快速檢測基礎(chǔ)知識及應(yīng)用

快速檢測基礎(chǔ)知識及應(yīng)用第1頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一按照規(guī)定的程序，由測定確定給定產(chǎn)品的一種或多種特性，處理或服務(wù)組成的技術(shù)操作（GB/T15483.1-1999）按照程序確定合格評定對象的一個或多個特性的活動（ISO17000:2004）第2頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一通過觀察和判斷，必要時結(jié)合測量、檢測所進(jìn)行的符合性評價（ISO/IEC指南2）對產(chǎn)品設(shè)計、產(chǎn)品、服務(wù)、過程或工廠的核查，并確定其對于特定要求的符合性，或在專業(yè)判斷的基礎(chǔ)上，對通用要求的符合性（GB/T18346-2001）第3頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一檢測檢驗性質(zhì)一種活動、一組操作基于特定要求的判斷、評價范圍大小范圍窄范圍寬，可以包含檢測活動第4頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一Testing:測試、試驗、檢驗第5頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一

檢測的分類第6頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一檢測確證/確認(rèn)檢測快速檢測第7頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一快速檢測確認(rèn)檢測人員少量、適用的培訓(xùn)需大量、專業(yè)的培訓(xùn)，并考核確認(rèn)合格設(shè)備設(shè)備便攜性強(qiáng)，價格低廉，準(zhǔn)確度低，輔助設(shè)備少設(shè)備一般不可移動，價格昂貴，準(zhǔn)確度高；輔助設(shè)備多耗材成套的試劑盒、速測卡，簡單，便攜性強(qiáng)大量試劑、與設(shè)備配套的貴重的配件等方法一般由試劑盒或速測卡供應(yīng)商提供操作說明書，準(zhǔn)確度低國際、區(qū)域或國家標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布的方法；知名技術(shù)組織或期刊公布的方法；實驗室制定的經(jīng)確認(rèn)的方法環(huán)境環(huán)境條件要求低，一般不要求溫度、濕度等環(huán)境條件要求高，一般要求控制溫度、濕度第8頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一檢測定量檢測定性檢測有沒有？是不是？有多少？第9頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一定性檢測定量檢測定義對對象的描述：是不是？有沒有？對對象的測量：有多少？邏輯關(guān)系定性檢測是定量檢測的前提實現(xiàn)方式顏色判斷；光譜：吸光度比較、特征光譜、最大吸收波長；色譜：保留時間對比；質(zhì)譜：分子離子峰、離子碎片光譜：外表法色譜：外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法、標(biāo)準(zhǔn)加入法等結(jié)果表達(dá)陰性/陽性；有/無帶有單位的數(shù)值第10頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一半定量檢測：通常不能給出準(zhǔn)確的數(shù)值結(jié)果，而是給出一個準(zhǔn)確度比確認(rèn)分析低的數(shù)值或數(shù)值范圍第11頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一定性檢測、半定量檢測、定量檢測概念關(guān)系第12頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一定性檢測、半定量檢測、定量檢測概念對比結(jié)果檢測類型1某檢測人員使用膠體金免疫法檢測豬肉中鹽酸克倫特羅，測試卡檢測線成無色，控制線成紅色，據(jù)此該檢測員判斷該樣品是陽性樣，樣品中鹽酸克倫特羅含量大于該方法的檢出限3μg/kg。2某檢測人員依據(jù)國標(biāo)的方法檢測生活飲用水中的肉眼可見物，該檢測人員根據(jù)實際觀察結(jié)果報告最終結(jié)果為無肉眼可見物3某檢測人員依據(jù)國標(biāo)，使用液相色譜方法檢測水產(chǎn)品中的孔雀石綠，報告最終檢測結(jié)果5.2μg/kg。4某檢測人員依據(jù)國標(biāo)，使用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法檢測水產(chǎn)品中多環(huán)芳烴，根據(jù)色譜圖及質(zhì)譜圖判斷，未檢出，該檢測人員報告檢測結(jié)果為小于該方法檢出限1μg/kg。第13頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一定性檢測定量檢測半定量檢測快速檢測+-+確認(rèn)檢測++++++備注：“-”表示準(zhǔn)確度低；“+”表示準(zhǔn)確度一般；“++”表示準(zhǔn)確度高從定性、定量及半定量準(zhǔn)確度高低方面來考察快速檢測與確認(rèn)檢測的適用性第14頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一測量準(zhǔn)確度第15頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第16頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一定性測量準(zhǔn)確度第17頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一如何用數(shù)值描述定性檢測的可靠性和真實性？第18頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一金標(biāo)準(zhǔn)第19頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一試驗結(jié)果金標(biāo)準(zhǔn)合計有?。栃裕o病（陰性）陽性a（真陽性）b（假陽性）a+b陰性c（假陰性）d（真陰性）c+d合計a+cb+da+b+c+d第20頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第21頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一粗一致率（crudeagreement,CA）是指試驗結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果一致性

CA=(真陽性+真陰性)/受試者總?cè)藬?shù)=(a+d)/(a+b+c+d)×100%符合率受人為因素影響較多，一般用調(diào)整符合率（adjustedagreement,AA）：

AA=1/4[a/(a+c)+d/(b+d)+a/(a+b)+d/(c+d)]×100%符合率第22頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一Kappa值

觀察一致率(P0)：

P0=(a+d）/(a+b+c+d)

機(jī)遇一致率(Pc)：

Pc=｛[(a+b)(a+c)/(a+b+c+d)]+[(c+d)(b+d)/(a+b+c+d)]｝/(a+b+c+d)

Kappa=(P0－Pc)/(1－Pc)

Kappa值越高，表示一致性程度越好。

Kappa值（在0~1之間）：0.75~1之間為一致性高

0.40~0.74為一般

0.39以下為一致性差第23頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第24頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一

靈敏度(真陽性率)是真正有病的人中試驗結(jié)果陽性的百分率，其表示試驗方法對疾病的檢出能力。

靈敏度越高，說明試驗方法對疾病的檢出能力越強(qiáng)，病人漏診機(jī)會越少。與靈敏度相對的是漏診率(假陰性率)

。

靈敏度第25頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一

特異度(真陰性率)是無病的人中試驗結(jié)果陰性的百分率，其表示試驗方法對無病的檢出能力。特異度越高，說明試驗方法對無病的判斷能力越強(qiáng)，無病的人被誤診機(jī)會越少。與特異度相對的是誤診率(假陽性率)。特異度第26頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一概率比

陽性概率比(＋LR)=真陽性率/假陽性率=靈敏度/誤診率陽性概率比指正確判斷陽性的可能性是錯判陽性可能性的倍數(shù)，表明診斷試驗結(jié)果呈陽性時患病與不患病的比例，其比值越大，試驗的診斷價值越高。

陰性概率比(－LR)=假陰性率/真陰性率=漏診率/特異度陰性概率比指錯判陰性的可能性是正確判斷陰性可能性的倍數(shù)，表明診斷試驗結(jié)果呈陰性時患病與不患病的比例，其比值越小，試驗的診斷價值越高。第27頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一約登指數(shù)（Youden）

靈敏度和特異度是反映一項診斷試驗的兩個基本指標(biāo)，兩者之和減去一，即為Youden指數(shù)。

Youden指數(shù)（YI）越大，試驗的真實性越高。Youden指數(shù)也稱正確指數(shù)第28頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第29頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第30頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一準(zhǔn)確度定性檢測膠體金免疫法準(zhǔn)確度定量檢測酶聯(lián)免疫法可靠性（reliability）粗一致率相同正確度（trueness）偏倚相同調(diào)整一致率相同回收率相同Kappa值相同------真實性（validity）靈敏度不同，以檢出限表示精密度（precision）重復(fù)性/再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差相同特異度相同重復(fù)性/再現(xiàn)性方差相同概率比相同變異系數(shù)相同約登指數(shù)不同，不使用該參數(shù)重復(fù)性/再現(xiàn)性限相同第31頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一食品安全問題來源第32頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第33頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一理化快速檢測技術(shù)免疫學(xué)快速檢測技術(shù)分子生物學(xué)快速檢測技術(shù)生物傳感器快速檢測技術(shù)分子印跡快速檢測技術(shù)其他快速檢測技術(shù)第34頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一現(xiàn)場快速檢測技術(shù)實驗室快速檢測技術(shù)第35頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一快速檢測試劑快速檢測箱快速檢測儀器快速檢測車第36頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第37頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第38頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第39頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第40頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第41頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第42頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第43頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一第44頁，共45頁，2023年，2月20日，星期一

理化快速檢測技術(shù)免疫學(xué)快速檢測技術(shù)分子生物學(xué)快速檢測技術(shù)生物傳感器技術(shù)分子印跡技術(shù)化學(xué)比色酶抑制比重法感官對比放射免疫酶免疫金免疫熒光免疫發(fā)光免疫免疫親和柱反向乳膠凝集免疫磁珠分離PCR技術(shù)生物芯片技術(shù)核酸探針技術(shù)酶傳感器微生物傳感器組織傳感器免疫傳感器細(xì)胞傳感器預(yù)組織法自組裝法添加劑+++-+-------------+-++-++非食用物質(zhì)++--++++++++++--------+----++農(nóng)藥殘留-+++--+++++++++------+--++-++獸藥殘留----++++++++++++-------++-+++++有害元素+++---+++-------------++++生物毒素+++---+++--++++++--+++----++++--理化指標(biāo)+++--+--------------++---摻假++-++++++------------------熱加工危害物---------------