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第7章食品生物工程下游技術(shù)(四)
初步純化萃?。╡xtraction)吸附(absorption)沉淀(precipitation)萃取溶劑萃取-單級(jí)萃取實(shí)驗(yàn)室操作使含溶質(zhì)的溶液和萃取劑接觸混合,靜止后分成兩層。
通常原料液是水溶液,萃取劑是有機(jī)溶劑,分層后,上層為萃取相,下層為萃余相。常用萃取溶劑:醇、酯、酮。雜質(zhì)溶質(zhì)原溶劑萃取劑Lightphase,萃取液Heavyphase,萃余液萃取效率不高,產(chǎn)物在水相中含量仍較高。工業(yè)生產(chǎn)最常用的萃取流程------多級(jí)萃取多級(jí)逆流萃取萃取效率最高,萃取劑用量最少。多級(jí)逆流萃取工業(yè)裝置:超臨界二氧化碳萃取臨界點(diǎn):T:31.1℃P:7.4MPa操作(1)等溫變壓法:萃取了溶質(zhì)的超臨界流體通過(guò)膨脹閥進(jìn)入分離槽,壓力下降,密度也下降,溶質(zhì)溶解度下降而析出。(2)等壓變溫法:萃取了溶質(zhì)的超臨界流體經(jīng)加熱器升溫后在分離槽析出溶質(zhì)。
(3)吸附法:萃取了溶質(zhì)的超臨界流體通過(guò)吸附分離器(內(nèi)含只吸附溶質(zhì)的吸附劑),使溶質(zhì)與萃取劑分離。優(yōu)缺點(diǎn):臨界條件溫和、產(chǎn)品分離簡(jiǎn)單、CO2便宜、萃取后無(wú)殘留等。但設(shè)備投資大!吸附吸附原理:用固體吸附劑吸附溶液中的目的物質(zhì)或雜質(zhì)。普通吸附劑:活性炭、磷酸鈣、白陶土、硅藻土等。活性炭:最常用的吸附力很強(qiáng)的非極性吸附劑;
吸附能力:極性基團(tuán)多>極性基團(tuán)少相對(duì)分子質(zhì)量大>相對(duì)分子質(zhì)量小芳香族化合物>脂肪族化合物酸性溶液中吸附力強(qiáng),pH=5離子交換吸附吸附原理:樹(shù)脂上離子性功能團(tuán)與溶液中的離子進(jìn)行吸附。樹(shù)脂種類(lèi):強(qiáng)酸、弱酸、強(qiáng)堿、弱堿。強(qiáng)堿性物質(zhì)選用弱酸性樹(shù)脂,弱酸性物質(zhì)選用強(qiáng)堿性樹(shù)脂。過(guò)程:溶液加入經(jīng)預(yù)處理的樹(shù)脂后進(jìn)行吸附,吸附了目的物質(zhì)的樹(shù)脂從溶液中分離,再把目的物質(zhì)從樹(shù)脂上洗脫下來(lái)。洗脫條件與吸附條件相反。樹(shù)脂可再生。沉淀原理:利用沉淀劑使所需提取的生化物質(zhì)或雜質(zhì)在溶液中的溶解度降低而形成無(wú)定形固體沉淀的過(guò)程。沉淀方法:鹽析(saltingout)鹽析原理:在高濃度的中性鹽存在下,蛋白質(zhì)(酶)等生物大分子物質(zhì)在水溶液中的溶解度降低,產(chǎn)生沉淀的過(guò)程。鹽析是可逆的!硫酸銨:溶解度大(25℃,767g/L,100%飽和度)過(guò)程:通常在攪拌下,以少量多次方式緩慢加入,待加入的硫酸銨溶解后再加入少量的硫酸銨。鹽析沉淀后,需進(jìn)行脫鹽處理,再進(jìn)行后續(xù)操作。脫鹽的方法有透析(透析袋)、超濾。
透析只用于除鹽類(lèi)和小分子雜質(zhì)(五)
精細(xì)純化層析電泳層析:根據(jù)混合物中,溶質(zhì)在互不相溶的兩相之間分配行為的差別,引起溶質(zhì)移動(dòng)速度的不同而進(jìn)行分離的方法?;ゲ幌嗳艿膬上喾謩e稱(chēng)為:固定相和流動(dòng)相。層析又稱(chēng)色譜或色層分離。屬高度純化技術(shù)。凝膠層析原理:在樣品通過(guò)一定孔徑的凝膠固定相時(shí),由于流經(jīng)體積的不同,使不同相對(duì)分子量的組分得以分離。亦稱(chēng)分子篩層析。分配系數(shù)與相對(duì)分子量、分子形狀、凝膠的孔徑有關(guān),與洗脫液的pH、離子強(qiáng)度無(wú)關(guān)。大分子先出來(lái),小分子后出來(lái)!分子篩凝膠層析的優(yōu)、缺點(diǎn)及應(yīng)用優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)便,分離效果好,重復(fù)性高,回收率高、分離條件溫和、規(guī)模放大容易、應(yīng)用廣泛缺點(diǎn): 分辨率低(根據(jù)分子大小的差別)洗脫后產(chǎn)品被稀釋?xiě)?yīng)用:脫鹽、相對(duì)分子量的測(cè)定Saltproduct親和層析親和作用:生物分子間識(shí)別并結(jié)合的相應(yīng)一種物質(zhì)的特異性相互作用稱(chēng)為
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