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文檔簡介

動物人工繁殖動物人工繁殖技術(shù)包括有性生殖和無性生殖兩條途徑。前者的關(guān)鍵技術(shù)是人工受精與體外受精,后者的關(guān)鍵技術(shù)是核移植,兩者都涉及胚胎培養(yǎng)與移植。動物人工繁殖的基礎(chǔ)是胚胎工程。胚胎工程是通過在生殖細胞、胚胎細胞水平上的顯微操作技術(shù),來定向控制、改造和創(chuàng)造新遺傳性狀的技術(shù),是動物細胞工程的拓展和延伸,又稱發(fā)育工程(revelopmentaltechnology)?,F(xiàn)在是1頁\一共有52頁\編輯于星期二胚胎工程的發(fā)展歷史1891年,英國人希普首次在兔子身上成功的進行了核移植。20世紀30年代,陸續(xù)在鼠、兔、羊、豬、牛和馬進行胚胎移植實驗,相繼獲得成功。20世紀60年代以來,隨著胚胎移植技術(shù)的不斷成熟和規(guī)范化,以及一系列新方法的建立,胚胎工程進展迅速,以日本、澳大利亞和加拿大發(fā)展最快。1987年,美國用家貓做代理母親,移植了一只瀕臨滅絕的珍貴貓的受精卵,成功獲得試管貓。我國自20世紀70年代開始發(fā)展該技術(shù),進展也較迅速,但與世界先進國家相比,還存在較大差距。1977年,英國科學(xué)家首次創(chuàng)造了世界上第一個試管嬰兒?,F(xiàn)在是2頁\一共有52頁\編輯于星期二體外受精和胚胎移植技術(shù)現(xiàn)在是3頁\一共有52頁\編輯于星期二胚胎移植的發(fā)育早期胚胎發(fā)育的三個階段:1)桑椹胚:卵裂球分裂到16-32細胞時,成為一緊密的細胞團,稱為桑椹胚。在2-8個細胞時,每個細胞均具有全能性。2)囊胚:在胚胎內(nèi)形成空腔,逐漸變大成為囊胚腔,此時一端細胞個體較大,形成密集(三層)的內(nèi)細胞團(ICM),將來發(fā)育成胚體。另一端只有環(huán)透明帶一層細胞,稱滋養(yǎng)層,將來發(fā)育成胚膜。3)原腸胚:囊胚進一步發(fā)育,內(nèi)細胞團外的滋養(yǎng)層退化,內(nèi)細胞團裸出形成胚盤,在胚盤下方衍生出內(nèi)胚層,此時胚胎稱原腸胚?,F(xiàn)在是4頁\一共有52頁\編輯于星期二胚胎工程---體外受精(IVF)(第一步驟)精子獲能是精子獲得穿透卵子透明帶能力的生理過程,是精子在受精前必須經(jīng)歷的一個重要階段。精子獲能分為體內(nèi)獲能與體外獲能體內(nèi)獲能:精子在附睪內(nèi)已經(jīng)獲得了受精能力,但由附睪分泌的一種物質(zhì)附于精子表面,抑制了他的受精能力,這種物質(zhì)被稱為去能因子。去能因子是頂體酶的抑制劑。體外獲能:精子通過用子宮液、卵泡液、子宮內(nèi)膜提取液或血清等在體外培養(yǎng)獲能的過程。2、卵子回收及成熟培養(yǎng)3、卵子和精子的體外受精(invitrofertilizationIVF)受精成功的標志至少是看受精卵是否可以發(fā)育至囊胚期階段4、受精卵的體外發(fā)育及體外培養(yǎng)現(xiàn)在是5頁\一共有52頁\編輯于星期二體外受精的方式:1、共培養(yǎng)體外受精卵子和精子在體外人工環(huán)境中共同培養(yǎng)2、透明帶注射法體外將精子通過微注射器注射入卵細胞的透明帶下的卵間隙中使卵細胞受精。3、卵漿內(nèi)精子注射法體外將精子通過微注射器注射入卵細胞的細胞質(zhì)中使卵細胞受精。4、透明帶修飾法人工破壞卵細胞的透明帶?,F(xiàn)在是6頁\一共有52頁\編輯于星期二胚胎工程---胚胎移植(ET)(第二步驟)胚胎移植(embryotransfer)指從某個體采胚或?qū)⒃嚬軆?nèi)的受精卵(8細胞以上或囊胚期)移植到另一個體的輸卵管或子宮中去的技術(shù)。提供胚胎或受精卵的母體稱為“供體”。接受胚胎或受精卵的母體稱為“受體”,又稱“代孕母體”或“代理母親”。來自供體的胚胎能夠在受體的子宮著床,并繼續(xù)生長和發(fā)育,最后產(chǎn)下供體的后代,即是所謂的“借腹懷胎”。現(xiàn)在是7頁\一共有52頁\編輯于星期二荷爾蒙FSH(促卵泡激素)人工環(huán)境下通過藥物(FSH)刺激卵巢分泌產(chǎn)生卵細胞超數(shù)排卵:在母畜發(fā)情周期的適當(dāng)時間用人工方法促使其有更多的卵泡發(fā)育、成熟、排卵的一項技術(shù)。方法是注射促性腺激素,如孕酮、雌二醇、促卵泡激素、促黃體激素、促性腺激素釋放激素等?,F(xiàn)在是8頁\一共有52頁\編輯于星期二LH是黃體生成素,HCG是促絨毛性腺激素超排卵處理的母體在停藥后24-48小時后可進行人工受精,以后約在3-7天從母體采集受精卵或胚胎?,F(xiàn)在是9頁\一共有52頁\編輯于星期二體外受精生殖核胚囊胚胎的采集、鑒別正常發(fā)育的胚胎,其中細胞(卵裂球)外形整齊,大小一致,分布均勻,外膜完整。無卵裂現(xiàn)象(未受精)和異常卵(外膜破裂、卵裂球破裂等)都不能用于移植。精子獲能現(xiàn)在是10頁\一共有52頁\編輯于星期二胚胎移植同步發(fā)情指使供體和受體同步發(fā)情,即處于相同的生殖周期。胚胎移植外科手術(shù)法或非手術(shù)法現(xiàn)在是11頁\一共有52頁\編輯于星期二胚胎冷凍保存技術(shù):在冷凍細胞的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,包括精子、卵母細胞和早期胚體的冷凍保存。1、短期臨時保存:指將暫時不使用的胚胎在37℃培養(yǎng)液中保存,或在活體同種或異種動物的輸卵管內(nèi)保存1-2天。也可將胚胎置0-4℃低溫下保存2-3天。2、長期冷凍保存:有儀器程序逐步降溫冷凍和徒手操作的快速玻璃化冷凍。前者利用冷凍儀按編程由室溫逐步降溫至零下196℃(液氮)保存。所用冷凍劑一般為二甲基亞砜、氨基酸、甘油等。后者是直接加入高濃度的抗凍液(玻璃化冷凍保護液)急速冷凍,有液體轉(zhuǎn)化為透明膠狀固體?,F(xiàn)在是12頁\一共有52頁\編輯于星期二試管嬰兒現(xiàn)在是13頁\一共有52頁\編輯于星期二

1977年7月25號世界上第一例試管嬰兒——路易絲.布朗在英國呱呱墜地;1978年,印度創(chuàng)造了世界上第二例試管嬰兒。至1987年,有6000多個,1996——1997年間美國就有42463個。我國大陸也于1988年3月10號,在北京醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科手術(shù)室誕生了第一個試管嬰兒——鄭萌珠。培育試管嬰兒,包括體外受精(invitrofertiliztion)和胚胎移植(embryotransfer,ET)兩個步驟。即在試管中將精子與卵結(jié)合受精,2·5天后,把發(fā)育到8細胞期的胚胎移植到子宮中去,發(fā)育成長,直至足月分娩。(胚胎發(fā)育的第7—12天,即原腸化階段,是人生最關(guān)鍵的時刻)。此項技術(shù)主要適用于各種女性原因的不孕、免疫性不孕、輕度少精癥等。現(xiàn)在是14頁\一共有52頁\編輯于星期二試管嬰兒的三個階段:第一代試管嬰兒:最早成功的常規(guī)技術(shù)。第二代試管嬰兒:采用顯微受精技術(shù)將單個精子注射進卵細胞內(nèi)使其受精。適用于男性原因的不孕,如少精、弱精等。1996年,我國第二代試管嬰兒(ICSI)在中山醫(yī)科大學(xué)獲得成功。第三代試管嬰兒:對體外受精的胚胎取出細胞進行遺傳學(xué)診斷后再行胚胎移植。我國第三代試管嬰兒(PGD)在中山醫(yī)科大學(xué)獲得成功。2000年3月,我國首例超快速冷凍胚胎移植的試管嬰兒在湖南醫(yī)科大學(xué)人類生殖工程研究室誕生,標志著我國在該領(lǐng)域的研究已進入世界先進行列。進一步,美國、日本、臺灣正研制多胞胎和“人造子宮”以完成懷孕全過程?,F(xiàn)在是15頁\一共有52頁\編輯于星期二(一)克隆概念的由來

(二)克隆研究的主要內(nèi)容

(三)克隆的理論基礎(chǔ)及發(fā)展史

(四)克隆的技術(shù)方法及制備程序

(五)克隆技術(shù)的應(yīng)用及意義

(六)克隆技術(shù)存在的問題

(七)驚世駭俗的計劃——“克隆人”生物克隆技術(shù)現(xiàn)在是16頁\一共有52頁\編輯于星期二克隆概念的由來“一個細菌一分為二;一根葡萄枝切成十段就可能變成十株葡萄;仙人掌切成幾塊,每塊落地就生根;一株草莓依靠它沿地“爬走”的匍匐莖,一年內(nèi)就能長出數(shù)百株草莓苗;人們剪下植物枝條,扦插到土里,不久就會發(fā)芽,長出新的植株,這些植株是遺傳物質(zhì)組成完全相同的植株,這就是克隆”。凡此種種,都是生物靠自身的一分為二或自身的一小部分的擴大來繁衍后代,這就是無性繁殖,無性繁殖的英文名稱叫“Clone”,譯音為“克隆”。在動物界也有無性繁殖,不過多見于非脊椎動物,如原生動物的分裂繁殖、尾索類動物的出芽生殖等。但對于高級動物,在自然條件下,一般只能進行有性繁殖,要使其進行無性繁殖,科學(xué)家必須經(jīng)過一系列復(fù)雜的操作程序。如用未分化的胚胎細胞進行核移植稱為胚胎細胞克隆(embryonic-cell-cloning);用已分化的體細胞(即非生殖細胞)。進行核移植稱之體細胞克隆(somatic-cell-cloning)?,F(xiàn)在是17頁\一共有52頁\編輯于星期二克隆研究的主要內(nèi)容

1供體細胞的來源和特性胚胎細胞——發(fā)育至32-64個卵裂球的胚胎細胞;胚胎干細胞——來自胚胎內(nèi)細胞團;成年動物體細胞

2細胞質(zhì)受體的來源和特性具有全能性的細胞核是否具有重編程的能力,主要取決于胞質(zhì)的性質(zhì)。成熟卵母細胞是目前公認的成功受體。3重構(gòu)胚核質(zhì)適應(yīng)機理核質(zhì)間細胞周期是否同期化、核重編程的能力如何和核質(zhì)相適應(yīng)的機制等。4克隆技術(shù)支持體系的研究包括供核細胞和胞質(zhì)受體的采集技術(shù)和培養(yǎng)體系的研究;核移植操作技術(shù)及有關(guān)設(shè)備的研究。5重構(gòu)胚胎的體內(nèi)和體外培養(yǎng)技術(shù)6克隆技術(shù)的使用化研究現(xiàn)在是18頁\一共有52頁\編輯于星期二克隆的理論基礎(chǔ)及發(fā)展史1932年,英國作家赫胥黎的小說《美麗新世界》中預(yù)言人類科技發(fā)展到足以復(fù)制自身之時,便是世界陷入混亂之日。

1938年,德國胚胎學(xué)家提出動物克隆的設(shè)想:即從發(fā)育后期的胚胎中取出細胞核,將其移植到一個卵子中去,使其繁殖。

1950年,首次成功地冷藏牛的精于,稍后與母牛的卵子進行了人工授精。

1951年,科學(xué)家培育出第一個人體腫瘤細胞系。

1952年,皮科克醫(yī)生宣稱他找到了370多種不用精子生殖海膽的方法。

1952年,第一次進行動物克隆,羅伯特·布瑞格和托馬斯·金對小蝌蚪的細胞核進行無性繁殖。1953年,沃森和克里克發(fā)表了震驚世界的千字論文,揭開了生命遺傳物質(zhì)即DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)。

現(xiàn)在是19頁\一共有52頁\編輯于星期二1970年,英國科學(xué)家約翰·戈德和同事利用經(jīng)過培養(yǎng)的成年青蛙表皮細胞核克隆成功成年青蛙。

1976年,美國設(shè)立“重組DNA管理委員會”,負責(zé)管理人體基因工程。

1977年,數(shù)百名美國人來到美國國家科學(xué)院舉行示威,其口號是:“我們不要克隆”,“不要碰我的基因”!這是第一次對生物技術(shù)提出抗議。

1978年,由英國科學(xué)家史德彼逑和愛德華茲共同培育出第一個試管嬰兒--路易斯。

1981年,日內(nèi)瓦大學(xué)的研究人員利用胚胎移植技術(shù)培育出正常的老鼠。

1983年,第一次成功地進行了人類胚胎由一個母體向另一個母體的轉(zhuǎn)移。

1986年,作為人工授精試驗的志愿者懷特·海德懷胎十月產(chǎn)下一女嬰,但當(dāng)她提出要撫養(yǎng)“自己的孩子”時,遭到了拒絕。

1986年,英國科學(xué)家首次利用胚胎細胞細胞核移植技術(shù)克隆出一頭羊?,F(xiàn)在是20頁\一共有52頁\編輯于星期二1988年,格雷納德生物公司成功地利用改進型的細胞核移植技術(shù)來克隆奶牛。

1991年,美國國家衛(wèi)生與醫(yī)學(xué)博物館宣布,打算復(fù)制林肯身體組織樣本。

1991年,文特爾提出要對人體大腦中發(fā)現(xiàn)的337個基因擁有專利保護權(quán)和所有權(quán)。

1993年,電影《株羅紀公園》“克隆”了一大堆恐龍。

1994年,美國利用牛胚胎細胞核移植技術(shù)克隆牛成功。

1994年,中國利用山羊胚胎細胞核移植技術(shù)克隆山羊成功。

1996年,一部令人迷惑的電視動畫片《蜘蛛人》創(chuàng)造了一個克隆蜘蛛人的英雄形象。

1997年,英國胚胎學(xué)家維爾穆特和他的同事宣稱用母羊的乳腺細胞克隆成功了第一只克隆羊。開創(chuàng)了成年哺乳動物克隆的先河。

1998年,克隆羊“多利”當(dāng)上了媽媽,生下了一只名叫“邦尼”的小羊?,F(xiàn)在是21頁\一共有52頁\編輯于星期二動物克隆研究的三個階段

1、胚胎細胞克隆階段1981年,IIImensee和Hoppe報道他們用小鼠的正常囊胚或孤雌活化囊胚的內(nèi)細胞團細胞作為供核體,直接注入去掉雌雄原核的受精卵胞質(zhì)中,重構(gòu)胚體外發(fā)育到桑葚胚或囊胚后移植寄母子宮,獲得了克隆小鼠,這是在哺乳類第一次用胚胎細胞進行核移植獲得成功。1983年,美國科學(xué)家利用核移植技術(shù)結(jié)合細胞融合方法獲得了克隆小鼠。1986年,英國的Willadsen用綿羊的8-16個細胞階段的胚胎細胞作供體進行核移植,首次應(yīng)用電融合的方法克隆出一只小羊。此后,其他科學(xué)家也相繼成功地克隆出小鼠、綿羊、牛、兔豬和猴等。我國科學(xué)家也在20世紀90年代成功開展了胚胎細胞克隆兔、山羊、小鼠、牛和豬等研究。以上這些克隆實驗中所用供核細胞均屬發(fā)育至不同階段的胚胎細胞?,F(xiàn)在是22頁\一共有52頁\編輯于星期二2、同種體細胞克隆階段1997年2月,英國羅斯林研究所Wilmut等人宣布他們用6歲成年羊的高度分化的乳腺細胞進行了核移植,成功地獲得了克隆羊“多莉”。1998年5月,美國科學(xué)家Robl的研究組利用胎兒成纖維細胞克隆出了3頭牛,而且攜帶了轉(zhuǎn)移的基因。1998年7月,日本科學(xué)家Dato等用牛的輸卵管細胞克隆出了8頭小牛。1998年7月,美國夏威夷大學(xué)Yanagimachi領(lǐng)導(dǎo)的研究小組獲得小鼠卵丘細胞進行克隆再克隆小鼠成功的結(jié)果。1999年6月,Yanagimachi的研究小組又利用成年雄性小鼠尾尖的成纖維細胞為供核體細胞成功地克隆出了一只雄性小鼠,這也是第一只供體細胞不是來源于雌性動物被克隆的動物。此后,同種體細胞克隆山羊、豬、貓和兔也都相繼誕生。我國體細胞克隆山羊和克隆牛不論雌的還是雄的也都已獲得成功。在同種體細胞克隆研究中。所用供核體細胞為高度分化的體細胞。現(xiàn)在是23頁\一共有52頁\編輯于星期二3、異種體細胞克隆階段異種體細胞克隆是將一種動物的體細胞核移植到另一種動物的去核(遺傳物質(zhì))卵母細胞中。由于瀕危物種的個體數(shù)量少,很難提供用于克隆的卵母細胞和代孕受體,這就促使科學(xué)家提出了異種克隆的設(shè)想。異種克隆研究面臨著許多問題,如體細胞核能否在異種卵胞質(zhì)中去分化并支持早期胚泡發(fā)育?異種核質(zhì)能否相容?異種重構(gòu)胚能否著床并進行全程發(fā)育等問題。1999年,中科院動物所實驗室將成年大熊貓體細胞作為供核體細胞移植到去核(遺傳生物)日本大耳白兔卵母細胞中成功地構(gòu)建異種重構(gòu)胚,體外培養(yǎng)獲得孵化囊胚。2001年將重構(gòu)胚移植寄母子宮,獲得了著床的重大進展。2002年,不僅異種重構(gòu)胚能夠在異種寄母子宮中著床,而且還能發(fā)育,這是異種克隆大熊貓研究中攻克的最后一個難題中的最新進展。美國(1952年前)→英國(1963年)→中國(1970年前后)→英國

第一階段第二階段第三階段現(xiàn)在是24頁\一共有52頁\編輯于星期二芬多席特白面羊(6歲)蘇格蘭黑面羊乳腺上皮細胞(凍存3個月)卵細胞細胞核

取出細胞核去核卵換核卵細胞體外培養(yǎng)代孕母羊“多莉”(白面羊的復(fù)制品)動物克隆史上的豐碑——“多莉”的誕生(體細胞的克?。┈F(xiàn)在是25頁\一共有52頁\編輯于星期二Wilmut克隆“多莉”的生物學(xué)意義具有豐富的保存卵細胞和其它細胞的經(jīng)驗掌握了熟練的核移植.等關(guān)鍵性技術(shù)對受精卵進行了電刺激處理,起激活作用采用細胞同步化技術(shù),使受體和供體細胞均處在細胞周期的G0期已經(jīng)成功的進行了先期克隆實驗現(xiàn)在是26頁\一共有52頁\編輯于星期二克隆的技術(shù)方法克隆的技術(shù)方法主要指以細胞核移植為核心技術(shù)的無性繁殖技術(shù)。細胞核移植技術(shù):是一種利用顯微操作技術(shù)將一種動物的細胞核移入同種或異種動物的去核成熟卵內(nèi)的精細操作技術(shù)。包括胚胎細胞核移植和體細胞核移植兩種。通過此技術(shù)可獲得核質(zhì)雜種?,F(xiàn)在是27頁\一共有52頁\編輯于星期二(1)受體細胞的去核:受體為成熟的卵細胞。盲吸去核法:用細胞骨架松弛劑(細胞松弛素或秋水仙素)處理卵母細胞,固定卵母細胞,吸管刺入透明帶,吸取核輕輕拉出透明帶,完成卵母細胞去核。功能去核法:通過紫外照射或者激光照射使染色體失活而達到去核的目的?;瘜W(xué)誘導(dǎo)去核法:用脫羰秋水仙素處理減數(shù)分裂2期的卵母細胞使其排放第二極體。細胞核移植的技術(shù)要點第二極體:動物的卵原細胞減數(shù)第一次分裂結(jié)束形成的兩個子細胞中的大細胞叫次級卵母細胞,小的叫第一極體(1個);減數(shù)第二次分裂完形成的4個子細胞中那1個大細胞叫卵細胞,3個小的叫第二極體(3個)?,F(xiàn)在是28頁\一共有52頁\編輯于星期二(2)供體細胞的準備:供體通常選用胚胎細胞(發(fā)育至32-64個卵裂球的胚胎細胞)和胚胎干細胞(來自胚胎內(nèi)細胞團)以及成年動物體細胞。供體細胞通常采用處于G0期的細胞。G0期細胞又稱為“靜止細胞”,“休止細胞”,其適合在適宜的條件下刺激進入增殖狀態(tài)。血清“饑餓”法能夠獲得G0期的細胞?,F(xiàn)在是29頁\一共有52頁\編輯于星期二血清“饑餓”法如何使處在細胞周期不同階段上的核供體和受體處于同步狀態(tài)?血清“饑餓法”使細胞核和去核卵細胞處于細胞周期中相匹配的階段,使結(jié)合在基因(DNA)上的調(diào)控蛋白脫落下來,細胞進入重新編程過程(reprogram,remodel

)。現(xiàn)在是30頁\一共有52頁\編輯于星期二(3)細胞移核:選擇合適的微吸管穿過透明帶注入去核卵母細胞中,避免移入過多的細胞質(zhì)、控制溫度,短時間內(nèi)完成。還可用供核細胞和卵母細胞的融合實現(xiàn)核轉(zhuǎn)移。直接注射法透明帶注射法直接注射法現(xiàn)在是31頁\一共有52頁\編輯于星期二(4)重組胚激活激活是通過某種刺激使卵子內(nèi)鈣離子濃度升高,給卵一個啟動信號,促使細胞周期的恢復(fù)。電激活:通過電流刺激,使重組胚的核和質(zhì)進行融合,從而激活重組胚?;瘜W(xué)激活:使用化學(xué)物質(zhì)(7%乙醇,離子霉素,鈣離子載體等)刺激重組胚。(5)重組胚的培養(yǎng)和移植重組胚可以采用體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種方式。體外培養(yǎng)是將重組胚在特定培養(yǎng)液中培養(yǎng)至囊胚,選擇優(yōu)質(zhì)胚移植入同期的受體中繼續(xù)發(fā)育的過程。(6)核移植后代的鑒定常用分子生物學(xué)方法現(xiàn)在是32頁\一共有52頁\編輯于星期二根據(jù)細胞核的來源不同,一般分為胚胎細胞核移植法、胚胎干細胞移植法、胎兒成纖維細胞移植法和體細胞核移植法,其基本程序大體一致??寺游锏闹苽涑绦?)胚胎細胞核移植法:將未著床的早期胚胎分散成單個細胞,然后分別取核進行核移植,發(fā)育成胚胎后再行胚胎移植、發(fā)育分娩。也可通過細胞融合法將供體核移入去核卵的方法。2)胚胎干細胞移植:首先制作胚胎干細胞系,再進行細胞核移植,可克隆出更多的動物個體。此法在小鼠較為成熟。3)胎兒成纖維細胞核移植:從早期胎兒分離成纖維細胞進行核移植。4)體細胞克隆技術(shù):1997年2月,英國羅斯林研究所Wilmut等人宣布他們用6歲成年羊的高度分化的乳腺細胞進行了核移植,成功地獲得了克隆羊“多莉”。榮登Science雜志評出的1997年世界十大科技成就之首?,F(xiàn)在是33頁\一共有52頁\編輯于星期二核供體動物的選擇與細胞核的獲得核受體動物的選擇與細胞核的移出供體核的移入及原核的取出胚泡的體外試管培養(yǎng)代母的選擇與胚泡移入子宮克隆動物的體內(nèi)發(fā)育與出生動物克隆的過程現(xiàn)在是34頁\一共有52頁\編輯于星期二爪蟾的核移植實驗1958年JohnGurdon和Machineer現(xiàn)在是35頁\一共有52頁\編輯于星期二現(xiàn)在是36頁\一共有52頁\編輯于星期二現(xiàn)在是37頁\一共有52頁\編輯于星期二克隆技術(shù)的實踐應(yīng)用及意義遺傳素質(zhì)完全一致的克隆動物將有利于開展對動物(人)生長發(fā)育、衰老和疾病健康等機理的研究拯救瀕臨滅絕的動物(異種克隆、借腹懷胎),保護基因資源大量快速擴大和繁殖高經(jīng)濟性狀(品質(zhì)優(yōu)良)的牲畜(禽)克隆轉(zhuǎn)基因動物,創(chuàng)建活的藥廠,提供廉價的藥品和保健品提高臨床醫(yī)學(xué)的治療手段(提供易被接受的移植器官)解決不育癥,作為生育的輔助措施——“克隆人”DNA大量拷貝(DNA克?。┛寺〖夹g(shù)最重要的用途體現(xiàn)在兩方面:一是大規(guī)模繁殖良種動物,包括轉(zhuǎn)基因動物;二是克隆瀕危動物?,F(xiàn)在是38頁\一共有52頁\編輯于星期二克隆技術(shù)存在的問題技術(shù)尚不成熟,成本高、效率及成活率低移植434只成體綿羊的乳腺上皮細胞核至相同數(shù)量的綿羊卵子中,產(chǎn)生了277個融合細胞(成功率為63.8%)。將此融合細胞移入母羊輸卵管成功247個(89.2%),只獲得29個發(fā)育到桑椹期或囊胚期的胚胎11.7%)。移植到13只代孕母羊的子宮中,僅有一頭羊懷胎(7.7%)最后產(chǎn)下一只小羊——“多莉”(總成功率為0.23%)。存在嚴重的生理或免疫缺陷克隆動物的壽命問題,克隆動物存在嚴重的早衰問題,夭折率高達75%。(多莉DNA遭損傷,明顯衰老,端粒比同齡羊縮短約20%,與6歲供體核母羊相似)現(xiàn)在是39頁\一共有52頁\編輯于星期二驚世駭俗的計劃——“克隆人”自從2003年邪教組織雷爾教派的科學(xué)家布里吉特·布瓦瑟利耶聲稱已“培育出世界第一個克隆嬰兒”后,國際輿論一直沸沸揚揚,科學(xué)界則始終持質(zhì)疑的態(tài)度。多數(shù)西方國家政府,領(lǐng)袖以及宗教界人士紛紛發(fā)表聲明反對克隆人,也有不少國家制定了禁止克隆人的法令。在這種情況下,依然在國際社會還有人要進行克隆人。1998年新年伊始,美國一位物理學(xué)家公開向新聞媒體宣布了他自己輝煌的“克隆人”計劃。此人名叫理查德.錫德,70歲,哈佛大學(xué)教授。意大利胚胎學(xué)家安蒂諾里和美國一女科學(xué)家,已經(jīng)征集了200多位女性在公海的一只游船上進行克隆人的試驗。英國和韓國已于1998年用人的體細胞克隆成功人的胚胎,由于法律約束又銷毀了。維爾穆特1999年月初在英國宣布他領(lǐng)導(dǎo)的科研小組正著手實施克隆人體胚胎的計劃。1999年6月,美國馬薩諸州成功克隆出人的胚胎。現(xiàn)在是40頁\一共有52頁\編輯于星期二2001年11月25日美國先進細胞技術(shù)公司(ACT)報道了利用克隆技術(shù)培育出人類早期胚胎(4、6細胞期),這個消息一瞬間就傳遍了世界,在全球引發(fā)軒然大波,激起了各國爭議,因為它離克隆人只有一步之遙。三位“瘋子科學(xué)家”執(zhí)意要開始克隆人美國“克隆基金”主任布瓦瑟利耶、肯塔基州列克星頓大學(xué)激素學(xué)院院長扎沃斯和意大利科學(xué)家安提諾里。是克隆人的堅定推崇者,因此被學(xué)術(shù)界稱為“科學(xué)瘋子”。三位“瘋子科學(xué)家”最近在美國科學(xué)院的研討會上暗示,他們最近幾周將開始實施克隆人的計劃,克隆人可能明年就會問世。由于三人大肆鼓吹其克隆人計劃,結(jié)果招致了美國國家科學(xué)院大廳內(nèi)的一場對罵?,F(xiàn)在是41頁\一共有52頁\編輯于星期二克隆人的問題誰生他?鑒于這個孩子是人類試驗品的現(xiàn)實,這位母親起到的也僅僅是一個生育機或孵化器的作用。這對母子之間的感情,在孩子出生前就被異化了。這位母親自然也就被剝奪了享受正常親情的權(quán)利,更談不到親自撫育這個孩子了。因此,母愛將是克隆人終生享受不到的奢侈品。誰養(yǎng)他?科學(xué)創(chuàng)造了他,那么養(yǎng)育他的權(quán)利自然落到了科學(xué)家以及用金錢支持這些科學(xué)實驗的人身上。他大部分的生命將在實驗室里度過,他將要面對的是無數(shù)未知的兇險和危機以及比這些還要可怕的歸屬感的天然缺失。誰愛他?誰對他投注真誠的情感?當(dāng)然,克隆人的生命將比地球上任何一個生命都要值錢,所有科學(xué)家都會竭盡全力挽救他的生命,心理學(xué)家們會對他的任何情

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