菌種制作技術(shù)演示文稿

菌種制作技術(shù)演示文稿現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五第六講二、三級(jí)菌種制作技術(shù)《食用菌生產(chǎn)技術(shù)》課程組現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五二、三級(jí)菌種制作技術(shù)一.二、三級(jí)菌種培養(yǎng)基的配制二.二、三級(jí)菌種培養(yǎng)基的滅菌三.二、三級(jí)菌種的接種四.二、三級(jí)菌種的培養(yǎng)五.二、三級(jí)菌種的質(zhì)量鑒定現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù)原種和栽培種的生產(chǎn)，無(wú)論是培養(yǎng)基成分，配制方法和滅菌方法基本上是相同的。1）原種：是由試管斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)的母種作種源接種而成，主要用于繁殖栽培種，也可直接用于生產(chǎn)。（母種→原種）2）栽培種：由原種作種源擴(kuò)大而成，只能用于生產(chǎn)。（原種→栽培種)現(xiàn)在是4頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五二、三級(jí)菌種制作流程配制培養(yǎng)基滅菌二級(jí)菌種培養(yǎng)接種培養(yǎng)接種滅菌配制培養(yǎng)基三級(jí)菌種一級(jí)菌種二級(jí)菌種(二、三級(jí)菌種制作過(guò)程大同小異)現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五原種、栽培種的制作流程

按配方稱(chēng)取原料→拌料→裝瓶（袋）→打洞（孔徑1cm深至瓶底）→滅菌（1.5kg／cm2，1.5~2h）→冷卻→接種（接入黃豆大小一塊）→培養(yǎng)（25℃~27℃）→菌絲長(zhǎng)滿瓶（袋）→培養(yǎng)7d~8d→擴(kuò)大成栽培種。現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五一.二、三級(jí)菌種培養(yǎng)基的配制（一）配制總原則1．選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。2．營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)間配制的比例要恰當(dāng)。3．選擇經(jīng)濟(jì)實(shí)用、來(lái)源廣泛的原料。4．適宜的pH值和含水量。現(xiàn)在是7頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五培養(yǎng)基（料）配制原則⑴掌握碳氮比例食用菌對(duì)碳和氮的需要有一個(gè)比例，簡(jiǎn)稱(chēng)碳氮比（C／Ｎ）。菌絲體生長(zhǎng)階段：C／Ｎ=20∶1；子實(shí)體形成階段：C／Ｎ=30~40∶1；C／Ｎ過(guò)高，菌絲體生長(zhǎng)過(guò)旺，而子實(shí)體小、產(chǎn)量低?，F(xiàn)在是8頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五⑵選好培養(yǎng)材料①首先選不含殺菌物質(zhì)的木屑杉、松、樟等樹(shù)種，含酚、酯、精油等殺菌物質(zhì)，會(huì)抑制食用菌生長(zhǎng)。要用必須經(jīng)過(guò)處理，如：蒸煮、曬等。②根據(jù)食用菌的喜好選木屑如：培養(yǎng)香菇用樺木屑就比椴木屑好；培養(yǎng)金針菇用構(gòu)，楮等木屑就比用榆、槐等木屑好。現(xiàn)在是9頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五⑶注意物理性狀培養(yǎng)原料要注意顆粒粗細(xì)、質(zhì)地軟硬程度，以及持水性能等物理性狀。⑷調(diào)節(jié)酸堿度各種食用菌需要的pH值不同，配制培養(yǎng)料時(shí)，應(yīng)選用NaOH、石灰、鹽酸或過(guò)磷酸鈣等物質(zhì)調(diào)節(jié)pH值。霉菌比食用菌喜歡更低的pH值，生產(chǎn)上有時(shí)為了控制這類(lèi)雜菌的發(fā)生，往往將pH值適當(dāng)調(diào)高0.5~1?，F(xiàn)在是10頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五原料選擇的注意事項(xiàng)（幾點(diǎn)說(shuō)明）⑴木屑：樹(shù)種：除松樹(shù)、杉樹(shù)、柏樹(shù)、樟樹(shù)、蕓香屬、按屬等樹(shù)種之外，絕大多數(shù)闊葉樹(shù)和木屑都可以利用。（因其中含有酚、酯、精油等殺菌物質(zhì)）粗細(xì)：不宜過(guò)細(xì)，以免培養(yǎng)基過(guò)濕或通氣不良。

現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五選擇：根據(jù)食用菌分解能力選擇，分解能力較強(qiáng)的食用菌采用硬質(zhì)闊葉樹(shù)木屑，反之采用軟質(zhì)樹(shù)種木屑。如：金針菇分解能力較弱，以含單寧較少木屑為宜，木屑越陳越好；茯苓菌分解能力較強(qiáng)，可采用顆粒粗的松木屑或松木釘。現(xiàn)在是12頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五⑵米糠、麩皮作用作用：補(bǔ)充氮源和維生素。稻草、麥秸、木屑、棉籽殼等纖維素原料，含氮量低。如：木屑含氮量0.03%以下。麩皮：含氮量比米糠多，但維生素不如米糠。米糠：含氮量比麩皮少。用量：一般10%~20%，過(guò)多易引起污染?，F(xiàn)在是13頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五⑶加糖的作用①初期補(bǔ)充碳源，用量1%~5%。②誘導(dǎo)胞外酶的產(chǎn)生。纖維素原料，食用菌利用緩慢。加入少量白糖作為食用菌初期補(bǔ)充碳源，促進(jìn)菌絲快速生長(zhǎng)，同時(shí)誘導(dǎo)纖維素酶的產(chǎn)生，更好地利用纖維素。現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五⑷Ca2＋作用①提供食用菌鈣離子：原料中加石膏、CaCO3或過(guò)磷酸鈣、骨粉提供食用菌鈣離子；②鈣不斷中和食用菌產(chǎn)生的有機(jī)酸；③鈣還能中和單寧；④減少過(guò)量K、Mg對(duì)菌絲中毒，促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)?，F(xiàn)在是15頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五1、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法

培養(yǎng)料木屑——米糠培養(yǎng)料：木生菇類(lèi)，如：木耳、銀耳、香菇；草莖或草糞——廄肥培養(yǎng)料：草生菇類(lèi)，如：蘑菇、草菇；棉籽殼——米糠培養(yǎng)料：多種菇類(lèi)。（二）培養(yǎng)基常用的配方現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五⑴糞草培養(yǎng)基（適用于蘑菇）稻草或麥秸20kg、糞肥（干）30kg、石膏500g、水適量。方法：稻草切成2cm長(zhǎng)＋糞肥→混合發(fā)酵＋石膏→調(diào)水→裝瓶→滅菌1、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五⑵稻草麩皮培養(yǎng)基（草菇）干稻草78%、麩皮或米糠20%、蔗糖1%、過(guò)磷酸鈣1%、水適量方法：稻草切成2cm長(zhǎng)→發(fā)酵→＋蔗糖＋麩皮＋過(guò)磷酸鈣現(xiàn)在是18頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五⑶木屑米糠培養(yǎng)基（香菇、木耳、猴頭、平菇等）木屑78%、麩皮或米糠20%、石膏1%、蔗糖1%、水適量。

⑷木屑、麩皮、黃豆粉培養(yǎng)基（銀耳）木屑50kg、麩皮15kg、黃豆粉1kg、蔗糖0.75kg、MgSO40.25kg、水70~75kg。⑸棉籽殼培養(yǎng)基（平菇、猴頭、金針菇）

棉籽殼99.7%、蔗糖0.1%、石膏0.2%、水適量。1、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五（三）培養(yǎng)基配制步驟稱(chēng)料拌料調(diào)節(jié)pH值分裝培養(yǎng)料清潔（洗或擦）瓶、袋外壁封口1.不溶性主、輔料混拌均勻2.可溶性輔料溶于水后拌入主輔料3.注意檢查含水量（手測(cè)法等）比實(shí)際要求的pH值調(diào)高1左右容器：菌種瓶、菌種袋要求：上緊下松，外緊內(nèi)松，中間一個(gè)洞現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五二.二、三級(jí)菌種培養(yǎng)基的滅菌

1．滅菌方法及要求

高壓蒸汽滅菌：壓力1.5kg/cm2，溫度126-128℃，時(shí)間1-2h（谷粒和經(jīng)過(guò)堆制發(fā)酵的糞草培養(yǎng)基應(yīng)達(dá)到2-2.5h）。

常壓蒸汽滅菌：100℃，保持10-12h臥式高壓蒸汽滅菌鍋現(xiàn)在是21頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五2．滅菌效果檢驗(yàn)隨機(jī)取幾瓶（袋）置于25-30℃溫度下空白培養(yǎng)4-6天，會(huì)出現(xiàn)以下情況：全部感雜少數(shù)感雜全部沒(méi)有雜菌

3、高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法按照儀器操作說(shuō)明操作！分析原因？現(xiàn)在是22頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五三.二、三級(jí)菌種的接種概念：菌種移至新培養(yǎng)基上的過(guò)程

關(guān)鍵：無(wú)菌操作接種接種環(huán)境消毒滅菌酒精棉球消毒雙手操作器具消毒滅菌開(kāi)啟的管口、瓶口靠近燈焰拔出的棉塞勿觸及任何地方動(dòng)作快、準(zhǔn)、穩(wěn)無(wú)菌操作要點(diǎn)現(xiàn)在是23頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五接種方法二級(jí)種三級(jí)種用接種耙取蠶豆大母種放于瓶中料面上用接種匙（鑷、鏟）取棗大原種放于袋中或瓶中料面上注意：1、嚴(yán)格挑選待接的菌種質(zhì)量；2、勿接入表面老菌絲及老種塊。現(xiàn)在是24頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五四.二、三級(jí)菌種的培養(yǎng)菌種的培養(yǎng)實(shí)際就是對(duì)菌絲體的培養(yǎng)培養(yǎng)條件場(chǎng)所清潔空氣清新光線暗溫度約25℃空氣濕度60%~70%現(xiàn)在是25頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五培養(yǎng)方法勿堆放過(guò)擠及時(shí)剔除污染瓶（袋）栽培種的菌袋缺氧時(shí)可刺孔增氧控制菌齡（菌絲長(zhǎng)滿7-10天后使用）現(xiàn)在是26頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五五.二、三級(jí)菌種的質(zhì)量鑒定菌絲白（或呈該菌種應(yīng)有的顏色）

均勻、粗壯、有菇香味

接種后萌發(fā)快無(wú)雜色、無(wú)黃水、無(wú)結(jié)皮、無(wú)原基、無(wú)干縮脫壁等現(xiàn)象

菌種出售必須貼有菌種質(zhì)量合格標(biāo)簽，標(biāo)明菌種種類(lèi)、級(jí)別、品種、生產(chǎn)單位和接種日期。合格菌種現(xiàn)在是27頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五雜菌檢查（菌種檢查）

接種后的原種，一般在3d~5d左右菌絲恢復(fù)生長(zhǎng)，應(yīng)每天全面檢查雜菌情況，如有污染及時(shí)剔除。（正常為白色，若混有其它色澤，應(yīng)及時(shí)處理）；如發(fā)現(xiàn)接種塊無(wú)新菌絲萌發(fā)，則認(rèn)為是死菌，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)種。

正常：菌絲白色雜菌：黃、紅、綠、黑死菌：補(bǔ)種現(xiàn)在是28頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五菌種制作過(guò)程中，只要做到選擇正確的配方和優(yōu)質(zhì)原料嚴(yán)格滅菌優(yōu)良的二、三級(jí)菌種嚴(yán)格無(wú)菌操作科學(xué)培育選擇優(yōu)良菌種↓↓↓↓↓現(xiàn)在是29頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五六、制種、保藏中易碰到的問(wèn)題及處理方法1、母種污染處理⑴細(xì)菌污染底部取菌：可根據(jù)細(xì)菌只發(fā)生在培養(yǎng)基表面，而真菌菌絲能穿透到培養(yǎng)基內(nèi)部的特點(diǎn)，用無(wú)菌操作法敲破試管取出培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基的底部挑取一小塊帶有菌絲的培養(yǎng)基，移植到另一試管中培養(yǎng)，可得到純正的母種?，F(xiàn)在是30頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五1、母種污染處理⑴細(xì)菌污染覆蓋培養(yǎng)：將熔化培養(yǎng)基冷卻到40℃，倒在已污染細(xì)菌的斜面上，使之形成厚約20cm的覆蓋層，當(dāng)食用菌菌絲透過(guò)培養(yǎng)基形成新的菌落時(shí)，即可挑取轉(zhuǎn)管純化。現(xiàn)在是31頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五1、母種污染處理⑵真菌污染若污染的是青霉、黃霉、木霉等真菌，只要母種菌絲與這些雜菌沒(méi)有相聯(lián)或尚有一部分菌絲沒(méi)有相聯(lián)，并且這些雜菌的菌絲還沒(méi)有產(chǎn)生孢子時(shí)，可以用無(wú)菌方法仔細(xì)挑取沒(méi)有相聯(lián)的一部分菌絲，移植到另外的試管中繼續(xù)培育，就能得到純正的母種。現(xiàn)在是32頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五2、原種、栽培種被雜菌污染的原因有哪些？怎樣鑒別？根據(jù)雜菌開(kāi)始發(fā)生的部位，大致有以下幾種污染原因：⑴若雜菌同時(shí)在培養(yǎng)基的上、中、下部位發(fā)生，主要是由于培養(yǎng)基滅菌不徹底造成的。⑵若雜菌開(kāi)始發(fā)生在接種塊上，這很可能是母種或原種已經(jīng)感染了雜菌；或者是由于接種工具不嚴(yán)格（消毒），把雜菌帶入?，F(xiàn)在是33頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五2、原種、栽培種被雜菌污染的原因有哪些？怎樣鑒別？⑶若雜菌先在培養(yǎng)基表面發(fā)生，這是由于接種過(guò)程中無(wú)菌操作不嚴(yán)而引起的。⑷若雜菌是在接種后若干天才發(fā)生的，而且是發(fā)生在瓶口往下掛的，這說(shuō)明雜菌是從棉花塞侵入培養(yǎng)基的。引起的原因是培養(yǎng)室濕度過(guò)大、棉塞受潮，造成霉菌滋生所致。現(xiàn)在是34頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五3、為什么母種不能多次轉(zhuǎn)管移植？

母種轉(zhuǎn)管次數(shù)多了會(huì)削弱菌絲的生活力，降低出菇率，甚至造成菌絲不孕而不能形成子實(shí)體。因此母種培育可以一次多培育幾支試管，不要反復(fù)多次分離轉(zhuǎn)管，以確保菌絲旺盛的生活力。（發(fā)生變異）現(xiàn)在是35頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五4、優(yōu)良菌種的標(biāo)準(zhǔn)是什么？

各種食用菌菌種，既有特定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，也有共同的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。這些共同的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)主要是純、壯兩條。⑴純：除銀耳菌種，其余各種栽培食用菌均是一種菌絲體的純培養(yǎng)物，不得混入雜菌或純培養(yǎng)物以外的其它菌種。例如：香菇7925菌種，只能是7925菌株菌絲體的純培養(yǎng)?，F(xiàn)在是36頁(yè)\一共有37頁(yè)\編輯于星期五復(fù)習(xí)思考題1．簡(jiǎn)述二、三