實(shí)驗(yàn)室移液槍的操作和維護(hù)

實(shí)驗(yàn)室移液槍的操作和維護(hù)移液槍是實(shí)驗(yàn)操作上不可缺少的工具，對于頂尖高手而言，重要的就是實(shí)驗(yàn)的誤差最小，重復(fù)再現(xiàn)性好，那就要注意正確移液槍使用。移液槍的分類和工作原理氣體活塞式移液槍工作原理：通過彈簧的伸縮運(yùn)動，推動活塞，排除部分空氣，利用大氣壓吸入液體，再由活塞推動空氣排除液體。塞式移液槍工作原理：通過分液管或吸頭內(nèi)活塞的連續(xù)運(yùn)動移取和打出液體，活塞和液體直接接觸，沒有空氣柱，適用于密度、黏度與水不同的液體，如易揮發(fā)性溶液、粘稠液體等。移液槍使用訣竅氣體活塞式移液槍1影響移液槍精度因素⑴溫度：室溫低時(shí)，手溫較高，使得空氣膨脹，吸入冷溶液時(shí)往往發(fā)生誤差。⑵氣密性：吸頭和槍體的結(jié)合部，以及槍內(nèi)柱體之間的長期磨損，造成誤差。⑶吸速：容易造成吸頭內(nèi)氣泡產(chǎn)生，而且會污染槍頭。⑷試劑的揮發(fā)：吸揮發(fā)性高的試劑時(shí)，蒸汽進(jìn)入槍頭，內(nèi)壓增高，結(jié)果在壓出液體時(shí)，壓力變大，而產(chǎn)生誤差。解決辦法：反復(fù)抽吸4-5次就可改善。2具體使用方法更換tip法：最精確。⑴調(diào)節(jié)旋鈕到所需刻度位置，訣竅：首先可略超過一些，再回旋至刻度。注意禁止超過最大刻度，避免人為誤差。⑵插上tip:無菌操作時(shí)，要注意動作迅速正確，不能用手碰tip,動作的力度要保持一致，禁止廢動作。普通操作時(shí)，可用拇指食指上緊，但手不能碰tip尖端處。⑶指壓到第一段，tip尖端接觸試劑。白色tip進(jìn)到液面1mm一下，黃色吸頭2-3mm,藍(lán)色吸頭2-4mm,避免液壓的影響造成的誤差。⑷緩慢吸試劑，禁止速度過快，液體進(jìn)入槍頭。⑸移出吸頭后，先在容器內(nèi)壁輕輕靠住，使吸頭外壁液體流下。(6)將吸頭貼在目標(biāo)容器內(nèi)壁，輕輕按到第一段，壓出液體。(7)吸頭尖端在容器內(nèi)壁略上滑動，保留尖端少量液體，移出目標(biāo)容器，手指卸掉吸頭，注意不要使試劑濺出。一只吸頭分注法：不適用于揮發(fā)性，有毒性試劑。⑴同上述A-D,移出液面后，先緩慢按到第一段，在用力按到第二段，將試劑全壓出。⑵同上述C,緩慢吸出液體。⑶在目標(biāo)容器液體上空，壓出試劑到第二段，注意壓的力度要和A相同，還應(yīng)注意試劑不要四處飛濺。⑷緩慢返回第一段，可重復(fù)上述操作。達(dá)到目標(biāo)容器原有液體不污染吸頭的目的。轉(zhuǎn)移數(shù)ul的貴重試劑時(shí)的方法：⑴同上述A-D,移出液面后，在容器內(nèi)壁輕按幾下，使外壁液體流下。白色吸頭進(jìn)到液面1mm以下，這最重要。(2)tip尖端浸入目標(biāo)容器的液面下，緩慢壓到第一段。⑶松開，返回到第一段，重新吸入液體，反復(fù)4-5次，，洗凈吸頭內(nèi)壁液體。⑷將吸頭尖端移出液面，在內(nèi)壁輕輕靠住，壓出液體到第二段。移液槍使用注意事項(xiàng)，要注意以下幾點(diǎn)：.正確選擇移液槍與吸頭組合量程空氣柱的體積越小，誤差越低。.吸頭的浸沒深度吸頭盡量浸沒得淺一些，防止液體殘留在吸頭表面，但是同時(shí)要浸沒得足夠深防止吸取空氣。.垂直吸取液體移液時(shí)角度不同，液體壓力也會改變。.預(yù)潤濕通過預(yù)潤濕，使得空氣柱充滿飽和的液體分子，至少預(yù)潤濕3次，使得空氣柱里的液體分子達(dá)到飽和。.正確的放液操作放液時(shí)，吸頭尖靠在容器內(nèi)壁，完全打出，排出最后的液滴;體積低于10ul直接放液到容器底部。.緩慢、勻速的吸放液體，保證結(jié)果的精確性。移液六部曲L裝吸頭移液器套柄用力下壓，需要時(shí)小幅度旋轉(zhuǎn)即可。錯誤操作：用力敲擊吸頭。此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損，從而影響其密封性。.量程設(shè)定操作之前請先選擇正確的移液器，移液器可在10T00%量程范圍內(nèi)操作，但在10%量程處操作對于移液技巧要求高，故推薦在35T00%量程范圍內(nèi)操作。量程調(diào)節(jié)：當(dāng)由小量程調(diào)節(jié)至大量程時(shí)，朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn)，旋轉(zhuǎn)到達(dá)超過所需量程1/3圈處再回調(diào)至所需量程。當(dāng)由大量程調(diào)節(jié)至小量程時(shí)，直接連貫旋轉(zhuǎn)至所需量程。.潤洗用同一樣品重復(fù)吸液排液二至三次，潤洗為以后每次吸液提供相同的接觸面，保證操作的一致性。注意：高溫或者低溫液體請不要潤洗！.吸頭浸入角度吸液時(shí)盡量保持垂直狀態(tài)，傾斜角度不能超過20°。吸頭浸入深度：0.l-10ul:l-2mm.10-200ul:2-3mm.200-2000ul深-6mm、over2000ul：6Tomm。吸頭浸入時(shí)間吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開，這對于大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。吸液速度勻速連貫移液，控制好移液速度，太快會造成噴液，液體或者氣霧沖入移液器內(nèi)部，污染活塞等部件。排液及吹液先將活塞按至第一檔排液，略作停頓后按至第二檔進(jìn)行吹液。排液四種方式：沿內(nèi)壁、在液面以上、在液體表面、液面下。手溫移液器不宜長時(shí)間握在手里，不用時(shí)最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。移液槍的維護(hù)保養(yǎng)密封性檢查.儀器測漏.簡單目測法l）200uL及以下的移液器，吸液后將吸頭浸入液面1-2ninb靜待20秒，觀察吸頭內(nèi)部液面是否下降。2）1000uL以上的移液器，吸液后將吸頭移出液面，朝下垂直靜置15-20秒,觀察是否有液體下滴。移液器的清洗方式外部清潔:日常清潔劑（專業(yè)清洗劑，肥皂液，洗潔精等）擦洗，然后用純水淋洗，晾干即可。內(nèi)部清潔:1）下半部分拆卸下來。2）塑料部件（套柄等）采用與外部清潔一致的方式即可。3）活塞清潔可用純水（或先用異丙醇沖洗再用純水洗凈），晾干，然后在活塞表面用棉簽涂上一層薄薄的硅酮油脂。注：移液器主體密封部分，大多是免維護(hù)的，不能輕易拆卸。移液器的故障分析解決問題問題問題可能原因解決方法吸頭松脫或吸頭不匹配問題可能原因解決方法吸頭松脫或吸頭不匹配吸頭松脫或吸頭不匹配插緊吸頭；更換匹配的吸頭吸頭漏液或分液體積不準(zhǔn)確吸頭松脫或吸頭不匹配插緊吸頭；更換匹配的吸頭吸頭漏液或分液體積不準(zhǔn)確吸頭漏液或分液體積不準(zhǔn)確移取粘稠、易揮發(fā)性或與水密度有明顯差異的液體預(yù)潤濕吸頭數(shù)次移液過快緩慢移動控制按鈕，慢吸慢放吸頭漏液或分液體積不準(zhǔn)確移取粘稠、易揮發(fā)性或與水密度有明顯差異的液體預(yù)潤濕吸頭數(shù)次移液過快緩慢移動控制按鈕，慢吸慢放吸頭離開液面過