結(jié)直腸癌Tiam高表達(dá)與其啟動(dòng)子低甲基化相關(guān)

結(jié)直腸癌Tiam高表達(dá)與其啟動(dòng)子低甲基化相關(guān)第1頁(yè)/共24頁(yè)

結(jié)直腸癌Tiam1高表達(dá)與其啟動(dòng)子低甲基化相關(guān)

第2頁(yè)/共24頁(yè)背景Tiam1:T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)因子1Tiam1與腫瘤的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移Tiam1的表達(dá)調(diào)控機(jī)制尚未完全闡明表觀遺傳學(xué)：DNA異常甲基化第3頁(yè)/共24頁(yè)

藍(lán)色區(qū)域?yàn)镃pG島，該CpG島長(zhǎng)2183bp，跨越啟動(dòng)子和第一外顯子，存在256個(gè)CpG位點(diǎn)Tiam1基因5’端CpG島預(yù)測(cè)

第4頁(yè)/共24頁(yè)去甲基化藥物處理HT29細(xì)胞前后Tiam1mRNA表達(dá)1.SW6202.HT29(5-aza-dC)3.HT29(對(duì)照)C.空白對(duì)照GAPDH(580bp)Tiam1(252bp)

marker123c第5頁(yè)/共24頁(yè)Ⅰ.116例配對(duì)結(jié)直腸癌組織中Tiam1蛋白的表達(dá)第6頁(yè)/共24頁(yè)第7頁(yè)/共24頁(yè)Tiam1蛋白在結(jié)直腸癌配對(duì)組織中的表達(dá)分布

*

Z=-4.608，P＝0.000#

Z＝-3.115，P＝0.002

第8頁(yè)/共24頁(yè)Z＝-2.584，P＝0.01

Tiam1蛋白表達(dá)與結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系

第9頁(yè)/共24頁(yè)Tiam1蛋白在癌組織中的表達(dá)與臨床病理資料之間的關(guān)系第10頁(yè)/共24頁(yè)Ⅱ.結(jié)直腸癌組織中Tiam1基因異常甲基化的研究第11頁(yè)/共24頁(yè)MSP原理第12頁(yè)/共24頁(yè)CMU2n2t12n12t31n31t48n48t83n83t116n116tmu212314883116nt部分配對(duì)組織中Tiam1DNA甲基化及其蛋白表達(dá)情況第13頁(yè)/共24頁(yè)MSP擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序部分結(jié)果

umoo.未轉(zhuǎn)化的原始序列m.甲基化引物擴(kuò)增產(chǎn)物u.未甲基化引物擴(kuò)增產(chǎn)物第14頁(yè)/共24頁(yè)Z=-2.244,P=0.025

r=-0.494,P<0.001116例配對(duì)組織中Tiam1基因的甲基化狀況

232例組織中Tiam1蛋白表達(dá)與甲基化之間的相關(guān)性

第15頁(yè)/共24頁(yè)腫瘤組織Tiam1甲基化狀態(tài)與臨床病理資料之間的關(guān)系

第16頁(yè)/共24頁(yè)Ⅲ.結(jié)直腸癌細(xì)胞株中Tiam1基因異常甲基化的研究第17頁(yè)/共24頁(yè)Tiam1高表達(dá)結(jié)直腸癌細(xì)胞株：LoVo細(xì)胞、

SW620細(xì)胞Tiam1低表達(dá)結(jié)直腸癌細(xì)胞株：LS174T細(xì)胞Tiam1不表達(dá)結(jié)直腸癌細(xì)胞株：HT29細(xì)胞第18頁(yè)/共24頁(yè)5-aza-dC處理對(duì)Tiam1mRNA在HT29及LS174T中表達(dá)的影響GAPDH(580bp)Tiam1(252bp)

1234cmarkerLS174T(+)LS174T(-)HT29(+)HT29(-)5-aza-dC第19頁(yè)/共24頁(yè)5-aza-dC（+）X2005-aza-dC（-）X200免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)5-aza-dC處理對(duì)HT29細(xì)胞中Tiam1蛋白表達(dá)的影響第20頁(yè)/共24頁(yè)免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)5-aza-dC處理對(duì)LS174T細(xì)胞中Tiam1蛋白表達(dá)的影響5-aza-dC（-）X2005-aza-dC（+）X200第21頁(yè)/共24頁(yè)1.SW6202.HT293.HT29(5-aza-dC)4.SW6205.LS174T6.LS174T(5-aza-dC)

123456GAPDHTiam1Westernblot法檢測(cè)5-aza-dC處理對(duì)HT29、LS174T細(xì)胞中Tiam1蛋白表達(dá)的影響第22頁(yè)/共2