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文檔簡介
實驗七環(huán)境因素對微生物的影響課件第一頁,共19頁。一、實驗?zāi)康牧私飧鞣N物理和化學(xué)因素對微生物生長的抑制作用觀察各因素對微生物生長抑制的強弱第二頁,共19頁。二、實驗原理環(huán)境因素包括物理因素、化學(xué)因素和生物因素,不良的環(huán)境條件使微生物的生長受到抑制,甚至導(dǎo)致菌體的死亡。但是某些微生物產(chǎn)生的芽孢,對惡劣的環(huán)境條件有較強的抵抗能力。我們可以通過控制環(huán)境條件,使有害微生物的生長繁殖受到抑制,甚至被殺死;而對有益微生物,通過調(diào)節(jié)理化因素,使其得到良好的生長繁殖或產(chǎn)生有經(jīng)濟價值的代謝產(chǎn)物。根據(jù)微生物對氧氣的需求,可把微生物分為好氧菌、厭氧菌和兼性好氧菌。在鑒定細(xì)菌時,常以它們的好氧性作為指標(biāo)。pH對微生物生長的影響第三頁,共19頁。溫度是影響微生物生長的重要因素之一。根據(jù)微生物生長的最適溫度范圍,可分為高溫菌、中溫菌和低溫菌,自然界中絕大部分微生物屬于中溫菌。紫外線主要作用于細(xì)胞內(nèi)的DNA,輕則使微生物發(fā)生突變,重則造成微生物死亡。紫外線照射的劑量與所用紫外光燈的功率(瓦數(shù))、照射距離和照射時間有關(guān)。紫外線透過物質(zhì)的能力弱,一層黑紙足以擋住紫外線的通過。第四頁,共19頁?;瘜W(xué)藥劑對微生物生長的影響:抑制或殺死微生物的化學(xué)因素種類極多,用途廣泛,性質(zhì)各異。其中表面消毒劑和化學(xué)藥劑最為常見。表面消毒劑在極低濃度時,常常表現(xiàn)為對微生物細(xì)胞的刺激作用,隨著濃度的逐漸增加,就相繼出現(xiàn)抑菌和殺菌作用,對一切活細(xì)胞都表現(xiàn)活性?;瘜W(xué)藥劑主要包括一些抗代謝物,例如抗生素等。在微生物實驗中,pH值的變化也對微生物生長有很大影響。第五頁,共19頁。第六頁,共19頁。各種物理因素
紫外線作用于生物體DNA
溫度作用于溫度敏感型蛋白質(zhì)生物因素
青霉素作用于細(xì)胞壁
鏈霉素rRNA等第七頁,共19頁。三、實驗器材菌液大腸桿菌、金黃葡、枯草桿菌器材平皿、吸管、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、酒精燈、玻璃刮鏟試劑
75%乙醇、10%苯酚、30%甲醛、1%碘液、0.1%升汞、50U/ml的青霉素、鏈霉素、慶大霉素儀器水浴鍋、紫外燈第八頁,共19頁。四、實驗步驟化學(xué)因素
制牛肉膏蛋白胨平板一塊,取0.1ml金黃色葡萄球菌菌液涂布。
劃分五個等分區(qū)塊,做好記號后在每個區(qū)塊內(nèi)分別放上75%乙醇、10%苯酚、30%甲醛、1%碘液、0.1%升汞的小濾紙片。
倒置于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時第九頁,共19頁。第十頁,共19頁。第十一頁,共19頁。生物因素
制牛肉膏蛋白胨平板2塊,分別涂布大腸桿菌和金黃色葡萄球菌各0.1ml
每個平板劃分三個等分區(qū)塊,做好記號后,在每個區(qū)塊內(nèi)分別放上50U/ml的青霉素、鏈霉素、慶大霉素的小濾紙片。
倒置于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時第十二頁,共19頁。產(chǎn)黃氫霉測試菌第十三頁,共19頁。物理因素
(1)紫外線
實驗流程
倒平板→涂布接種→紫外線處理→培養(yǎng)→觀察比較→記錄結(jié)果
實驗步驟
A.標(biāo)記培養(yǎng)基:取肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板3個,分別標(biāo)明大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌等試驗菌的名稱。
B.接種:分別用無菌吸管取培養(yǎng)18—20h的大腸桿菌、枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌菌液0.1m1(或2滴),加在相應(yīng)的平板上,再用無菌刮鏟涂布均勻。
C.紫外線處理:打開培養(yǎng)皿蓋,用無菌黑紙遮蓋部分平板,置于預(yù)熱10一15min后的紫外燈下,紫外線照射20
min左右,取去黑紙,蓋上皿蓋。
D.培養(yǎng):在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
第十四頁,共19頁。
(2)溫度
實驗流程
培養(yǎng)液→接種→高溫→培養(yǎng)→觀察比較→記錄結(jié)果
實驗步驟
A.選取培養(yǎng)基:取8支A培養(yǎng)液試管,按順序從1到8編號。
B.接種:其中4支(例如1、3、5、7)培養(yǎng)液試管中各接入培養(yǎng)48h的大腸桿菌的菌懸液0.1m1,其余4支(2、4、6、8)
培養(yǎng)液試管中各接入培養(yǎng)48h的枯草芽孢桿菌的菌懸液0.1m1,混勻。
C.
高溫水?。簩?支已接種的培養(yǎng)液試管同時放入100℃水浴中,10min后取出1至4號管,再過10min后,取出5至8號管。各管取出后立即用冷水或冷卻。
D.
培養(yǎng):將各管置于其最適溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。
E.
觀察結(jié)果:依據(jù)菌株生長狀況記錄結(jié)果。以“一”表示不生長,“十’表示生長,并以“十”,“十十”,“十十十”表示不同生長量。
第十五頁,共19頁。五、實驗結(jié)果測定各種化學(xué)物質(zhì)產(chǎn)生的抑菌圈的大小,比較不同化學(xué)因素的抑菌能力?觀察物理因素對微生物生長的影響。觀察生物因素對微生物生長的影響。第十六頁,共19頁。六、問題與討論請列舉5種化學(xué)因素和兩種物理因素對微生物生長的抑制作用及其機理
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