生物參考區(qū)間建立與驗證

（優(yōu)選）生物參考區(qū)間建立與驗證目前一頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere一、參考區(qū)間的概念正常值參考范圍Expectedvalues參考區(qū)間（referenceintervals）兩參考限之間包括兩參考限的區(qū)間。注：參考區(qū)間是指從參考下限到參考上限的值的區(qū)間，通常是參考分布中間95%區(qū)間，在某些情況下只有一個參考限具有臨床意義，通常是參考上限，這時的參考區(qū)間可以是0到參考上限。醫(yī)學絕對水平目前二頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere一、參考區(qū)間的概念

參考個體(referenceindividuals)按明確標準選擇的用作檢驗對象的個體。注：通常是符合特定標準的健康個體。

參考人群(referencepopulation)由所有參考個體所組成的群體。注：通常參考人群的個體數(shù)是未知的，因此參考人群是一個推想的實體。

參考樣本組

(referencesamplegroup)從參考人群中選擇的用以代表參考人群的足夠數(shù)量的個體。

參考值

(referencevalues)通過對參考個體某一特定量進行觀察或測量而得到的值（檢驗結(jié)果）。注：參考值從參考樣本組中獲得。目前三頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere一、參考區(qū)間的概念參考分布(referencedistribution)參考值的分布。注：參考人群的推想分布可用參考樣本組的參考分布及合適的統(tǒng)計方法進行試驗；參考人群推想分布的參數(shù)可用參考樣本組的參考分布及合適的統(tǒng)計方法來估計。

參考限

(referencelimit)一個來自參考分布用于分類目的的值。注：參考限通常是使規(guī)定部分的參考值分別小于等于或大于等于的下側(cè)或上側(cè)限值，參考限將參考值分類；參考值可能與其他類型的決定限不同。目前四頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere一、參考區(qū)間的概念參考個體參考人群參考樣本組參考值參考分布參考限參考區(qū)間CompriseaFromwhichisselectedaOnwhicharedeterminedOnwhichisobservedaFromwhicharecalculatedThatmaydefine目前五頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere二、參考區(qū)間建立的意義參考區(qū)間是臨床檢驗結(jié)果的評價標準，可幫助臨床醫(yī)師做出正確的診斷和治療決策參照體外診斷試劑廠家提供的數(shù)據(jù)或文獻報道，而這些數(shù)據(jù)多來源于其他國家二三十年前參考區(qū)間或小樣本局部地區(qū)人群或數(shù)據(jù)庫參考區(qū)間的研究結(jié)果不同國家、地區(qū)、民族，生活環(huán)境、飲食、遺傳背景、經(jīng)濟存在差異，生物學變異等存在決定不同國家和地區(qū)需建立符合本地人群特征的參考區(qū)間方法學和檢測技術(shù)不斷更新，人民生活水平提高，許多項目參考區(qū)間不再適用目前六頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法2008CLISC28-A3文件《Howtodefineanddeterminereferenceintervalsintheclinicallaboratory——Approvedguidelines》2012我國常用生化、血液項目參考區(qū)間建立和驗證相關(guān)行業(yè)標準起草目前七頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法參考人群募集募集人群來源分布知情同意：告知、自愿參考人群選擇篩選標準：問卷、體檢、實驗室標本采集分析前質(zhì)量控制，影響因素，標本類型標本檢測性能驗證、分析中質(zhì)量控制統(tǒng)計分析離群值、建立參考區(qū)間、判斷分組參考區(qū)間驗證臨床可接受目前八頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法參考人群募集參考人群來源：城市、農(nóng)村、體檢中心；性別比例；年齡分布

樣本量：每個組別至少120人，2倍于目標人群抽樣方法：多級隨機整群抽樣原則

城市、農(nóng)村社區(qū)：分層（經(jīng)濟狀況和衛(wèi)生條件）逐級隨機抽取下一級（區(qū)、縣）街道、鄉(xiāng)社區(qū)、村個體（性別/年齡比例）體檢中心：分層（職業(yè)）單位目前九頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法參考人群選擇何謂健康？相對、難定義主觀感覺？潛在/亞臨床疾病界定方法：疾??？健康生活方式？自我感覺（農(nóng)村）？影像學（脂肪肝）？對參考個體健康狀況評估進行詳細記錄就顯得尤為重要，可便于他人再次評估，且為其他實驗室進行參考區(qū)間的轉(zhuǎn)移和驗證時提供參考依據(jù)目前十頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法參考人群選擇——調(diào)查問卷年齡吸煙、飲酒性別藥物使用情況民族維生素攝入情況聯(lián)系方式近期住院、手術(shù)職業(yè)環(huán)境近期輸血、獻血睡眠病史、家族史鍛煉過敏史飲食針對女性的特殊問題目前十一頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法參考人群選擇——體格檢查BMI、腰圍、臀圍血壓全身全系統(tǒng)體格檢查：一般情況，心肺腹查體，口腔、甲狀腺、淋巴結(jié)、四肢、脊柱、關(guān)節(jié)等問診：癥狀、病史目前十二頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法參考人群選擇——排除標準急慢性感染動脈粥樣硬化、血管病燒傷和肌肉創(chuàng)傷心臟病、高血壓慢性腎病糖尿病肝膽管疾病自身免疫性疾病過敏性疾病甲亢或甲減疾病血液系統(tǒng)疾病呼吸系統(tǒng)疾病吸煙量飲酒量2周內(nèi)服用藥物肥胖：BMI≥28懷孕或產(chǎn)后不足1年6個月內(nèi)做過手術(shù)4個月內(nèi)獻血或輸血目前十三頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法參考人群選擇——實驗室檢查尿檢：正常免疫學排除：HBsAg、HCV-Ab、HIV-Ab生化學排除：血糖、血脂等目前十四頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法標本采集——分析前質(zhì)量控制個體準備標本采集標本處理飲食環(huán)境運輸空腹時間時間凝塊藥物、煙、酒體位血清/血漿分離運動標本類型儲存應(yīng)激技術(shù)據(jù)檢測時間目前十五頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法標本檢測——生化項目質(zhì)量保證精密度：使用高低濃度質(zhì)控品，重復測定4次/天，測定5天；計算CV值，小于試劑說明書的標稱指標（CLSIEP-15）正確度：使用新鮮冰凍血清及NIST標物，重復測定5次，連續(xù)2天；計算偏倚(bias)與1/2TEa比較，超出，查找原因（試劑、校準、參數(shù)、儀器等）室內(nèi)質(zhì)控：每天不同時段分析質(zhì)控品5次，連續(xù)4天，計算質(zhì)控品的均值和標準差，質(zhì)控圖，符合質(zhì)控規(guī)則目前十六頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法標本檢測——血液項目質(zhì)量保證精密度：使用3個濃度全血質(zhì)控品，重復測定4次/天，測定5天；計算CV值（CLSIEP-15）正確度：5支新鮮血標本（8h內(nèi)），每份新鮮血標本測定2次，計算bias室內(nèi)質(zhì)控：3個濃度，連續(xù)3天不同時間段測定，計算10-20次檢驗結(jié)果均值，至少用13s，22s規(guī)則機器報警，涂片鏡檢目前十七頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法統(tǒng)計分析——離群值處理Dixon法則即1/3規(guī)則：疑似離群值與其相鄰值的差值D和數(shù)據(jù)全距R相除，D/R≥1/3則為離群值Horn法則：四分位值P25（Q1）P50（Q2）P75（Q3)

四分位間距Q=Q3-Q1

（Q1-1.5×Q，Q3+1.5×Q）

目前十八頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法統(tǒng)計分析——參考區(qū)間計算建立參考區(qū)間：分布判斷

參考值95%的分布范圍x-1.96s，x+1.96sP2.5—P97.5

目前十九頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法統(tǒng)計分析——分組判斷Z=Z*=3(naverage/120)1/2=3[(n1+n2)/240]1/2Z檢驗（正態(tài)分布，或接近正態(tài)分布）判斷標準：如果Z值大于Z*值，或者較大SD大于較小的1.5倍，建議分組，臨床可接受目前二十頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法特殊人群參考區(qū)間的建立特殊人群：兒童、妊娠、少數(shù)民族必要性：不適用性（HbA1c妊娠婦女4-5.5%，非妊娠婦女4.8-6.2%；D-D妊娠婦女高；甲狀腺激素不同孕期參考區(qū)間）困難更大：人群募集、標本采集、情緒飲食控制目前二十一頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法多中心實驗室聯(lián)合建立參考區(qū)間的趨勢工程浩大：數(shù)量、質(zhì)量各醫(yī)院參考區(qū)間不同：醫(yī)生、患者、醫(yī)療資源CLSI：相同項目不用試劑儀器廠家、實驗室參照相同標準，檢測值可互換——多中心共同參考區(qū)間成為可能通用參考區(qū)間：人群、可比室間質(zhì)評、檢驗標準化、醫(yī)改檢驗結(jié)果一致性工作推進，提供良好基礎(chǔ)和技術(shù)保障目前二十二頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法多中心實驗室聯(lián)合建立參考區(qū)間的趨勢序號地理區(qū)域承擔單位1東北地區(qū)中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院2華北地區(qū)北京大學第三醫(yī)院3華東地區(qū)復旦大學附屬中山醫(yī)院4西北地區(qū)第四軍醫(yī)大學第一附屬醫(yī)院5西南地區(qū)四川大學華西醫(yī)院6華南地區(qū)廣東省中醫(yī)醫(yī)院本標準參考區(qū)間基于中國人群多中心研究結(jié)果，檢驗結(jié)果可溯源至國際公認參考方法?；谥袊巳憾嘀行难芯拷Y(jié)果，可溯源至國際公認參考方法，廣泛征求臨床意見目前二十三頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法中國成人肝臟功能項目和電解質(zhì)項目的參考區(qū)間項目單位性別參考區(qū)間血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）U/L男9～50女7～40血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)U/L男15～40女13～35血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)U/L男10～60女7～45血清堿性磷酸酶(ALP)U/L男45～125女20-49歲：35～10050-79歲：50～135血清總蛋白(TP)g/L男/女65～85血清白蛋白(ALB)g/L男/女40～55血清球蛋白(GLB)g/L男/女20～40白蛋白/球蛋白(A/G)男/女1.2～2.4血清鉀離子(K＋)mmol/L男/女3.5～5.3血清鈉離子(Na＋)mmol/L男/女137～147血清氯離子(Cl－)mmol/L男/女99～110目前二十四頁\總數(shù)二十六頁\編于二十點YourTopicGoesHere三、參考區(qū)間的建立方法中國成人血細胞分析項目的參考區(qū)間（儀器法）項目單位性別參考區(qū)間白細胞(WBC)×109/L男/女3.5～9.5中性粒細胞絕對值(Neut#)×109/L男/女1.8～6.3淋巴細胞絕對值(Lymph#)×109/L男/女1.1～3.2嗜酸性粒細胞絕對值(Eos#)×109/L男/女0.02～0.52嗜堿性粒細胞絕對值(Baso#)×109/L男/女0～0.06單核細胞絕對值(Mono#)×109/L男/女0.1～0.6中性粒細胞百分數(shù)(Neut%)％男/女40