基因檢測(cè)與葉酸吸收

基因與優(yōu)孕之皇甫霹蹣創(chuàng)作當(dāng)年的美國(guó)電影《侏羅紀(jì)公園》讓所有人對(duì)“基因”的神奇發(fā)生了深刻的印象，回到現(xiàn)實(shí)中，神秘的基因科技除了在電影里制造恐龍，具體對(duì)我們的生活有些什么幫忙呢？目前，這項(xiàng)前沿科技已經(jīng)正式應(yīng)用于臨床，為尋常蒼生提供個(gè)人基因檢測(cè)服務(wù)，找到身體治病內(nèi)因，以便針對(duì)性、方向性的改善外因，防止重大疾病的發(fā)生。近年來，不育不孕與新生兒出生缺陷發(fā)生率呈逐年上升趨勢(shì)，引起了醫(yī)療及政府相關(guān)部分的高度重視。中國(guó)疾病預(yù)防控制中心婦幼保健中心于2007年先后三次向全國(guó)婦幼保健院發(fā)出關(guān)于開展“婦幼保健遺傳檢測(cè)服務(wù)項(xiàng)目”的函，特別強(qiáng)調(diào)：“隨著人類基因組計(jì)劃和國(guó)際人類基因組單體型圖計(jì)劃的完成，在發(fā)達(dá)國(guó)家基因檢測(cè)技術(shù)也逐漸成為健康醫(yī)療體系中的一部分，并已證明能有效降低個(gè)人患病風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)節(jié)約醫(yī)療開支”。同時(shí)指出：“為了提升婦幼保健服務(wù)的技術(shù)含量，將最新的預(yù)防檢測(cè)技術(shù)及時(shí)應(yīng)用于婦幼保健服務(wù)?！笔灼谕瞥隽艘浴霸衅谌~酸需求遺傳檢測(cè)”為代表的15項(xiàng)“婦幼保健遺傳檢測(cè)服務(wù)項(xiàng)目”。衛(wèi)生部于2009年6月發(fā)出了關(guān)于《增補(bǔ)葉酸預(yù)防神經(jīng)管缺陷項(xiàng)目管理方案》的通知，進(jìn)一步加大了預(yù)防新生兒出生缺陷宣傳和管理力度，對(duì)各級(jí)衛(wèi)生部分提出了具體要求。葉酸缺乏是導(dǎo)致新生兒出生缺陷的主要原因。導(dǎo)致機(jī)體缺乏葉酸有兩個(gè)方面的原因：一是葉酸攝入量缺乏，二是由于遺傳（基因）缺陷導(dǎo)致機(jī)體對(duì)葉酸的利用能力低下（葉酸代謝通路障礙）?？茖W(xué)研究證明，通過基因檢測(cè)技術(shù)手段，對(duì)人體MTHFR基因及MTRR基因做檢測(cè)，可以及早發(fā)現(xiàn)分歧個(gè)體對(duì)葉酸的吸收利用水平，從而篩查出容易引起葉酸缺乏的高危人群，實(shí)現(xiàn)個(gè)性化增補(bǔ)葉酸（因人而異地確切給出葉酸彌補(bǔ)計(jì)劃和彌補(bǔ)量），從而增強(qiáng)葉酸彌補(bǔ)依從性，同時(shí)加強(qiáng)產(chǎn)前檢查，以降低新生兒出生缺陷風(fēng)險(xiǎn)。而現(xiàn)實(shí)生活中，有超出50%的女性是在無意中受孕的。當(dāng)知道受孕后，增補(bǔ)葉酸的關(guān)鍵期往往已滯后了2-3個(gè)月，晦氣于胎兒神經(jīng)管缺陷的有效預(yù)防。從另一方面，，葉酸增補(bǔ)不該僅僅局限在女性，男性彌補(bǔ)葉酸有著同等重要的意義?？茖W(xué)研究證明，男性體內(nèi)缺乏葉酸，會(huì)導(dǎo)致精子質(zhì)量降低，精液中精子攜帶的染色體數(shù)量異常，引起新生兒出生缺陷。機(jī)體葉酸水平低下，也是引起不育不孕、自發(fā)性流產(chǎn)的重要原因之一。因此，新婚夫婦準(zhǔn)備懷孕前，至少應(yīng)該做一項(xiàng)“孕期葉酸需求（女性）”及“高同型半胱氨酸血癥（男性）”的基因檢測(cè)，這樣更有利于優(yōu)孕。（胎兒神經(jīng)管缺陷主要表示為無腦兒、腦膨出、腦脊髓膜膨出、隱性脊柱裂、唇裂及腭裂等。）附：葉酸代謝能力（孕期葉酸需求/高同型半胱氨酸血癥）遺傳檢測(cè)項(xiàng)目簡(jiǎn)介一、項(xiàng)目概述及布景中國(guó)是世界上出生缺陷的高發(fā)國(guó)家之一，每年的出生缺陷兒數(shù)量約占全世界的20%。中國(guó)政府批準(zhǔn)，從2005年開始，每年9月12日是我國(guó)“預(yù)防出生缺陷日”。據(jù)中國(guó)疾病預(yù)防控制中心統(tǒng)計(jì)資料顯示，我國(guó)是新生兒出生缺陷的高發(fā)國(guó)家，每年有80萬一120萬名出生缺陷兒，平均每30秒就有一名缺陷兒出生。其中，除20%—30%患兒經(jīng)早期診斷和治療可以獲得較好生活質(zhì)量外，30%—40%患兒在出生后死亡，約40%將成為終身殘疾。這意味著每年將有40萬家庭被卷入終生痛苦的漩渦中。資料顯示，四川省每年約有超出4萬名的出生缺陷患兒，并呈逐年增長(zhǎng)趨勢(shì)。國(guó)家計(jì)生委副主任江帆說：“我國(guó)每年出生缺陷患兒的治療費(fèi)用高達(dá)數(shù)百億元，維持最基本生活費(fèi)用高達(dá)數(shù)百億元，給國(guó)家造成的間接費(fèi)用約數(shù)千億元”。更為引人關(guān)注的是，盡管國(guó)家花費(fèi)巨大投入積極采納預(yù)防措施，但近年來全國(guó)出生缺陷率有增無減，上升趨勢(shì)十分明顯。中國(guó)優(yōu)生科學(xué)協(xié)會(huì)副會(huì)長(zhǎng)、北京大學(xué)人口研究所所長(zhǎng)鄭曉瑛介紹，我國(guó)罕見的出生缺陷有神經(jīng)管畸形、先天性心臟病、唇腭裂、尿道下裂等。出生缺陷的發(fā)生原因十分復(fù)雜，有些還不為人類所認(rèn)識(shí)，但主要是遺傳因素、環(huán)境因素或二者的共同作用。鄭曉瑛進(jìn)一步指出：“我國(guó)是全球神經(jīng)管畸形高發(fā)國(guó)家，最罕見的就是脊柱裂兒和無腦兒，原因是母體葉酸缺乏。中國(guó)育齡婦女體內(nèi)葉酸缺乏較普遍，每3個(gè)育齡婦女就有一人缺乏葉酸?！比~酸屬B族維生素，是合成核酸所必須的元素，是細(xì)胞生長(zhǎng)和組織修復(fù)所必須的物質(zhì)，更是胚胎發(fā)育過程中不成缺少的營(yíng)養(yǎng)素。近年來大量研究已經(jīng)證實(shí)，葉酸缺乏是導(dǎo)致出生缺陷的主要原因。葉酸的臨床功能除了預(yù)防胎兒神經(jīng)管缺陷外，還能降低孕婦妊娠高血壓、自發(fā)性流產(chǎn)和胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩、早產(chǎn)以及新生兒低出生體重等發(fā)病率?？茖W(xué)研究發(fā)現(xiàn)，葉酸利用能力受遺傳結(jié)構(gòu)（基因）影響，如果與葉酸代謝相關(guān)的酶活性偏低（即相關(guān)基因功能異常），這一人群如按常量（400微克/天）彌補(bǔ)葉酸，機(jī)體葉酸水平也會(huì)缺乏。遺傳體質(zhì)的差別導(dǎo)致了機(jī)體對(duì)葉酸利用能力的差別，因此，葉酸增補(bǔ)應(yīng)因人而異，增補(bǔ)過多或過少都晦氣于胎兒健康和孕婦健康。隨著生命科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，葉酸利用能力基因檢測(cè)與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估于2008年即已被中國(guó)疾病預(yù)防控制中心婦幼保健中心列為臨床應(yīng)用指南（拜見《婦幼保健醫(yī)療臨床遺傳檢測(cè)項(xiàng)目資料匯編》第六卷臨床應(yīng)用指南之二十一《葉酸利用能力》）。這一嶄新的生命科學(xué)技術(shù)成果近兩年來已在國(guó)內(nèi)部分婦幼保健院（四川省內(nèi)如德陽(yáng)市婦幼保健院）取得較大成效，為個(gè)體化（差別化）增補(bǔ)葉酸、預(yù)防新生兒出生缺陷提供了更高水平的科學(xué)手段和臨床依據(jù)。但是，在婦幼保健院的應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)一個(gè)普遍存在的問題，即50%以上的孕婦是在無意中懷孕的，增補(bǔ)葉酸的時(shí)間往往滯后至少2?3個(gè)月（懷孕前三個(gè)月即應(yīng)開始增補(bǔ)葉酸），錯(cuò)過了彌補(bǔ)葉酸的關(guān)鍵時(shí)期，晦氣于預(yù)防胎兒神經(jīng)管缺陷。因此，應(yīng)該提倡葉酸增補(bǔ)從新婚開始（在發(fā)達(dá)國(guó)家，新婚期即開始了葉酸的增補(bǔ)）。男性增補(bǔ)葉酸對(duì)優(yōu)生有著同等重要的意義?？茖W(xué)研究進(jìn)一步標(biāo)明，葉酸攝入缺乏，男性機(jī)體葉酸水平偏低，主要會(huì)導(dǎo)致兩方面的不良后果：一是精子密度低、活性下降、勃起功能減弱，二是精液中攜帶的染色體數(shù)量異常（過多或過少，即精子中出現(xiàn)“非整倍體”），引起唐氏綜合癥或流產(chǎn)。綜上所述，通過最先進(jìn)的科學(xué)手段檢測(cè)每對(duì)新婚夫婦對(duì)葉酸的利用能力，不但可以實(shí)現(xiàn)個(gè)性化增補(bǔ)葉酸，還可以增強(qiáng)新婚夫婦增補(bǔ)葉酸的意識(shí)和依從性，從而更有效地降低新生兒出生缺陷風(fēng)險(xiǎn)。二、研究成果介紹科學(xué)研究證實(shí)而且機(jī)理研究清楚的與甲基類維生素（葉酸及維生素B12）代謝密切相關(guān)的基因是MTHFR和MTRR。5,10-亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR）、甲硫氨酸合成酶還原酶（MTRR）等基因變異引起的相應(yīng)的酶活性降低可阻抑同型半胱氨酸轉(zhuǎn)化為甲硫氨酸，導(dǎo)致低葉酸血癥和高同型半胱氨酸血癥，從而增加新生兒出生缺陷風(fēng)險(xiǎn)或自發(fā)性流產(chǎn)等風(fēng)險(xiǎn)。1、MTHFR基因基因簡(jiǎn)介MTHFR全稱5,10-methylenetetrahydrofolatereductase（5,10-亞甲基四氫葉酸還原酶），位于一號(hào)染色體lp36.3位置。MTHFE全長(zhǎng)19.3kb，mRNA全長(zhǎng)7105bp，共有外顯子12個(gè)，編碼共有657個(gè)氨基酸編碼子的蛋白?；蚍肿由飳W(xué)功能亞甲基四氫葉酸還原酶催化5,10-亞甲基四氫葉酸轉(zhuǎn)換成5-甲基四氫葉酸鹽，使之能為同型半胱氨酸提供甲基甲硫氨酸。該酶是人體葉酸代謝中的一個(gè)十分重要的酶?；蚺c疾病葉酸及其代謝中間產(chǎn)品在機(jī)體生理生化反應(yīng)中具有重要作用，一旦機(jī)體發(fā)生葉酸缺陷或者葉酸代謝酶的缺陷，就會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞周期不正常，DNA、蛋白質(zhì)甲基化反應(yīng)異常、DNA堿基無法正常合成等多種生化反應(yīng)異常，從而直接或間接地導(dǎo)致新生兒或胎兒神經(jīng)管缺陷以及成年人的癌癥、心血管疾病的發(fā)生?；蚨鄳B(tài)性位點(diǎn)rs1801131概述rs1801131是位于第一號(hào)染色體MTHFR基因第八個(gè)外顯子上第1298（1337）核甘酸的一個(gè)A/C多態(tài)，引起MTHFR基因編碼的蛋白質(zhì)第429個(gè)氨基酸由Glu變成Ala。在世界人群中的該多態(tài)的頻率分布，A占77%，C占23%。中國(guó)人群中的分布A占81%，C為19%。功能研究發(fā)現(xiàn)，rs1801131位點(diǎn)的多態(tài)性是影響該酶的活性的一個(gè)重要因素。攜帶MTHFR1298C等基因的酶活性為野生型的68%左右，因而阻礙了葉酸代謝，引起一系列疾病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加。rs1801133概述rs1801133是位于第一號(hào)染色體MTHFR基因第五個(gè)外顯子上的716（677）位mRNA上一個(gè)C/T多態(tài)，引起MTHFR基因編碼的蛋白質(zhì)第222個(gè)氨基酸由Ala（A）變成Val（V）。在世界人群中的該多態(tài)的頻率分布，A占78%，T占22%。中國(guó)人群中的分布A占67%，C為34%。功能研究發(fā)現(xiàn)，MTHFR677位點(diǎn)的多態(tài)性是影響該酶活性的一個(gè)重要因素，導(dǎo)致酶活性和熱穩(wěn)定性下降。若以個(gè)體攜帶677CC基因型時(shí)其MTHFR活性為100%，攜帶CT基因型的活性則為CC的71%，基因型為TT型的只有34%。2、MTRR基因基因簡(jiǎn)介MTRR全稱5-methyltetrahydrofolate-homocysteinemethyltransferasereductase,編碼甲硫氨酸合成酶還原酶，位于5P15.3-p15.2。MTRR基因全長(zhǎng)32021kb,mRNA全長(zhǎng)3274bp,共有15個(gè)外顯子，編碼具有726個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)?；蚍肿由飳W(xué)功能甲硫氨酸是蛋白質(zhì)合成和一碳代謝的必須氨基酸，它的合成是由甲硫氨酸合酶（MTR編碼）催化的，而甲硫氨酸合酶因?yàn)檩o助因子維生素B12被氧化而最終失活。MTRR編碼的甲硫氨酸合成酶還原酶能夠通過還原型甲基化作用重新生成具有功能活性的甲硫氨酸合酶。甲硫氨酸合成酶還原酶是具有電子轉(zhuǎn)移作用的鐵氧化還原蛋白-NADP（+）還原酶（ferredoxin-NADP（+）reductase，F(xiàn)NR）家族成員。MTRR突變是造成葉酸/甲基維生素缺乏癥的主要病因。主要突變型有122M（A66G）、S175L、其它一些片段拔出缺失和點(diǎn)突變。其中A66G是最主要和研究最多的突變?；蚺c疾病MTRR突變是造成葉酸/甲基維生素缺乏癥的主要病因，也是同型半胱氨酸、葉酸代謝異常的主要原因之一。而同型半胱氨酸、葉酸代謝與許多疾?。―own綜合癥-先天愚型、神經(jīng)管疾病、心血管疾病等）相關(guān)，因此MTRR突變被認(rèn)為是這些疾病的高風(fēng)險(xiǎn)因素?；蚨鄳B(tài)性位點(diǎn)概述rs1801394是位于5P15.3-p15.2之間的MTRR基因第2個(gè)外顯子處的一個(gè)A/G多態(tài)，引起MTRR基因編碼的蛋白第22個(gè)氨基酸由Ile變成Met（Ile22Met）。在dbSNP數(shù)據(jù)庫(kù)中，世界人群中的該多態(tài)的頻率分布為，A占57.4%，G占42.6%左右。在中國(guó)人群中該多態(tài)的頻率分布為：A占76%，G占24%左右。功能rs1801394位點(diǎn)是MTRR上的主要突變，引起甲基維生素缺乏癥,并經(jīng)經(jīng)常使用來研究與脊柱裂、Down綜合癥、神經(jīng)管缺陷、白血病等疾病的關(guān)系。3、葉酸利用能力遺傳檢測(cè)項(xiàng)目涉及的基因及位點(diǎn)葉酸利用能力遺傳（基因）檢測(cè)是生命科學(xué)研究成果的轉(zhuǎn)化應(yīng)用。葉酸利用能力遺傳檢測(cè)項(xiàng)目涉及的基因及位點(diǎn)如下表所示：基因位點(diǎn)基因型基因型在中國(guó)人群中分別所占比例MTHFRC677TCC（正常）;CT（正常）;TT（風(fēng)險(xiǎn)）22%；50%；28%MTHFRA1298CAA（正常）;AC（正常）;CC（風(fēng)險(xiǎn)）66%；31%；4%MTRRA66GAA（正常）;AG（風(fēng)險(xiǎn)）;GG（風(fēng)險(xiǎn)）58%；36%；6%4、風(fēng)險(xiǎn)分級(jí)零級(jí)一級(jí)二級(jí)三級(jí)四級(jí)五級(jí)六級(jí)七級(jí)未發(fā)現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)低度風(fēng)險(xiǎn)中度風(fēng)險(xiǎn)高度風(fēng)險(xiǎn)風(fēng)險(xiǎn)分級(jí)：依據(jù)各基因（位點(diǎn)）功能、純和、雜合及其出現(xiàn)頻率。綜上所述，對(duì)MTHFR基因、MTRR基因及其相關(guān)位點(diǎn)的檢測(cè)，可以直接發(fā)現(xiàn)被檢測(cè)者葉酸代謝方面的遺傳缺陷（即葉酸的利用能力），從而根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)高低（相關(guān)代謝酶的活性程度）建議更準(zhǔn)確的彌補(bǔ)劑量。如由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心婦幼保健中心組織的孕期葉酸利用能力檢測(cè)所提供的增補(bǔ)參考量：檢測(cè)結(jié)果孕前3個(gè)月孕早期（0-12周）孕中/后期（13-40周）未發(fā)現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)400微克/天400微克/天注意食物彌補(bǔ)，可不需要額外增補(bǔ)低度風(fēng)險(xiǎn)400微克/天400微克/天400微克/天中度風(fēng)險(xiǎn)400微克/天800微克/天400微克/天高度風(fēng)險(xiǎn)800微克/天800微克/天400微克/天男性葉酸增補(bǔ)方法及注意事項(xiàng)未發(fā)現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)低度風(fēng)險(xiǎn)中度風(fēng)險(xiǎn)高度風(fēng)險(xiǎn)要孩子前3個(gè)月即應(yīng)注意葉酸的膳食彌補(bǔ)即可要孩子前3個(gè)月加強(qiáng)膳食葉酸彌補(bǔ)或增補(bǔ)葉酸400微克/天要孩子前3~6個(gè)月加強(qiáng)膳食葉酸彌補(bǔ)并增補(bǔ)葉酸600微克/天要孩子前6個(gè)月加強(qiáng)膳食葉酸彌補(bǔ)并增補(bǔ)葉酸800微