提取蘆丁實驗方案

超聲波提取法對苦養(yǎng)茶中蘆丁提取量的實驗研究一、 實驗儀器和材料超聲波發(fā)生器（型號： 生產(chǎn)廠家： ）減壓蒸餾裝置（型號：生產(chǎn)廠家：）紫外分光光度計（型號： 生產(chǎn)廠家：）恒溫干燥器100ml燒杯5個50ml燒杯5個100ml容量瓶6個25ml容量瓶6個電子天平蘆丁標準樣苦養(yǎng)樣品500g（生產(chǎn)商：甘洛縣彝家山寨農(nóng)牧科技有限公司蘆丁含量1.32%）無水乙醇2000ml亞硝酸鈉100ml硝酸鋁100ml氫氧化鈉200ml（均為分析純）蒸餾水二、 待測樣品的制備將苦養(yǎng)在40?45°C恒溫干燥箱中干燥4?5h,粉碎，過250um篩。稱取1.000g苦養(yǎng)，用一定濃度乙醇浸泡3h,超聲波提取一定的時間，減壓過濾，收集濾液至100mL容量瓶并定容至100mL，作供試液。三、 對照品溶液的制備精密稱取105C干燥至恒重的蘆丁對照品10mg，置100ml容量瓶中，用60%乙醇溶解定容至刻度，搖勻，即得。四、 線性關系的考察精密量取對照品溶液0,1.0，2.0,3.0,4.0，5.0，6.0ml，S25ml容量瓶中，加蒸餾水至6ml，口5%亞硝酸鈉1ml，搖勻，靜置6分鐘，加10%硝酸鋁1ml，搖勻，靜置6分鐘，^口4%氫氧化鈉10ml，加蒸餾水至刻度，靜置15分鐘，用紫外分光光度計測定吸收度，檢測波長510nm。以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，求回歸方程、相關系數(shù)r。五、 樣品含量測定準確吸取供試品液10.0mL于50mL容量瓶中，按照蘆丁標準曲線計算樣品中的蘆丁含量。具體計算方式如下：1.000g苦養(yǎng)中蘆丁質(zhì)量（mg）：M=C（mg/mL）25mLO.5lO0mL1.000g苦養(yǎng)中蘆丁提取率（%）:W（%）=六、單因素和正交試驗利用蘆丁標準曲線方程進行定量評價，以原料的蘆丁提取率作指標，分別考察乙醇濃度、超聲時間、料液比對提取率的影響，并在單因素試驗基礎上采用正交試驗法確定苦養(yǎng)茶中蘆丁的最佳提取工藝。正交試驗設計選擇三因素三水平。根據(jù)正交設計方法按L9(3)進行試驗，因素水平見表1。表1正交試驗的因素水平水平A乙醇濃度/%B超聲時間/minC料液比(g/ml)150101/30260201/40370301/50正交試驗A乙醇濃度％B超聲時間/minC料液比(g/ml)實驗指標提取率（%）150101/301.681250201/401.873350301/501.843460101/501.616560201/301.760660301/401.918770101/401.387870201/501.647970301/301.669T15.3974.6845.11T25.2945.285.178T34.7035.435.106k11.7991.5611.703k21.7651.7601.726k31.5681.8101.702R0.2310.2490.024優(yōu)化條件A1B3C2B>A>C最佳條件為50%乙醇、超聲時間30分、料液比1/40提取率為2.041%回收率實驗用標準加入法測定紫外線檢測的回收率，精確吸取樣品溶液2ml。分別加入2,3,4,m1蘆丁標準液后測定吸光度，由蘆丁標準曲線的測定值得所需的回收率。所得的平均回收率為樣品溶液/m1+蘆丁標準品/ml樣品溶液中蘆丁量/mg加入標準液中蘆丁量/mg測定值回收率/%平均回收率/%RSD%2+271.70440103.2292.42+371.70460128.1597.394.32.832+471.70480141.3493.2精密度檢測對苦養(yǎng)茶提取液平行測定6次，得6個吸光度，在標準曲線上對應6個濃度值，

結(jié)果見表2.其SD值為0.002%，RSD值為0.188%，偏差值較小。表2蘆丁測定的精密度結(jié)果編號123456吸光度1.2281.2281.2251.2311.2261.228穩(wěn)定性實驗取樣品測定液，，每隔0.5h測定一次吸收度，測定結(jié)果見表3,結(jié)果表明從測

定開始，2.5h內(nèi)其吸收度基本穩(wěn)定，平均值為1.222，RSD值為0.132%。表3蘆丁測定的穩(wěn)定性實驗時間/h 0 0.5 1 1.5 2.0 2.5