生態(tài)毒理學(xué)研究方法

生態(tài)毒理學(xué)研究方法生態(tài)毒理學(xué)研究方法第1頁(yè)毒性影響原因生物原因

(1)生物分類(lèi)組別(taxonomicgroup)

種屬和個(gè)體差異：不一樣種屬生物或同一個(gè)屬不一樣個(gè)體之間對(duì)同一毒物反應(yīng)差異，原因復(fù)雜，但主體原因是毒物在體內(nèi)代謝差異(包含代謝酶)所致。在進(jìn)行毒性試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)盡可能選擇條件一致生物以降低個(gè)體差異造成影響。

(2)年紀(jì)階段/機(jī)體大小 反應(yīng)靈敏度差異。新生和幼年生物通常對(duì)毒物較成年生物敏感。新生生物中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育不完全，對(duì)相關(guān)興奮劑敏感性差，而對(duì)抑制劑則較為靈敏。新生生物膜通透性較強(qiáng)，對(duì)一些脂溶性神經(jīng)毒物毒性反應(yīng)較大。經(jīng)代謝轉(zhuǎn)化后毒性增強(qiáng)化學(xué)物，對(duì)新生和幼年生物毒性較成年低，反之，在體內(nèi)可快速代謝失活化學(xué)物，對(duì)新生和幼年生物毒性可能較大。

(3)營(yíng)養(yǎng)與健康 營(yíng)養(yǎng)不足或失調(diào)影響化學(xué)物毒性作用。如蛋白質(zhì)缺乏引發(fā)酶蛋白合成降低、活性降低，解毒能力降低，毒性增加。維生素缺乏也有類(lèi)似情況。健康情況也有影響。

(4)生物節(jié)律 即生物鐘，化學(xué)物毒性與其進(jìn)入體內(nèi)發(fā)揮作用時(shí)間相關(guān)。生態(tài)毒理學(xué)研究方法第2頁(yè)非生物原因

(1)溫度(每增加10C，多數(shù)有毒物毒性會(huì)改變2到4倍)

影響方式復(fù)雜。適應(yīng)溫度和試驗(yàn)溫度。毒性影響原因適應(yīng)溫度耐受溫度抑制水平(產(chǎn)卵)負(fù)載水平(活動(dòng)生長(zhǎng))致死閾值5%致死閾值50%最終初始致死溫度三種毒性終點(diǎn)(死亡、生長(zhǎng)、產(chǎn)卵)下適應(yīng)溫度和耐受溫度關(guān)系。虛線各自?xún)?nèi)部面積指示耐受區(qū)。生態(tài)毒理學(xué)研究方法第3頁(yè)毒性影響原因 (2)pH和堿度

pH對(duì)毒性影響是多方面，在酸性條件下(pH5)時(shí)，H+本身對(duì)水生生物便是致命。酸對(duì)魚(yú)生理影響集成模型以下列圖所表示：2H++Ca3(PO4)23Ca2++2HPO42－2H++CaCO3

Ca2++CO2+H2OH+CO2+H2OK+Na++HPrH++Na+Pr－H+H+鰓ECFH++NH4NaH+H++HP42－H++NH3Ca2+腎骨骼ICFH++HCO3－K++HPrH++K+Pr－K+HP42+NH3H+NH4H2PO4ECF:外細(xì)胞液ICF:內(nèi)細(xì)胞液Pr:蛋白質(zhì)生態(tài)毒理學(xué)研究方法第4頁(yè) H+還能影響痕量金屬毒性，方式為：(1)影響水中金屬形態(tài)；(2)與金屬競(jìng)爭(zhēng)生物膜上表面反應(yīng)位。下列圖為天然水中痕量金屬主要形態(tài)及其轉(zhuǎn)化。毒性影響原因不穩(wěn)定有機(jī)絡(luò)合物穩(wěn)定有機(jī)絡(luò)合物游離離子顆粒態(tài)吸附無(wú)機(jī)絡(luò)合物膠體形態(tài)生態(tài)毒理學(xué)研究方法第5頁(yè)按操作定義金屬形態(tài)樣品原始樣品在室溫下風(fēng)干，然后在105C烘箱中烘干。用瑪瑙研缽研磨后，過(guò)尼龍篩，篩選一定孔徑顆粒。取一定量樣品，按下述方法對(duì)金屬進(jìn)行化學(xué)逐層提?。赫麴s水(W/V＝1:20,2h,25C)液相：水可溶態(tài)固相1M/0.5MMgCl2(pH=7,W/V=1:20,2h,25C)固相液相：離子交換態(tài)1MNaOAc(pH=5.1,W/V=1:20,2h,25C)固相固相固相液相：碳酸鹽結(jié)合態(tài)液相：中等可還原態(tài)液相：有機(jī)－硫化物結(jié)合態(tài)0.04MNH2OHHCl(在25%HOAc中,W/V=1:20,2h,96C)液相：殘?jiān)鼞B(tài)30%H2O2+0.02MHNO3

(pH=2,W/V=1:20,4h,85C)濃HNO3－HClO4－HF(8h,160C)生態(tài)毒理學(xué)研究方法第6頁(yè)Henderson－Hasselbach方程式對(duì)于弱酸HAH++A－Ka=(H+)(A－)/(HA)logKa=log[(H+)(A－)/(HA)]logKa=log(H+)+log[(A－)/(HA)]－log(H+)=－logKa+log[(A－)/(HA)]pH=pKa+log[(A－)/(HA)]對(duì)于弱堿HB+

H++BKa=(H+)(B)/(HB+)logKa=log[(H+)(B)/(HB+)]logKa=log(H+)+log[(B+)/(HB+)]－log(H+)=－logKa+log[(B+)/(HB+)]pH=pKa+log[(B)/(HB+)]解離常數(shù)pKa與弱酸和弱堿pH關(guān)系污染物處于pH改變水介質(zhì)中，其吸收進(jìn)入機(jī)體內(nèi)在相當(dāng)程度上受pH影響，即在腸胃消化道內(nèi)酸堿反應(yīng)。由上述關(guān)系，pH影響弱酸和弱堿水溶解度。另外，pH還能影響親脂金屬形態(tài)生物有效性，不經(jīng)形成表面絡(luò)合物而穿過(guò)細(xì)胞膜。生態(tài)毒理學(xué)研究方法第7頁(yè) (3)鹽度 主要應(yīng)用于鹽度改變顯著得海灣地域。對(duì)大多數(shù)金屬而言，低鹽度會(huì)增加毒性。鹽度對(duì)金屬生物有效性影響主要與其形態(tài)相關(guān)。

(4)硬度 硬度主要成份是二價(jià)鈣離子和鎂離子。美國(guó)環(huán)境保護(hù)局USEPA定義硬度通常以CaCO3等價(jià)值。

(5)化學(xué)混合物(isobologram，等熱輻射測(cè)量圖)

普通地，同一化學(xué)分類(lèi)化學(xué)物含有相同毒性?；旌衔锒拘圆⒎鞘呛?jiǎn)單加和關(guān)系。毒性影響原因化學(xué)物BLC50化學(xué)物ALC50直接化學(xué)物相加協(xié)同/增強(qiáng)無(wú)相互作用無(wú)相互作用聯(lián)合毒性行為(中間加和響應(yīng))拮抗作用有毒混合物模型：條目定義化學(xué)物A：96小時(shí)LC50＝1mg/L化學(xué)物B：96小時(shí)LC50=10mg/L二者分別按1mg/L和10mg/L加入96小時(shí)死亡描述定義50%死亡<50%死亡>50%死亡(1)倍數(shù)百分比增加(2)低于情形(1)(3)高于情形(1)無(wú)相互作用，各自反應(yīng)拮抗作用，混合低于各自相加直接相加低于加和增強(qiáng)作用生態(tài)毒理學(xué)研究方法第8頁(yè) (6)溶解有機(jī)碳(DOC)

溶解有機(jī)分子，分子量跨度從低于1000高至100000以上。作為金屬離子絡(luò)合劑。

(7)脂水分配系數(shù)(化合物毒性除與其在脂水相相對(duì)溶解度相關(guān)，還與其體液絕對(duì)溶解度相關(guān)) (8)電離度(弱酸或弱堿型有機(jī)物在體內(nèi)pH條件下，電離度低，非離子行百分比高，輕易被吸收發(fā)揮毒性) (9)揮發(fā)度和蒸氣壓(暴露接觸機(jī)率) (10)分散度(粉塵、煙霧等固態(tài)物質(zhì)毒性與分散度即顆粒粒徑大小相關(guān)) (11)純度(雜質(zhì)：剩下原料、合成副產(chǎn)品、添加劑、賦形劑) (12)濕度(伴隨高溫時(shí)，化學(xué)物經(jīng)皮膚吸收速率加緊) (13)氣壓顆粒物作用：食物主要性 氣態(tài)污染物除去呼吸吸入和氣孔/表皮進(jìn)入植物外，還有兩條基礎(chǔ)進(jìn)入路徑：以溶解態(tài)形式直接經(jīng)過(guò)生物膜傳輸；攝取污染顆粒物質(zhì)(僅對(duì)異養(yǎng)生物)。 有機(jī)污染物孔隙水相和沉積物相之間分配：Cw/Cs=Kocfoc，Koc，foc分別為有機(jī)相分配系數(shù)和沉積物有機(jī)碳分?jǐn)?shù)。沉積物－水，土壤－水分配系數(shù)能夠由辛醇－水分配系數(shù)近似：logKoc=aKow+b。 毒性影響原因生態(tài)毒理學(xué)研究方法第9頁(yè)

沉積環(huán)境中影響化學(xué)物生物有效性許多主要過(guò)程受沉積物氧化還原條件影響。其中，常處于厭氧環(huán)境沉積物中硫化物對(duì)金屬作用很大。酸可揮發(fā)性硫化物(acidvolatilesulfide,AVS)與酸化過(guò)程中同時(shí)提取金屬含量關(guān)系是主要描述沉積物中金屬生物有效性指標(biāo)。比率形式：AVS/SEM<1；差減形式：AVS－SEM。但詳細(xì)情況尚需詳細(xì)分析，可能有其它原因控制毒性發(fā)揮作用。同時(shí)，AVS方法比較依賴(lài)沉積物孔隙水作為控制金屬生物有效性因子，沒(méi)有考慮底棲生物攝食習(xí)慣和行為，如攝取顆粒物。定量結(jié)構(gòu)與活性關(guān)系(quantitativestructureactivityrelationship,QSAR)

有利于經(jīng)過(guò)比較預(yù)測(cè)新化合物生物活性、作用機(jī)理和安全限量范圍。當(dāng)前正處于發(fā)展階段。QSAR，QSBR(biodegradation)，QSPR(Properties)。 前提假設(shè)：某一化合物子結(jié)構(gòu)均會(huì)對(duì)整體性質(zhì)作出貢獻(xiàn)，類(lèi)似化合物應(yīng)對(duì)靶標(biāo)含有相同作用模式。現(xiàn)階段通常采取簡(jiǎn)單或多元回歸方程式：

Y=a+bX；Y=a+b1X1+b2X2+…+bjXj

相關(guān)原因：

(1)同系物碳原子數(shù)；

(2)烴基：分子結(jié)構(gòu)引入烴基，脂溶性增加，易于經(jīng)過(guò)細(xì)胞膜，毒性增強(qiáng)，但烴基結(jié)構(gòu)可增加毒物分子空間位置妨礙效應(yīng)，從而使毒性降低。

(3)分子飽和度：分子中不飽和鍵增加是化學(xué)物活性增加，毒性加強(qiáng)。 毒性影響原因生態(tài)毒理學(xué)研究方法第10頁(yè) (4)鹵素取代：鹵族元素通常有較強(qiáng)吸引電子能力，引入鹵素原子使電負(fù)性增加，易于與酶系統(tǒng)結(jié)合，毒性增強(qiáng)。

(5)羥基：引入羥基分子極性增強(qiáng)，毒性增加，如苯中引入羥基變?yōu)楸椒印?/p>

(6)酸基和酯基：酸基(羧基和磺酸基)引入使水溶性和電離性增加，脂溶性降低，難以轉(zhuǎn)運(yùn)和吸收，毒性降低。但酸基經(jīng)酯化后，效果相反。

(7)胺基：胺具堿性，易于蛋白和核酸酸性基團(tuán)、酶反應(yīng)。

(8)構(gòu)型(同分異構(gòu)體；旋光異構(gòu)體)：普通對(duì)位>鄰位>間位，但也有例外。因?yàn)槭荏w和或酶普通只能與一個(gè)旋光異構(gòu)體結(jié)合，產(chǎn)生生物效應(yīng)，化學(xué)旋光異構(gòu)體之間毒性不一樣。

(9)有機(jī)磷化合物：主要指五價(jià)磷有機(jī)殺蟲(chóng)劑。接觸條件

(1)接觸路徑：接觸路徑不一樣，則吸收、分布不一樣，其代謝轉(zhuǎn)化、毒性反應(yīng)性質(zhì)和程度也不一樣。

(2)溶劑和助溶劑：不一樣溶劑和助溶劑可加速或減緩毒物吸收、排泄，從而影響其毒性。

(3)毒物濃度和容積：稀釋作用情況不一致，有濃溶液毒性強(qiáng)，有則稀釋后反而強(qiáng)。

(4)交叉接觸：不一樣暴露路徑交叉作用。毒性影響原因生態(tài)毒理學(xué)研究方法第11頁(yè)群落種群個(gè)體組織細(xì)胞群落

個(gè)體種群組織細(xì)胞群落個(gè)體種群

組織細(xì)胞情形A情形B情形C生態(tài)毒理學(xué)應(yīng)包含各種組織水平上研究不一樣類(lèi)型生物組織水平之間關(guān)系“嵌套形式”，細(xì)胞效應(yīng)即簡(jiǎn)單地意味著全部生物水平效應(yīng)。情形B和C中豎條紋區(qū)域代表不確定性(Uncertainty)。低級(jí)生物響應(yīng)(如酶活性或免疫響應(yīng)改變)可能代表從健康反應(yīng)直至壓迫(stress)廣譜范圍。所以，難以確定這種響應(yīng)和有機(jī)體適應(yīng)性定量關(guān)系。從個(gè)體水平響應(yīng)結(jié)果外推至種群或群落水平屬于另一類(lèi)問(wèn)題(如情形C)。生態(tài)毒理學(xué)研究方法第12頁(yè)生態(tài)毒理學(xué)方法學(xué)方法生態(tài)毒理學(xué)研究特點(diǎn)

(1)研究目標(biāo)：保護(hù)多物種種群和群落免受造成現(xiàn)實(shí)或潛在危害有毒物濃度暴露。

(2)關(guān)注物種：受控于直接試驗(yàn)法需要。

(3)判定不窮盡性：無(wú)法判別所相關(guān)心受試物種。所以，結(jié)果外推程度不確定。有機(jī)體在生態(tài)系統(tǒng)中反應(yīng)與試驗(yàn)室內(nèi)受控條件下結(jié)果可能不一致。

(4)受試有機(jī)體：尤其指水生生物，生活在多變環(huán)境中，體溫隨環(huán)境溫度改變，有些與溫度相關(guān)毒性預(yù)測(cè)性較差。外部或暴露劑量及暴露時(shí)間直接從測(cè)定結(jié)果取得。

(5)毒性作用機(jī)理和結(jié)構(gòu)活性關(guān)系：偏重于基礎(chǔ)研究，重點(diǎn)在于測(cè)定效應(yīng)和臨界(閾值)濃度。

(6)常見(jiàn)檢測(cè)方法：通常較新，有些已標(biāo)準(zhǔn)化，但對(duì)于生態(tài)系統(tǒng)層次有效性還未確定。

在介紹、討論和評(píng)價(jià)各種方法理論和實(shí)踐意義時(shí)，經(jīng)常包括生物指示物、標(biāo)識(shí)物，生態(tài)指示物和模型。生態(tài)毒理學(xué)研究方法第13頁(yè)生物指示物普通概念和原理 生物指示物可被視為了解一個(gè)條件和狀態(tài)伎倆。利用生物指示物所依靠普通原理在于有機(jī)體對(duì)生態(tài)環(huán)境特定條件或特定條件改變產(chǎn)生響應(yīng)，而且生物響應(yīng)可加以測(cè)定。 生態(tài)指示物是指示生態(tài)系統(tǒng)條件/狀態(tài)生物響應(yīng)，但不一定是生態(tài)系統(tǒng)水平上一個(gè)測(cè)度。

比如湖水中葉綠素a濃度是仲夏浮游植物群落一個(gè)生物測(cè)度，并用于相關(guān)磷濃度湖泊生態(tài)系統(tǒng)整體狀態(tài)指示物。高濃度磷會(huì)造成富營(yíng)養(yǎng)化，引發(fā)湖泊中各種營(yíng)養(yǎng)水平響應(yīng)。評(píng)價(jià)富營(yíng)養(yǎng)化程度，盡管可選取磷濃度或一些魚(yú)種群和群落參數(shù)，但對(duì)于常規(guī)評(píng)價(jià)，葉綠素a測(cè)定是可靠且相對(duì)簡(jiǎn)單指示物。

理想生物指示物條件：生物響應(yīng)能夠定量化；專(zhuān)用于擾動(dòng)；在試驗(yàn)室和現(xiàn)實(shí)環(huán)境中均可進(jìn)行觀察；對(duì)系統(tǒng)整體功效有重復(fù)性和可靠性。

區(qū)分兩種生物響應(yīng)：

(1)到達(dá)某一試驗(yàn)終點(diǎn)；

(2)某一化學(xué)物質(zhì)在組織中積累。 生物指示物和生物監(jiān)視器定義：推薦將生物指示物用于全部類(lèi)型響應(yīng)，從亞細(xì)胞至系統(tǒng)，而不是物質(zhì)累積。而生物監(jiān)視器則主要針對(duì)機(jī)體累積類(lèi)型。 二者性質(zhì)比較(參見(jiàn)下述表格)生態(tài)毒理學(xué)研究方法第14頁(yè)生物指示物和生物監(jiān)視器性質(zhì)比較生態(tài)毒理學(xué)研究方法第15頁(yè)對(duì)潛在有毒物耐受性和抵抗性

(I)耐受性：指一個(gè)經(jīng)受暴露于非正常高濃度物質(zhì)(元素或化合物)能力，這些物質(zhì)能造成負(fù)面生物效應(yīng)且能不確定地加以維持。 最常提及例子出現(xiàn)在物種內(nèi)部，給定物種生態(tài)類(lèi)型或種系表現(xiàn)出一個(gè)經(jīng)受給定污染物濃度能力，該濃度對(duì)原始種系明確有害。

(II)耐受機(jī)理

a.阻止有毒物吸收；

b.吸收然后將污染物存放于與機(jī)體相隔離結(jié)構(gòu)中(如結(jié)石，特殊包裹物和液泡)或者以非生物活性形式存放；

c.內(nèi)部或外部降解化學(xué)物成為較少危害物質(zhì)；

d.吸收然后經(jīng)過(guò)細(xì)胞排泄而排除；

e.回避(僅對(duì)可運(yùn)動(dòng)生物)。生態(tài)毒理學(xué)研究方法第16頁(yè)生物尺度問(wèn)題

(1)

生化標(biāo)識(shí)物/指示物原理和性質(zhì) 生化指示物特征：

(i)在較大有機(jī)體范圍內(nèi)能觀察到特定生化響應(yīng)；

(ii)響應(yīng)專(zhuān)用于特定污染物或污染物族；

(iii)試驗(yàn)室結(jié)果應(yīng)與野外響應(yīng)相關(guān)；

(iv)生化響應(yīng)與功效降低或減弱相關(guān)或相關(guān)聯(lián)。 對(duì)于第(iv)點(diǎn)存在爭(zhēng)議：觀察到生化和生理參數(shù)表達(dá)病理學(xué)條件程度，病理學(xué)條件調(diào)和有機(jī)體整體適應(yīng)性。 現(xiàn)有幾個(gè)方法以澄清這種了解上爭(zhēng)議：

(a)野外采集物種生化標(biāo)識(shí)物已經(jīng)與暴露于試驗(yàn)室條件下特定化學(xué)物或化學(xué)物組；

(b)沿污染梯度不一樣點(diǎn)測(cè)定采集生化標(biāo)識(shí)物；

(c)證據(jù)權(quán)重策略得到不一樣生化標(biāo)識(shí)物相關(guān)性支持。

(2)

常見(jiàn)生化標(biāo)識(shí)物組 酶；單(加)氧酶(混合功效氧化物酶)；階段II結(jié)合酶(glutathione谷胱甘肽轉(zhuǎn)運(yùn)酶)；DNA損傷和修復(fù)生物標(biāo)識(shí)物；金屬巰基組氨酸三甲基內(nèi)鹽；受迫蛋白；免疫功效；組織病理學(xué)；生長(zhǎng)域范圍(scope)。 生態(tài)毒理學(xué)研究方法第17頁(yè)常見(jiàn)生化標(biāo)識(shí)物樣例刺激物響應(yīng)專(zhuān)一性有機(jī)體健康關(guān)聯(lián)光化學(xué)氧化物，酸性沉降，過(guò)氧化物生成抗氧化酶或非酶抗氧化物無(wú)經(jīng)過(guò)膜受體混亂生成自由基，混和功效氧化物活性受酶和非酶控制。過(guò)分自由基產(chǎn)生損害DNA，膜脂，和蛋白；壓制自由基產(chǎn)生會(huì)抑制免疫響應(yīng)氯化烴和芳香烴(PAHs)產(chǎn)生細(xì)胞色素P450，單(加)氧酶有氧化有機(jī)物，并轉(zhuǎn)為更多極化(易溶)形式。引發(fā)致癌中間體痕量金屬，有機(jī)化學(xué)物階段II結(jié)合酶無(wú)增加異體化合物溶解度和去除速率鉛氨基果糖酸脫水酶有改變氨基果糖酸脫水酶活性，干擾鐵/細(xì)胞色素代謝有機(jī)磷酸鹽，氨基甲酸鹽，合成除蟲(chóng)菊酯殺蟲(chóng)劑經(jīng)過(guò)攻擊酶上羥基抑制乙酰膽堿酯酶活性有神經(jīng)傳導(dǎo)元過(guò)分興奮，神經(jīng)肌肉功效損失生態(tài)毒理學(xué)研究方法第18頁(yè)刺激物響應(yīng)專(zhuān)一性有機(jī)體健康關(guān)聯(lián)一些B族和邊界金屬(Ag,Cd,Cu,Hg,Zn)金屬硫因合成有限控制組織中金屬分布(去毒功效)，去除自由基物理和化學(xué)擾動(dòng)(如鹽度、滲透壓改變、冷熱沖擊等)合成受迫蛋白，或稱(chēng)熱沖擊蛋白無(wú)包括細(xì)胞修復(fù)金屬，有機(jī)物改變免疫功效。巨噬細(xì)胞活性無(wú)因暴露于先前刺激，巨噬細(xì)胞活性受損PAHs,PCBs組織病理學(xué)。上皮組織腫瘤，腎臟損害無(wú)組織損害來(lái)自與污染物直接接觸乙炔基雌二醇,烷基酚,有機(jī)氯殺蟲(chóng)劑,PCBs,鄰苯二甲酸酯/鹽破壞生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)無(wú)老鼠雌性生殖區(qū)增殖。非天然生成卵黃蛋白原常見(jiàn)生化標(biāo)識(shí)物樣例(續(xù))生態(tài)毒理學(xué)研究方法第19頁(yè) (3)獨(dú)立物種作為指示物(參見(jiàn)表格)或監(jiān)視器(參見(jiàn)表格)；

(4)生態(tài)系統(tǒng)指示物替換物 最少須滿(mǎn)足三個(gè)基準(zhǔn)條件用以限定物種作為替換物種：

a.必須是其所參加食物網(wǎng)強(qiáng)大累積者；

b.必須是所在系統(tǒng)中數(shù)量豐富且分布廣泛；

c.必須是易于識(shí)別且生態(tài)相關(guān)。 可指示環(huán)境壓迫群落水平響應(yīng)：

a.生物體平均大小降低；

b.生物量降低(biomass)；

c.特有種被普通種代替；

d.物種豐度降低(物種數(shù)目)；

e.群落組成改變(相對(duì)豐度)；

f.一些物種生殖損害；

g.食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)和長(zhǎng)度改變；

h.捕食者數(shù)目降低，被捕食者數(shù)目增加。 生態(tài)毒理學(xué)研究方法第20頁(yè)陸生指示物種樣例陸生指示物物種混亂響應(yīng)應(yīng)用陸生香草基質(zhì)中放射活性基因突變?cè)斐苫ǘ漕伾淖兎派湫缘V物調(diào)查診療地衣、苔蘚附生植物群落SO2群落改變：物種出現(xiàn)或消失基于地衣群落指數(shù)規(guī)劃SO2污染帶百分比地衣、苔蘚附生植物群落，設(shè)計(jì)14種，移植在樹(shù)皮片上SO2內(nèi)外扁平體狀態(tài)改變地衣扁平體傷害程度與SO2平均濃度相關(guān)性地衣、苔蘚附生植物群落，12種SO2分布模式，靠近源，物種數(shù)少，隨距離增加提供快速評(píng)價(jià)方法和確定長(zhǎng)距離點(diǎn)源污染地衣、苔蘚花對(duì)SO2耐受程度不一樣物種SO2樹(shù)上附生物種組成污染敏感物種重新出現(xiàn)提醒空氣質(zhì)量改進(jìn)人工基質(zhì)上地衣、苔蘚SO2伴隨大氣污染削減，物種重新入侵響應(yīng)慢，除SO2外，可能存在其它影響參數(shù)捕食鳥(niǎo)類(lèi)有機(jī)氯污染(PCB,DDE)蛋殼變薄，卵營(yíng)養(yǎng)不良食物鏈效應(yīng)評(píng)價(jià)；污染源遷移恢復(fù)評(píng)價(jià)生態(tài)毒理學(xué)研究方法第21頁(yè)水生指示物種樣例指示物物種混亂響應(yīng)應(yīng)用蜉蝣類(lèi)幼體湖泊酸化低pH條件下物種消失低堿度湖：酸化早期預(yù)警硅藻多物種種群湖泊酸化物種組成和豐度減弱親酸或親堿條件，為重建湖泊化學(xué)歷史或現(xiàn)實(shí)狀況，改變條件以計(jì)算硅藻－推斷pH硅藻物種范圍來(lái)自大量湖泊沉積物數(shù)據(jù)庫(kù)基于酸中和容量酸靈敏度，與硫沉積相關(guān)物種組成和豐度以設(shè)置臨界SO2負(fù)荷效應(yīng)劑量關(guān)系建立硅藻古湖沼模型蜉蝣類(lèi)幼體湖泊營(yíng)養(yǎng)化狀態(tài)中營(yíng)養(yǎng)條件下優(yōu)勢(shì)種湖水、沉積物質(zhì)量評(píng)價(jià)顫蚓寡毛步驟動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)增強(qiáng)中營(yíng)養(yǎng)條件下優(yōu)勢(shì)種湖水、沉積物質(zhì)量評(píng)價(jià)白星眼魚(yú)湖泊營(yíng)養(yǎng)化狀態(tài)中營(yíng)養(yǎng)條件下優(yōu)勢(shì)種湖水、沉積物質(zhì)量評(píng)價(jià)片腳類(lèi)動(dòng)物湖泊營(yíng)養(yǎng)化狀態(tài)貧營(yíng)養(yǎng)條件下優(yōu)勢(shì)種湖水、沉積物質(zhì)量評(píng)價(jià)湖鮭魚(yú)湖泊營(yíng)養(yǎng)化狀態(tài)貧營(yíng)養(yǎng)條件下優(yōu)勢(shì)魚(yú)種湖水、沉積物質(zhì)量評(píng)價(jià)蚤湖泊營(yíng)養(yǎng)化狀態(tài)富營(yíng)養(yǎng)條件下優(yōu)勢(shì)種生態(tài)毒理學(xué)研究方法第22頁(yè)用于環(huán)境監(jiān)測(cè)陸生物種樣例監(jiān)視器物種混亂參數(shù)測(cè)定應(yīng)用苔蘚羽狀苔蘚大氣污染苔蘚組織中金屬濃度評(píng)價(jià)北極大氣污染起源苔蘚羽狀苔蘚無(wú)機(jī)污染，大氣沉降，當(dāng)?shù)鼗騻鬏斀饘?、?lèi)金屬元素時(shí)空監(jiān)測(cè)氣生污染物，長(zhǎng)距離傳送通常與濕性沉降相關(guān)苔蘚羽狀苔蘚PCBs大氣沉降PCBs同系物濃度范圍在監(jiān)測(cè)時(shí)段內(nèi)，指示PCB總濃度降低苔蘚羽狀苔蘚、沼澤苔蘚、附生植物苔蘚天然生長(zhǎng)苔蘚評(píng)價(jià)作為金屬沉降監(jiān)視關(guān)注極地地域苔蘚中金屬含量利用苔蘚作為重金屬大氣沉降監(jiān)測(cè)器，注意苔蘚數(shù)據(jù)經(jīng)沉降數(shù)據(jù)校正，評(píng)價(jià)非大氣污染源貢獻(xiàn)地衣苔蘚大氣沉降中污染地衣吸收大氣沉降過(guò)程：顆粒捕捉、離子交換、被動(dòng)和主動(dòng)吸收不一樣尺度監(jiān)測(cè)大氣沉降?？紤]種間差異地衣苔蘚硫和鉛在加拿大東部沉積測(cè)定不一樣地域地衣中濃度顯著差異表明散發(fā)和沉降速率差異生態(tài)毒理學(xué)研究方法第23頁(yè)鯡鷗鷗卵跟蹤污染時(shí)序，濃度降低檢驗(yàn)恢復(fù)卵中污染物濃度環(huán)境中各種起源異體有機(jī)污染物，可能進(jìn)入人類(lèi)食物鏈，有