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顯微鏡油鏡的使用和細(xì)菌形態(tài)的觀察第1頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私怙@微鏡的基本構(gòu)造和使用方法掌握油鏡的原理和使用方法了解細(xì)菌的三種基本形態(tài)第2頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六二、顯微鏡的基本構(gòu)造
顯微鏡的構(gòu)造機(jī)械裝置光學(xué)系統(tǒng)鏡座載物臺(tái)鏡臂標(biāo)本夾和標(biāo)本移動(dòng)尺粗調(diào)螺旋和細(xì)調(diào)螺旋聚光鏡升降螺旋接目鏡接物鏡及鏡頭轉(zhuǎn)換器聚光鏡虹彩光圈電光源第3頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六普通光學(xué)顯微鏡基本構(gòu)造第4頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六1、增加照明亮度2、增加顯微鏡的分辨率三、實(shí)驗(yàn)原理δ﹦λ2NA
第5頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六油鏡使用的原理
油鏡,即油浸物鏡。當(dāng)光線由反光鏡通過(guò)玻片與鏡頭之間的空氣時(shí),由于空氣與玻片的密度不同,使光線受到曲折,發(fā)生散射,降低了視野的照明度。若中間的介質(zhì)是一層油(其折射率與玻片的相近),則幾乎不發(fā)生折射,增加了視野的進(jìn)光量,從而使物象更加清晰。第6頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六顯微鏡的放大倍數(shù)、分辨率和數(shù)值孔徑
1.放大倍數(shù)=物鏡放大倍數(shù)×目鏡放大倍數(shù)2.分辨率:是表示顯微鏡辨析物體(兩端)兩點(diǎn)之間距離的能力,可用公式表示為:δ=0.61×λ/N.A
式中:
δ:物鏡分辨出物體兩點(diǎn)間的最短距離。:可見(jiàn)光的波長(zhǎng)(平均0.55m)N.A:數(shù)值孔徑3.數(shù)值孔徑(N.A)=n×sinα/2其意為玻片和物鏡之間的折射率(n)乘以光線投射到物鏡上的最大夾角(a)的一半的正弦。第7頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六四、實(shí)驗(yàn)器材1、細(xì)菌三態(tài)裝片2、顯微鏡3、香柏油4、擦鏡紙等第8頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六五、操作步驟1.放置好顯微鏡2.調(diào)節(jié)光源3.低倍鏡觀察4.高倍鏡觀察5.油鏡觀察6.清潔和還原顯微鏡第9頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六1.放置好顯微鏡
置顯微鏡于平穩(wěn)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,鏡座距實(shí)驗(yàn)臺(tái)邊沿約為3~4cm。鏡檢者姿勢(shì)要端正。(取、放顯微鏡時(shí)應(yīng)一手握住鏡臂,一手托住底座,使顯微鏡保持直立、平穩(wěn)。切忌用單手拎提;且不論使用單筒顯微鏡或雙筒顯微鏡均應(yīng)雙眼同時(shí)睜開(kāi)觀察,以減少眼睛疲勞,也便于邊觀察邊繪圖或紀(jì)錄。2.調(diào)節(jié)好光源接通電源,打開(kāi)光源。第10頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六3.低倍鏡的觀察。將標(biāo)本片放在載物臺(tái)上,用標(biāo)本夾夾住,調(diào)節(jié)標(biāo)本移動(dòng)螺旋,使觀察的目的物處于物鏡的正下方。調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋,使物鏡(10×)與標(biāo)本靠近,眼睛在測(cè)向注視物鏡,防止物鏡和載玻片相碰。張開(kāi)雙眼向目鏡里觀察,如果見(jiàn)到目的物,但不十分清楚,可用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié),至目的物清晰為止。通過(guò)玻片夾推進(jìn)器慢慢移動(dòng)玻片,認(rèn)真觀察標(biāo)本各部分,找到合適的目的物,仔細(xì)觀察并記錄所觀察到的結(jié)果。第11頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六4.高倍鏡的觀察使用高倍鏡前,必須先用低倍鏡觀察,發(fā)現(xiàn)目的物后將它移至視野正中處。旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器換高倍鏡。如果高倍鏡觸及載玻片立即停止旋動(dòng),這說(shuō)明原來(lái)低倍鏡并沒(méi)有調(diào)準(zhǔn),目的物并沒(méi)有真正找到,必須用低倍鏡重新調(diào)節(jié)。如果高倍鏡下觀察目的物有點(diǎn)模糊,調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,直到視野清晰。調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí)要注意旋轉(zhuǎn)方向與載物臺(tái)上升或下降的關(guān)系,防止鏡頭與載玻片強(qiáng)力接觸,損壞鏡頭或載玻片。第12頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六5.油鏡的觀察如果用高倍鏡目的物未能看清,可用油鏡。先用低倍鏡和高倍鏡檢查標(biāo)本片,將目的物移到視野正中。下降載物臺(tái),在載玻片上滴一滴香柏油,將油鏡移至正中,緩慢調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋使油鏡頭浸沒(méi)在油中,剛好貼近載玻片。然后再用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋微微向上調(diào)(切忌用粗準(zhǔn)焦螺旋)即可。(應(yīng)特別注意不要在升降載物臺(tái)時(shí)用力過(guò)猛,或者調(diào)焦時(shí)誤將粗調(diào)節(jié)螺旋向反方向轉(zhuǎn)動(dòng)而損壞鏡頭及載玻片)第13頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六6.清潔顯微鏡和還原顯微鏡.觀察結(jié)束后,調(diào)節(jié)光源到最小再關(guān)掉電源開(kāi)關(guān)。調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋,使載物臺(tái)下降到最低,取下玻片。.
把油鏡轉(zhuǎn)離光軸,擦鏡紙擦1~2次,去油,用二甲苯滴濕的擦鏡紙擦2次,再用擦鏡紙擦1~2次,順鏡頭直徑方向擦,不要圓周擦和來(lái)回擦。擦干凈鏡體,罩上防塵罩,然后放回原處。.用擦油鏡頭的方法擦玻片。
第14頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六六、顯微結(jié)構(gòu)圖的繪制
嚴(yán)格按光學(xué)顯微鏡的操作方法,依低倍、高倍及油鏡的次序觀察細(xì)菌示范片,并繪出其形態(tài)圖。生物繪圖中繪出的圖要清楚,并正確的表示出形態(tài)構(gòu)造的特點(diǎn),繪圖注意事項(xiàng)如下:(1)繪圖要用黑色硬鉛筆,不要用軟鉛筆或有色鉛筆,一般用2H鉛筆為宜。(2)圖的大小及在紙上分布的位置要適當(dāng)。一般畫(huà)在靠近中央稍偏左方,并向右方引出注明各部名稱的線條。各引出線條要整齊平列,各部名稱寫(xiě)在線條右邊第15頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六(3)畫(huà)圖時(shí)先用輕淡小點(diǎn)或輕線條畫(huà)出輪廓,再依照輪廓一筆畫(huà)出與物象相符的線條。線條要清晰,比例要準(zhǔn)確。較長(zhǎng)的線條要向順手的方向運(yùn)筆,或把紙轉(zhuǎn)動(dòng)再畫(huà)。同一線條粗細(xì)相同,中間不要有斷線或開(kāi)叉痕跡,線條也不要涂抹。(4)繪出的圖要正確,觀察時(shí)要把混雜物、破損、重疊等現(xiàn)象區(qū)別清楚,不要把這些現(xiàn)象繪上。(5)圖的明暗及濃淡,應(yīng)用細(xì)點(diǎn)表示,不要采用涂抹方法。點(diǎn)細(xì)點(diǎn)時(shí),要點(diǎn)成圓點(diǎn),不要點(diǎn)成小撇。(6)整個(gè)圖要美觀、整潔,還要特別注意準(zhǔn)確性。第16頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六七、思考題1、使用油鏡時(shí),為什么要先用低倍鏡觀察?2、繪出
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