果蠅飼養(yǎng)與性狀觀察 雜交

果蠅飼養(yǎng)與性狀觀察雜交第1頁(yè)/共36頁(yè)2注意安全有毒、危險(xiǎn)品嚴(yán)格按操作規(guī)程使用與廢棄，不得隨意丟棄。易燃物品必須遠(yuǎn)離火源。嚴(yán)防觸電，禁止?jié)袷秩∧秒娫撮_關(guān)。一旦發(fā)生事故，及時(shí)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)房間嚴(yán)禁進(jìn)食與飲水。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須身著工作服。第2頁(yè)/共36頁(yè)實(shí)驗(yàn)課要求1實(shí)驗(yàn)室紀(jì)律安靜、整潔、認(rèn)真操作。愛惜儀器、物品，節(jié)約材料、藥品。試劑的使用：及時(shí)蓋上瓶塞，不要“張冠李戴”。倒出的溶液嚴(yán)禁回倒，滴管、玻棒不可混用。按規(guī)則使用儀器。值周安排實(shí)驗(yàn)結(jié)束后必須做好清潔。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后請(qǐng)簽到第3頁(yè)/共36頁(yè)3顯微鏡和解剖鏡的使用防濕、防高溫、防藥品侵蝕。染液等溶液：不得污染鏡頭和鏡臺(tái)。不得在高倍鏡下取放標(biāo)本片。移動(dòng)時(shí)小心、輕放，防止滑落損壞。用后關(guān)閉燈源，清潔，套上防塵罩。儀器、工具損壞或丟失：及時(shí)報(bào)告。違反操作規(guī)程所致不應(yīng)有損失，按學(xué)校規(guī)定處理。第4頁(yè)/共36頁(yè)4課程評(píng)分規(guī)則實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)用品實(shí)驗(yàn)步驟注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及觀察討論實(shí)驗(yàn)小結(jié)參考格式實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析6次實(shí)驗(yàn)完成后裝訂成冊(cè)，注明學(xué)號(hào)第5頁(yè)/共36頁(yè)實(shí)驗(yàn)一果蠅飼養(yǎng)與性狀、生活史觀察實(shí)驗(yàn)二果蠅雜交實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)——伴性遺傳的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)三粗糙鏈孢霉四分子分析實(shí)驗(yàn)四蠶豆根尖細(xì)胞有絲分裂觀察實(shí)驗(yàn)五果蠅唾腺染色體的標(biāo)本制作

實(shí)驗(yàn)六減數(shù)分裂標(biāo)本的制備與觀察實(shí)驗(yàn)七人群PTC味覺(jué)基因頻率的測(cè)定與分析第6頁(yè)/共36頁(yè)3.掌握遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的果蠅品系特征及常見的突變類型一目的要求1.了解果蠅的生活史，學(xué)會(huì)飼養(yǎng)果蠅的方法。2.掌握區(qū)別雌雄果蠅技能及處女蠅的選擇方法。實(shí)驗(yàn)一果蠅飼養(yǎng)與性狀、生活史觀察黑腹果蠅Drosophilamelanogaster第7頁(yè)/共36頁(yè)1.果蠅作為實(shí)驗(yàn)材料的優(yōu)點(diǎn)飼養(yǎng)容易生長(zhǎng)迅速2n=8，少唾腺染色體制作容易，橫紋清晰突變性狀多，形態(tài)、行為等二實(shí)驗(yàn)原理重要的模式生物第8頁(yè)/共36頁(yè)2.果蠅的生活史（變態(tài)發(fā)育）最適溫度20-25℃1-2day1day1day1day1day1.5-2day3.5-4dayWhitingtonLab完全變態(tài)昆蟲生活史：4階段第9頁(yè)/共36頁(yè)WhitingtonLabBP104:axonstaining22c10:sensoryneuronstaining3.模式生物第10頁(yè)/共36頁(yè)Embryodevelopment第11頁(yè)/共36頁(yè)WingthreatBoxingBehaviortestFightingExploring第12頁(yè)/共36頁(yè)1.果蠅培養(yǎng)基配制成分?jǐn)?shù)量單位作用水玉米粉綿白糖瓊脂條丙

酸酵母粉12012.39.30.90.8少量mlgggml溶

劑基本成分基本成分固化劑防腐劑菌

種以大組為單位配制，2人/小組，5瓶培養(yǎng)基/2人玉米粉培養(yǎng)基配方(10瓶)

三操作步驟2瓶今天用，3瓶下次實(shí)驗(yàn)用洗培養(yǎng)瓶，制棉塞（紗布和棉花），干燥第13頁(yè)/共36頁(yè)水分成兩份，一份用于溶解瓊脂和糖，另一份煮玉米粉，待兩份分別溶解煮好后再混合煮沸。煮培養(yǎng)基加丙酸分裝去火后再加入丙酸。將粘稠的培養(yǎng)基充分?jǐn)嚢韬蠓盅b培養(yǎng)瓶，厚度約1-1.5cm。撒酵母粉待培養(yǎng)基冷卻后，用乙醇棉球擦瓶壁，除去積水，然后在培養(yǎng)基表面撒上一層酵母粉，即可接種果蠅。江南第14頁(yè)/共36頁(yè)2.乙醚麻醉果蠅果蠅如復(fù)蘇，應(yīng)進(jìn)行第二次麻醉。羅雪瑞第15頁(yè)/共36頁(yè)乙醚麻醉果蠅麻醉:兩支翅膀仍重疊在背上死亡:翅膀外展雜交的親本:切不可選翅膀外展果蠅，不管外展程度如何張凝第16頁(yè)/共36頁(yè)3.

果蠅觀察：雌雄鑒別特

征雌蠅雄蠅個(gè)

體大小腹片64腹背部條紋53腹部末端尖圓性

梳無(wú)有第17頁(yè)/共36頁(yè)雌腹片6節(jié)產(chǎn)卵管呈圓錐狀凸出雄腹片4節(jié)交尾器為黑色圓形雌雄體消化道、生殖腺發(fā)育畸形第18頁(yè)/共36頁(yè)雄果蠅在第一對(duì)足跗節(jié)具有性梳第19頁(yè)/共36頁(yè)果蠅雌雄鑒別特

征雌蠅雄蠅個(gè)

體大小腹片64腹背部條紋53腹部末端尖圓性

梳無(wú)有第20頁(yè)/共36頁(yè)野生型體色灰眼色磚紅，飽滿，圓形剛毛平直，先端略彎長(zhǎng)翅，長(zhǎng)度約為腹部長(zhǎng)度的兩倍；圓卵型，靜止時(shí)平放交叉重疊；翅膀有橫隔脈第21頁(yè)/共36頁(yè)4.果蠅觀察：突變性狀的鑒別影響部位突變名稱性狀特征基因符號(hào)染色體翅形殘翅翅退化，部分殘留vgⅡ短翅翅短，與腹部等長(zhǎng)mⅠ(X)匙翅翅小似勺nub2Ⅱ翹翅翅后翻cyⅡ眼白眼復(fù)眼白色wⅠ(X)棒眼復(fù)眼棒狀BⅠ(X)體色黑檀體體色黑亮eⅢ

黑體體色黑，比e深bⅡ黃體體色淺橙黃色yⅠ(X)剛毛焦剛毛剛毛卷曲sn3Ⅰ(X)叉剛毛剛毛近中部分叉fⅠ(X)第22頁(yè)/共36頁(yè)果蠅突變體眼色眼睛形狀背部顏色翅形狀第23頁(yè)/共36頁(yè)果蠅突變體第24頁(yè)/共36頁(yè)突變型性狀觀察：4、5、6、7、18、22、25、e5.果蠅性狀觀察結(jié)果記錄編號(hào)體色眼色翅長(zhǎng)短翅形剛毛第25頁(yè)/共36頁(yè)6.果蠅生活史的觀察尚雨桐鄭超第26頁(yè)/共36頁(yè)

實(shí)驗(yàn)二果蠅雜交實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)——伴性遺傳的驗(yàn)證2.正確認(rèn)識(shí)伴性遺傳與非伴性遺傳的區(qū)別以及伴性基因在正反交中的差異。一目的要求1.進(jìn)一步掌握伴性遺傳的原理、規(guī)律和特點(diǎn)。果蠅性染色體為XY型。雌果蠅為XX同配性別；雄果蠅為XY異配性別。性染色體上的基因在遺傳過(guò)程中，性狀遺傳總是和性別相聯(lián)系，因此，把性染色體上的基因遺傳叫伴性遺傳。二實(shí)驗(yàn)原理第27頁(yè)/共36頁(yè)黑腹果蠅品系：選一對(duì)形狀的①野生型②突變型三實(shí)驗(yàn)材料影響部位突變名稱性狀特征基因符號(hào)染色體翅形殘翅翅退化，部分殘留vgⅡ短翅翅短，與腹部等長(zhǎng)mⅠ(X)匙翅翅小似勺nub2Ⅱ翹翅翅后翻cyⅡ眼白眼復(fù)眼白色wⅠ(X)棒眼復(fù)眼棒狀BⅠ(X)體色黑檀體體色黑亮eⅢ

黑體體色黑，比e深bⅡ黃體體色淺橙黃色yⅠ(X)剛毛焦剛毛剛毛卷曲sn3Ⅰ(X)叉剛毛剛毛近中部分叉fⅠ(X)第28頁(yè)/共36頁(yè)果蠅接種方法②接種：用毛筆掃到平放的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，避免沾在培養(yǎng)基上，果蠅醒后再將培養(yǎng)瓶直立。①麻醉果蠅：勿麻醉至死四操作步驟1.果蠅親本的飼養(yǎng)江南③2瓶/小組雜交親本培養(yǎng)野生型1瓶突變型1瓶第29頁(yè)/共36頁(yè)④貼上標(biāo)簽，做好標(biāo)記⑤果蠅恢復(fù)后,20-25oC統(tǒng)一培養(yǎng)1.果蠅親本的飼養(yǎng)第30頁(yè)/共36頁(yè)①成蟲至新瓶培養(yǎng)2.選擇雜交親本：處女蠅與雄蠅雌果蠅：受精囊可保存交配所得的大量的精子。處女蠅：可保證雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。挑選原理：♀羽化開始10小時(shí)之內(nèi)尚未成熟，無(wú)交配能力。挑選方法：除去全部成蟲，收集10小時(shí)之內(nèi)羽化的新果蠅。驗(yàn)證方法：處女蠅單獨(dú)培養(yǎng)，3天后看是否產(chǎn)卵。具體步驟：②挑處女蠅野生型和突變型各5-10只③挑雄蠅野生型和突變型各5-10只雜交實(shí)驗(yàn)的早晨實(shí)驗(yàn)開始之前9-10小時(shí)保證足夠量用于雜交唾腺染色體(2周)(3周)第31頁(yè)/共36頁(yè)3.果蠅正反交實(shí)驗(yàn)正交：野生型（♀）×突變型（♂）反交：突變型（♀）×野生型（♂）5-10對(duì)處女蠅與雄果蠅/雜交貼上標(biāo)簽，做好標(biāo)記4.去親本5.F1代性狀觀察20-25oC統(tǒng)一培養(yǎng)7-8天后，除去成蟲，防止因親本與F1代混雜而影響實(shí)驗(yàn)效果F1代羽化，計(jì)數(shù)并觀察F1代性狀2瓶/小組每隔2天統(tǒng)計(jì)一次，累積6-7天數(shù)據(jù)(3周)(4周)(5周)第32頁(yè)/共36頁(yè)6.F1代自交7.去F1代8.F2代性狀觀察7-8天后，除去成蟲，防止因F1代與F2代混雜而影響實(shí)驗(yàn)效果F2代羽化，計(jì)數(shù)并觀察F2代性狀注意：驗(yàn)證伴性遺傳挑選反交F1代5-10對(duì)轉(zhuǎn)入新培養(yǎng)瓶雜交貼上標(biāo)簽，做好標(biāo)記20-25oC統(tǒng)一培養(yǎng)挑選正交F1代5-10對(duì)轉(zhuǎn)入新培養(yǎng)瓶雜交不需處女蠅每隔2天統(tǒng)計(jì)一次，累積6-7天數(shù)據(jù)(5周)(6周)(7周)第33頁(yè)/共36頁(yè)正交實(shí)驗(yàn)F1代果蠅數(shù)量統(tǒng)