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文檔簡介
病理檢驗技術(shù)
特殊染色病理性沉著物銅銅是人體必需的微量元素之一,它是體內(nèi)許多氧化酶的必要成分,特別是細(xì)胞色素氧化酶和DOPA氧化酶的重要組成成分。正常人體內(nèi)銅的總量平均為75mg,但如超過一定的量,銅就會對機(jī)體產(chǎn)生毒性。肝豆?fàn)詈俗冃?又稱
Wilson病),就是一種由過量銅沉積于組織中造成毒性而致病的一種常染色體隱性遺傳疾病。
在一般情況下,用組化方法不能顯示出組織中所含微量的銅,但當(dāng)組織中堆積過量的銅后,就可用組化方法顯示出來。銅最常堆積于肝、腦、腎和角膜,通常是切取肝組織行病理切片檢查。顯示銅的方法有紅氨酸法,若丹明法和二苯硫卡巴腙法等,紅氨酸法較敏感,也是傳統(tǒng)的染色法。
紅氨酸法(根據(jù)Uzman和Howell)(一)試劑配制1.0.1%的紅氨酸乙醇液
紅氨酸(
rubeanic
acid)10mg
無水乙醇10ml2.10%的醋酸鈉(
sodium
acetate)
3.紅氨酸乙醇醋酸鈉液0.1%的紅氨酸乙醇液2ml10%的醋酸鈉
40ml4.醇溶性伊紅液
伊紅Y,醇溶性(
eosin
y,
alcohol
soluble)0.25~0.5g80%的乙醇100ml(二)染色步驟1.組織固定于10%的甲醛液中,常規(guī)脫水包埋。2.切片厚6um,常規(guī)脫蠟至水。3.浸入紅氨酸乙醇醋酸鈉液(加蓋)于37℃的恒溫箱內(nèi)處理12~24小時。(二)染色步驟4.70%的乙醇浸洗2次,每次10分鐘。5.無水乙醇浸洗2次,每次3小時。6.醇溶性伊紅液淺染1秒。7.無水乙醇稍洗。8.常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。(三)結(jié)果在淡紅色背景下,銅呈深綠黑色小顆粒。(四)應(yīng)用在肝切片中
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