生化析儀原理

檢驗(yàn)科吳迪生化分析儀原理1生化析儀原理第1頁(yè)臨床生化自動(dòng)分析儀分類按運(yùn)行速度：1．大型生化儀速度600test/小時(shí)以上2．中型生化儀速度300-600test/小時(shí)3．小型生化儀速度300test/小時(shí)以下按儀器結(jié)構(gòu)：1．流動(dòng)式自動(dòng)生化分析儀2．離心式自動(dòng)生化分析儀3．分立式自動(dòng)生化分析儀生化析儀原理第2頁(yè)分立式自動(dòng)分析儀主要部件加樣系統(tǒng)比色系統(tǒng)分光系統(tǒng)供排水系統(tǒng)清洗系統(tǒng)操作控制與數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)生化析儀原理第3頁(yè)生化析儀原理第4頁(yè)生化析儀原理第5頁(yè)生化析儀原理第6頁(yè)生化析儀原理第7頁(yè)生化析儀原理第8頁(yè)加樣系統(tǒng)試劑倉(cāng)樣品轉(zhuǎn)盤、進(jìn)樣架系統(tǒng)（樣本放入?yún)^(qū)、條碼掃描通道、測(cè)定緩沖區(qū)、樣本回收區(qū)）樣品取樣單元試劑取樣單元混合部件生化析儀原理第9頁(yè)比色系統(tǒng)光源比色杯分立式比色轉(zhuǎn)盤比色杯恒溫水浴、空氣浴、恒溫液循環(huán)間接加熱比色杯類型硬質(zhì)石英/玻璃、塑料，永久、半永久、一次性。生化析儀原理第10頁(yè)分光系統(tǒng)干涉濾光片光柵分光式無(wú)相差蝕刻凹面光柵后分光集束式光路系統(tǒng)生化析儀原理第11頁(yè)關(guān)于雙波長(zhǎng)檢測(cè)優(yōu)點(diǎn)經(jīng)過(guò)計(jì)算兩個(gè)波長(zhǎng)之間差值，可糾正樣品中脂血、溶血和黃疸干擾影響；也可賠償電壓波動(dòng)影響，從而取得穩(wěn)定測(cè)定結(jié)果。生化析儀原理第12頁(yè)自動(dòng)生化分析儀工作程序計(jì)算機(jī)進(jìn)行計(jì)算打印機(jī)打印結(jié)果光電感應(yīng)器檢測(cè)樣本比色杯比色杯試劑1比色杯攪拌延遲試劑2比色杯比色杯攪拌反應(yīng)比色傳輸傳輸生化析儀原理第13頁(yè)生化析儀原理第14頁(yè)自動(dòng)分析儀基本分析方法終點(diǎn)法（1點(diǎn)）終點(diǎn)法和2點(diǎn)終點(diǎn)法速率法速率法和2點(diǎn)速率法（固定時(shí)間法）生化析儀原理第15頁(yè)終點(diǎn)法被測(cè)物質(zhì)（反應(yīng)底物）在化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中完全被消耗或轉(zhuǎn)換，即反應(yīng)到達(dá)平衡（終點(diǎn)），經(jīng)過(guò)測(cè)定產(chǎn)物（反應(yīng)生成物）多少來(lái)定量測(cè)定被測(cè)底物含量。終點(diǎn)法普通用來(lái)檢測(cè)代謝物濃度，經(jīng)過(guò)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)液（校準(zhǔn)液）反應(yīng)吸光度，建立一條濃度與吸光度改變標(biāo)準(zhǔn)曲線。經(jīng)過(guò)檢測(cè)標(biāo)本吸光度與標(biāo)準(zhǔn)液吸光度進(jìn)行比較，計(jì)算出該標(biāo)本中待測(cè)物濃度。生化析儀原理第16頁(yè)終點(diǎn)法終點(diǎn)法終點(diǎn)法可依據(jù)試劑原理不一樣設(shè)置為（一點(diǎn)）終點(diǎn)法和兩點(diǎn)終點(diǎn)法。對(duì)于單一試劑，在加入標(biāo)本后，反應(yīng)即可進(jìn)行，在反應(yīng)到達(dá)終點(diǎn)后，讀取反應(yīng)點(diǎn)（吸光度），故普通選取一點(diǎn)終點(diǎn)法。對(duì)于兩種以上試劑，加入第一試劑，主要起緩沖或者消除干擾等作用，此時(shí)可讀取初始反應(yīng)點(diǎn)，加入第二（或第三）試劑后，在反應(yīng)到達(dá)終點(diǎn)后，讀取結(jié)束反應(yīng)點(diǎn)。此即兩點(diǎn)終點(diǎn)法。本質(zhì)均為終點(diǎn)法。生化析儀原理第17頁(yè)終點(diǎn)法反應(yīng)曲線舉例（單試劑）生化析儀原理第18頁(yè)終點(diǎn)法反應(yīng)曲線舉例（單試劑）生化析儀原理第19頁(yè)終點(diǎn)法反應(yīng)曲線舉例（雙試劑）生化析儀原理第20頁(yè)終點(diǎn)法反應(yīng)曲線舉例（雙試劑）生化析儀原理第21頁(yè)終點(diǎn)法反應(yīng)曲線舉例（雙試劑免疫比濁法）生化析儀原理第22頁(yè)速率法速率法分為：連續(xù)監(jiān)測(cè)速率法和兩點(diǎn)速率法（固定時(shí)間法）。連續(xù)監(jiān)測(cè)速率法：在可見(jiàn)光區(qū)(GGT、ALP：405nm黃色)或紫外（HBDH、LDH、ALT：340nm）在一段時(shí)間內(nèi)連續(xù)監(jiān)測(cè)某一物質(zhì)生成(或消耗)速率，計(jì)算待測(cè)物活性，普通用于樣本中酶活性檢測(cè)。酶促反應(yīng)，在一定條件和測(cè)定范圍內(nèi)，當(dāng)Km〉〉底物濃度，符合零級(jí)速率法，底物消耗/生成速率只與催化反應(yīng)酶活性相關(guān)，為正百分比關(guān)系，直線斜率為定值（即K值或factor）生化析儀原理第23頁(yè)連續(xù)監(jiān)測(cè)速率法反應(yīng)曲線生化析儀原理第24頁(yè)兩點(diǎn)速率法兩點(diǎn)速率法適合用于反應(yīng)吸光度隨時(shí)間改變而改變，在一定時(shí)間內(nèi)無(wú)抵達(dá)終點(diǎn)趨勢(shì)，該反應(yīng)改變規(guī)律為在一定時(shí)間內(nèi)反應(yīng)趨勢(shì)為直線或靠近于直線。設(shè)定參數(shù)時(shí)選擇在直線上兩個(gè)點(diǎn)作為檢測(cè)點(diǎn)。生化析儀原理第25頁(yè)速率法吸光度計(jì)算速率法吸光度計(jì)算：如讀點(diǎn)為21-26;用最小二乘法，得到測(cè)光點(diǎn)21-26間每分鐘吸光度改變量。兩點(diǎn)速率法吸光度計(jì)算:

如讀點(diǎn)為21-26;T為：(26-21)點(diǎn)間隔時(shí)間[(A26+A25)/2-(A21+A20)/2]/T生化析儀原理第26頁(yè)定標(biāo)方法對(duì)于終點(diǎn)法和兩點(diǎn)速率法，必須經(jīng)過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)液，建立一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。速率法檢測(cè)酶類能夠采取理論因數(shù)法（K因數(shù)或Factor法），不過(guò)當(dāng)前，大多數(shù)試驗(yàn)室對(duì)酶類（速率法）測(cè)試亦采取標(biāo)準(zhǔn)液校正Factor方式，以消除儀器和試劑系統(tǒng)誤差。生化析儀原理第27頁(yè)定標(biāo)方法——2點(diǎn)定標(biāo)兩點(diǎn)定標(biāo)：以水作為零點(diǎn)，標(biāo)準(zhǔn)液作為另一點(diǎn)，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。此方法適合用于濃度隨吸光度改變呈線性改變?cè)噭?。曲線方程為：Y=AX對(duì)于一些特殊試劑如：K，Na，CL，因水中痕量離子濃度存在或者線性范圍限制，普通不以水作為零點(diǎn)，而采取定值高、低兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。曲線方程為：Y=AX+B。生化析儀原理第28頁(yè)2點(diǎn)定標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線生化析儀原理第29頁(yè)2點(diǎn)定標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線生化析儀原理第30頁(yè)定標(biāo)方法——多點(diǎn)定標(biāo)多點(diǎn)定標(biāo)：采取兩個(gè)以上標(biāo)準(zhǔn)液來(lái)建立一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。該曲線特征普通為非線性，即吸光度與濃度改變不是直線關(guān)系。計(jì)算方式在自動(dòng)生化儀上可選擇為：SPLINE或LOGIT-LOG法。對(duì)于一些經(jīng)過(guò)（膠乳增強(qiáng)）免疫比濁法測(cè)定試劑，多為此方法。因?yàn)榭乖贵w反應(yīng)形成濁度線性范圍較窄。生化析儀原理第31頁(yè)多點(diǎn)定標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線生化析儀原理第32頁(yè)多點(diǎn)定標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線生化析儀原理第33頁(yè)多點(diǎn)定標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線生化析儀原理第34頁(yè)自動(dòng)生化分析儀操作控制系統(tǒng)儀器操作和控制軟件功效：（1）設(shè)置系統(tǒng)參數(shù)（2）設(shè)置項(xiàng)目參數(shù)（3）設(shè)置試劑參數(shù)（4）設(shè)置校準(zhǔn)品和質(zhì)控品參數(shù)（5）實(shí)施校準(zhǔn)和質(zhì)控測(cè)試（6）進(jìn)行樣品測(cè)試（7）結(jié)果查詢（8）反應(yīng)全程監(jiān)控（9）執(zhí)行維護(hù)生化析儀原理第35頁(yè)自動(dòng)生化分析儀上機(jī)參數(shù)生化分析儀參數(shù)就是儀器工作指令，操作者經(jīng)過(guò)設(shè)置