生物安全柜“十市聯(lián)賽”一等獎

滄州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校王鳳玲滄州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校王翠翠檢驗儀器分析技術(shù)生物安全柜

生物危害標(biāo)識圖血的教訓(xùn)03年在與SARS斗爭中，我國醫(yī)療機構(gòu)的檢驗人員已經(jīng)付出了沉重的代價。由于中國檢驗界在學(xué)科建設(shè)的理念上更多的重視質(zhì)量管理，相對忽視了生物安全管理。04年5月20日鐘南山院士總結(jié)9例SRAS個案經(jīng)驗教訓(xùn)：此次病例源頭不是從本實驗室感染，而是從鄰近實驗室感染，說明存在實驗場地污染的情況。生物安全柜一生物安全柜的工作原理和分類(一)生物安全柜的基本工作原理(二)生物安全柜的分類二生物安全柜的結(jié)構(gòu)與功能三生物安全柜的實際應(yīng)用前言臨床實驗室由于要接收各類患者的標(biāo)本，是一個具有一定危險性的工作場所。保護(hù)其工作人員的安全和健康，防止生物危害性的污染已經(jīng)成為迫切需要解決的問題

2003年5月9日美國疾病控制中心發(fā)布了最新的實驗室生物安全級別標(biāo)準(zhǔn)，即生物安全三級(BiosafetyLevelThree，BSL-3)標(biāo)準(zhǔn)

生物安全柜是生物安全一級屏障的主要防護(hù)設(shè)施，是防止實驗室獲得性感染的主要設(shè)備生物安全柜的工作原理和分類一、生物安全柜的基本工作原理生物安全柜（biosafetycabinet；biologicalsafetycabinet）是防止操作處理過程中某些含有危險性或未知性生物微粒發(fā)生氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負(fù)壓安全裝置氣溶膠（aerosol）是指懸浮于氣體介質(zhì)中、粒徑一般為0.001μm～100μm的固態(tài)、液態(tài)微粒所形成的膠溶態(tài)分散體系生物安全柜的基本工作原理

生物安全柜的工作原理主要是將柜內(nèi)空氣向外抽吸，使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，通過垂直氣流來保護(hù)工作人員；外界空氣經(jīng)高效空氣過濾器（high-efficiencyparticulateairfilter,HEPAfilter）過濾后進(jìn)入安全柜內(nèi)，以避免處理樣品被污染；柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過HEPA過濾器過濾后再排放到大氣中，以保護(hù)環(huán)境。生物安全柜的基本工作原理生物安全柜的工作原理――氣流示意圖生物安全柜的分類生物安全柜領(lǐng)域執(zhí)行的最重要的標(biāo)準(zhǔn)是歐洲標(biāo)準(zhǔn)EN12469和美國國家衛(wèi)生基金會的第49號標(biāo)準(zhǔn)（NSF49）NSF49在上世紀(jì)70年代就已經(jīng)出現(xiàn)，被公認(rèn)為目前生物安全柜領(lǐng)域最完善的標(biāo)準(zhǔn)。2002年，NSF49正式獲得了美國國家標(biāo)準(zhǔn)學(xué)會（ANSI）的認(rèn)可，成為美國生物安全柜的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)歐洲標(biāo)準(zhǔn)化委員會（CEN）于2000年5月頒布了生物安全柜歐洲標(biāo)準(zhǔn)EN12469:2000，成為歐盟區(qū)域內(nèi)生物安全柜統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)這兩個標(biāo)準(zhǔn)對生物安全柜的分類、性能和檢測均有明確規(guī)定生物安全柜的分類根據(jù)防護(hù)程度的不同，通常將生物安全柜分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級，可適用于不同生物安全等級的媒質(zhì)的操作按照美國1992年版NSF49標(biāo)準(zhǔn)生物安全等級1級（P1）的媒質(zhì)是指普通無害細(xì)菌、病毒等微生物生物安全等級2級（P2）的媒質(zhì)是指一般性可致病細(xì)菌、病毒等微生物生物安全等級3級（P3）的媒質(zhì)是指烈性/致命細(xì)菌、病毒等微生物，但感染后可治愈生物安全等級4級（P4）的媒質(zhì)是指烈性/致命細(xì)菌、病毒等微生物，感染后不可治愈生物安全柜的分類--Ⅰ級生物安全柜Ⅰ級生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員與環(huán)境安全、而不保護(hù)樣品安全的通風(fēng)安全柜適用于對處理樣品安全性無要求且生物危險度等級為1、2、3的媒質(zhì)的操作生物安全柜的分類--Ⅰ級生物安全柜無手套型有手套型Ⅰ級生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖

生物安全柜的分類--Ⅰ級生物安全柜因不考慮處理樣品是否會被進(jìn)入柜內(nèi)的空氣污染，故對進(jìn)入柜內(nèi)的空氣潔凈度要求不高空氣的流動為單向、非循環(huán)式，空氣流經(jīng)HEPA過濾器后進(jìn)入柜內(nèi)，通過工作臺面后又被過濾、經(jīng)排氣口排出為保護(hù)操作人員安全，其向內(nèi)的非循環(huán)吸入氣流必須遠(yuǎn)離操作者，故要求在使用前方有操作窗口、無手套的Ⅰ級生物安全柜時，避免人員在安全柜前快速走動或操作人員完成操作后將手臂快速從柜內(nèi)抽出為保護(hù)環(huán)境，安全柜中的氣體在外排到大氣以前必須先經(jīng)過HEPA過濾器過濾生物安全柜的分類--Ⅱ級生物安全柜Ⅱ級生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員、處理樣品安全與環(huán)境安全的通風(fēng)安全柜通常適用于生物危險度等級為1、2、3的媒質(zhì)的操作。當(dāng)有毒化學(xué)物質(zhì)或放射性核物質(zhì)被用于微生物研究或制藥的添加物時，應(yīng)使用專為此目的設(shè)計制造的II級生物安全柜生物安全柜的分類--Ⅱ級生物安全柜操作窗口內(nèi)側(cè)垂直氣流和外部吸入氣流交匯點的平衡是生物安全柜的一個設(shè)計關(guān)鍵。若外部吸入氣流過強，此未經(jīng)過濾的空氣有可能越過前方的回風(fēng)隔柵而污染操作平臺；若垂直氣流過強，則有可能使柜內(nèi)含有微生物的空氣逸出Ⅱ級生物安全柜分為A1、A2（原B3）、B1、B2四個類型生物安全柜的分類--Ⅱ級生物安全柜

A1型生物安全柜

Ⅱ級A1型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖

生物安全柜的分類--Ⅱ級生物安全柜A2型生物安全柜Ⅱ級A2型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖

生物安全柜的分類--Ⅱ級生物安全柜B1型生物安全柜當(dāng)使用微量揮發(fā)性有毒化學(xué)物質(zhì)和痕量放射性核素用于微生物學(xué)研究時，可采用B1型生物安全柜，但是對這些化學(xué)物質(zhì)和放射性核素的處理應(yīng)在安全柜的直接排風(fēng)區(qū)內(nèi)進(jìn)行Ⅱ級B1型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖

生物安全柜的分類--Ⅱ級生物安全柜B2型生物安全柜（也稱為“全排”型）適用于處理感染性樣品、使用揮發(fā)性有毒化學(xué)物質(zhì)和以放射性核素作為微生物學(xué)研究的工作場合Ⅱ級B2型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖

生物安全柜的分類--Ⅲ級生物安全柜Ⅲ級生物安全柜是完全密閉、不漏氣結(jié)構(gòu)的通風(fēng)安全柜工作空間內(nèi)為經(jīng)HEPA過濾器凈化的無渦流的單向流空氣安全柜正面上部為觀察窗，下部為手套箱式操作口。在安全柜內(nèi)操作是通過與安全柜相連接的橡皮手套進(jìn)行。

生物安全柜的分類--Ⅲ級生物安全柜安全柜應(yīng)維持至少120Pa的負(fù)壓，方可確保人體與柜內(nèi)物品完全隔絕進(jìn)入氣流經(jīng)數(shù)個HEPA過濾器過濾后送入安全柜，排出氣流應(yīng)經(jīng)雙層HEPA過濾器過濾或通過HEPA過濾器過濾和焚燒來處理Ⅲ級生物安全柜適用于生物危險度等級為1、2、3和4的媒質(zhì)的操作生物安全柜的結(jié)構(gòu)與功能生物安全柜一般均由箱體和支架兩部分組成箱體內(nèi)部含有風(fēng)機、門電機、進(jìn)風(fēng)預(yù)過濾罩、凈化空氣過濾器、外排空氣預(yù)過濾器、照明源和紫外光源等設(shè)備生物安全柜的結(jié)構(gòu)與功能正面示意圖側(cè)面示意圖生物安全柜基本結(jié)構(gòu)示意圖生物安全柜的應(yīng)用生物安全實驗室選用生物安全柜的原則實驗室級別生物安全柜選用原則一級一般無須使用生物安全柜，或使用Ⅰ級生物安全柜二級當(dāng)可能產(chǎn)生微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作時，可使用I級生物安全柜；當(dāng)處理感染性材料時，應(yīng)使用部分或全部排風(fēng)的Ⅱ級生物安全柜；若涉及處理化學(xué)致癌劑、放射性物質(zhì)和揮發(fā)性溶媒，則只能使用Ⅱ-B級全排風(fēng)(B2型)生物安全柜。三級應(yīng)使用II級或Ⅲ級生物安全柜；所有涉及感染材料的操作，應(yīng)使用全排風(fēng)型Ⅱ-B級(B2型)或Ⅲ級生物安全柜。四級應(yīng)使用Ⅲ級全排風(fēng)生物安全柜。當(dāng)人員穿著正壓防護(hù)服時，可使用Ⅱ-B級生物安全柜。生物安全柜的應(yīng)用

一、儀器的安裝生物安全柜在搬運過程中，嚴(yán)禁將其橫倒放置和拆卸，宜在搬入安裝現(xiàn)場后拆開包裝生物安全柜應(yīng)安裝于排風(fēng)口附近，不應(yīng)安裝在氣流激烈變化和人員走動多的地方，不應(yīng)安裝在門口。生物安全柜應(yīng)處于空氣氣流方向下游生物安全柜的應(yīng)用

二、生物安全柜內(nèi)實驗操作注意事項1.平行擺放柜內(nèi)物品為避免物品之間的交叉污染。2.操作宜緩慢3.柜內(nèi)移動物品時應(yīng)盡量避免交叉污染4.避免震動5.柜內(nèi)盡量不要使用明火生物安全柜的應(yīng)用三、維護(hù)與保養(yǎng)每次實驗結(jié)束后應(yīng)對工作室進(jìn)行清洗和消毒預(yù)過濾器一旦受損，應(yīng)及時更換HEPA過濾器有一定的使用壽命，隨著使用期的延長，細(xì)菌和塵埃積聚在過濾器上，會導(dǎo)致HEPA過濾器壓力損失的增大。HEPA過濾器的使用壽命到期后，應(yīng)立即更換。由于過濾器可能帶有污染物，操作時應(yīng)注意安全防護(hù)，最好請專業(yè)人員來更換

生物安全柜的應(yīng)用有下列情況之一時，應(yīng)對生物安全柜進(jìn)行現(xiàn)場檢測生物安全實驗室竣工后，投入使用前，生物安全柜已安裝完畢生物安全柜被移動位置對生物安全柜進(jìn)行檢修生物安全柜更換HEPA過濾器后生物安全柜一年一度的常規(guī)檢測

生物安全柜的應(yīng)用檢測項目及要求垂直氣流平均風(fēng)速檢測檢測方法：在HEPA過濾器以下0.15m處的截面上，采用風(fēng)速儀均勻布點測量截面風(fēng)速。測點間距不大于0.15m，每列至少測量3點，每行至少測量5點。評價標(biāo)準(zhǔn)：平均風(fēng)速不低于0.25m/s，與生產(chǎn)廠家給定值之差不大于±0.025m/s，且單點風(fēng)速與平均風(fēng)速之差不大于±20%

生物安全柜的應(yīng)用工作窗口的氣流流向檢測檢測方法：可采用發(fā)煙法或絲線法在工作窗口斷面檢測，檢測位置包括工作窗口的四周邊緣和中間區(qū)域評價標(biāo)準(zhǔn)：工作窗口斷面所有位置的氣流均向內(nèi)工作窗口的氣流流速檢測檢測方法：采用風(fēng)速計測量工作窗口斷面風(fēng)速。測點間距不大于0.10m，每列至少測量2點，每行至少測量5點評價標(biāo)準(zhǔn)：其斷面上的風(fēng)速值均不低于產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求

生物安全柜的應(yīng)用工作區(qū)潔凈度檢測采用塵埃粒子計數(shù)器在工作區(qū)檢測。粒子計數(shù)器采樣口置于工作臺面向上20cm高度位置，其測量點服從行、列均為20cm的網(wǎng)格分布。每列至少測量三點，每行至少測量5點評價標(biāo)準(zhǔn)：塵埃粒子數(shù)不得高于產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求。噪聲檢測生物安全柜前面板水平中心向外300㎜，且高于工作臺面380㎜處用聲級計測量噪聲。評價標(biāo)準(zhǔn)：噪聲不得高于產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求。小結(jié)生物安全柜是防止操作處理過程中某些含有危險性或未知性生物微粒發(fā)生氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負(fù)壓安全裝置其工作原理是將柜內(nèi)空氣向外抽吸，使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，通過垂直氣流來保護(hù)工作人員；外界空氣經(jīng)HEPA過濾器過濾后進(jìn)入安全柜內(nèi)，以避免處理樣品被污染；柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過過濾器過濾后再排放到大氣中，以保護(hù)環(huán)境課堂練習(xí)

根據(jù)防護(hù)程度的不同，通常將生物安全柜分成的等級是（