血液一般檢驗紅細胞部分下

血液一般檢驗紅細胞部分下第1頁/共45頁

【檢測原理】HCT直接測定采用離心法，間接測定采用血液分析儀法。

1．離心法常用微量法和溫氏法，其檢測原理基本相同，但離心力不同。血液離心后分5層，自上而下分別為血漿層、血小板層、白細胞和有核紅細胞層、還原紅細胞層和氧合紅細胞層。讀取結(jié)果以還原紅細胞層為準（圖2-19）。圖2-19血細胞比容結(jié)果判斷第2頁/共45頁2．血液分析儀法由紅細胞計數(shù)和紅細胞平均體積導出HCT，HCT＝紅細胞計數(shù)×紅細胞平均體積。

【方法學評價】HCT測定的方法學評價見表2-18。第3頁/共45頁第4頁/共45頁【質(zhì)量保證】第5頁/共45頁【參考區(qū)間】①成年男性：0.40～0.50；女性：0.37～0.48。②新生兒0.47～0.67。③兒童：0.33～0.42。

【臨床意義】HCT的臨床意義與紅細胞計數(shù)相似。HCT減低是診斷貧血的指標，若紅細胞數(shù)量正常，血漿量增加，為假性貧血；HCT增加可因紅細胞數(shù)量絕對增加或血漿量減少所致（表2-19）。HCT的主要應用價值為：

1．臨床補液量的參考

2．真性紅細胞增多癥診斷指標

3．計算紅細胞平均指數(shù)的基礎(chǔ)第6頁/共45頁第7頁/共45頁五、紅細胞平均指數(shù)

紅細胞平均指數(shù)包括紅細胞平均體積（MCV）、紅細胞平均血紅蛋白量（MCH）和紅細胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）。紅細胞平均指數(shù)有助于深入認識紅細胞特征，為貧血的鑒別診斷提供線索。第8頁/共45頁【檢測原理】1．手工法根據(jù)RBC、Hb、HCT測定結(jié)果計算紅細胞平均指數(shù)（表2-20）。

2．血液分析儀法MCV由血液分析儀直接測定導出；由儀器測定HGB、RBC可計算出MCH＝HGB/RBC；MCHC＝HGB/（RBC×MCV）。第9頁/共45頁第10頁/共45頁【方法學評價】手工法紅細胞平均指數(shù)由RBC、HGB、HCT測定后計算而來，因此，必須采用同一抗凝血標本，且所檢測的結(jié)果必須準確。儀器法紅細胞平均指數(shù)的測定同樣依賴于RBC、HGB和MCV測定的準確性。第11頁/共45頁【參考區(qū)間】MCV、MCH、MCHC的參考區(qū)間見表2-21。第12頁/共45頁

【臨床意義】紅細胞平均指數(shù)可用于貧血形態(tài)學分類（表2-22）及提示貧血的可能原因。但紅細胞平均指數(shù)僅反映了紅細胞群體平均情況，無法闡明紅細胞彼此之間的差異。第13頁/共45頁圖2-20網(wǎng)織紅細胞六、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)

網(wǎng)織紅細胞（Ret，RET）是介于晚幼紅細胞和成熟紅細胞之間的過渡細胞，略大于成熟紅細胞，其胞質(zhì)中殘存的嗜堿性物質(zhì)RNA經(jīng)堿性染料活體染色后，形成藍色或紫色的點粒狀或絲網(wǎng)狀沉淀物。

ICSH將網(wǎng)織紅細胞分為4型（表2-23，圖2-20）。第14頁/共45頁第15頁/共45頁

網(wǎng)織紅細胞檢測的目的：

①鑒別貧血的類型（增生性、非增生性、增生增高性）。②檢查骨髓的功能。③檢測貧血的治療效果。④評估骨髓移植后、再生障礙性貧血細胞毒藥物誘導治療后或EPO治療后的紅細胞造血情況。第16頁/共45頁

【檢測原理】1．普通顯微鏡法活體染料的堿性著色基團可與網(wǎng)織紅細胞RNA的磷酸基結(jié)合，使RNA膠體間的負電荷減少而發(fā)生凝縮，形成藍色的點狀、線狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。

2．血液分析儀法特殊染料與網(wǎng)織紅細胞中RNA結(jié)合后進行RNA定量，可精確計數(shù)網(wǎng)織紅細胞占成熟紅細胞的百分數(shù)（Ret%），并可根據(jù)RNA含量將網(wǎng)織紅細胞分類及計算網(wǎng)織紅細胞其他參數(shù)。第17頁/共45頁【方法學評價】網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的方法學評價見表2-24。第18頁/共45頁【質(zhì)量保證】以手工計數(shù)法為重點。

1．選擇合適的染料用于網(wǎng)織紅細胞檢測的活體染料很多，有煌焦油藍（

brilliantcresylblue）、新亞甲藍（

newmethyleneblue）、中性紅、亞甲藍、甲苯胺藍等。網(wǎng)織紅細胞活體染料的評價見表2-25。第19頁/共45頁第20頁/共45頁2.正確辨認網(wǎng)織紅細胞外周血液網(wǎng)織紅細胞主要為Ⅳ型，凡含有2個或2個以上顆粒、且顆粒必須遠離細胞邊緣的紅細胞均應計為網(wǎng)織紅細胞。紅細胞各種顆?；虬w的鑒別見表2-26。第21頁/共45頁第22頁/共45頁3．網(wǎng)織紅細胞計數(shù)方法（1）Miller窺盤法：ICSH及我國衛(wèi)生部臨床檢驗中心推薦使用Miller窺盤法（圖2-21）進行網(wǎng)織紅細胞計數(shù)。（2）顯微成像系統(tǒng)：圖2-21Miller窺盤結(jié)構(gòu)示意圖第23頁/共45頁ICSH建議，為控制CV在10%內(nèi)，應根據(jù)網(wǎng)織紅細胞比率，決定在連續(xù)視野中Miller窺盤小方格內(nèi)實際需要計數(shù)的紅細胞數(shù)量（表2-27）。第24頁/共45頁【參考區(qū)間】①成人、兒童：0.5℅~1.5℅。②新生兒：2.0℅～6.0℅。③成人絕對值：（24～84）×109/L。

【臨床意義】網(wǎng)織紅細胞計數(shù)是反映骨髓造血功能的重要指標，常見網(wǎng)織紅細胞參數(shù)及評價見表2-28。第25頁/共45頁第26頁/共45頁1．評價骨髓增生能力，判斷貧血類型2．評價療效3．放療和化療的監(jiān)測4．藥物影響第27頁/共45頁七、嗜堿性點彩紅細胞計數(shù)嗜堿性點彩紅細胞是不完全成熟的紅細胞，胞質(zhì)內(nèi)殘存的核酸變性、聚集形成顆粒，經(jīng)堿性染料（如亞甲藍）染色后，細胞內(nèi)可見到深染的顆粒；若以Wright染色，則在粉紅色的胞質(zhì)中出現(xiàn)藍黑色顆粒，故名嗜堿性點彩紅細胞。第28頁/共45頁【檢測原理】制備血涂片，甲醇固定，亞甲藍染色。選擇細胞分布均勻的區(qū)域，油鏡下計數(shù)1000個紅細胞中嗜堿性點彩紅細胞的數(shù)量，或油鏡下計數(shù)50個視野中的嗜堿性點彩紅細胞，同時計數(shù)5個視野中的正常紅細胞數(shù)量，計算百分率。第29頁/共45頁【參考區(qū)間】＜0.03%。

【臨床意義】嗜堿性點彩紅細胞計數(shù)增高主要見于鉛、汞、銀、鉍等重金屬及硝基苯、苯胺中毒，對慢性重金屬中毒具有輔助診斷價值。溶血性貧血、巨幼細胞性貧血、白血病、惡性腫瘤時也可見嗜堿性點彩紅細胞增高。第30頁/共45頁八、紅細胞沉降率測定紅細胞沉降率（ESR）簡稱血沉，是指在規(guī)定條件下，離體抗凝全血中的紅細胞自然下沉的速率。ESR是傳統(tǒng)且應用較廣的指標，用于診斷疾病雖然缺乏特異性，但操作簡便，具有動態(tài)觀察病情與療效的實用價值。第31頁/共45頁【檢測原理】1．魏氏（Westergren）法將枸櫞酸鈉抗凝血置于特制的刻度血沉管內(nèi)，在室溫下垂直立于血沉架1h后，讀取上層血漿的高度，即為紅細胞沉降率。血沉測定實際上是測量單位時間內(nèi)紅細胞下沉后血漿段的高度，而并非真正紅細胞沉降的速度。

2．自動血沉儀法全自動血沉儀根據(jù)紅細胞下沉過程中血漿濁度的改變，采用光電比濁法、紅外線掃描法或攝影法，動態(tài)分析紅細胞下沉各個時段血漿的透光度，以微電腦記錄并打印結(jié)果。第32頁/共45頁【方法學評價】魏氏法為傳統(tǒng)方法，為國內(nèi)規(guī)范方法。ICSH、CLSI以及WHO均有血沉檢測的標準化文件。ICSH方法（1993）及CLSI（2000）方法均以魏氏法為基礎(chǔ)，建立了新的ESR檢驗“參考方法”和供常規(guī)使用的“選擇方法”，后者簡稱“常規(guī)工作方法”，分別制定了新的操作規(guī)程。血沉測定的方法學評價見表2-29。第33頁/共45頁第34頁/共45頁【質(zhì)量保證】血沉測定迄今仍未建立決定性方法，目前首選參考方法，其次為標準化方法（相當于二級參考方法），再次為選擇方法即常規(guī)工作方法。1．ICSH規(guī)定的參考方法可用于驗證其他方法的可靠性未稀釋標本結(jié)果糾正公式為：糾正ESR（mm/h）＝（未稀釋標本ESR×0.86）－12

其結(jié)果在95%限定值范圍內(nèi)（表2-30），表明方法滿意。因ESR影響因素復雜，新方法應建立特定的自身參考區(qū)間。第35頁/共45頁第36頁/共45頁2．魏氏法對抗凝劑、血液標本及物理條件的要求魏氏法對抗凝劑、血液標本及物理條件的要求見表2-31。第37頁/共45頁第38頁/共45頁3．質(zhì)控方法參考方法常作為常規(guī)試驗的質(zhì)控方法，但參考方法費時、費力，通常采用替代的穩(wěn)定化全血質(zhì)控品作為每日質(zhì)控。進行質(zhì)控必須要滿足以下條件：EDTA抗凝，HCT為0.35左右，ESR在15～105mm/h范圍，檢測前將標本顛倒混勻16次。

4.血沉測定影響因素影響血沉測定的因素見表2-32。第39頁/共45頁第40頁/共45頁【參考區(qū)間】魏氏法：男性0～15mm/h，女性0～20mm/h。

【臨床意義】血沉是一項常規(guī)篩檢試驗，雖然特異性差，但仍然具有一定的參考價值。臨床上，血沉主要用于觀察病情的動態(tài)變化、區(qū)別功能性與器質(zhì)性病變、鑒別良性與惡性腫瘤等。第41頁/共45頁