生化析儀原理

檢驗科吳迪生化分析儀原理1生化析儀原理第1頁臨床生化自動分析儀分類按運行速度：1．大型生化儀速度600test/小時以上2．中型生化儀速度300-600test/小時3．小型生化儀速度300test/小時以下按儀器結構：1．流動式自動生化分析儀2．離心式自動生化分析儀3．分立式自動生化分析儀生化析儀原理第2頁分立式自動分析儀主要部件加樣系統(tǒng)比色系統(tǒng)分光系統(tǒng)供排水系統(tǒng)清洗系統(tǒng)操作控制與數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)生化析儀原理第3頁生化析儀原理第4頁生化析儀原理第5頁生化析儀原理第6頁生化析儀原理第7頁生化析儀原理第8頁加樣系統(tǒng)試劑倉樣品轉盤、進樣架系統(tǒng)（樣本放入?yún)^(qū)、條碼掃描通道、測定緩沖區(qū)、樣本回收區(qū)）樣品取樣單元試劑取樣單元混合部件生化析儀原理第9頁比色系統(tǒng)光源比色杯分立式比色轉盤比色杯恒溫水浴、空氣浴、恒溫液循環(huán)間接加熱比色杯類型硬質石英/玻璃、塑料，永久、半永久、一次性。生化析儀原理第10頁分光系統(tǒng)干涉濾光片光柵分光式無相差蝕刻凹面光柵后分光集束式光路系統(tǒng)生化析儀原理第11頁關于雙波長檢測優(yōu)點經(jīng)過計算兩個波長之間差值，可糾正樣品中脂血、溶血和黃疸干擾影響；也可賠償電壓波動影響，從而取得穩(wěn)定測定結果。生化析儀原理第12頁自動生化分析儀工作程序計算機進行計算打印機打印結果光電感應器檢測樣本比色杯比色杯試劑1比色杯攪拌延遲試劑2比色杯比色杯攪拌反應比色傳輸傳輸生化析儀原理第13頁生化析儀原理第14頁自動分析儀基本分析方法終點法（1點）終點法和2點終點法速率法速率法和2點速率法（固定時間法）生化析儀原理第15頁終點法被測物質（反應底物）在化學反應過程中完全被消耗或轉換，即反應到達平衡（終點），經(jīng)過測定產(chǎn)物（反應生成物）多少來定量測定被測底物含量。終點法普通用來檢測代謝物濃度，經(jīng)過測定標準液（校準液）反應吸光度，建立一條濃度與吸光度改變標準曲線。經(jīng)過檢測標本吸光度與標準液吸光度進行比較，計算出該標本中待測物濃度。生化析儀原理第16頁終點法終點法終點法可依據(jù)試劑原理不一樣設置為（一點）終點法和兩點終點法。對于單一試劑，在加入標本后，反應即可進行，在反應到達終點后，讀取反應點（吸光度），故普通選取一點終點法。對于兩種以上試劑，加入第一試劑，主要起緩沖或者消除干擾等作用，此時可讀取初始反應點，加入第二（或第三）試劑后，在反應到達終點后，讀取結束反應點。此即兩點終點法。本質均為終點法。生化析儀原理第17頁終點法反應曲線舉例（單試劑）生化析儀原理第18頁終點法反應曲線舉例（單試劑）生化析儀原理第19頁終點法反應曲線舉例（雙試劑）生化析儀原理第20頁終點法反應曲線舉例（雙試劑）生化析儀原理第21頁終點法反應曲線舉例（雙試劑免疫比濁法）生化析儀原理第22頁速率法速率法分為：連續(xù)監(jiān)測速率法和兩點速率法（固定時間法）。連續(xù)監(jiān)測速率法：在可見光區(qū)(GGT、ALP：405nm黃色)或紫外（HBDH、LDH、ALT：340nm）在一段時間內(nèi)連續(xù)監(jiān)測某一物質生成(或消耗)速率，計算待測物活性，普通用于樣本中酶活性檢測。酶促反應，在一定條件和測定范圍內(nèi)，當Km〉〉底物濃度，符合零級速率法，底物消耗/生成速率只與催化反應酶活性相關，為正百分比關系，直線斜率為定值（即K值或factor）生化析儀原理第23頁連續(xù)監(jiān)測速率法反應曲線生化析儀原理第24頁兩點速率法兩點速率法適合用于反應吸光度隨時間改變而改變，在一定時間內(nèi)無抵達終點趨勢，該反應改變規(guī)律為在一定時間內(nèi)反應趨勢為直線或靠近于直線。設定參數(shù)時選擇在直線上兩個點作為檢測點。生化析儀原理第25頁速率法吸光度計算速率法吸光度計算：如讀點為21-26;用最小二乘法，得到測光點21-26間每分鐘吸光度改變量。兩點速率法吸光度計算:

如讀點為21-26;T為：(26-21)點間隔時間[(A26+A25)/2-(A21+A20)/2]/T生化析儀原理第26頁定標方法對于終點法和兩點速率法，必須經(jīng)過使用標準液，建立一條標準曲線。速率法檢測酶類能夠采取理論因數(shù)法（K因數(shù)或Factor法），不過當前，大多數(shù)試驗室對酶類（速率法）測試亦采取標準液校正Factor方式，以消除儀器和試劑系統(tǒng)誤差。生化析儀原理第27頁定標方法——2點定標兩點定標：以水作為零點，標準液作為另一點，建立標準曲線。此方法適合用于濃度隨吸光度改變呈線性改變試劑。曲線方程為：Y=AX對于一些特殊試劑如：K，Na，CL，因水中痕量離子濃度存在或者線性范圍限制，普通不以水作為零點，而采取定值高、低兩個標準液，建立標準曲線。曲線方程為：Y=AX+B。生化析儀原理第28頁2點定標標準曲線生化析儀原理第29頁2點定標標準曲線生化析儀原理第30頁定標方法——多點定標多點定標：采取兩個以上標準液來建立一條標準曲線。該曲線特征普通為非線性，即吸光度與濃度改變不是直線關系。計算方式在自動生化儀上可選擇為：SPLINE或LOGIT-LOG法。對于一些經(jīng)過（膠乳增強）免疫比濁法測定試劑，多為此方法。因為抗原抗體反應形成濁度線性范圍較窄。生化析儀原理第31頁多點定標標準曲線生化析儀原理第32頁多點定標標準曲線生化析儀原理第33頁多點定標標準曲線生化析儀原理第34頁自動生化分析儀操作控制系統(tǒng)儀器操作和控制軟件功效：（1）設置系統(tǒng)參數(shù)（2）設置項目參數(shù)（3）設置試劑參數(shù)（4）設置校準品和質控品參數(shù)（5）實施校準和質控測試（6）進行樣品測試（7）結果查詢（8）反應全程監(jiān)控（9）執(zhí)行維護生化析儀原理第35頁自動生化分析儀上機參數(shù)生化分析儀參數(shù)就是儀器工作指令，操作者經(jīng)過設置