免疫器官的觀察與免疫細胞的分離

免疫器官的觀察與免疫細胞的分離免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第1頁第二講

免疫器官觀察與

免疫細胞分離免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第2頁試驗目標掌握小白鼠捉拿與處死方法掌握免疫細胞分離方法及其效果判斷熟悉血細胞計數(shù)板結(jié)構(gòu)及使用方法免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第3頁免疫器官觀察免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第4頁免疫細胞種類免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第5頁免疫細胞分離技術(shù)

密度梯度離心法免疫吸附分離法熒光激活細胞分選儀分離法磁珠分離法抗原肽-MHC分子四聚體技術(shù)花環(huán)沉降法免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第6頁外周血單核細胞分離離心前離心后稀釋抗凝血淋巴細胞分離液血漿單個核細胞粒細胞紅細胞密度梯度離心法免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第7頁淋巴細胞及其亞群分離免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第8頁抗原肽-MHC分子四聚體技術(shù)

T免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第9頁小白鼠抓取和固定通常見右手提起小鼠尾巴將其放在鼠籠蓋或其它粗糙表面上，在小鼠向前掙扎爬行時，用左手拇指和食指捏住其雙耳及頸部皮膚，翻轉(zhuǎn)后將小鼠置于左手掌心、無名指和小指夾其背部皮膚和尾部，即可將小鼠完全固定。免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第10頁小白鼠抓取和固定免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第11頁小白鼠抓取和固定免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第12頁小白鼠處死方法頸椎脫臼法：用拇指和食指用力往下按住鼠頭，另一只手抓住鼠尾，用力稍向后上方一拉，使之頸椎脫臼，造成脊髓與腦髓斷離，動物馬上死亡。免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第13頁小白鼠處死法（頸椎脫臼法）

免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第14頁倒T字開腹

免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第15頁小白鼠脾臟免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第16頁小白鼠脾臟免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第17頁小白鼠脾臟

免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第18頁小白鼠胸腺免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第19頁小白鼠胸腺免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第20頁【試驗器材】

小白鼠手術(shù)器械，解剖臺,血細胞計數(shù)板,顯微鏡0.2％臺盼藍染液免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第21頁【試驗步驟】頸椎脫臼法處死小白鼠，取其脾臟將脾臟放入適量（約15ml）生理鹽水中，除去筋膜取綠豆大小脾臟，用玻片研磨制成10ml細胞懸液?。眒l細胞懸液于試管中，加入１滴臺盼藍染液混勻后靜置3分鐘，低倍鏡觀察免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第22頁【臺盼蘭拒染法原理】

通透性著色顏色體積

死細胞

高

易藍大

活細胞

低

難無色小活細胞死細胞免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第23頁注意事項脾臟去凈筋膜，棄邊緣，取其中間個別研磨時不可用力過大，時間不宜過長染色時間不宜過長或過短血細胞計數(shù)板使用方法（10倍鏡、暗視野）免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第24頁血細胞記數(shù)板

細胞計數(shù)池免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第25頁血細胞計數(shù)池結(jié)構(gòu)

白細胞計數(shù)區(qū)：

紅細胞計數(shù)區(qū)：無效計數(shù)區(qū)免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第26頁【計數(shù)標準】

1、2、“”形隨機計數(shù)S計左不計右，計上不計下√

×√√免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第27頁【試驗結(jié)果】

細胞計數(shù)隨機計數(shù)100個細胞，并數(shù)出其中活細胞數(shù)結(jié)果計算細胞活力＝活細胞數(shù)／細胞總數(shù)×100%免疫器官的觀察與免疫細胞的分離第28頁試驗操作錄像免疫器官的觀察與免疫細胞的