色譜分析導(dǎo)論詳解

色譜分析導(dǎo)論詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日優(yōu)選色譜分析導(dǎo)論現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*3第一節(jié)色譜法概述一、色譜法的特點(diǎn)、分類(lèi)和作用characteristic,classificationactuationofchromatograph

二、氣相色譜分離過(guò)程separationprocessofgaschromatograph三、色譜流出曲線與基本術(shù)語(yǔ)Chromatogramandnamewords

generalizationofchromatographanalysis

現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*4一、色譜法的特點(diǎn)、分類(lèi)和作用

1.概述混合物最有效的分離、分析方法。俄國(guó)植物學(xué)家茨維特（Tswett)在1906年使用的裝置：色譜原型裝置，如圖。

色譜法是一種分離技術(shù)。試樣混合物的分離過(guò)程也就是試樣中各組分在稱(chēng)之為色譜分離柱中的兩相間不斷進(jìn)行著的分配過(guò)程。其中的一相固定不動(dòng)，稱(chēng)為固定相；另一相是攜帶試樣混合物流過(guò)此固定相的流體（氣體或液體），稱(chēng)為流動(dòng)相?，F(xiàn)在是4頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*5色譜法原理

當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí)，其與固定相發(fā)生相互作用。由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同，隨著流動(dòng)相的移動(dòng)，混合物在兩相間經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同，從而按一定次序從色譜柱中流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測(cè)方法結(jié)合，實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測(cè)。

兩相及兩相的相對(duì)運(yùn)動(dòng)構(gòu)成了色譜法的基礎(chǔ)現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*62.色譜法分類(lèi)

按流動(dòng)相的狀態(tài)不同主要分為兩類(lèi)：(1)氣相色譜：流動(dòng)相為氣體（稱(chēng)為載氣）。按分離柱不同可分為：填充柱色譜和毛細(xì)管柱色譜；按固定相的不同又分為：氣固色譜和氣液色譜現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*7(2)液相色譜：流動(dòng)相為液體（也稱(chēng)為淋洗液）。按固定相的不同分為：液固色譜和液液色譜。

離子色譜：液相色譜的一種，以特制的離子交換樹(shù)脂為固定相，不同pH值的水溶液為流動(dòng)相。現(xiàn)在是7頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*8(3)其他色譜方法薄層色譜和紙色譜：比較簡(jiǎn)單的色譜方法凝膠色譜法：測(cè)聚合物分子量分布。超臨界色譜:CO2流動(dòng)相。高效毛細(xì)管電泳:九十年代快速發(fā)展、特別適合生物試樣分析分離的高效分析儀器?，F(xiàn)在是8頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*93.色譜法的特點(diǎn)（1）分離效率高

復(fù)雜混合物，有機(jī)同系物、異構(gòu)體。手性異構(gòu)體。（2）靈敏度高

可以檢測(cè)出μg.g-1(10-6)級(jí)甚至ng.g-1(10-9)級(jí)的物質(zhì)量。（3）分析速度快

一般在幾分鐘或幾十分鐘內(nèi)可以完成一個(gè)試樣的分析。（4）應(yīng)用范圍廣

氣相色譜：沸點(diǎn)低于400℃的各種有機(jī)或無(wú)機(jī)試樣的分析。液相色譜：高沸點(diǎn)、熱不穩(wěn)定、生物試樣的分離分析。

不足之處：

被分離組分的定性較為困難?，F(xiàn)在是9頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*10二、色譜分離過(guò)程色譜分離過(guò)程是在色譜柱內(nèi)完成的。以氣相色譜為例。氣固(液固)色譜和氣液(液液)色譜，兩者的分離機(jī)理不同。氣固(液固)色譜的固定相:多孔性的固體吸附劑顆粒。

固體吸附劑對(duì)試樣中各組分的吸附能力的不同。氣液(液液)色譜的固定相:由擔(dān)體和固定液所組成。

固定液對(duì)試樣中各組分的溶解能力的不同。氣固色譜的分離機(jī)理:

吸附與脫附的不斷重復(fù)過(guò)程；氣液色譜的分離機(jī)理：

溶解與揮發(fā)的反復(fù)多次分配過(guò)程?，F(xiàn)在是10頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*11氣相色譜分離過(guò)程當(dāng)試樣由載氣攜帶進(jìn)入色譜柱與固定相接觸時(shí)，被固定相溶解或吸附;隨著載氣的不斷通入，被溶解或吸附的組分又從固定相中揮發(fā)或脫附;揮發(fā)或脫附下的組分隨著載氣向前移動(dòng)時(shí)又再次被固定相溶解或吸附;隨著載氣的流動(dòng)，溶解、揮發(fā)，或吸附、脫附的過(guò)程反復(fù)地進(jìn)行?，F(xiàn)在是11頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*12三、色譜流出曲線與術(shù)語(yǔ)1.基線

無(wú)試樣通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，檢測(cè)到的信號(hào)即為基線。2.色譜峰當(dāng)某組分從色譜柱流出時(shí)，檢測(cè)器對(duì)該組分的響應(yīng)信號(hào)隨時(shí)間變化所形成的峰形曲線稱(chēng)為該組分的色譜峰。3.峰高(h)色譜峰頂?shù)交€的垂直距離?，F(xiàn)在是12頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*134.保留值

表示試樣中各組分在色譜柱中滯留時(shí)間的數(shù)值。

（1）時(shí)間表示的保留值

保留時(shí)間（tR）：組分從進(jìn)樣到柱后出現(xiàn)濃度極大值（即色譜峰頂值）時(shí)所需的時(shí)間；（動(dòng)畫(huà)）調(diào)整保留時(shí)間（tR

＇）：tR＇=tR－t0

死時(shí)間（t0）：不與固定相作用的氣體（如空氣）的保留時(shí)間；現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*14（2）用體積表示的保留值

保留體積（VR）：

VR=tR×F0F0為柱出口處的載氣流量，單位：mL/min。

死體積（V0）：

V0=t0×F0

調(diào)整保留體積(VR＇)：

V

R＇=VR－V0

（動(dòng)畫(huà)）現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*155.相對(duì)保留值r2，1組分2與組分1調(diào)整保留值之比：

r2，1=t′R2

/t′R1=V′R2/V′R1相對(duì)保留值只與柱溫和固定相性質(zhì)有關(guān)，與其他色譜操作條件無(wú)關(guān)，它表示了固定相對(duì)這兩種組分的選擇性。所以又稱(chēng)為選擇因子。現(xiàn)在是15頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*166.區(qū)域?qū)挾?/p>

用來(lái)衡量色譜峰寬度的參數(shù)，有三種表示方法：（1）標(biāo)準(zhǔn)偏差()：即0.607倍峰高處色譜峰寬度的一半。（2）半峰寬(W1/2)：色譜峰高一半處的寬度W1/2=2.354（3）峰底寬(Wb)：Wb=4現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*177.色譜流出曲線的數(shù)學(xué)描述

色譜峰為正態(tài)分布時(shí)，色譜流出曲線上的濃度與時(shí)間的關(guān)系為：

當(dāng)色譜峰為非正態(tài)分布時(shí)，可按正態(tài)分布函數(shù)加指數(shù)衰減函數(shù)構(gòu)建關(guān)系式。現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*18色譜流出曲線的意義

由色譜流出曲線可以實(shí)現(xiàn)以下目的：（1）根據(jù)色譜峰的數(shù)目，可以判斷試樣中所含組分的最少個(gè)數(shù)。（2）根據(jù)色譜峰的保留值進(jìn)行定性分析。（3）依據(jù)色譜峰的面積或峰高進(jìn)行定量分析。（4）依據(jù)色譜峰的保留值以及峰寬評(píng)價(jià)色譜柱的分離效能?，F(xiàn)在是18頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*19選擇內(nèi)容：第一節(jié)色譜法概述generalizationofchromatographanalysis第二節(jié)色譜理論基礎(chǔ)fundamentalofchromatographtheory結(jié)束現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*20第二節(jié)色譜理論基礎(chǔ)一、塔板理論platetheory二、速率理論ratetheory三、分離度resolution

fundamentalofchromatographtheory

現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*21一、塔板理論

（一）分配過(guò)程

1.分配系數(shù)（partionfactor）K

組分在固定相和流動(dòng)相間發(fā)生的吸附、脫附，或溶解、揮發(fā)的過(guò)程叫做分配過(guò)程。在一定溫度下，組分在兩相間分配達(dá)到平衡時(shí)的濃度（單位：g/mL）比，稱(chēng)為分配系數(shù)，用K表示，即：分配系數(shù)是色譜分離的依據(jù)?，F(xiàn)在是21頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*22分配系數(shù)K的討論

一定溫度下，組分的分配系數(shù)K越大，出峰越慢；試樣一定時(shí)，K主要取決于固定相性質(zhì)；同一個(gè)組份在不同的固定相上的分配系數(shù)K不同；選擇適宜的固定相可改善分離效果；試樣中的各組分具有不同的K值是分離的基礎(chǔ)；某組分的K=0時(shí)，即不被固定相保留，最先流出?，F(xiàn)在是22頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*232.分配比（partionradio）k

在實(shí)際工作中，也常用分配比來(lái)表征色譜分配平衡過(guò)程。分配比是指，在一定溫度下，組分在兩相間分配達(dá)到平衡時(shí)的質(zhì)量比：

1.分配系數(shù)與分配比都是與組分及固定相的熱力學(xué)性質(zhì)有關(guān)的常數(shù)，隨分離柱溫度、柱壓的改變而變化。2.分配系數(shù)與分配比都是衡量色譜柱對(duì)組分保留能力的參數(shù)，數(shù)值越大，該組分的保留時(shí)間越長(zhǎng)。3.分配比可以由實(shí)驗(yàn)測(cè)得。分配比也稱(chēng)：

容量因子(capacityfactor)；容量比(capacityfactor)；現(xiàn)在是23頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*24（1）容量因子與分配系數(shù)的關(guān)系

式中β為相比，即β=Vm/Vs

。填充柱相比：6～35；毛細(xì)管柱的相比：50～1500。

容量因子越大，保留時(shí)間越長(zhǎng)。

VM為流動(dòng)相體積，即柱內(nèi)固定相顆粒間的空隙體積；

VS為固定相體積，對(duì)不同類(lèi)型色譜柱，VS的含義不同:

氣-液色譜柱：VS為固定液體積；

氣-固色譜柱：VS為吸附劑表面容量；現(xiàn)在是24頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*25（2）分配比與保留時(shí)間的關(guān)系

某組分的k值可由實(shí)驗(yàn)測(cè)得，等于該組分的調(diào)整保留時(shí)間與死時(shí)間的比值：（3）分配系數(shù)K及分配比k與選擇因子r2,1的關(guān)系如果兩組分的K或k值相等，則r2,1=1，兩組分的色譜峰必將重合，說(shuō)明分不開(kāi)。兩組分的K或k值相差越大，則分離得越好。因此兩組分具有不同的分配系數(shù)是色譜分離的先決條件?，F(xiàn)在是25頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*26基本保留方程可表示為：

tR=t0(1+k)若載氣流量F0恒定，也可用保留體積表示，則VR=Vm+KVs這就是色譜基本保留方程。上式說(shuō)明，色譜柱確定后，Vm和Vs即為定值。由此可見(jiàn)，分配系數(shù)不同的各組分具有不同的保留值，因而在色譜圖上有不同位置的色譜峰。（4）基本保留方程現(xiàn)在是26頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*27例：用一根固定相的體積為0.148mL，流動(dòng)相的體積為1.26mL的色譜柱分離A,B兩個(gè)組分，它們的保留時(shí)間分別為14.4min，15.4min，不被保留組分的保留時(shí)間為4.2min，試計(jì)算：

（1）各組分的容量因子

（2）各組分的分配系數(shù)

（3）AB兩組分的選擇因子rB,A解：（1）kA=(14.4min-4.2min)/4.2min=2.43

kB=(15.4min-4.2min)/4.2min=2.67K=kβ=kVm/VsKA=kAVm/Vs=2.43×1.26mL/0.148mL=20.7KB=kBVm/Vs=2.67×1.26mL/0.148mL=22.7(3)rB,A=KB/KA=22.7/20.7=1.10現(xiàn)在是27頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*28色譜理論

色譜理論需要解決的問(wèn)題：色譜分離過(guò)程的熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)問(wèn)題。影響分離及柱效的因素與提高柱效的途徑，柱效與分離度的評(píng)價(jià)指標(biāo)及其關(guān)系。組分保留時(shí)間為何不同？色譜峰為何變寬？組分保留時(shí)間：色譜過(guò)程的熱力學(xué)因素控制；（組分和固定相的結(jié)構(gòu)和性質(zhì),如分配系數(shù)）色譜峰變寬：色譜過(guò)程的動(dòng)力學(xué)因素控制；（兩相中的運(yùn)動(dòng)阻力，擴(kuò)散）兩種色譜理論：塔板理論和速率理論；現(xiàn)在是28頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*29

塔板理論的假設(shè)：(1)在每一個(gè)平衡過(guò)程間隔內(nèi)，平衡可以迅速達(dá)到；這一小段間隔的柱長(zhǎng)稱(chēng)為理論塔板高度。(2)將載氣看作成脈動(dòng)（間歇）過(guò)程；(3)試樣沿色譜柱方向的擴(kuò)散可忽略；(4)每次分配的分配系數(shù)相同。（二）塔板理論-柱分離效能指標(biāo)

1.塔板理論（platetheory）半經(jīng)驗(yàn)理論；將色譜分離過(guò)程比擬作蒸餾過(guò)程，將連續(xù)的色譜分離過(guò)程分割成多次的平衡過(guò)程的重復(fù)（類(lèi)似于蒸餾塔塔板上的平衡過(guò)程）；在每一個(gè)塔板上，被分離組分達(dá)到一次分配平衡。（動(dòng)畫(huà)）現(xiàn)在是29頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*30

色譜柱長(zhǎng)：L，

虛擬的塔板間距離（理論塔板高度）：H，色譜柱的理論塔板數(shù)：n，則三者的關(guān)系為：

n=L/H理論塔板數(shù)與色譜參數(shù)之間的關(guān)系為：保留時(shí)間包含死時(shí)間，在死時(shí)間內(nèi)不參與分配!單位柱長(zhǎng)的塔板數(shù)越多，表明柱效越高。用不同物質(zhì)計(jì)算可得到不同的理論塔板數(shù)?，F(xiàn)在是30頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*312.有效塔板數(shù)和有效塔板高度組分在t0時(shí)間內(nèi)不參與柱內(nèi)分配。需引入有效塔板數(shù)和有效塔板高度：現(xiàn)在是31頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*32例：用一根柱長(zhǎng)為1m的色譜柱分離含有A，B，C，D四個(gè)組分的混合物，它們的保留時(shí)間tR分別為6.4min,14.4min,15.4min,20.7min,其峰底寬Wb分別為0.45min,1.07min,1.16min,1.45min。

試計(jì)算：各譜峰的理論塔板數(shù)。解：現(xiàn)在是32頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*333.塔板理論的特點(diǎn)和不足(1)當(dāng)色譜柱長(zhǎng)度一定時(shí)，塔板數(shù)n

越大(塔板高度H越小)，被測(cè)組分在柱內(nèi)被分配的次數(shù)越多，柱效能則越高，即使分配系數(shù)只有微小的差別，仍可獲得好的分離效果。所得色譜峰越窄。

(2)不同物質(zhì)在同一色譜柱上的分配系數(shù)不同，用有效塔板數(shù)和有效塔板高度作為衡量柱效能的指標(biāo)時(shí)，應(yīng)指明測(cè)定物質(zhì)。(3)柱效不能表示被分離組分的實(shí)際分離效果，當(dāng)兩組分的分配系數(shù)K相同時(shí)，無(wú)論該色譜柱的塔板數(shù)多大，都無(wú)法分離。(4)塔板理論無(wú)法解釋同一色譜柱在不同的載氣流速下柱效不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，也無(wú)法指出影響柱效（如塔板高度H）的因素及提高柱效的途徑?，F(xiàn)在是33頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*34二、速率理論-影響柱效的因素1956年荷蘭學(xué)者范弟姆特（VanDeemter)等提出了色譜過(guò)程的動(dòng)力學(xué)理論，他們吸收了塔板理論的概念，并把影響塔板高度的動(dòng)力學(xué)因素結(jié)合進(jìn)去，導(dǎo)出了塔板高度H與載氣線速度u的關(guān)系。1.速率方程（也稱(chēng)范.弟姆特方程式）

H=A+B/u+C·u

H：理論塔板高度;u：載氣的線速度(cm/s)

減小A、B、C三項(xiàng)可提高柱效；

存在著最佳流速；

A、B、C三項(xiàng)常數(shù)各與哪些因素有關(guān)？現(xiàn)在是34頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*35A─渦流擴(kuò)散項(xiàng)

A=2λdp

dp：固定相的平均顆粒直徑λ：固定相的填充不均勻因子

固定相顆粒越小dp↓，填充的越均勻，A↓，H↓，柱效n↑。表現(xiàn)在渦流擴(kuò)散所引起的色譜峰變寬現(xiàn)象減輕，色譜峰較窄。對(duì)于空心毛細(xì)管柱，A項(xiàng)為零。（動(dòng)畫(huà)）現(xiàn)在是35頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*36B/u—分子擴(kuò)散項(xiàng)

B=2

γ

Dg

γ

：彎曲因子，空心毛細(xì)管,γ=1；填充柱色譜,γ

<1。Dg：試樣組分分子在氣相中的擴(kuò)散系數(shù)（cm2·s-1）

(1)存在著濃度差，產(chǎn)生縱向擴(kuò)散;

(2)擴(kuò)散導(dǎo)致色譜峰變寬，H↑(n↓)，分離變差;

(3)分子擴(kuò)散項(xiàng)與流速有關(guān)，流速↓，滯留時(shí)間↑，擴(kuò)散↑;

(4)擴(kuò)散系數(shù)Dg與組分及載氣的性質(zhì)有關(guān)：

Dg

∝(M載氣)-1/2；M載氣↑，B值↓。Dg∝（M組分）-1（5）擴(kuò)散系數(shù)Dg隨柱溫升高而增加。（動(dòng)畫(huà)）現(xiàn)在是36頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*37

k為容量因子；Dg、DL為擴(kuò)散系數(shù)。

減小擔(dān)體粒度，選擇小分子量的氣體作載氣，可降低傳質(zhì)阻力。C·u—傳質(zhì)阻力項(xiàng)

傳質(zhì)阻力系數(shù)包括氣相傳質(zhì)阻力Cg和液相傳質(zhì)阻力CL系數(shù)即：

C=（Cg+CL）（動(dòng)畫(huà)）現(xiàn)在是37頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*382.載氣流速與柱效——最佳流速載氣流速高時(shí)：

傳質(zhì)阻力項(xiàng)是影響柱效的主要因素，流速，柱效。載氣流速低時(shí)：

分子擴(kuò)散項(xiàng)成為影響柱效的主要因素，流速,柱效。H-u曲線與最佳流速：

由于流速對(duì)這兩項(xiàng)完全相反的作用，流速對(duì)柱效的總影響使得存在著一個(gè)最佳流速值，即速率方程式中塔板高度對(duì)流速的一階導(dǎo)數(shù)有零值點(diǎn)。以塔板高度H對(duì)應(yīng)載氣流速u(mài)作圖，曲線最低點(diǎn)的流速即為最佳流速?，F(xiàn)在是38頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*39最佳流速u(mài)opt與最小理論塔板高度Hmin現(xiàn)在是39頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*403.速率理論的要點(diǎn)(1)組分分子在柱內(nèi)運(yùn)行的多路徑與渦流擴(kuò)散、濃度梯度所造成的分子擴(kuò)散及傳質(zhì)阻力使氣液兩相間的分配平衡不能瞬間達(dá)到等因素是造成色譜峰擴(kuò)展，柱效下降的主要原因。(2)通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)墓潭ㄏ嗔６取⑤d氣種類(lèi)、液膜厚度及載氣流速可提高柱效。(3)速率理論為色譜分離和操作條件選擇提供了理論指導(dǎo)。闡明了流速和柱溫對(duì)柱效及分離的影響。(4)各種因素相互制約，如載氣流速增大，分子擴(kuò)散項(xiàng)的影響減小，使柱效提高，但同時(shí)傳質(zhì)阻力項(xiàng)的影響增大，又使柱效下降；柱溫升高，有利于傳質(zhì)，但又加劇了分子擴(kuò)散的影響，選擇最佳條件，才能使柱效達(dá)到最高?，F(xiàn)在是40頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*41三、分離度

塔板理論和速率理論都難以描述難分離物質(zhì)對(duì)的實(shí)際分離程度。即柱效為多大時(shí)，相鄰兩組份能夠被完全分離。難分離物質(zhì)對(duì)的分離度大小受色譜過(guò)程中兩種因素的綜合影響：保留值之差──色譜過(guò)程的熱力學(xué)因素；

區(qū)域?qū)挾醛ぉどV過(guò)程的動(dòng)力學(xué)因素。色譜分離中的四種情況如圖所示：現(xiàn)在是41頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*42討論：色譜分離中的四種情況的討論：①柱效較高，△K(分配系數(shù))較大,完全分離；②△K不是很大，柱效較高，峰較窄，基本上完全分離；③柱效較低，△K較大,但分離的不好；④△K小，柱效低，分離效果更差?，F(xiàn)在是42頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*43分離度的表達(dá)式：分離度同時(shí)反映色譜柱效能和選擇性的一個(gè)綜合指標(biāo).定義為相鄰兩組分色譜峰保留值之差與兩個(gè)組分色譜峰峰底寬度總和一半的比值?，F(xiàn)在是43頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*44R=1.5R=0.75R=1.0響應(yīng)信號(hào)保留時(shí)間t,min現(xiàn)在是44頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*45R=0.8：兩峰的分離程度可達(dá)89%，有部分重疊；R=1：分離程度98%；R=1.5：達(dá)99.7%（相鄰兩峰完全分離的標(biāo)準(zhǔn)）?，F(xiàn)在是45頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*46色譜基本分離方程式R的定義并未反映影響分離度的各種因素。也就是說(shuō)，R未與影響其大小的因素：柱效n、選擇因子和保留因子k聯(lián)系起來(lái)。對(duì)于相鄰的難分離組分，由于它們的分配系數(shù)K相差小，可合理假設(shè)k1k2=k，W1W2=W。因此可導(dǎo)出R與n、和

k

的關(guān)系：現(xiàn)在是46頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*47現(xiàn)在是47頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*48討論：（1）分離度與柱效的關(guān)系（柱效因子n)

分離度與柱效因子n的平方根成正比，r2,1一定時(shí)，增加柱長(zhǎng)以增加柱效n，可提高分離度，但組分保留時(shí)間增加且峰擴(kuò)展，分析時(shí)間長(zhǎng)。增加n值得另一辦法是減小柱的H值（2）分離度與選擇因子r2,1的關(guān)系

增大r2,1是提高分離度的最有效方法，計(jì)算可知，在相同分離度下，當(dāng)r2,1增加一倍，需要的n有效減小10000倍。

增大r2,1的最有效方法是選擇合適的固定相。現(xiàn)在是48頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*49(3)分離度R分配比k的關(guān)系

k增加，分離度R增加，但當(dāng)k>10，則R的增加不明顯。通常k在2~10之間。改變k的方法有：適當(dāng)增加柱溫(GC)、改變流動(dòng)相性質(zhì)和組成(LC)以及固定相含量?，F(xiàn)在是49頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*50色譜分離中的問(wèn)題由于分析物組成復(fù)雜，以某一組成的流動(dòng)相可能使部分待測(cè)物得到好的分離，但同時(shí)又使其它待測(cè)物的分離不令人滿(mǎn)意！實(shí)際工作中采用程序升溫（GC）和梯度淋洗（LC）來(lái)解決這個(gè)問(wèn)題。現(xiàn)在是50頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*51分析時(shí)間t

分析時(shí)間通常指最后一個(gè)組分出峰的時(shí)間。其值為可見(jiàn)，分析時(shí)間與R，，k、H/u等參數(shù)有關(guān)。R增加1倍，分析時(shí)間則是原來(lái)的4倍。實(shí)際工作中，即要能獲得有效的分離，又要在較短時(shí)間內(nèi)完成分析?，F(xiàn)在是51頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*52

色譜的定性分析色譜的定性分析（1）將已知物直接和未知物對(duì)照進(jìn)行定性（2）利用文獻(xiàn)的保留數(shù)據(jù)進(jìn)行定性（3）利用經(jīng)驗(yàn)規(guī)律定性（4）與化學(xué)方法結(jié)合定性（5）與其它儀器連用進(jìn)行定性色譜的定性分析：是指確定試樣的組成，即確定每個(gè)色譜峰代表什么組分?，F(xiàn)在是52頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*53色譜的定量分析色譜的響應(yīng)信號(hào)：色譜的響應(yīng)信號(hào)是峰高或峰面積。一般來(lái)說(shuō)，峰面積的大小不受操作條件如柱溫、流動(dòng)相的流速、進(jìn)樣速度等條件的影響，從這一點(diǎn)來(lái)說(shuō)，峰面積更適合于定量分析。標(biāo)準(zhǔn)曲線法標(biāo)準(zhǔn)加入法現(xiàn)在是53頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*54請(qǐng)選擇內(nèi)容：第一節(jié)色譜法概述generalizationofchromatographanalysis第二節(jié)色譜理論基礎(chǔ)fundamentalofchromatographtheory結(jié)束現(xiàn)在是54頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*55色譜法液相色譜法氣相色譜法氣-液色譜法氣-固色譜法液-固色譜法液-液色譜法現(xiàn)在是55頁(yè)\一共有63頁(yè)\編輯于星期日*56色譜流出曲線的意義：色譜峰數(shù)=樣品中單組份的最少個(gè)數(shù)；色譜保留值——定性依據(jù)；色譜峰高或面積——定量