上海市臨檢中心 臨床檢驗質(zhì)量管理培訓(xùn) 5.王彥云-LC-MSMS技術(shù)在甲基丙二酸血癥的篩查及診療中的應(yīng)用（20191021）-王彥云

LC-MS/MS技術(shù)在甲基丙二酸血癥的篩查及診療中的應(yīng)用王彥云2019年10月甲基丙二酸血癥（Methylmalonic

Acidemia,MMA）?

常染色體隱性遺傳?

最常見的有機酸尿癥?

國內(nèi)、國外的首要篩查病種之一甲基丙二酸血癥的篩查?

串聯(lián)質(zhì)譜（非衍生化/衍生化）?

丙酰基肉堿（C3)?

蛋氨酸(MET)C3:

8.03C3/C0:

0.58C3/C2:

0.71MET:

3.49甲基丙二酸血癥篩查的難點?

容易漏篩?

初篩假陽性率?

召回成本C0:11.92C3:

1.81C3/C0:

0.15C3/C2:

0.25MET:

9.34串聯(lián)質(zhì)譜檢測的質(zhì)量控制實例一：本室質(zhì)量指標(biāo)進行縱向比較后的質(zhì)量改進經(jīng)驗1PDCA分析問題發(fā)現(xiàn)問題2種AA、18種AC暫無商品化質(zhì)控品質(zhì)控品+質(zhì)量指對于無質(zhì)控品的指標(biāo)可以采用“樣本數(shù)據(jù)質(zhì)控法”，將室內(nèi)質(zhì)控開展率提升至100%每批實驗結(jié)束后均及時統(tǒng)計樣本數(shù)據(jù)，包括均值、中位數(shù)串聯(lián)篩查按檢測指標(biāo)統(tǒng)計室內(nèi)質(zhì)控開展率按檢測指標(biāo)統(tǒng)計串聯(lián)篩查“室內(nèi)質(zhì)控開展率”為53.5%標(biāo)

樣本數(shù)據(jù)質(zhì)+發(fā)現(xiàn)新問題控聯(lián)合監(jiān)管串聯(lián)篩查質(zhì)量提升至100%2ACDP分析問題發(fā)現(xiàn)問題C0、C2、C3室內(nèi)

20170711批次實驗中血單位的樣本

質(zhì)控品均在控，

部分指標(biāo)在全市采血培訓(xùn)中進

初篩陽性率及一步強化規(guī)范采血的

樣本均值恢復(fù)分別比較各采聯(lián)系可疑采血機構(gòu)，詳細詢問樣本采集均數(shù)，查出并

排除人員操作、

異常，其中環(huán)節(jié)“初篩陽性率”重要性正常C3/C2：0.1%→3.4%確定哪家單位

儀器、試劑質(zhì)量的樣本出現(xiàn)問

及環(huán)境問題題并予以糾正

重點懷疑樣本質(zhì)量問題最終原因確定為樣本是在高溫高濕環(huán)境中采集及晾干C0：2.9%→0.4%樣本數(shù)據(jù)均值異常C2：20.0→15.0C0

：18.0→23.0重新培訓(xùn)其正確的采血及晾干步驟串聯(lián)質(zhì)譜檢測的質(zhì)量控制實例二：本室質(zhì)量指標(biāo)進行橫向比較后的質(zhì)量改進經(jīng)驗PDCA發(fā)現(xiàn)問題分析問題R4S-陽性患者橫向比較：本室MS/MS篩查的

數(shù)據(jù)庫+建立多“陽性預(yù)測值”為2.6%，但國逐步建立本室的多病種二階篩查技術(shù)平臺變量模式判讀軟件（人工智外報道的陽性預(yù)

能）首先建立MMA二階篩查技術(shù)平臺測值為181%-642%。二階篩查-MMA、SUAC等1Lim

JS,TanE

S,JohnCM

,etal.

InbornError

ofMetabolism

(IEM)

screening

in

Singapore

byelectrosprayionization-tandem

mass

spectrometry(ESI/MS/MS):An

8yearjourneyfrom

pilot

to

current

program[J].MolecularGeneticsand

Metabolism,2014,

113(1-2):53-61.2Enhancedinterpretation

of

newbornscreeningresultswithoutanalyte

cutoff

values[J].Geneticsin

Medicine,2012,

14(7):648-655.甲基丙二酸血癥的二階篩查二階篩查指標(biāo)：?

甲基丙二酸?

甲基枸櫞酸?

同型半胱氨酸梅奧診所二階篩查檢測方法建立本室截斷值檢測指標(biāo)梅奧診所參考區(qū)間＜5.0umol/L本室99.5百分位界值3.796umol/L甲基丙二酸（MMA）同型半胱氨酸（HCY）＜15.0umol/L9.498umol/L建立本室截斷值例數(shù)MMA（μmol/L）例數(shù)MMA（μmol/L）10.7812345678911.828.7715.6537.723.9255.589.9511.63101112131415164.8310.665.767.985.2520.0426.69檢測指標(biāo)梅奧診所參考區(qū)間本室陽性截斷值（ROC曲線）甲基丙二酸（MMA）同型半胱氨酸（HCY）＜5.0umol/L＜15.0umol/L3.145umol/L7.295umol/L本室MMA聯(lián)合篩查流程圖?降低初篩陽性率?避免漏篩?提高陽性預(yù)測值實例二：本室質(zhì)量指標(biāo)進行橫向比較后的質(zhì)量改進經(jīng)驗PDCA發(fā)現(xiàn)問題分析問題R4S-陽性患者對于C3初篩陽

MMA篩查的陽性預(yù)

將MMA二階篩性的樣本在原

測值提高至87.5%3

查納入常規(guī)工作橫向比較：本室MS/MS篩查的

數(shù)據(jù)庫+建立多“陽性預(yù)測值”為2.6%，但國逐步建立本室的多病種二階篩查技術(shù)平臺變量模式判讀軟件（人工智外報道的陽性預(yù)

能）血片的基礎(chǔ)上進一步檢測MMA、MCA首先建立MMA二階篩查技術(shù)平臺測值為181%-642%。及HCY二階篩查-MMA、SUAC等待解決的問題：進一步研發(fā)其它病種的二階篩查技術(shù)1Lim

JS,TanE

S,JohnCM

,etal.

InbornError

ofMetabolism

(IEM)

screening

in

Singapore

byelectrosprayionization-tandem

mass

spectrometry(ESI/MS/MS):An

8yearjourneyfrom

pilot

to

current

program[J].MolecularGeneticsand

Metabolism,2014,

113(1-2):53-61.2Enhancedinterpretation

of

newbornscreeningresultswithoutanalyte

cutoff

values[J].Geneticsin

Medicine,2012,

14(7):648-655.3王彥云,

孫云,蔣濤.串聯(lián)質(zhì)譜和高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜二次篩查聯(lián)合應(yīng)用于新生兒MMA篩查[J].

臨床檢驗雜志,

2018,

36(5).實例二階篩查陽性病例分享二階篩查陽性病例1:G1P2，異卵，男，36+4W，BW2.34

Kg串聯(lián)質(zhì)譜：C32.04C3/C0

0.12C3/C2

0.34二階篩查：MMA

11.8MCA

1.1HCY

64.1二階篩查陽性病例2:G1P1，女，40+6W，BW2.65

Kg串聯(lián)質(zhì)譜：C3

4.14C3/C0

0.13C3/C2

0.18二階篩查：MMA

3.92MCA

0.26HCY

10.7確診MMA患兒的隨訪及時調(diào)整藥物劑量全面評估生長發(fā)育情況肝、腎功能頭顱MRI眼底血清中的同型半胱氨酸（生化）尿液中的甲基丙二酸（GC/MS）干血斑中的C0、C3（MS/MS）智測身高、體重LC-MS/MS技術(shù)在MMA患兒隨訪中的應(yīng)用HCY檢測方法樣本樣本量樣本獲取難易程度樣本檢測干擾因素循環(huán)酶法血清＞0.3ml較難容易溶血、及時分離樣本無LC-MS/MS干血斑≥6

ulMMA檢測方法樣本樣本量樣本獲取難易程度樣本檢測干擾因素樣本前處理每個樣本檢測

重復(fù)性耗時成本GC/MS尿濾紙片干血斑≥3ml≥6ul較難容易肌酐無繁瑣簡單48h較差好高低LC-MS/MS3minMMA合并慢性腎臟病患者？LC-MS/MS技術(shù)在MMA患兒隨訪中的應(yīng)用實例MMA隨訪病例分享患兒2歲2月齡（截止到該隨訪日期），女性，確診為MMA合并高同型半胱氨酸血癥MS/MSLC-MS/MS血清HCY尿GC/MSMMA1.04（＜3.145）HCY7.47C32.48C3/C0

0.07C3/C2

0.1417.73(＜15.0）4.22（＜3.5）（＜7.295）患兒1歲1月齡（截止到該隨訪日期），男性，確診為MMA合并高同型半胱氨酸血癥MS/MSLC-MS/MS血清HCY尿GC/MSMMA2.93（＜3