2015版中國藥典微生物檢驗(yàn)

2015版中國藥典微生物檢驗(yàn)2021/10/1012015版微生物檢驗(yàn)實(shí)現(xiàn)了三部藥典標(biāo)準(zhǔn)的統(tǒng)一形成了一個(gè)比較完備的藥品微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)體系，具有以下兩個(gè)顯著特征①全面與國際標(biāo)準(zhǔn)接軌；②推動(dòng)了藥品微生物控制由終產(chǎn)品檢驗(yàn)向過程控制轉(zhuǎn)變。2021/10/1022015版微生物檢驗(yàn)微生物基礎(chǔ)知識(shí)非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法(通則1105)解析非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法(通則1106)解析非無菌藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn)(通則1107)解析培養(yǎng)基的質(zhì)量管理工藝用水的檢查無菌檢查法(通則1101)解析2021/10/103微生物基本知識(shí)定義：微生物（microorganism）是對(duì)所有形體微小，單細(xì)胞或結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單的多細(xì)胞甚至無細(xì)胞結(jié)構(gòu)的低等生物的統(tǒng)稱。2021/10/104

微生物的分類

原核微生物：細(xì)菌、放線菌、立克次氏體支原體、衣原體、藍(lán)細(xì)菌和古細(xì)菌真核微生物：酵母菌、霉菌、粘菌、原生動(dòng)物和藻類非細(xì)胞型生物：病毒、噬菌體、類病毒、擬病毒和朊病毒

2021/10/105微生物特點(diǎn)體積小，比表面積大吸收多，轉(zhuǎn)化快

生長旺，繁殖快適應(yīng)強(qiáng)，易變異種類多，分布廣

2021/10/106球菌2021/10/107桿菌桿菌2021/10/108螺旋菌2021/10/109革蘭氏陽性細(xì)菌與陰性細(xì)菌細(xì)胞壁構(gòu)造圖2021/10/1010菌落菌落(colony)：將單一微生物細(xì)胞或一小堆同種微生物細(xì)胞接種到固體培養(yǎng)基表面，當(dāng)它占有一定空間并給予適宜的培養(yǎng)條件，該細(xì)胞就會(huì)迅速生長繁殖。結(jié)果形成以母細(xì)胞為中心，肉眼可見并有一定形態(tài)構(gòu)造的子細(xì)胞集團(tuán)。2021/10/1011真核微生物形態(tài)真核微生物：是細(xì)胞核具有核膜、核仁，能進(jìn)行有絲分裂，細(xì)胞質(zhì)中存在線粒體或同時(shí)存在葉綠體等多種細(xì)胞器的一類微生物。2021/10/1012

酵母菌特性

①個(gè)體一般以單細(xì)胞狀態(tài)存在

②多數(shù)為出芽繁殖，也有裂殖；

③能發(fā)酵糖類產(chǎn)能；

④細(xì)胞壁常含甘露聚糖；

⑤喜在含糖量較高、偏酸性環(huán)境生長。2021/10/1013酵母菌菌落特征與細(xì)菌相似，較細(xì)菌大而厚，圓形，光滑濕潤，粘性，易用針挑起，顏色單調(diào)，多為乳白色、少數(shù)紅色、常有酒香味2021/10/1014霉菌特性

絲狀真菌的一個(gè)通俗名稱，意即“發(fā)霉的真菌”。霉菌的營養(yǎng)體由菌絲構(gòu)成，菌絲無限生長并產(chǎn)生分枝，分枝的菌絲相互交錯(cuò)在一起，形成菌絲體。2021/10/1015

霉菌菌落特征

霉菌細(xì)胞呈絲狀，在固體培養(yǎng)基上形成營養(yǎng)菌絲和氣生菌絲。霉菌菌落較酵母菌大質(zhì)地疏松，外觀干燥，不透明，呈現(xiàn)或蛛網(wǎng)狀、絨毛狀或棉絮狀。菌落與培養(yǎng)基連接緊密，不易挑取，常有霉味。2021/10/1016非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法(通則1105)解析

格式變化內(nèi)容變化通用要求變化

—適用范圍

—檢測(cè)環(huán)境變化

—培養(yǎng)基

—計(jì)數(shù)的方法

—菌種及菌液制備

—培養(yǎng)基適用性檢查

—計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)

—供試品檢查2021/10/1017格式變化2010版附錄ⅩⅢC/附錄XIJ：微生物限度檢查法2015版非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法（通則1105）非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法（通則1106）非無菌藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn)（通則1107）2021/10/1018中國藥典2010年版微生物計(jì)數(shù)法編排方式中國藥典2015年版微生物計(jì)數(shù)法編排方式格式變化2021/10/1019內(nèi)容變化2021/10/1020適用范圍微生物計(jì)數(shù)法系用于能在有氧條件下生長的嗜溫細(xì)菌和真菌的計(jì)數(shù)。明確規(guī)定本法不適用于活菌制劑的檢查。增加了檢測(cè)產(chǎn)品的范圍。2010版：系檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料輔料受微生物污染程度的方法2021/10/1021檢測(cè)環(huán)境變化微生物計(jì)數(shù)試驗(yàn)環(huán)境要求微生物計(jì)數(shù)試驗(yàn)環(huán)境應(yīng)符合微生物限度檢查的要求。檢驗(yàn)全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染，防治污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。單向流區(qū)域、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期進(jìn)行監(jiān)測(cè)。9203：藥品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則“微生物限度檢查應(yīng)在不低于D級(jí)背景下的B級(jí)單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行”。2021/10/1022

試劑和試藥

中和劑、滅活劑和表面活性劑均應(yīng)對(duì)微生物無毒性其相互間具有相容性，有利于樣品中微生物均勻分散。稀釋液

1、pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液；2、pH6.8無菌磷酸鹽緩沖液、pH7.2無菌磷酸鹽緩沖液、pH7.6無菌磷酸鹽緩沖液；如需要，可在上述稀釋液滅菌前或滅菌后加入表面活性劑或中和劑等。3、0.9%無菌氯化鈉溶液。2021/10/1023培養(yǎng)基對(duì)照培養(yǎng)基

按標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)管理，由中檢院負(fù)責(zé)研制分發(fā)。計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基a.需氧菌總數(shù)：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）b.霉菌和酵母菌總數(shù)：沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或含抗生素的SDA。2021/10/1024

計(jì)數(shù)的方法

1.平皿法：包括傾注法和涂布法。該項(xiàng)下明確可使用直徑較大平皿，且培養(yǎng)基的用量應(yīng)相應(yīng)增加。2.薄膜過濾法。3.最可能數(shù)法(Most-Probable-NumberMethod，簡(jiǎn)稱

MPN。MPN法用于微生物計(jì)數(shù)時(shí)精確度較差，但對(duì)于某些微生物污染量很小的供試品，MPN法可能是更適合的方法。注：方法選擇原則：根據(jù)供試品理化特性和微生物限度標(biāo)準(zhǔn)等因素選擇。2021/10/1025

培養(yǎng)基適用性檢查

胰酪大豆胨瓊脂：金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、黑曲霉胰酪大豆胨肉湯：金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌沙氏葡萄糖瓊脂、玫瑰紅鈉瓊脂、白色念珠菌、黑曲霉。2021/10/1026

計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)

1.術(shù)語變化：計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)2.需氧菌總數(shù)測(cè)定用五種菌株試驗(yàn)3.菌液加入方式：菌液加入供試液中，使每1mL供試液或每張濾膜所濾過的供試液中含菌量不大于100cfu，且所加菌液的體積不超過供試液體積的1％。2021/10/1027供試品分類及供試液制備1.水溶性供試品

2.水不溶性非油脂類供試品

3.油脂類供試品試品：4.需用特殊方法制備供試液的供試品：①膜劑、②腸溶及結(jié)腸溶制劑、③氣霧劑噴霧劑、④貼膏劑2021/10/1028檢驗(yàn)量一般隨機(jī)抽取不少于2個(gè)最小包裝的供試品，混合，取規(guī)定量供試品進(jìn)行檢驗(yàn)。除另有規(guī)定外，一般供試品的檢驗(yàn)量為10g或10ml；膜劑為100cm2；貴重或微量包裝藥品的檢驗(yàn)量可以酌減。檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)從2個(gè)以上最小包裝單位中抽取供試品，大蜜丸還不得少于4丸，膜劑還不得少于4片。2021/10/1029培養(yǎng)條件描述方式：按計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)計(jì)數(shù)方法進(jìn)行供試品中需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)測(cè)定。培養(yǎng)條件：胰酪大豆胨瓊脂平板在30～35℃培養(yǎng)3-5天，沙氏葡萄糖瓊脂平板在20～25℃培養(yǎng)5~7天；MPN法和供試品接種，所有試驗(yàn)管在30～35℃培養(yǎng)3～5天。2021/10/1030菌數(shù)報(bào)告規(guī)則1、平皿法：需氧菌總數(shù)測(cè)定宜選取平均菌落數(shù)小于300cfu的稀釋級(jí)、霉菌和酵母菌總數(shù)測(cè)定宜選取平均菌落數(shù)小于100cfu的稀釋級(jí)，作為菌數(shù)報(bào)告的依據(jù)。取最高的平均菌落數(shù)，計(jì)算1g、1ml或10cm

供試品中所含的微生物數(shù)。取兩位有效數(shù)字報(bào)告。如各稀釋級(jí)的平皿均無菌落生長，或僅最低稀釋級(jí)的平板有菌落生長，但平均菌落數(shù)小于1時(shí)，以﹤1乘以最低稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。2021/10/1031菌數(shù)報(bào)告規(guī)則2、薄膜過濾法：計(jì)數(shù)方法同平皿計(jì)數(shù)法，每張濾膜上的菌落數(shù)應(yīng)不超過100cfu。菌數(shù)報(bào)告規(guī)則以相當(dāng)于1g、1ml或10cm供試品的菌落數(shù)報(bào)告菌數(shù)；若濾膜上無菌落生長，以﹤1報(bào)告菌數(shù)（每張濾膜過濾1g、1ml或10cm供試品），或﹤1乘以最低稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。3、MPN法：記錄每一稀釋級(jí)微生物生長的管數(shù)，從表3查對(duì)每1g或1ml供試品中需氧菌總數(shù)的最可能數(shù)。2021/10/1032計(jì)數(shù)要求

需氧菌總數(shù)是指胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基上生長的總菌落數(shù)(包括真菌菌落數(shù))；霉菌和酵母菌總數(shù)是指沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長的總菌落數(shù)(包括細(xì)菌菌落數(shù))。若因沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長的細(xì)菌使霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)結(jié)果不符合微生物限度要求，可使用含抗生素(如氯霉素、慶大霉素)的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基或選擇性培養(yǎng)基(如玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基)進(jìn)行霉菌和酵母菌總數(shù)測(cè)定。使用選擇性培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基適用性檢查。若采用MPN法，測(cè)定結(jié)果為需氧菌總數(shù)。2021/10/1033計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)參考?xì)W、美藥典，增加菌落計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定結(jié)果以10ncfu表示時(shí)，限度標(biāo)準(zhǔn)解釋如下：

“101CFU：最大可接受限值=20；

102CFU：最大可接受限值=200；

103CFU：最大可接受限值=2000。若供試品的需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)的檢查結(jié)果均符合各品種項(xiàng)下的規(guī)定，判供試品符合規(guī)定；若其中任何一項(xiàng)不符合各品種項(xiàng)下的規(guī)定，判供試品不符合規(guī)定。2021/10/1034計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)例如，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)為101cfu，不同于以往10cfu規(guī)定。以

10的指數(shù)規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，考慮了微生物計(jì)數(shù)結(jié)果的可變性，即計(jì)數(shù)結(jié)果非類似化學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果。故要求我們需要在結(jié)果判斷時(shí)或制定內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，對(duì)于結(jié)果的判斷或歷史數(shù)據(jù)的分析需要用風(fēng)險(xiǎn)分析的手段進(jìn)行評(píng)估。制定標(biāo)準(zhǔn)時(shí)需要依據(jù)歷史數(shù)據(jù)、工藝過程、用藥人群等進(jìn)行相應(yīng)分析，制定合理的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)，即總原則為在內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)的控制下產(chǎn)品無任何質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。

2021/10/1035總結(jié)：檢驗(yàn)程序1、培養(yǎng)基適用性檢查；2、方法適用試驗(yàn)前評(píng)估；3、通過評(píng)估，采用規(guī)定的稀釋液制備樣品4、試驗(yàn)組、菌液對(duì)照組、供試品對(duì)照組、中和劑或滅活劑對(duì)照組（需要的話）制備；培養(yǎng)、觀察、計(jì)數(shù)；計(jì)算回收率；5、判斷回收率結(jié)果是否滿足要求：⑴是，方法適用性試驗(yàn)通過，進(jìn)行確認(rèn)；⑵否，重新選擇方法進(jìn)行適用性試驗(yàn)。6、按通過的方法進(jìn)行樣品檢驗(yàn)。2021/10/10362015控制菌檢查主要變化—培養(yǎng)體系增菌培養(yǎng)基（廣譜增菌培養(yǎng)基替代選擇性增菌培養(yǎng)基）、預(yù)增菌、選擇性增菌、分離用培養(yǎng)基種類變化；培養(yǎng)時(shí)間與溫度變化。培養(yǎng)基的適用性發(fā)生變化。方法適用性發(fā)生變化（方法適用性）。強(qiáng)抑菌性樣品的處理方式發(fā)生變化。2021/10/1037耐膽鹽革蘭陰性菌耐膽鹽革蘭陰性菌(Bile-TolerantGram-NegativeBacteria)替代2010年版大腸菌群Coliform）耐膽鹽革蘭陰性菌為一群無嚴(yán)格定義的微生物，通常它們被定義為能夠在紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長的微生物。它們包括無乳糖發(fā)酵但能夠利用葡萄糖，能夠在膽鹽中生長的革蘭陰性菌，例如，腸桿菌科、假單胞菌和氣單胞菌屬的一些膽鹽耐受的革蘭陰性菌。2021/10/1038控制菌檢查方法適用性

結(jié)果判斷方式Ch.P2015：如果經(jīng)過試驗(yàn)確證供試品對(duì)試驗(yàn)菌的抗菌作用無法消除，可認(rèn)為受抑制的微生物不易存在于該供試品中，選擇抑菌成份消除相對(duì)徹底的方法進(jìn)行供試品的檢查。（陽性對(duì)照可以不生長）2021/10/1039非無菌藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn)

(通則1107)解析

修訂思路（1）將《中國藥典》2010版一、二、三部微生物限度標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目進(jìn)行對(duì)比、整合。采用一部的限度標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目作為合并后限度標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)。參考EP7.0、USP35、JPⅩⅤ標(biāo)準(zhǔn)，修訂中國藥典的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)。采用清晰直觀的表格形式，按給藥途徑、分液體、固體性狀、列出各類藥品的限度標(biāo)準(zhǔn)。2021/10/1040

與歐洲藥典8.0、美國藥典36版和日本藥局方

ⅩⅤ比較，修訂中國藥典的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)。

修訂菌數(shù)標(biāo)準(zhǔn)表述方式：指數(shù)形式10n，最大可接受限度值遵守2倍規(guī)則：

101CFU：最大可接受限度為20；

102CFU：最大可接受限度為200；依此類推。修訂檢查項(xiàng)目：

“需氧菌總數(shù)（TAMC）”替代“細(xì)菌數(shù)”

“耐膽鹽革蘭陰性菌”替代“大腸菌群”2021/10/10412015版限度標(biāo)準(zhǔn)的制定特點(diǎn)

及總體結(jié)構(gòu)增訂檢查制劑類型：基于藥品的給藥途徑及對(duì)患者的潛在危害劃分風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)來制定標(biāo)準(zhǔn)。

齒齦、皮膚制劑、呼吸道制劑；增加原輔料、中藥提取物、中藥飲片的控制兼顧國產(chǎn)藥品的特點(diǎn)，保留中國藥典對(duì)中藥制劑分類特點(diǎn)：

是否含藥材原粉，是否含豆豉、神曲；是否接觸完整皮膚黏膜。2021/10/1042

非無菌化學(xué)藥品制劑、生物制品

制劑、不含藥材原粉的中藥制劑

1.口服給藥制劑（固體、液體）2.口腔黏膜給藥制劑、齒齦給藥制劑、鼻用制劑3.耳用、皮膚給藥制劑4.呼吸道吸入給藥制劑5.陰道、尿道給藥制劑6.直腸給藥制劑（固體、液體）7.其他局部給藥制劑2021/10/1043

非無菌含藥材原粉的中藥制劑

1.固體口服給藥制劑（含/不含豆豉、神曲等發(fā)酵原粉）2.液體口服給藥制劑（含/不含豆豉、神曲

等發(fā)酵原粉）3.固體局部給藥制劑（用于表皮或粘膜完整/不完整）4.固體局部給藥制劑（用于表皮或粘膜完整/不完整）2021/10/10442015版各項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)具體規(guī)定2021/10/1045非無菌含藥材原粉的中藥制劑2021/10/1046非無菌的藥用原料及輔料中藥提取物及中藥飲片2021/10/1047

菌數(shù)結(jié)果報(bào)告

1、當(dāng)菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí)，按實(shí)有數(shù)據(jù)報(bào)告。2、菌落數(shù)大于100時(shí)，取兩位有效數(shù)字報(bào)告(1105非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法中平皿法菌數(shù)報(bào)告規(guī)則中提及)。3、當(dāng)菌數(shù)報(bào)告數(shù)表示為“…×10n”時(shí)，是實(shí)際數(shù)值，與標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定項(xiàng)下指數(shù)形式表述、2倍因子控制不同。

2021/10/1048

執(zhí)行及制定藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn)

注意事項(xiàng)

執(zhí)行范圍：--生產(chǎn)、貯存、銷售過程中的藥品--藥用原料、輔料--中藥提取物、中藥飲片--新藥標(biāo)準(zhǔn)--進(jìn)口藥品標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核--藥品質(zhì)量考察及仲裁執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)中注意事項(xiàng)：--品種正文項(xiàng)下（微生物限度）要求，--附錄制劑通則下（微生物限度）要求，--附錄微生物限度檢查法中標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。2021/10/1049執(zhí)行及制定藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn)

注意事項(xiàng)沙門菌檢查：--檢查對(duì)象：口服制劑

--特點(diǎn)1：含臟器提取物（不區(qū)分是否為中藥制劑）

--特點(diǎn)2：含藥材原粉（之前為含動(dòng)物藥材原粉，不再界定是否為動(dòng)物藥材）

--表1規(guī)定化學(xué)藥品制劑和生物制品制劑若含有未經(jīng)提取的動(dòng)物來源成分及礦物質(zhì)還不得檢出沙門菌（10g或10ml）2021/10/1050

制定產(chǎn)品的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)

制定新藥的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)時(shí)

--102cfu≠100cfu，最大可接受限度為200；基于數(shù)據(jù)分析和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估制定標(biāo)準(zhǔn)。

--原輔料、給藥途徑及對(duì)患者的潛在危害綜合考慮到控制菌標(biāo)準(zhǔn)；

產(chǎn)品特性：是否適合微生物生長？是否有抑制微生物生長的能力？用藥對(duì)象：新生兒、嬰兒、體弱者、病患傷殘…

原輔料、中藥提取物及中藥飲片參考制劑的要求及生產(chǎn)工藝特點(diǎn)設(shè)置控制菌檢查要求。2021/10/10512015年版純化水微生物限度檢查純化水檢測(cè)方法比較《中國藥典》2010年版（Ch.P2010)是將營養(yǎng)瓊脂(nutrientagarmedium，NA)培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂(rosebengalagarmedium，RA)培養(yǎng)基上的培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行合并計(jì)數(shù)作為最終的報(bào)告值。國外藥典（EP7.0版、USP35版）是采用一種培養(yǎng)基上的培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行計(jì)數(shù)。在培養(yǎng)體系的選擇上，歐洲藥典與美國藥典也存在差異。歐洲藥典明確規(guī)定了一種培養(yǎng)基為R2A瓊脂培養(yǎng)基，而美國藥典首先對(duì)所采用的方法不做強(qiáng)制性規(guī)定，即便是在推薦的方法中也不明確規(guī)定某一種培養(yǎng)基。2021/10/1052

制藥用水檢測(cè)方法修訂

純化水微生物限度檢查方法【微生物限度】取本品不少于1ml，經(jīng)薄膜過濾法處理，采用Ｒ2A瓊脂培養(yǎng)基，30～35℃培養(yǎng)不少于5天，依法檢查（通則1105），1ml供試品中需氧菌總數(shù)不得過100cfu。Ｒ2A瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查試驗(yàn)

照非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法（通則1105）中“計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查”的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查方法進(jìn)行，試驗(yàn)菌株為銅綠假單胞菌和枯草芽孢桿菌，應(yīng)符合規(guī)定。2021/10/1053培養(yǎng)基培養(yǎng)基的質(zhì)量保證—培養(yǎng)基的購買與接收培養(yǎng)基由專人負(fù)責(zé)購買和接收。在收到培養(yǎng)基后，應(yīng)檢查以下內(nèi)容：培養(yǎng)基的名稱、批號(hào)、效期、COA、必要的安全和（或）危害數(shù)據(jù)等文件證明。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立相關(guān)的文件和臺(tái)帳，在臺(tái)帳上包括以下信息：接收日期，名稱、貨號(hào)、批號(hào)、外觀的密封性、有效期、儲(chǔ)存條件等檢查內(nèi)容。2021/10/1054培養(yǎng)基的購買與接收證明文件2021/10/1055

培養(yǎng)基的質(zhì)量保證—貯存

一般要求：應(yīng)嚴(yán)格按照供應(yīng)商提供的貯存條件、有效期和使用方法進(jìn)行培養(yǎng)基的保存和使用.脫水合成培養(yǎng)基：脫水合成培養(yǎng)基一般為粉狀或顆粒狀形式包裝于密閉的容器中。用于微生物選擇或鑒定的添加成分通常為凍干物或液體。培養(yǎng)基的購買應(yīng)有計(jì)劃，以利于存貨的周轉(zhuǎn)（即掌握先購先用的原則）。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保存有效的培養(yǎng)基目錄清單，清單應(yīng)包括以下內(nèi)容：

——容器密閉性檢查；

——記錄首次開封日期；

——內(nèi)容物的感官檢查。開封后的脫水合成培養(yǎng)基，其質(zhì)量取決于貯存條件。通過觀察粉末的流動(dòng)性、均勻性、結(jié)塊情況和色澤變化等判斷脫水培養(yǎng)基的質(zhì)量的變化。若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基受潮或物理性狀發(fā)生明顯改變則不應(yīng)再使用。2021/10/1056

培養(yǎng)基的質(zhì)量保證—貯存

商品化即用型培養(yǎng)基

應(yīng)嚴(yán)格按照供應(yīng)商提供的貯存條件、有效期和使用方法進(jìn)行保存和使用。實(shí)驗(yàn)室自制的培養(yǎng)基避光、干燥保存，必要時(shí)在5℃±3℃冰箱中保存，通常建議平板不超過2周～4周，瓶裝及試管裝培養(yǎng)基不超過3個(gè)月～6個(gè)月，除非某些標(biāo)準(zhǔn)或?qū)嶒?yàn)結(jié)果表明保質(zhì)期比上述的更長。建議需在培養(yǎng)基中添加的不穩(wěn)定的添加劑應(yīng)即配即用，除非某些標(biāo)準(zhǔn)或?qū)嶒?yàn)結(jié)果表明保質(zhì)期更長；含有活性化學(xué)物質(zhì)或不穩(wěn)定性成分的固體培養(yǎng)基也應(yīng)即配即用，不可二次融化。培養(yǎng)基的貯存應(yīng)建立經(jīng)驗(yàn)證的有效期。觀察培養(yǎng)基是否有顏色變化、蒸發(fā)（脫水）或微生物生長的情況，當(dāng)培養(yǎng)基發(fā)生這類變化時(shí)，應(yīng)禁止使用。培養(yǎng)基使用或再次加熱前，應(yīng)先取出平衡至室溫2021/10/1057培養(yǎng)基配制一般要求：嚴(yán)格遵守良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的說明。嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配制。如重量（體積）pH、制備日期、滅菌條件和操作步驟等。

實(shí)驗(yàn)室使用各種基礎(chǔ)成分制備培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制，并記錄相關(guān)信息，如：培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級(jí)別、每個(gè)成分物質(zhì)含量、制造商、批號(hào)、pH、培養(yǎng)基體積（分裝體積）、無菌措施（包括實(shí)施的方式、溫度及時(shí)間）、配置日期、人員等，以便溯源。以上需要有詳細(xì)的SOP，并嚴(yán)格按照SOP執(zhí)行。2021/10/1058

培養(yǎng)基的質(zhì)量保證—配制記錄

培養(yǎng)基配制記錄。滅菌記錄。

培養(yǎng)基質(zhì)量控制記錄。

準(zhǔn)確、及時(shí)、完整。

給予一個(gè)可追蹤性，具有唯一性的批號(hào)。例如：培養(yǎng)基的配制批號(hào)有培養(yǎng)基的配制日期和配制序號(hào)組成。150614A表示該培養(yǎng)基是2015年6月14日配制，配制序號(hào)為A。培養(yǎng)基滅菌指示條的標(biāo)識(shí)。

培養(yǎng)基的標(biāo)簽：培養(yǎng)基名稱、培養(yǎng)基的裝量、培養(yǎng)基配制批號(hào)、配制人、配制日期、失效日期等。2021/10/1059

培養(yǎng)基的質(zhì)量保證—培養(yǎng)基的使用

配制好的培養(yǎng)基于室溫或冰箱內(nèi)保存。有效時(shí)間根據(jù)驗(yàn)證結(jié)果或廠家說明來定平板的制備和儲(chǔ)存

制備：融化培養(yǎng)基傾注平皿，至少3mm;置于水平面冷卻凝固；儲(chǔ)存：冷卻凝固的平皿放于密封袋子中，置于暗處或5±3℃冰箱保存；使用：表面接種的固體培養(yǎng)基，先對(duì)表面進(jìn)行干燥；注意不要過度干燥）2021/10/1060

培養(yǎng)基的質(zhì)量要求—微生物學(xué)要求

生長率按規(guī)定用適當(dāng)方法將適量測(cè)試菌株的工作培養(yǎng)物接種至固體、半固體和液體培養(yǎng)基中。每種培養(yǎng)基上菌株的生長率應(yīng)達(dá)到所規(guī)定的最低限值。選擇性為定量評(píng)估培養(yǎng)基的選擇性，應(yīng)按照規(guī)定以適當(dāng)方法將適量測(cè)試菌株的工作培養(yǎng)物接種至選擇性培養(yǎng)基和參考培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基的選擇性應(yīng)達(dá)到規(guī)定值。生理生化特性（特異性）確定培養(yǎng)基的菌落形態(tài)學(xué)、鑒別特性和選擇性，或試劑的鑒別特性，以獲得培養(yǎng)基或試劑的基本特性。性能評(píng)價(jià)和結(jié)果解釋若按照規(guī)定的所有測(cè)試菌株的性能測(cè)試達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，則該批培養(yǎng)基或試劑的性能測(cè)試結(jié)果符合規(guī)定。若基本要求和微生物學(xué)要求均符合規(guī)定，則該批培養(yǎng)基或試劑可被接受。2021/10/1061

《中國藥典》2015年版相關(guān)培養(yǎng)基變化

無菌檢查法（通則1101）

Ch.P2010

Ch.P2015硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基（SDB）改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）培養(yǎng)基的適用性檢查靈敏度檢查無菌性檢查

2021/10/1062

《中國藥典》2015年版相關(guān)培養(yǎng)基變化

無菌檢查法（通則1101）

Ch.P2010

Ch.P2015硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基（SDB）改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）培養(yǎng)基的適用性檢查靈敏度檢查無菌性檢查

2021/10/1063

非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法（通則1105）

相關(guān)培養(yǎng)基變化

Ch.P2010

Ch.P2015營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基

營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）改良馬丁培養(yǎng)基沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基（SDB）改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）培養(yǎng)基的適用性檢查固體：對(duì)照培養(yǎng)基，比值0.5-2液體：對(duì)照培養(yǎng)基，試驗(yàn)菌生長良好2021/10/1064

控制菌檢查法相關(guān)培養(yǎng)基變化

Ch.P2010

Ch.P2015

大腸菌群耐膽鹽革蘭陰性桿菌乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基