第十一章生物技術(shù)2

第十一章生物技術(shù)演示文稿目前一頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)第一節(jié)轉(zhuǎn)基因植物的檢測第二節(jié)轉(zhuǎn)基因植物的安全性評價本章主要內(nèi)容第11章轉(zhuǎn)基因植物的分子檢測及安全性評價目前二頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)本章教學(xué)目的與要求轉(zhuǎn)基因植物檢測方法人們對轉(zhuǎn)基因安全性的幾類問題第11章轉(zhuǎn)基因植物的分子檢測及安全性評價目前三頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)第一節(jié)、轉(zhuǎn)基因植物的檢測外源基因是否進(jìn)入受體植物細(xì)胞進(jìn)入植物細(xì)胞的外源基因是否整合到植物染色體上整合到染色體上的外源基因是否表達(dá)能否產(chǎn)生理想的目的表型目前四頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)一、外源基因整合狀態(tài)檢測（一）、PCR檢測方法檢測報告基因或目的基因快捷、簡易、靈敏等優(yōu)點(diǎn)目前五頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)1.引物的設(shè)計與合成目前六頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)2.模板DNA的制備PCR對模板DNA的質(zhì)量要求不高，可以直接利用細(xì)胞裂解液，或用快速微量法（CTAB或SDS法）制備基因組DNA

要有陰性對照和陽性對照目前七頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)3.反應(yīng)體系與循環(huán)參數(shù)反應(yīng)體系：DNA模板，dNTP，TaqDNA聚合酶，buffer反應(yīng)程序：

變性(94~95oC)

復(fù)性

延伸

(37~55oC)(70~72oC)72oC延伸10min30-35cycles

DNA擴(kuò)增100萬倍8目前八頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)轉(zhuǎn)基因棉花再生植株的NPT-Ⅱ報告基因的PCR檢測M：1Kb的分子量標(biāo)準(zhǔn)；P：質(zhì)粒；C：非轉(zhuǎn)基因?qū)φ眨?-27：轉(zhuǎn)化再生植株4.擴(kuò)增產(chǎn)物檢測目前九頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)5.PCR檢測的特點(diǎn)：檢測迅速靈敏度高，可以檢測到納克級外源DNA操作方便，對DNA質(zhì)量要求不高不足之處在于假陽性偏高、不能提供整合位點(diǎn)的遺傳信息目前十頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)（二）.Southern雜交及拷貝數(shù)檢測基因的堿基序列，與含有標(biāo)記的探針發(fā)生同源配對，雜交后能產(chǎn)生雜交印跡或雜交帶的轉(zhuǎn)化植株為轉(zhuǎn)基因植株；未產(chǎn)生雜交印跡或雜交帶的為非轉(zhuǎn)基因植株選擇不同的內(nèi)切酶和探針組合，根據(jù)雜交帶的片斷大小及數(shù)目，可以判斷外源基因的插入位點(diǎn)的整合情況及插入的拷貝數(shù)目前十一頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)1.植物總DNA提取CTAB:十六烷基三乙基溴化銨是一種去污劑，可溶解細(xì)胞膜，能與核酸形成復(fù)合物，在低鹽溶液中，復(fù)合物在溶液中沉淀，在高鹽溶液中是可溶的，再加入乙醇使核酸沉淀。SDS法：高濃度的SDS在較高的溫度下裂解細(xì)胞，高鹽低溫下沉淀多糖及蛋白質(zhì)，然后用乙醇沉淀DNA目前十二頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)2.DNA純度及濃度的檢測：瓊脂糖凝膠電泳0.8%

植物DNA呈現(xiàn)分子量較大的清晰條帶

如果DNA條帶呈彌散狀，表明降解如果在小分子量區(qū)存在較亮的條帶，說明含RNA如果點(diǎn)樣孔較亮，表明樣品含雜質(zhì)紫外分光光度法：

OD260/OD260=1.8OD260/OD260>1.8含較多RNAOD260/OD260<1.8含較多的蛋白質(zhì)及其它雜質(zhì)目前十三頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)3.總DNA的限制性酶切選擇合適的限制性內(nèi)切酶

單酶切酶切反應(yīng)體系DNA5-15ug體積20-90ul檢測酶切效果瓊脂糖凝膠分離目前十四頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)4.凝膠電泳分離各酶切片段凝膠厚度0.5cm以上樣品及上樣量含分子量質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)DNA，陽性對照，陰性對照低電壓、長時間電泳1V/CM電泳16小時目前十五頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)5.凝膠變性及轉(zhuǎn)膜雙鏈DNA變性成為單鏈，用0.5MNaOH+1.5MNaCl硝酸纖維素膜尼龍膜毛細(xì)管轉(zhuǎn)移法電轉(zhuǎn)移法真空轉(zhuǎn)移法目前十六頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)5.預(yù)雜交及雜交預(yù)雜交：在加入探針前用封閉劑封閉膜上的非特異性位點(diǎn)封閉劑：變性的非特異DNA，鮭魚精DNA

高分子化合物：PVP+BSA+Ficoll400雜交膜在預(yù)雜交液中，37-42°溫育3-12小時雜交：加入雜交探針，65°保溫?fù)u床過夜洗膜：2*SSC—0.1*SSC洗膜目前十七頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)6.雜交信號的檢測同位素標(biāo)記的探針通過放射性自顯影檢測非同位素探針采用酶反應(yīng)檢測目前十八頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)轉(zhuǎn)基因棉花再生植株的Southern分子雜交圖靈敏度高（可檢測1pg的DNA樣品），特異性強(qiáng)（可鑒別20個堿基的同源序列）是目前堅定外源基因整合最權(quán)威的方法HR16HR18HR19HR24HR26HR30HR35HR37HR38HR39YZ1目前十九頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)二、外源基因表達(dá)的檢測基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個水平轉(zhuǎn)錄是指以DNA(基因)為模板合成mRNA的過程翻譯是指以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)的過程檢測外源基因的表達(dá)包括特異mRNA和特異蛋白質(zhì)檢測特異mRNA的主要方法是Northern雜交和RT-PCR

特異蛋白質(zhì)表達(dá)的檢測方法主要有三種①生化反應(yīng)檢測法②免疫學(xué)檢測法：Western雜交③生物學(xué)活性的檢測目前二十頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)Northern雜交──DNA和RNA分子之間的雜交檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA的方法（一）、Northern雜交目前二十一頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)（二）RT-PCR原理：RNA的多聚酶反應(yīng)（RT-PCR）是以mRNA為模板進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)（reversetranscription，RT）與PCR，可用于檢測單個細(xì)胞或少數(shù)細(xì)胞中少于10個拷貝的RNA模板。mRNAcDNAPCR產(chǎn)物RNA提取：逆轉(zhuǎn)錄體系：RNA、緩沖液、dNTP、逆轉(zhuǎn)錄酶、引物（隨機(jī)引物，OligodT;特異引物)RT-PCR體系：特異性引物、cDNA模板、TaqDNA聚合酶、buffer目前二十二頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)利用凝膠成像分析儀對電泳結(jié)果進(jìn)行拍照和結(jié)果記錄；觀察膠上是否有預(yù)擴(kuò)增的主要產(chǎn)物帶。對比目的基因產(chǎn)物的電泳譜帶分子量和譜帶的特異性，確定和描述譜帶特征。

GhUBQ7GhCIPK6目前二十三頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)Westernimmunoblotanalysisofchitinase(chi)geneexpressioninleafextractoftransgeniccottonlines.（三）、Westernblot目前二十四頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)（四）、生化反應(yīng)檢測法主要通過酶反應(yīng)來檢測標(biāo)記基因的檢測（卡那霉素抗性、除草劑抗性）卡拉霉素抗性檢測：在轉(zhuǎn)基因植株的頂端剛展開的幼嫩的葉片上涂抹1%（w/v）的卡那霉素水溶液，7天后，觀察葉片涂抹部位的顏色反應(yīng)來判斷結(jié)果（黃色為敏感、綠色為抗性）ABA，轉(zhuǎn)基因植株葉片B，未轉(zhuǎn)基因株對照目前二十五頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)（五）、生物鑒定法抗性轉(zhuǎn)基因時，為了測定基因是否轉(zhuǎn)入或者轉(zhuǎn)入的是否表達(dá),可以給轉(zhuǎn)基因植株施加生物脅迫因子,如果產(chǎn)生抗性,表明轉(zhuǎn)基因理想效果；轉(zhuǎn)Bt基因的棉花中,采用抗蟲篩選能夠最直觀地檢測到抗蟲基因的表達(dá)效果BAA，未轉(zhuǎn)基因株對照B，轉(zhuǎn)基因植株葉片本節(jié)完目前二十六頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)一、轉(zhuǎn)基因植物的類型抗病轉(zhuǎn)基因植物：抗病毒轉(zhuǎn)基因煙草抗蟲轉(zhuǎn)基因植物：抗蟲棉抗逆轉(zhuǎn)基因植物：抗旱、抗鹽堿抗除草劑轉(zhuǎn)基因植物：抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米、大豆、棉花、油菜改良品質(zhì)轉(zhuǎn)基因植物：轉(zhuǎn)VtA水稻轉(zhuǎn)基因藥品植物：生產(chǎn)霍亂疫苗的胡蘿卜第二節(jié)轉(zhuǎn)基因植物安全性評價目前二十七頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)轉(zhuǎn)基因植物的貢獻(xiàn)增加農(nóng)作物產(chǎn)量降低生產(chǎn)成本減少化學(xué)農(nóng)藥對環(huán)境的污染改善農(nóng)作物品質(zhì)提高經(jīng)濟(jì)效益目前二十八頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)抗除草劑作物轉(zhuǎn)基因植物的生產(chǎn)（圖例）目前二十九頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)抗蟲棉花目前三十頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)抗CMV病毒轉(zhuǎn)基因番茄抗CMV病毒轉(zhuǎn)基因甜椒轉(zhuǎn)查爾酮合酶矮牽?；壳叭豁揬總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)二、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品

安全嗎?!目前三十二頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)轉(zhuǎn)基因生物給人類創(chuàng)造了巨大的經(jīng)濟(jì)和社會效益的同時，也可能給人類帶來極大的潛在或現(xiàn)實危害?？的螤柎髮W(xué)斑蝶事件加拿大“超級雜草”事件墨西哥玉米事件目前三十三頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)

1999年5月，康奈爾大學(xué)的一個研究組在《Nature》雜志上發(fā)表文章，聲稱轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米的花粉飄到一種名叫"馬利筋"的雜草上，用馬利筋葉片飼喂美國大斑蝶，導(dǎo)致44％的幼蟲死亡。斑蝶蝴蝶是北美一種珍稀瀕危動物，所以在當(dāng)時在全世界都引起了很大的反響。事實上，這一實驗結(jié)果在科學(xué)上沒有說服力。因為試驗是在實驗室完成的，且沒有提供使用花粉量的數(shù)據(jù)。

現(xiàn)在這個事件也有了科學(xué)的結(jié)論：

第一，玉米的花粉非常重，擴(kuò)散不遠(yuǎn)，在玉米地以外５米，每一平方厘米馬利筋葉片上只找到一個玉米花粉。

第二，2000年開始在美國三個州和加拿大進(jìn)行的田間試驗都證明，抗蟲玉米花粉對斑蝶并不構(gòu)成威脅，實驗室試驗中用10倍于田間的花粉量來喂大斑蝶的幼蟲，也沒有發(fā)現(xiàn)對其生長發(fā)育有影響。

斑蝶減少的真正原因，一是農(nóng)藥的過度使用，二是墨西哥生態(tài)環(huán)境的破壞．目前三十四頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)有人認(rèn)為，外源基因的導(dǎo)入可能會造就某種強(qiáng)勢生物，從而破壞原有生物種群的動態(tài)平衡和生物多樣性。1995年，加拿大首次商業(yè)化種植了通過基因工程改造的轉(zhuǎn)基因油菜。但在種植后的幾年里，其農(nóng)田便出現(xiàn)了對多種除草劑具有耐抗性的野草化的油菜植株，即超級雜草。如今，這種雜草化油菜在加拿大的草原農(nóng)田里已非常普遍。因為一些轉(zhuǎn)基因油菜籽在收獲時掉落，留在了泥土中，來年它們又重新萌發(fā)。如果在這片田地上種下去的不是同一個物種，那么萌發(fā)出來的油菜就變成了一種不受歡迎的野草，而且這種能夠同時抵御三種除草劑的野草化的油菜不但很難鏟除，而且還會通過交叉?zhèn)鞣鄣确绞剑廴就愇锓N，使種質(zhì)資源遭到破壞。應(yīng)當(dāng)指出的是，“超級雜草”并不是一個科學(xué)術(shù)語，只是一個形象化的比喻，目前并沒有證據(jù)證明已經(jīng)有“超級雜草”存在。同時，基因漂流并不是從轉(zhuǎn)基因作物開始，而是歷來都有。如果沒有基因漂流，就不會有進(jìn)化，世界上也就不會有這么多鐘的植物和現(xiàn)在的作物栽培品種。目前三十五頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)2001年發(fā)現(xiàn)的一種墨西哥玉米基因污染的問題是比較重要的。還有《自然》2001年曾經(jīng)發(fā)表文章，關(guān)于墨西哥玉米遭到轉(zhuǎn)基因玉米污染的事件。墨西哥本身不種植轉(zhuǎn)基因的玉米，而且有法規(guī)規(guī)定不允許種植，但是它進(jìn)口美國的轉(zhuǎn)基因玉米用做飼料。結(jié)果可能是有些農(nóng)民拿轉(zhuǎn)基因玉米去種，種完之后就污染了當(dāng)?shù)氐挠衩住Ｄ鞲缡怯衩椎脑a(chǎn)地。如果玉米原產(chǎn)地的遺傳多樣性受到污染，本地的玉米遺傳結(jié)構(gòu)受到破壞，產(chǎn)生的污染問題是很嚴(yán)重的。這件事對中國也有很大的啟示。中國現(xiàn)在進(jìn)口轉(zhuǎn)基因大豆，而中國是大豆的原產(chǎn)地，很有可能轉(zhuǎn)基因的大豆會對中國當(dāng)?shù)卦a(chǎn)的大豆，發(fā)生遺傳污染。因此，現(xiàn)在國家對轉(zhuǎn)基因的大豆控制還是比較嚴(yán)格，不允許種植。

目前三十六頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)目前三十七頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)（一）、食物安全選擇標(biāo)記基因可能編碼出對人體有直接毒性的蛋白質(zhì)；轉(zhuǎn)基因植物可能會表達(dá)出過敏蛋白；轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物表達(dá)出的某些蛋白質(zhì)，可能會潛移默化的影響人的免疫系統(tǒng)，從而對人體健康造成隱性的損傷改變農(nóng)作物品質(zhì)的基因，可能會改變宿主體內(nèi)的代謝途徑，從而改變轉(zhuǎn)基因食品的營養(yǎng)成分將動物蛋白基因轉(zhuǎn)入農(nóng)作物中，是否會侵犯素食者或宗教信仰者的權(quán)益？把人的某些基因轉(zhuǎn)入農(nóng)作物或牛、羊等家畜體內(nèi)，結(jié)果在農(nóng)作物或家畜的肉、耐中含有人的某些蛋白質(zhì)，這樣做是否違反了人類倫理道德？目前三十八頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)目前三十九頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)（二）、生物安全1、轉(zhuǎn)基因作物是否會成為“超級雜草”：轉(zhuǎn)基因植物可能會變成野生種類，或者它侵入新的生態(tài)區(qū)域，破壞了生態(tài)平衡后而成為雜草；抗除草劑基因等可能會通過花粉傳播或近緣雜交進(jìn)入到雜草或半馴化植物中，結(jié)果產(chǎn)生出超級雜草。2、具有抗蟲功能的轉(zhuǎn)基因植物，其體內(nèi)產(chǎn)生的抗蟲蛋白可能使害蟲產(chǎn)生抗性，使害蟲變得更加難以防治？現(xiàn)在也已發(fā)現(xiàn)具有抗病毒功能的轉(zhuǎn)基因植物，可以使相應(yīng)的病毒出現(xiàn)抗性。3、載體介導(dǎo)的外源基因可能發(fā)生橫向轉(zhuǎn)移，重組出新的菌株或病毒。目前四十頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)

（三）、環(huán)境安全1、改變了生物的多樣性和群落結(jié)構(gòu)，生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性可能會遭到破壞。轉(zhuǎn)基因生物是自然界中不存在的“人工制造”的生物，它們所具有的強(qiáng)大的生存競爭將使處于脆弱平衡狀態(tài)的農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)等遭到破壞。2、對非目標(biāo)生物的危害將直接影響到對生物多樣性的保護(hù)目前四十一頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)正是由于以上種種憂慮，人們對轉(zhuǎn)基因食品充滿了恐懼和擔(dān)心。目前四十二頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)三、轉(zhuǎn)基因食品安全性管理（一）安全性評價的目的轉(zhuǎn)基因食品的安全性評價是安全管理的核心和基礎(chǔ)之一，轉(zhuǎn)基因食品的安全評價目的是從技術(shù)上分析生物技術(shù)及其產(chǎn)品的潛在危險，對生物技術(shù)的研究、開發(fā)、商品化生產(chǎn)和應(yīng)用的各個環(huán)節(jié)的安全性進(jìn)行科學(xué)、公正的評價，以期在保障人類健康和生態(tài)環(huán)境安全的同時，也有助于促進(jìn)生物技術(shù)的健康、有序和可持續(xù)發(fā)展。目前四十三頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)對轉(zhuǎn)基因食品安全性評價的目的：1、提供科學(xué)決策的依據(jù)；2、保障人類健康和環(huán)境安全；3、回答公眾疑問；4、促進(jìn)國際貿(mào)易；5、促進(jìn)生物技術(shù)的可持續(xù)發(fā)展。目前四十四頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)（二）安全性評價的原則1、實質(zhì)等同性原則2、個案評估的原則（casebycase）3、預(yù)先防范（precaution）的原則4、逐步評估的原則（stepbystep）5、風(fēng)險效益平衡的原則6、熟悉性原則（familiarity）目前四十五頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)（二）安全性評價的原則1、實質(zhì)等同性原則在1996年FAO/WHO召開的第二次生物技術(shù)安全性評價專家咨詢會議，將轉(zhuǎn)基因植物、動物、微生物產(chǎn)生的食品分為三類：（1）轉(zhuǎn)基因食品與現(xiàn)有的傳統(tǒng)食品具有實質(zhì)等同性；（2）除某些特定的差異外，與傳統(tǒng)食品具有實質(zhì)等同性；（3）與傳統(tǒng)食品沒有實質(zhì)等同性。實質(zhì)等同性比較的主要內(nèi)容有生物學(xué)特性的比較，對植物來說包括形態(tài)、生長、產(chǎn)量、抗病性及其他有關(guān)的農(nóng)藝性狀；對微生物來說包括分類學(xué)特性（如培養(yǎng)方法、生物型、生理特性等）、侵染型、寄主范圍、有無質(zhì)粒、抗生素性、毒性等；動物方面是形態(tài)、生長生理特性、繁殖、健康特性及產(chǎn)量等。目前四十六頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)2、個案評估的原則（casebycase）

目前已有300多個基因被克隆，用于轉(zhuǎn)基因生物的研究，這些基因來源和功能各不相同，受體生物和基因操作也不相同，因此，必須采取的評價方式是針對不同轉(zhuǎn)基因食品逐個地進(jìn)行評估，該原則也是世界許多國家采取的方式。目前四十七頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)3、預(yù)先防范（precaution）的原則

早在20世紀(jì)60年代末斯坦福大學(xué)教授Berg嘗試用來自細(xì)菌的一段DNA與猴病毒SV40病毒連接起來，獲得了世界第一例重組DNA。這項研究受到了其他科學(xué)家的質(zhì)疑，因為SV40病毒是一種小型動物的腫瘤病毒，可以將人的細(xì)胞培養(yǎng)轉(zhuǎn)化為類腫瘤細(xì)胞。如果研究中的一些材料擴(kuò)散到環(huán)境中將對人類造成巨大的災(zāi)難。正是轉(zhuǎn)基因技術(shù)的這種特殊性，必須對轉(zhuǎn)基因食品采取預(yù)先防范作為風(fēng)險性評估的原則目前四十八頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)4、逐步評估的原則（stepbystep）

轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品的研發(fā)是經(jīng)過了實驗室研究、中間試驗、環(huán)境釋放、生產(chǎn)性試驗和商業(yè)化生產(chǎn)等幾個環(huán)節(jié)。每個環(huán)節(jié)對人類健康和環(huán)境所造成的風(fēng)險是不相同的。逐步評估的原則就是要求在每個環(huán)節(jié)上對轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品進(jìn)行風(fēng)險評估，并且以前一步的實驗結(jié)果作為依據(jù)來判定是否進(jìn)行下一階段的開發(fā)研究。一般，有三種可能：第一，轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品可以進(jìn)入下一階段試驗；第二，暫時不能進(jìn)入下一階段試驗，需要在本階段補(bǔ)充必要的數(shù)據(jù)和信息；第三，轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品不能進(jìn)入下一階段試驗。目前四十九頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)5、風(fēng)險效益平衡的原則

（balanceofbenefitsandrisks）

發(fā)展轉(zhuǎn)基因技術(shù)就是因為該技術(shù)可以帶來巨大的經(jīng)濟(jì)和社會效益。但作為一項新技術(shù)，該技術(shù)所可能帶來的風(fēng)險也是不容忽視的。因此，應(yīng)該采用風(fēng)險和效益平衡的原則。6、熟悉性原則（familiarity）

所謂的熟悉是指了解轉(zhuǎn)基因食品的有關(guān)性狀、與其他生物或環(huán)境的相互作用、預(yù)期效果等背景知識。但熟悉并不意味著轉(zhuǎn)基因食品的安全，而僅僅異味著可以采用已知的管理程序；不熟悉也并不能表示所評估的轉(zhuǎn)基因食品不安全。目前五十頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)（三）關(guān)于轉(zhuǎn)基因食品安全性評價的內(nèi)容1.過敏原2.毒性物質(zhì)3.抗生素抗性標(biāo)記基因4.營養(yǎng)成分和抗?fàn)I養(yǎng)因子5.轉(zhuǎn)基因作為對生態(tài)環(huán)境可能造成的影響目前五十一頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)（三）關(guān)于轉(zhuǎn)基因食品安全性評價的內(nèi)容1.過敏原食物過敏是人類食物食用史上一個由來已久的衛(wèi)生問題。食物過敏史指在食品中含有某些能引起人產(chǎn)生不適應(yīng)反應(yīng)的抗原子，這些抗原子主要是一些蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)具有對T細(xì)胞和B細(xì)胞的識別區(qū)，可以誘導(dǎo)人免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫球蛋白E抗體（IgE）。

國際食品生物技術(shù)委員會與國際生命科學(xué)研究院的過敏性和免疫研究所一起制定了一套分析遺傳改良食品過敏性樹狀分析法。該法重點(diǎn)分析基因的來源、目標(biāo)蛋白與已知過敏原的序列同源性、目標(biāo)蛋白與已知過敏病人血清中的IgE能否發(fā)生反應(yīng)，以及目標(biāo)蛋白的理化特性。目前五十二頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)2.毒性物質(zhì)

毒性物質(zhì)是指那些由動物、植物和微生物產(chǎn)生的對其他種生物有毒的化學(xué)物質(zhì)。從化學(xué)的角度看，毒性物質(zhì)包括了幾乎所有類型的化合物；從毒理學(xué)方面看，毒性物質(zhì)可以對各種器官和生物靶位產(chǎn)生化學(xué)和物理化學(xué)的直接作用，而引起機(jī)體的各種不良生理效應(yīng)。理論上講，任何外源基因的轉(zhuǎn)入都可能導(dǎo)致遺傳工程體產(chǎn)生不可預(yù)知的或意外的變化，其中包括多向效應(yīng)。這些效應(yīng)需要設(shè)計復(fù)雜的多因子試驗來驗證。模型動物的建立對評價轉(zhuǎn)基因食品的安全性是非常重要的。動物實驗是食品安全評價最常用的方法之一，對轉(zhuǎn)基因食品的毒性檢測評價涉及免疫毒性、神經(jīng)毒性、致癌性與遺傳毒性等多種動物模型的建立。目前五十三頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)3.抗生素抗性標(biāo)記基因

美國食品及藥物管理局（FDA）評價抗生素抗性標(biāo)記基因時，認(rèn)為在采取個案分析原則的基礎(chǔ)上，還應(yīng)考慮：1、使用的抗生素是否是人類治療疾病的重要抗生素；2、是否經(jīng)常使用；3、是否口服；4、在治療中是否是獨(dú)一無二不可替代的；5、在細(xì)菌菌群中所呈現(xiàn)的對抗生素的抗性水平狀況如何；6、在選擇壓力存在時是否會發(fā)生轉(zhuǎn)化。目前五十四頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)4.營養(yǎng)成分和抗?fàn)I養(yǎng)因子

食品的功能就在于它對人類的營養(yǎng)，因此，營養(yǎng)成分和抗?fàn)I養(yǎng)因子是轉(zhuǎn)基因食品安全性評價的重要組成部分。對轉(zhuǎn)基因食品營養(yǎng)成分的評價主要針對蛋白質(zhì)、淀粉、纖維素、脂肪等與人類健康營養(yǎng)密切相關(guān)的物質(zhì)。目前五十五頁\總數(shù)六十一頁\編于十七點(diǎn)5.轉(zhuǎn)基因作為對生態(tài)環(huán)境可能造成的影響（1）種群替代實驗（2）轉(zhuǎn)基因植物花粉散布的測度（3）鑒定轉(zhuǎn)基因存在的方法（4）外源基因轉(zhuǎn)移的檢測（5）轉(zhuǎn)基因植物潛在風(fēng)險評估的基本程序第一步，通過已有知識，將實驗對象進(jìn)行分析分類，判斷是屬于較高風(fēng)險一類，還是屬于較低風(fēng)險甚至無風(fēng)險一類。第二步，根據(jù)第一步的分類進(jìn)行不同的田間實驗，來評價其生態(tài)上的表現(xiàn)。第三步，如果轉(zhuǎn)基因作物經(jīng)第二步證明具有更高的行為表現(xiàn)，