第九章紫外吸收光譜法

第九章紫外吸收光譜法1第1頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三分子吸收光譜圖：-胡羅卜素咖啡因阿斯匹林丙酮第2頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三二、分子吸收光譜的分類1、分類：遠(yuǎn)紅外光譜、紅外光譜和紫外－可見光譜（1）遠(yuǎn)紅外光譜（分子的轉(zhuǎn)動(dòng)光譜）△E轉(zhuǎn)＝0.005－0.05eV當(dāng)△E＝0.005ev時(shí)同理，當(dāng)△E＝0.05ev時(shí)可見，產(chǎn)生轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)躍遷transition，需吸收波長為250－25μm的遠(yuǎn)紅外光，由此形成的光譜稱轉(zhuǎn)動(dòng)光譜or遠(yuǎn)紅外光譜第3頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三（2）紅外光譜（振轉(zhuǎn)光譜）△E振＝0.05－1eVλ＝25－1.25μm（3）紫外－可見光譜（電子光譜）△E電＝20－1eVλ＝1.25－0.06μm（1250－60nm）2、分子的電子光譜是帶光譜第4頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三分子（在基態(tài)振動(dòng)能級(jí)上）hγ能量分子內(nèi)若干個(gè)電子能級(jí)躍遷若干個(gè)譜帶系（電子能級(jí)躍遷）每個(gè)譜帶系含有若干個(gè)譜帶（振動(dòng)躍遷）每個(gè)譜帶含有若干條譜線（轉(zhuǎn)動(dòng)躍遷）通常，分子是處在基態(tài)振動(dòng)(Vibration)能級(jí)上。當(dāng)用紫外、可見光照射分子時(shí)，電子可以從基態(tài)激發(fā)到激發(fā)態(tài)的任一振動(dòng)（或不同的轉(zhuǎn)動(dòng)(Rotation)）能級(jí)上。因此，電子能級(jí)躍遷產(chǎn)生的吸收光譜，包括了大量譜線，并由于這些譜線的重疊而成為連續(xù)的吸收帶，這就是為什么分子的紫外、可見光譜不是線狀光譜，而是帶狀光譜的原因。又因?yàn)榻^大多數(shù)的分子光譜分析，都是用液體樣品，加之儀器的分辨率有限，因而使記錄所得電子光譜的譜帶變寬。雙原子分子紫外吸收譜帶形成機(jī)理(P107)第5頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三三、吸收光譜的特征及其表示方法1、吸收光譜（吸收曲線）Aλ1－吸收峰λmax2-谷λmin3-肩峰4-末端吸收2、吸收曲線的橫坐標(biāo)，一般用波長表示。有時(shí)也用頻率表示（γ＝c/λ，△E=hγγ＝cσ）3、吸收曲線的縱坐標(biāo)①透光率T(%)，（透射比）第6頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三②吸光度A③吸收率A(%)A(%)=1－T(%)④吸光系數(shù)A=abc摩爾吸光系數(shù)ε若c為質(zhì)量濃度（g/100mL）M－化合物的摩爾質(zhì)量⑤對(duì)數(shù)吸光系數(shù)ε值范圍：10－105(L·mol-1·cm-1)也有ε>105~6一般認(rèn)為：ε>104為強(qiáng)吸收，ε.103~104為較強(qiáng)吸收ε.102~103為較弱吸收，ε<102為弱吸收第7頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三縱坐標(biāo)用上述不同單位表示的吸收光譜圖（P110）0100吸收率/%0100透光率/%λ/nm0500ε/(L·mol-1·cm-1)1.02.03.0lgελ/nm同一化合物紫外吸收曲線的各種表示方法第8頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三第9頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三§9－2紫外吸收光譜法的基本原理一、電子躍遷類型有機(jī)化合物中有三種不同性質(zhì)的價(jià)電子（1）形成單鍵的電子稱σ電子（2）形成雙鍵的電子稱π電子（3）未成鍵的孤對(duì)電子稱n電子（orp電子也稱非鍵電子）CHHO....σπσn有機(jī)物分子中各種電子能級(jí)高低次序：σ*>π*>n>π>σ第10頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三在紫外和可見光譜區(qū)范圍內(nèi)，有機(jī)化合物的吸收帶主要由*、*、n*、n*及電荷遷移躍遷產(chǎn)生。無機(jī)化合物的吸收帶主要由電荷遷移和配位場躍遷（即d—d躍遷和f—f躍遷）產(chǎn)生。各種躍遷所需要能量順序：*>n*>*>n*第11頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三圖5－6常見電子躍遷所處的波長范圍及強(qiáng)度01234510100200300400500600700800λ/nmlgε遠(yuǎn)紫外區(qū)近紫外區(qū)可見區(qū)**n*n*n*荷移配位場Ligandfield第12頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三1、*躍遷飽和碳?xì)浠衔镏械摩译娮釉讦臆壍篱g的躍遷，一般發(fā)生在真空紫外區(qū)，近紫外區(qū)無吸收。例如，乙烷的最大吸收波長λmax＝135nm2、n*躍遷例如－NH2，－OH，－S，－X等基團(tuán)在分子上時(shí)，雜原子的n電子向反鍵軌道的躍遷n*躍遷吸收波長為150－250nm的光子，吸收光譜大部分在真空紫外區(qū)，一部分在紫外區(qū)lgε<3例如甲醇n*躍遷λmax＝183ε＝150；甲基氯n*躍遷λmax＝173；三甲胺n*躍遷λmax＝2273、*躍遷*躍遷所需能量較小，吸收峰大都位于紫外區(qū)（其中孤立雙鍵的最大吸收波長小于200nm）第13頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三一般εmax≥104例如乙烯的*躍遷，λmax=162nm，εmax=1044、n*躍遷－C＝O，－C＝N吸收波長≥200nmε.10－100例如丙酮的吸收峰，除強(qiáng)吸收的*躍遷（λmax=194nm。ε＝9×103）外，還有280nm左右的n*躍遷ε＝10－305、電荷遷移躍遷hγ給予體受體第14頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三電荷躍遷的吸收帶譜帶較寬，吸收強(qiáng)度大，εmax>104。結(jié)論：電子躍遷的類型與分子結(jié)構(gòu)及其存在的基團(tuán)有密切的關(guān)系，可根據(jù)分子結(jié)構(gòu)來推測可能產(chǎn)生的電子躍遷例如：飽和烴，只有*躍遷烯烴，有*、*躍遷脂肪族醚，有*、n*躍遷醛、酮，則同時(shí)有*、n*、*、n*四種類型躍遷*躍遷，λmax<150nm反之，可根據(jù)紫外吸收帶的波長，來推測電子躍遷類型，判斷化合物分子中可能存在的吸收基團(tuán)第15頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三二、發(fā)色團(tuán)、助色團(tuán)1、發(fā)色團(tuán)（生色團(tuán)Chromogenesisgroup）定義：凡是導(dǎo)致化合物在紫外區(qū)及可見區(qū)產(chǎn)生吸收的基團(tuán)，不論是否顯出顏色都稱為發(fā)色團(tuán)例如：乙烯基C=C乙炔基－C≡C－羰基C=O亞硝基－N=O腈基－C≡N由于這些基團(tuán)產(chǎn)生*、n*及n*躍遷吸收能量較低，吸收峰出現(xiàn)在紫外、可見光區(qū)化合物中幾個(gè)發(fā)色團(tuán)共軛的情況：第16頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三

表9－1某些常見發(fā)色團(tuán)的吸收特性生色團(tuán)溶劑/nmmax躍遷類型烯正庚烷17713000*炔正庚烷17810000*羧基乙醇20441n*酰胺基水21460n*羰基正己烷1861000n*，n*偶氮基乙醇339，665150000n*，硝基異辛酯28022n*亞硝基乙醚300，665100n*硝酸酯二氧雜環(huán)己烷27012n*第17頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三2、助色團(tuán)Auxochromousgroup助色團(tuán)是指帶有非鍵電子對(duì)（孤對(duì)電子）的基團(tuán)，如－OH、－OR、－NH2、－NHR、－SH、－Cl、－Br、－I等，它們本身不能吸收大于200nm的光，但是當(dāng)它們與生色團(tuán)相連時(shí)，會(huì)使生色團(tuán)的吸收峰向長波方向移動(dòng)，并且增加其吸光度。如飽和烷烴只有*躍遷，若與助色團(tuán)相連，則產(chǎn)生n*躍遷（P116表5－2助色團(tuán)在飽和化合物中的吸收峰）若助色團(tuán)與發(fā)色團(tuán)相連，發(fā)生n共軛，形成多電子大鍵，使*軌道orbit能量降低，*躍遷所需能量降低例如，苯的B吸收帶，其λmax.254nm，ε.204，當(dāng)它被一個(gè)－OH取代后λmax.270nm，ε.1450。不同助色團(tuán)對(duì)苯吸收特征的影響（見P122表5－6苯及其衍生物的吸收光譜）第18頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三3、紅移、藍(lán)移、增色效應(yīng)和減色效應(yīng)（1）紅移、藍(lán)移Redshiftorblueshift某些有機(jī)化合物經(jīng)取代反應(yīng)引入取代基或溶劑的改變而使最大吸收波長發(fā)生移動(dòng)。波長將向長波方向移動(dòng)稱為紅移，這種基團(tuán)稱為向紅基團(tuán)（-OH、-OR、-NH2、-SH、-Cl、-Br、--SR、-NR2）。向短波方向移動(dòng)稱為藍(lán)移（or紫移）這種基團(tuán)稱為向藍(lán)（紫）基團(tuán)（如-CH2、-CH2CH3、-OCOCH3）。（2）增色效應(yīng)和減色效應(yīng)有機(jī)化合物中常因分子結(jié)構(gòu)中引入取代基或受溶劑的變更而的影響，使吸收帶的強(qiáng)度即摩爾吸光系數(shù)增大或減小的現(xiàn)象三、吸收帶指吸收峰在紫外－可見光譜中的波帶位置第19頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三1、R吸收帶R吸收帶是由化合物的n*躍遷產(chǎn)生的吸收帶。它具有雜原子和雙鍵的共軛基團(tuán)，例如：C=O－NO－NO2－N=N－－C=S等特點(diǎn)是：①n*躍遷的能量最小，處于長波方向，λmax在270nm以上②躍遷幾率小，吸收強(qiáng)度弱，ε<100例如：C=OCH3CH3λmax280nmεmax16R帶CH3NO2λmax280nmεmax22R帶CH3(CH2)7ONOλmax370nmεmax55R帶第20頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三2、K吸收帶K帶是由共軛體系中*躍遷產(chǎn)生的吸收帶特點(diǎn)：①吸收帶的波長比R帶短，一般λmax>200nm②躍遷幾率大，吸收強(qiáng)度大，一般ε>104③隨著共軛體系的增長，電子云束縛更小，引起*躍遷所需的能量更小，K帶吸收向長波方向移動(dòng)④K帶吸收是共軛分子的特征吸收帶，是紫外光譜中應(yīng)用最多的吸收帶例如：CH2＝CH－CH＝CH2*λmax＝217nmεmax＝104

CH3－CH＝CH－CHO（巴豆醛）*λmax＝217.5nmεmax＝1.5×104－CH＝CH2λmax＝248nmεmax＝1.4×104第21頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三3、B吸收帶由苯環(huán)本身振動(dòng)及閉合環(huán)狀共軛雙鍵*躍遷而產(chǎn)生的吸收帶，是芳香族（包括雜環(huán)芳香族）的主要特征吸收帶特點(diǎn)：①在230－270nm呈現(xiàn)一寬峰，且具有精細(xì)結(jié)構(gòu)②λmax＝255nm，εmax＝200，屬弱吸收③常用來識(shí)別芳香族化合物第22頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三4、E吸收帶由苯環(huán)內(nèi)三個(gè)乙烯基共軛發(fā)生的*躍遷產(chǎn)生，也是芳香族化合物的特征吸收帶E1λmax1＝180nm，εmax>104E1觀察不到E2λmax1＝200nm，εmax>7000都屬強(qiáng)吸收當(dāng)苯環(huán)上有發(fā)色團(tuán)取代且與苯環(huán)共軛時(shí)，E2帶與K帶合并，吸收峰向長波移動(dòng)第23頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三例如，苯乙酮－C－CH3＝O三個(gè)吸收峰：K帶：λmax240nmε＝13000B帶：λmax278nmε＝1100R帶：λmax319nmε＝50第24頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三§9－3紫外吸收光譜與分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系一、各類有機(jī)化合物的紫外吸收光譜1、飽和烴及其取代衍生物*λmax<150nm飽和有機(jī)化合物在紫外光譜分析中常用作溶劑，如己烷、環(huán)己烷、庚烷、異辛烷、乙醇、甲醇等若有助色團(tuán)和飽和烴相連，除*躍遷外，還產(chǎn)生n*躍遷，λmax產(chǎn)生紅移2、不飽和烴及共軛烯烴（1）簡單的碳－碳雙鍵產(chǎn)生*、*兩種躍遷，*躍遷所需的能量較*躍遷小第25頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三例如：乙烯λmax＝165nmε＝104C=OC=SC=N－－N＝O例：丙稀醛CH2＝C－CHO除在208nm產(chǎn)生的*躍遷（ε＝1000）吸收外，在328nm附近還有一個(gè)n*吸收（ε＝13）（2）共軛雙鍵當(dāng)有兩個(gè)以上的雙鍵共軛時(shí)，隨著共軛系統(tǒng)的延長，*躍遷的吸收帶將明顯向長波方向移動(dòng)，吸收強(qiáng)度也隨之增強(qiáng)。（P277表9－4某些共軛多烯的吸收特性）如：番茄紅素11個(gè)C=C鍵（紅色）第26頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三第27頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三3、醛和酮醛和酮中均含有羰基（C=O）。能實(shí)現(xiàn)n*躍遷（λmax.270-300nm附近，ε＝10－20）；n*躍遷（λmax.180nm左右）；*躍遷（λmax.150nm左右）。一般紫外光度計(jì)只能檢測n*躍遷產(chǎn)生的R吸收帶。R帶是醛酮的特征吸收帶，是判斷醛酮的重要依據(jù)（P120表5－4某些醛、酮的紫外光譜數(shù)據(jù)）當(dāng)羰基雙鍵與乙烯雙鍵共軛時(shí)，形成了α、β不飽和醛、酮－C＝C－C＝Oβα由于共軛效應(yīng)，使乙烯基*躍遷吸收帶紅移至220－260nm，成為K吸收帶，強(qiáng)吸收。羰基雙鍵R帶紅移至310－330nm，ε<100，弱吸收。（P121表5－5某些α、β不飽和醛酮的吸收光譜特性）第28頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三由此看出：K帶吸收強(qiáng)度高εmax.104R帶吸收強(qiáng)度低εmax<102這一特征，可識(shí)別α、β不飽和醛、酮4、芳香族化合物（1）苯E1：180－184nm處（ε＝4700）強(qiáng)吸收帶E2：204nm處（ε＝7900）中強(qiáng)吸收帶（末端）B：230－270nm（ε＝204）弱吸收帶是苯環(huán)的精細(xì)吸收帶或稱苯帶（P118圖5－8苯蒸氣的吸收曲線）第29頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三（2）取代苯苯酚在庚烷和乙醇中的紫外圖譜第30頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三（3）綢環(huán)芳香族化合物P123表5－7幾種綢環(huán)芳烴的吸收光譜二、溶劑對(duì)紫外吸收光譜的影響溶劑的極性對(duì)溶質(zhì)吸收峰的波長、強(qiáng)度和形狀都有影響1、溶劑極性對(duì)λmax的影響P124表5－8溶劑對(duì)亞異丙酮吸收帶的影響吸收帶正己烷乙腈氯仿甲醇水波長位移*λmax/nm230234238237243長移n*λmax/nm320314315309305短移原因：第31頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三軌道極性：n>*>*△En△EpC=C在非極性溶劑中在極性溶劑中△En*nC=O△Ep在非極性溶劑中在極性溶劑中△En>△Ep紅移△En<△Ep藍(lán)移2、溶劑極性對(duì)吸收光譜精細(xì)結(jié)構(gòu)的影響（P125圖5－12對(duì)稱四嗪在蒸氣態(tài)、環(huán)己烷和水中的吸收光譜）第32頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三第33頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三苯的紫外吸收光譜(乙醇中)

第34頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三3、正確地選用溶劑正確地選用溶劑的原則：（1）溶劑能溶解試樣，溶劑對(duì)溶質(zhì)是惰性的（2）在溶解度允許的范圍內(nèi)，盡量選擇極性較小的溶劑（3）溶劑在樣品的吸收光譜區(qū)應(yīng)無明顯吸收P126表5－9常用于紫外－可見區(qū)測定的溶劑，表中給出了各種溶劑使用的最低波長極限，所選溶劑必須在大于最低波長極限的范圍內(nèi)使用。問：在280～310nm范圍內(nèi)測定某化合物的吸收光譜，能否用丙酮（最低波長極限330nm）作溶劑？）第35頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三§5－4紫外分光光度計(jì)（自學(xué)）一、紫外分光光度計(jì)的基本構(gòu)造紫外分光光度計(jì)儀器由輻射光源、單色器、吸收池和檢測器信號(hào)處理及讀數(shù)裝置等五部分組成。1、光源對(duì)光源基本要求：足夠光強(qiáng)、穩(wěn)定、連續(xù)輻射且強(qiáng)度隨波長變化小氫燈和氘燈（輻射強(qiáng)度比氫燈大4～5倍）：160－375nm，多用在紫外區(qū)（鎢及碘鎢燈：340－2500nm，多用在可見光區(qū)）。2、單色器(Mnochromator)與原子吸收光度儀不同，在UV光度計(jì)中，單色器通常置于吸收池的前面?。煞乐箯?qiáng)光照射引起吸收池中一些物質(zhì)的分解）第36頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三3、吸收池(Cell，Container)：用于盛放樣品?？捎檬⒉牧现谱鳎梢姽鈪^(qū)可用玻璃）。4、檢測器：硒光電池、PMT5、信號(hào)處理及讀數(shù)系統(tǒng)二、儀器類型1、單波長分光光度計(jì)752S/752SPC（上海）752型第37頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三單波長單光束Incidentbeam分光光度計(jì)0.575光源單色器吸收池檢測器顯示第38頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三單波長雙光束分光光度計(jì)UV-2450/2550Jasco-UV/VIS第39頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三單波長雙光束分光光度計(jì)比值光源單色器吸收池檢測器顯示光束分裂器第40頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三2、雙波長分光光度計(jì)島津UV-3150第41頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三§5－5紫外吸收光譜的應(yīng)用一、定性分析紫外光譜對(duì)于判斷有機(jī)化合物中的發(fā)色團(tuán)和助色團(tuán)的種類、位置、數(shù)目以及區(qū)別飽和不飽和化合物、測定分子共軛程度，進(jìn)而確定未知物的結(jié)構(gòu)骨架等方面有獨(dú)到的優(yōu)點(diǎn)1、紫外吸收光譜法定性鑒定的步驟①將試樣盡可能提純，以除去可能存在的雜質(zhì)②繪制已提純樣品的吸收光譜曲線，由其光譜特征，依據(jù)一般規(guī)律，作初步判斷③利用對(duì)比法對(duì)該化合物進(jìn)一步定性鑒定④應(yīng)用化學(xué)、物理、物理化學(xué)等分析方法進(jìn)行對(duì)照驗(yàn)證，最后作出正確結(jié)論第42頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三2、根據(jù)光譜作初步判斷（1）若化合物的紫外光譜在200－400nm范圍內(nèi)沒有吸收帶化合物可能是飽和的直鏈烴、脂環(huán)烴或其他飽和脂肪族化合物或只含有一個(gè)雙鍵的烯烴等（2）若化合物只在270－350nm范圍有弱的吸收帶（ε＝10-100），化合物含有一個(gè)簡單的非共軛的并含有未成鍵電子的發(fā)色團(tuán)，如羰基、硝基等（n→π*）（3）若化合物在210－250nm范圍內(nèi)有強(qiáng)的吸收帶（ε≥104）是K吸收帶的特征，可能是含有共軛雙鍵的化合物。若在260－300nm范圍有強(qiáng)的吸收帶，化合物有3個(gè)或3個(gè)以上的共軛雙鍵。若吸收帶進(jìn)入可見光，則化合物可能是長共軛發(fā)色基團(tuán)或是綢環(huán)化合物。（4）若化合物在250－300nm范圍內(nèi)有中等強(qiáng)度的吸收帶（ε：103－104）化合物往往含有苯環(huán)，這是苯環(huán)B吸收帶的特征。第43頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三3、對(duì)比法（1）同標(biāo)準(zhǔn)試樣光譜比較，當(dāng)溶劑和濃度相同時(shí)，若二者光譜相同，則是同一化合物。（2）同化合物的標(biāo)準(zhǔn)光譜圖進(jìn)行比較（溶劑必須相同）常見光譜圖集“TheSadtlerStandardSpectra,Ultraviolet”收集了46000種化合物的紫外光譜第44頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三補(bǔ)充：UV-Vis分光光度法的應(yīng)用一、定性分析1.制作試樣的吸收曲線并與標(biāo)準(zhǔn)紫外光譜對(duì)照；2.利用Woodward-Fieser和Scott經(jīng)驗(yàn)規(guī)則求最大吸收波長。即，當(dāng)通過其它方法獲得一系列可能的分子結(jié)構(gòu)式后，可通過此類規(guī)則估算最大吸收波長并與實(shí)測值對(duì)比。Woodward-Fieser規(guī)則第45頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三Woodward-Fieser規(guī)則估算最大吸收波長的幾個(gè)實(shí)例：四第46頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三二、有機(jī)化合物的構(gòu)型、構(gòu)象的測定例如：1.2－二苯乙烯具有順、反兩種異構(gòu)體C＝CHHC＝CHH反式順式λmax:295.5nmλmax:280nmεmax:29000εmax:10500第47頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三2、互變異構(gòu)體的測定例如：CH3－C－CH2－C－OC2H5?

CH3－C＝CH－C－OC2H5＝O＝O＝OOH酮式烯醇式λmax:204nmλmax:243nmεmax:1.8×104CH3－C＝CH－C－OC2H5＝OOH在極性溶劑中，酮式占優(yōu)勢.在非極性溶劑中，烯醇式占優(yōu)勢＝O＝OCH3－C－CH2－C－OC2H5O－HHH－OHP135圖5－17乙酰乙酯在不同溶劑中的紫外吸收光譜圖第48頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三3、構(gòu)象的判別例如：叔丁基環(huán)己酮α位氫原子被鹵素取代后XC4H9＝OXC4H9＝OⅠⅡ三、化合物中雜質(zhì)的檢查例如，乙醇中含有雜質(zhì)苯，苯λmax＝256nm，而乙醇在此波長處無吸收菲的氯仿溶液在λmax＝296nm處有強(qiáng)吸收，lgε＝4.10，用某種方法精制的菲，測得其lgε值比標(biāo)準(zhǔn)菲低10%，這說明精制菲的含量只有90％，其余很可能是蒽等雜質(zhì)第49頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三四、定量分析1、單一組分測定：選擇λmax，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線法2、多組分測定（1）各組分的吸收曲線互相不重疊，與單一組分測定方法相同。（2）各組分的吸收曲線互相重疊，根據(jù)吸光度的加和性原理。第50頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三3、雙波長分光光度法1951年B.chance提出（1）基本原理設(shè)波長為λ1和λ2的兩束單色光強(qiáng)度相等，則：∴△A∝c定量分析的依據(jù)光源單色器1單色器2檢測器切光器狹縫吸收池第51頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三21AXY（2）優(yōu)點(diǎn)因只用一個(gè)吸收池，不用參比液，故消除了背景吸收、光散射及兩個(gè)吸收池不匹配引起的測量誤差，提高了測量的選擇性和準(zhǔn)確度舉例：Y的存在下測定XY的存在不干擾X的測定第52頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三（3）λ1和λ2的選擇是方法的關(guān)鍵要求：△A足夠大，且△λ盡量?。ㄌ岣邷y量精密度）等吸收點(diǎn)法（常用）選擇λ1－λ2組合的條件：在所選的λ1，λ2處①待測組分的△A應(yīng)足夠大②干擾組分有相同的吸收（在λ1，λ2處）測苯酚：測量波長－λ1，參比波長λ2orλ2’（三氯苯酚和λ1有相同吸收的點(diǎn)有兩個(gè)：λ2和λ2’，但λ2更接近λ1→精密度好），所以，以λ2作參比波長，消除了y對(duì)x的干擾。XY122‘A/nm第53頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三圖5－20作圖法選擇波長λ1和λ2第54頁，共60頁，2023年，2月20日，星期三4、光度滴定通過測量滴定過程中吸光度的變化來確定滴定分析終點(diǎn)的方法，稱為光度滴定法A－V滴定劑設(shè)εx、εp、εt為被滴定物質(zhì)、反應(yīng)物和滴定劑的摩爾吸光系數(shù)X+t→p（1）當(dāng)被滴定物質(zhì)和產(chǎn)物在指定波長下無吸收，而滴定劑有吸收。即，εx＝εp＝0εt>0如，550nm,KMnO4