào)：15920705（交換生）

：綜述了花卉類(lèi)植物組織培養(yǎng)技術(shù)在近年來(lái)的新進(jìn)展;包括花卉組織培養(yǎng)的意義、應(yīng)用狀況、研究進(jìn)展等。并從以上三個(gè)方面進(jìn)行了綜述。本文著重論述菊花組織培養(yǎng)技術(shù)的試驗(yàn)過(guò)程、應(yīng)用狀況以這兩方面。：菊花組織培養(yǎng)應(yīng)用發(fā)展

1.組織培養(yǎng)的原理

花卉組織培養(yǎng)，就是分開(kāi)花卉植物體的一部分，如莖類(lèi)、莖段、葉、花、幼胚等，在無(wú)菌試管，并協(xié)同一定的營(yíng)養(yǎng)、激素、溫度、光照等條件，使其產(chǎn)生完整植株。

植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞全能性。也就是說(shuō)每個(gè)植物細(xì)胞里都含有一整套遺傳物質(zhì)，只不過(guò)在特定條件下不會(huì)表達(dá)。組織培養(yǎng)基于此原理就可以將已處于分化終端或正在分化的植物組織脫分化，誘導(dǎo)形成愈傷組織，再在愈傷組織上形成新的叢生芽。

2.試驗(yàn)材料2.1試驗(yàn)儀器

分析天平、超凈工作臺(tái)、高壓滅菌鍋、培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室、剪刀、鑷子、手術(shù)刀、電爐、燒杯試劑瓶、培養(yǎng)瓶、酒精燈、縝密PH試紙。

2.2材料：

菊花花瓣

2.3試劑

6-BA、2,4-D、NAA、1mol/L氫氧化鈉、1mol/LHCL、乙醇、蔗、瓊脂。

3．試驗(yàn)方法3.1配制培養(yǎng)基

適合菊花花瓣分化培養(yǎng)的培養(yǎng)基為MS+6-BA3mg/l+NAA0.1mg/l+糖3%+瓊脂0.7%，pH5.8

3.2外植體的消毒滅菌

選取新鮮的菊花花瓣，用洗衣粉清洗表面，自來(lái)水沖洗30min，再用吸水紙吸干水分。然后移入超凈工作臺(tái)，用70%乙醇消毒30s，接著擁抱和漂白粉消毒20min。最終用無(wú)菌水洗五到六次，滅菌過(guò)濾的濾紙吸干水分。

3.3接種培養(yǎng)

用滅菌的剪刀把花瓣頭尾剪去，剪成一或兩段，接種在培養(yǎng)基上，幾天后，脫分化出遇上組著愈傷組織，再培養(yǎng)十天左右可分化出不定芽。當(dāng)芽長(zhǎng)到1-2厘米時(shí)，分割芽MS+NAA0.5mg/l生根培養(yǎng)基中，繼續(xù)培養(yǎng)10天左右，就可以長(zhǎng)出白根，形成完整的植株。

4.花卉組織培養(yǎng)的意義

4.1增加遺傳變異性，改良品種

單倍體育種：通過(guò)花藥培養(yǎng)，從小孢子獲得單倍體植株，染色體加倍后獲得正常二倍體植株，這是一條育種的新途徑。單倍體育種可以縮短育種年限，儉約人力物力，較快地獲得優(yōu)良品種，目前已有四十多種植物獲得了單倍體植株。我國(guó)在水稻、小麥、煙草、柏樹(shù)、橡膠、辣椒等植物的單倍體育種的工作上，處于領(lǐng)先地位。

胚培養(yǎng)、子房培養(yǎng)、胚珠培養(yǎng)：為了戰(zhàn)勝遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，可采用胚、子房、胚珠培養(yǎng)和試管受精等手段。最早成功的例子是兩個(gè)栽培種亞麻的雜交胚

發(fā)生敗育，利有雜種胚培養(yǎng)戰(zhàn)勝了一些障礙，得到種子。現(xiàn)在在棉花、黃麻上也獲得成功。從玉米的離體子房培養(yǎng)，經(jīng)體外受粉可以得到種子。

突變體的選擇和應(yīng)用：由于植物的單細(xì)胞培養(yǎng)成功，可以用這個(gè)方法誘發(fā)單細(xì)胞進(jìn)行突變，通過(guò)篩選所需要的突變體，然后使細(xì)胞分化成植株，再通過(guò)有性世代使遺傳性穩(wěn)定下來(lái)，這是從細(xì)胞水平來(lái)改造植物的一種途徑。除細(xì)胞外，愈傷組織、花藥、原生質(zhì)體都可誘發(fā)突變。

此外，通過(guò)原生質(zhì)體融合，并以選擇胞質(zhì)鏈霉素抗性做手段以轉(zhuǎn)移煙草的雄性不育性狀，或通過(guò)原生質(zhì)體融合轉(zhuǎn)移胞質(zhì)的抗林可霉素因子都得到成功。原生質(zhì)體沒(méi)有胞壁，簡(jiǎn)單接受外來(lái)的引入物質(zhì)。由于致癌農(nóng)桿菌可以使多種植物形成腫瘤，以及已發(fā)現(xiàn)它所帶的Ti質(zhì)粒可以有效的插入植物細(xì)胞的基因組中，所以一些研究者也設(shè)想能否以Ti質(zhì)粒作為載體，與固氮基因重組后轉(zhuǎn)入植物的細(xì)胞中，則遺傳工程在創(chuàng)新植物類(lèi)型上的前景，無(wú)疑是十分廣闊的。

4.2繁殖植物

組織培養(yǎng)中從一個(gè)單細(xì)胞，一塊愈傷組織，一個(gè)芽（或其它器官）都可以獲得無(wú)性系。這一方法在較短時(shí)間內(nèi)即可獲得一個(gè)植株。對(duì)保存寶貴的優(yōu)良樹(shù)種或花卉品種是簡(jiǎn)易而有效的方法。

5.花卉組織培養(yǎng)的應(yīng)用價(jià)值

由于其條件可以嚴(yán)格控制，生長(zhǎng)迅速，1-2個(gè)月即為一個(gè)周期，因此在花卉植物的生產(chǎn)上有重要應(yīng)用價(jià)值。

5.1快速大量繁殖方面：

對(duì)一些難繁殖的寶貴品種花卉及一些短期內(nèi)大量急需生產(chǎn)的花卉，應(yīng)用很廣。蘭花、菊花、唐菖蒲等花卉利用腋芽增生，短期得到大量植株。非洲紫羅蘭可通過(guò)葉片，水仙可通地鱗片，誘導(dǎo)產(chǎn)生不定芽，來(lái)達(dá)到大量繁殖的目的。

5.2花卉育種方面：

百合、鳶尾等大量花卉可以進(jìn)行遠(yuǎn)緣雜交，由于生理代謝等方面的原因，常使雜種胚早期敗育，因而得不到雜種植物。而在試管中進(jìn)行胚培養(yǎng)，可使其順利生長(zhǎng)，得到遠(yuǎn)緣雜種。此外還可采用愈傷組織誘變、花粉培養(yǎng)等多種方法，來(lái)進(jìn)行花卉育種。

5.3培育無(wú)病毒苗方面：

菊花、唐菖蒲、水仙、郁金香、大麗花等一大批花卉靠無(wú)性繁殖法繁殖，病毒逐代傳遞積累，危害日趨嚴(yán)重。而分開(kāi)花卉植物0.1-0.5毫米大小的生長(zhǎng)點(diǎn)，培養(yǎng)得到的基本上是無(wú)病毒苗。因此這一技術(shù)已在花卉無(wú)病毒苗的培育中廣泛應(yīng)用。

6.組織培養(yǎng)在花卉繁殖上的應(yīng)用6.1快速、大量繁殖優(yōu)良品種

組織培養(yǎng)與傳統(tǒng)的無(wú)性繁殖相比，工作不受季節(jié)限制，而且經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)進(jìn)行無(wú)性繁殖，具有用材少、速度快等特點(diǎn)。組織培養(yǎng)雖然有用材少、增殖率高的優(yōu)點(diǎn)，但成本較高，一般在母株材料少而需短時(shí)期內(nèi)大量增殖和培育脫毒苗時(shí)才應(yīng)用，如母株材料多且沒(méi)有褪化時(shí)，還是以傳統(tǒng)繁殖方法為宜。

6.2在花卉育種上的利用

在花卉育種上，應(yīng)用很廣泛，主要在胚胎培養(yǎng)、單倍體育種、體細(xì)胞雜交和植物基因工程等方面應(yīng)用較多。通過(guò)組織培養(yǎng)，可縮短育種年限和世代，也有利于基因突變中隱性突變的分開(kāi)。

6.3花卉的提純復(fù)壯

運(yùn)用組織培養(yǎng)，苗木的復(fù)壯過(guò)程很明顯，對(duì)于長(zhǎng)期運(yùn)用無(wú)性方法繁殖并開(kāi)始

退化的花卉品種，如康乃馨可采用組培方法繁殖，可使個(gè)體發(fā)育向年青階段轉(zhuǎn)化。

6.4獲得無(wú)病植株

一些用無(wú)性繁殖方法來(lái)繁衍的花卉種類(lèi)，如康乃馨、菊花、郁金香、水仙、百合、鳶尾等，不能通過(guò)種子途徑去除病毒。由于利用植物體的一部分繁殖，易導(dǎo)致病毒積累，危害加重，影響了花卉的欣賞效果。而植物在莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)區(qū)幾乎不含或含極少病毒，由于該區(qū)無(wú)維管束，病毒難以進(jìn)入，所以莖尖培養(yǎng)成為獲得無(wú)病毒植株的重要途徑。

6.5種質(zhì)資源的保存

好多無(wú)性繁殖的植物因沒(méi)有種子供長(zhǎng)期保存，其種質(zhì)資源傳統(tǒng)上只能在田間種植保存，花費(fèi)人力物力，且資源易受人為因素和環(huán)境因素而丟失。而用組培方法，可大大節(jié)省人力、物力，大大延長(zhǎng)保存期。

7.前景展望

由于生產(chǎn)方法獨(dú)特，且都是在人工無(wú)菌操