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血液一般檢驗(yàn)紅細(xì)胞部分下第1頁(yè)/共45頁(yè)

【檢測(cè)原理】HCT直接測(cè)定采用離心法,間接測(cè)定采用血液分析儀法。

1.離心法常用微量法和溫氏法,其檢測(cè)原理基本相同,但離心力不同。血液離心后分5層,自上而下分別為血漿層、血小板層、白細(xì)胞和有核紅細(xì)胞層、還原紅細(xì)胞層和氧合紅細(xì)胞層。讀取結(jié)果以還原紅細(xì)胞層為準(zhǔn)(圖2-19)。圖2-19血細(xì)胞比容結(jié)果判斷第2頁(yè)/共45頁(yè)2.血液分析儀法由紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞平均體積導(dǎo)出HCT,HCT=紅細(xì)胞計(jì)數(shù)×紅細(xì)胞平均體積。

【方法學(xué)評(píng)價(jià)】HCT測(cè)定的方法學(xué)評(píng)價(jià)見(jiàn)表2-18。第3頁(yè)/共45頁(yè)第4頁(yè)/共45頁(yè)【質(zhì)量保證】第5頁(yè)/共45頁(yè)【參考區(qū)間】①成年男性:0.40~0.50;女性:0.37~0.48。②新生兒0.47~0.67。③兒童:0.33~0.42。

【臨床意義】HCT的臨床意義與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相似。HCT減低是診斷貧血的指標(biāo),若紅細(xì)胞數(shù)量正常,血漿量增加,為假性貧血;HCT增加可因紅細(xì)胞數(shù)量絕對(duì)增加或血漿量減少所致(表2-19)。HCT的主要應(yīng)用價(jià)值為:

1.臨床補(bǔ)液量的參考

2.真性紅細(xì)胞增多癥診斷指標(biāo)

3.計(jì)算紅細(xì)胞平均指數(shù)的基礎(chǔ)第6頁(yè)/共45頁(yè)第7頁(yè)/共45頁(yè)五、紅細(xì)胞平均指數(shù)

紅細(xì)胞平均指數(shù)包括紅細(xì)胞平均體積(MCV)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量(MCH)和紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)。紅細(xì)胞平均指數(shù)有助于深入認(rèn)識(shí)紅細(xì)胞特征,為貧血的鑒別診斷提供線索。第8頁(yè)/共45頁(yè)【檢測(cè)原理】1.手工法根據(jù)RBC、Hb、HCT測(cè)定結(jié)果計(jì)算紅細(xì)胞平均指數(shù)(表2-20)。

2.血液分析儀法MCV由血液分析儀直接測(cè)定導(dǎo)出;由儀器測(cè)定HGB、RBC可計(jì)算出MCH=HGB/RBC;MCHC=HGB/(RBC×MCV)。第9頁(yè)/共45頁(yè)第10頁(yè)/共45頁(yè)【方法學(xué)評(píng)價(jià)】手工法紅細(xì)胞平均指數(shù)由RBC、HGB、HCT測(cè)定后計(jì)算而來(lái),因此,必須采用同一抗凝血標(biāo)本,且所檢測(cè)的結(jié)果必須準(zhǔn)確。儀器法紅細(xì)胞平均指數(shù)的測(cè)定同樣依賴(lài)于RBC、HGB和MCV測(cè)定的準(zhǔn)確性。第11頁(yè)/共45頁(yè)【參考區(qū)間】MCV、MCH、MCHC的參考區(qū)間見(jiàn)表2-21。第12頁(yè)/共45頁(yè)

【臨床意義】紅細(xì)胞平均指數(shù)可用于貧血形態(tài)學(xué)分類(lèi)(表2-22)及提示貧血的可能原因。但紅細(xì)胞平均指數(shù)僅反映了紅細(xì)胞群體平均情況,無(wú)法闡明紅細(xì)胞彼此之間的差異。第13頁(yè)/共45頁(yè)圖2-20網(wǎng)織紅細(xì)胞六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

網(wǎng)織紅細(xì)胞(Ret,RET)是介于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間的過(guò)渡細(xì)胞,略大于成熟紅細(xì)胞,其胞質(zhì)中殘存的嗜堿性物質(zhì)RNA經(jīng)堿性染料活體染色后,形成藍(lán)色或紫色的點(diǎn)粒狀或絲網(wǎng)狀沉淀物。

ICSH將網(wǎng)織紅細(xì)胞分為4型(表2-23,圖2-20)。第14頁(yè)/共45頁(yè)第15頁(yè)/共45頁(yè)

網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)的目的:

①鑒別貧血的類(lèi)型(增生性、非增生性、增生增高性)。②檢查骨髓的功能。③檢測(cè)貧血的治療效果。④評(píng)估骨髓移植后、再生障礙性貧血細(xì)胞毒藥物誘導(dǎo)治療后或EPO治療后的紅細(xì)胞造血情況。第16頁(yè)/共45頁(yè)

【檢測(cè)原理】1.普通顯微鏡法活體染料的堿性著色基團(tuán)可與網(wǎng)織紅細(xì)胞RNA的磷酸基結(jié)合,使RNA膠體間的負(fù)電荷減少而發(fā)生凝縮,形成藍(lán)色的點(diǎn)狀、線狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。

2.血液分析儀法特殊染料與網(wǎng)織紅細(xì)胞中RNA結(jié)合后進(jìn)行RNA定量,可精確計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞占成熟紅細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(Ret%),并可根據(jù)RNA含量將網(wǎng)織紅細(xì)胞分類(lèi)及計(jì)算網(wǎng)織紅細(xì)胞其他參數(shù)。第17頁(yè)/共45頁(yè)【方法學(xué)評(píng)價(jià)】網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法學(xué)評(píng)價(jià)見(jiàn)表2-24。第18頁(yè)/共45頁(yè)【質(zhì)量保證】以手工計(jì)數(shù)法為重點(diǎn)。

1.選擇合適的染料用于網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)的活體染料很多,有煌焦油藍(lán)(

brilliantcresylblue)、新亞甲藍(lán)(

newmethyleneblue)、中性紅、亞甲藍(lán)、甲苯胺藍(lán)等。網(wǎng)織紅細(xì)胞活體染料的評(píng)價(jià)見(jiàn)表2-25。第19頁(yè)/共45頁(yè)第20頁(yè)/共45頁(yè)2.正確辨認(rèn)網(wǎng)織紅細(xì)胞外周血液網(wǎng)織紅細(xì)胞主要為Ⅳ型,凡含有2個(gè)或2個(gè)以上顆粒、且顆粒必須遠(yuǎn)離細(xì)胞邊緣的紅細(xì)胞均應(yīng)計(jì)為網(wǎng)織紅細(xì)胞。紅細(xì)胞各種顆粒或包涵體的鑒別見(jiàn)表2-26。第21頁(yè)/共45頁(yè)第22頁(yè)/共45頁(yè)3.網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法(1)Miller窺盤(pán)法:ICSH及我國(guó)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心推薦使用Miller窺盤(pán)法(圖2-21)進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。(2)顯微成像系統(tǒng):圖2-21Miller窺盤(pán)結(jié)構(gòu)示意圖第23頁(yè)/共45頁(yè)ICSH建議,為控制CV在10%內(nèi),應(yīng)根據(jù)網(wǎng)織紅細(xì)胞比率,決定在連續(xù)視野中Miller窺盤(pán)小方格內(nèi)實(shí)際需要計(jì)數(shù)的紅細(xì)胞數(shù)量(表2-27)。第24頁(yè)/共45頁(yè)【參考區(qū)間】①成人、兒童:0.5℅~1.5℅。②新生兒:2.0℅~6.0℅。③成人絕對(duì)值:(24~84)×109/L。

【臨床意義】網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是反映骨髓造血功能的重要指標(biāo),常見(jiàn)網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)及評(píng)價(jià)見(jiàn)表2-28。第25頁(yè)/共45頁(yè)第26頁(yè)/共45頁(yè)1.評(píng)價(jià)骨髓增生能力,判斷貧血類(lèi)型2.評(píng)價(jià)療效3.放療和化療的監(jiān)測(cè)4.藥物影響第27頁(yè)/共45頁(yè)七、嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞是不完全成熟的紅細(xì)胞,胞質(zhì)內(nèi)殘存的核酸變性、聚集形成顆粒,經(jīng)堿性染料(如亞甲藍(lán))染色后,細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)到深染的顆粒;若以Wright染色,則在粉紅色的胞質(zhì)中出現(xiàn)藍(lán)黑色顆粒,故名嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞。第28頁(yè)/共45頁(yè)【檢測(cè)原理】制備血涂片,甲醇固定,亞甲藍(lán)染色。選擇細(xì)胞分布均勻的區(qū)域,油鏡下計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞的數(shù)量,或油鏡下計(jì)數(shù)50個(gè)視野中的嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞,同時(shí)計(jì)數(shù)5個(gè)視野中的正常紅細(xì)胞數(shù)量,計(jì)算百分率。第29頁(yè)/共45頁(yè)【參考區(qū)間】<0.03%。

【臨床意義】嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)增高主要見(jiàn)于鉛、汞、銀、鉍等重金屬及硝基苯、苯胺中毒,對(duì)慢性重金屬中毒具有輔助診斷價(jià)值。溶血性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、白血病、惡性腫瘤時(shí)也可見(jiàn)嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞增高。第30頁(yè)/共45頁(yè)八、紅細(xì)胞沉降率測(cè)定紅細(xì)胞沉降率(ESR)簡(jiǎn)稱(chēng)血沉,是指在規(guī)定條件下,離體抗凝全血中的紅細(xì)胞自然下沉的速率。ESR是傳統(tǒng)且應(yīng)用較廣的指標(biāo),用于診斷疾病雖然缺乏特異性,但操作簡(jiǎn)便,具有動(dòng)態(tài)觀察病情與療效的實(shí)用價(jià)值。第31頁(yè)/共45頁(yè)【檢測(cè)原理】1.魏氏(Westergren)法將枸櫞酸鈉抗凝血置于特制的刻度血沉管內(nèi),在室溫下垂直立于血沉架1h后,讀取上層血漿的高度,即為紅細(xì)胞沉降率。血沉測(cè)定實(shí)際上是測(cè)量單位時(shí)間內(nèi)紅細(xì)胞下沉后血漿段的高度,而并非真正紅細(xì)胞沉降的速度。

2.自動(dòng)血沉儀法全自動(dòng)血沉儀根據(jù)紅細(xì)胞下沉過(guò)程中血漿濁度的改變,采用光電比濁法、紅外線掃描法或攝影法,動(dòng)態(tài)分析紅細(xì)胞下沉各個(gè)時(shí)段血漿的透光度,以微電腦記錄并打印結(jié)果。第32頁(yè)/共45頁(yè)【方法學(xué)評(píng)價(jià)】魏氏法為傳統(tǒng)方法,為國(guó)內(nèi)規(guī)范方法。ICSH、CLSI以及WHO均有血沉檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化文件。ICSH方法(1993)及CLSI(2000)方法均以魏氏法為基礎(chǔ),建立了新的ESR檢驗(yàn)“參考方法”和供常規(guī)使用的“選擇方法”,后者簡(jiǎn)稱(chēng)“常規(guī)工作方法”,分別制定了新的操作規(guī)程。血沉測(cè)定的方法學(xué)評(píng)價(jià)見(jiàn)表2-29。第33頁(yè)/共45頁(yè)第34頁(yè)/共45頁(yè)【質(zhì)量保證】血沉測(cè)定迄今仍未建立決定性方法,目前首選參考方法,其次為標(biāo)準(zhǔn)化方法(相當(dāng)于二級(jí)參考方法),再次為選擇方法即常規(guī)工作方法。1.ICSH規(guī)定的參考方法可用于驗(yàn)證其他方法的可靠性未稀釋標(biāo)本結(jié)果糾正公式為:糾正ESR(mm/h)=(未稀釋標(biāo)本ESR×0.86)-12

其結(jié)果在95%限定值范圍內(nèi)(表2-30),表明方法滿(mǎn)意。因ESR影響因素復(fù)雜,新方法應(yīng)建立特定的自身參考區(qū)間。第35頁(yè)/共45頁(yè)第36頁(yè)/共45頁(yè)2.魏氏法對(duì)抗凝劑、血液標(biāo)本及物理?xiàng)l件的要求魏氏法對(duì)抗凝劑、血液標(biāo)本及物理?xiàng)l件的要求見(jiàn)表2-31。第37頁(yè)/共45頁(yè)第38頁(yè)/共45頁(yè)3.質(zhì)控方法參考方法常作為常規(guī)試驗(yàn)的質(zhì)控方法,但參考方法費(fèi)時(shí)、費(fèi)力,通常采用替代的穩(wěn)定化全血質(zhì)控品作為每日質(zhì)控。進(jìn)行質(zhì)控必須要滿(mǎn)足以下條件:EDTA抗凝,HCT為0.35左右,ESR在15~105mm/h范圍,檢測(cè)前將標(biāo)本顛倒混勻16次。

4.血沉測(cè)定影響因素影響血沉測(cè)定的因素見(jiàn)表2-32。第39頁(yè)/共45頁(yè)第40頁(yè)/共45頁(yè)【參考區(qū)間】魏氏法:男性0~15mm/h,女性0~20mm/h。

【臨床意義】血沉是一項(xiàng)常規(guī)篩檢試驗(yàn),雖然特異性差,但仍然具有一定的參考價(jià)值。臨床上,血沉主要用于觀察病情的動(dòng)態(tài)變化、區(qū)別功能性與器質(zhì)性病變、鑒別良性與惡性腫瘤等。第41頁(yè)/共45頁(yè)

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