上海市臨檢中心 臨床檢驗(yàn)質(zhì)量管理培訓(xùn) 12.肖艷群-質(zhì)量控制-臨檢中心- 2019.10.23

分子診斷技術(shù)管理規(guī)范上海市臨床檢驗(yàn)中心

肖艷群?

分子診斷技術(shù)政策監(jiān)管要求?

分子診斷技術(shù)檢測質(zhì)量要求國家政策、技術(shù)規(guī)范/指南?

國家政策?

醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法?

《醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法》?

《上海市<醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法>實(shí)施細(xì)則》衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號（國家衛(wèi)生健康委令第1號）（滬委規(guī)〔2019〕3號）?

技術(shù)規(guī)范?

測序技術(shù)的個體化醫(yī)學(xué)檢測應(yīng)用指南（試行）?

遺傳性相關(guān)個體化醫(yī)學(xué)檢測應(yīng)用指南（試行）?

腫瘤個體化治療檢測應(yīng)用指南（試行）2014201520152015201620172017?

藥物代謝酶和藥物作用靶點(diǎn)基因檢測技術(shù)指南（試行）?

孕婦外周血胎兒游離DNA產(chǎn)前篩查與診斷技術(shù)規(guī)范?

感染性疾病相關(guān)個體化醫(yī)學(xué)分子檢測技術(shù)指南?

個體化醫(yī)學(xué)檢測微陣列基因芯片技術(shù)規(guī)范上海市醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理發(fā)展歷程2018年修訂《醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法》2019年出臺上海市《醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法實(shí)施細(xì)則

》2002-2009年新技術(shù)和專項(xiàng)技術(shù)準(zhǔn)入管理2009-2015年醫(yī)療技術(shù)分級分類管理2015-2018年取消行政準(zhǔn)入200220092015201820192002年，本市在全國率先探索，以新技術(shù)準(zhǔn)入為抓手，主動加強(qiáng)醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用監(jiān)

督

，

制

定《上海市醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用準(zhǔn)入管理辦法》2009年，原衛(wèi)生部下發(fā)《醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法》，要求醫(yī)療機(jī)構(gòu)分級分類開展醫(yī)療技術(shù)，并實(shí)施準(zhǔn)入管理2015年，取消了第三類、第二類醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用準(zhǔn)入審批，對國家和上海限制應(yīng)用醫(yī)療技術(shù)實(shí)施備案管理2018年，強(qiáng)化醫(yī)療機(jī)構(gòu)以及衛(wèi)生行政部門的監(jiān)管責(zé)任，明確取消醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用準(zhǔn)入審批后的制度體系設(shè)計8月15日正式實(shí)施第五章

醫(yī)療機(jī)構(gòu)醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理第一章

總則實(shí)施細(xì)則總體框架第二章第六章醫(yī)療技術(shù)負(fù)面清單管理醫(yī)療技術(shù)培訓(xùn)管理共八章47條第三章限制醫(yī)療技術(shù)備案管理第七章事中事后監(jiān)督管理第四章

醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用信息報送管理第八章

附則限制類醫(yī)療技術(shù)備案流程限制類醫(yī)療技術(shù)備案流程登記備案自我評估臨床應(yīng)用應(yīng)根據(jù)相關(guān)醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理規(guī)范進(jìn)行自我評估于開展首例臨床應(yīng)用之日起15個工作日內(nèi)，向核發(fā)其《醫(yī)療機(jī)構(gòu)執(zhí)業(yè)許可證》的衛(wèi)生健康部門備案“中國上?！钡摹耙痪W(wǎng)通辦”網(wǎng)站，在醫(yī)療機(jī)構(gòu)執(zhí)業(yè)登記欄目進(jìn)行備案臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)及分子診斷相關(guān)技術(shù)管理規(guī)范一、醫(yī)療機(jī)構(gòu)基本要求二、人員基本要求三、臨床應(yīng)用基本規(guī)范和管理要求四、實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求五、人員管理六、設(shè)備管理七、標(biāo)本管理八、質(zhì)量管理九、檢測要求基因芯片診斷技術(shù)管理規(guī)范一、醫(yī)療機(jī)構(gòu)基本要求二、人員基本要求三、臨床應(yīng)用基本規(guī)范和管理要求四、實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本要求五、人員管理六、設(shè)備管理七、標(biāo)本管理八、質(zhì)量管理九、檢測要求“政務(wù)服務(wù)”“按部門”登陸“中國上海”“一網(wǎng)通辦”網(wǎng)站用戶登錄“上海市衛(wèi)健委”“準(zhǔn)營準(zhǔn)辦”“醫(yī)療結(jié)構(gòu)執(zhí)業(yè)登記”完成備案提交材料“醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用備案”1.登陸中國上海

“一網(wǎng)通辦”網(wǎng)站

2.“政務(wù)服務(wù)”，“按部門”選擇“上海市衛(wèi)生健康委員會”3.用戶登錄4.“準(zhǔn)營準(zhǔn)辦”；“醫(yī)療機(jī)構(gòu)執(zhí)業(yè)登記”；“立即辦理”；“醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用備案”5.提交資料已納入臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)及分子診斷相關(guān)技術(shù)項(xiàng)目已納入臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)及分子診斷相關(guān)技術(shù)項(xiàng)目已納入基因芯片診斷技術(shù)項(xiàng)目核心內(nèi)容第四十四

——

四十六條

明確新技術(shù)備案途徑醫(yī)療機(jī)構(gòu)擬開展本市首次開展新技術(shù)，在開展首例臨床應(yīng)用前，應(yīng)當(dāng)完成臨床研究論證并向相關(guān)的第三方評價機(jī)構(gòu)申請進(jìn)行技術(shù)安全性、有效性評估和倫理審查第三方評價機(jī)構(gòu)評估審查后確認(rèn)該技術(shù)為禁止類技術(shù)或需納入本市限制類技術(shù)目錄的，醫(yī)療機(jī)構(gòu)按照禁止類或限制類技術(shù)管理規(guī)定執(zhí)行第八章附則需納入本市限制類技術(shù)目錄的，應(yīng)制定該項(xiàng)新技術(shù)臨床應(yīng)用技術(shù)管理規(guī)范（或備案條件）。其他醫(yī)療機(jī)構(gòu)擬開展該技術(shù)臨床應(yīng)用的，按照規(guī)定進(jìn)行備案上海市醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收及分子診斷新技術(shù)評估工作流程圖醫(yī)療機(jī)構(gòu)登陸中心網(wǎng)站填寫申請醫(yī)療機(jī)構(gòu)向中心提交電子版材料電子版評審后提交紙質(zhì)材料中心組織專家評估出具技術(shù)評估報告報衛(wèi)生行政部門備案上海市醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收及分子診斷新技術(shù)評估所需材料1.

上海市醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用能力評估申請書一、醫(yī)療機(jī)構(gòu)基本情況二、申請單位相關(guān)學(xué)科基本情況（一）項(xiàng)目負(fù)責(zé)人基本信息（二）學(xué)科人員基本信息（三）項(xiàng)目所在實(shí)驗(yàn)室的專用設(shè)備、設(shè)施及工作基礎(chǔ)三、開展該項(xiàng)技術(shù)的目地、意義和實(shí)施方案四、該項(xiàng)醫(yī)療技術(shù)的基本情況（一）技術(shù)路線（包括技術(shù)方法、所采用的儀器設(shè)備及技術(shù)的科學(xué)性等）（二）該項(xiàng)技術(shù)的國內(nèi)外應(yīng)用情況（包括該項(xiàng)技術(shù)在國內(nèi)外的應(yīng)用時間、范圍及獲得相關(guān)監(jiān)督管理部門的準(zhǔn)入情況）（三）與同種疾病的其他檢測技術(shù)的特點(diǎn)及費(fèi)用比較（四）該項(xiàng)技術(shù)的質(zhì)量控制措施（五）醫(yī)療機(jī)構(gòu)自我評估情況上海市醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收及分子診斷新技術(shù)評估所需材料2.

醫(yī)療機(jī)構(gòu)執(zhí)業(yè)許可證副本復(fù)印件（加蓋單位公章）3.

與該技術(shù)有關(guān)的技術(shù)人員上崗資格證書或職業(yè)醫(yī)師資格證書復(fù)印件（加蓋單位公章）4.

與該技術(shù)有關(guān)的實(shí)驗(yàn)室平面圖5.

醫(yī)療機(jī)構(gòu)醫(yī)學(xué)倫理審查報告（相關(guān)技術(shù)評估辦法規(guī)定的需提交；另附：倫理委員會成員姓名、專業(yè)、職務(wù)、職稱等情況）6.

與該項(xiàng)目相關(guān)的試劑注冊證書復(fù)印件7.

擬開展檢測項(xiàng)目性能驗(yàn)證報告8.

參加室間質(zhì)量評價活動反饋結(jié)果復(fù)印件，或證明其檢測質(zhì)量的其它相關(guān)資料（加蓋單位公章）9.

擬開展檢測項(xiàng)目報告樣單10.該技術(shù)的相關(guān)管理制度（質(zhì)量手冊、程序文件、作業(yè)指導(dǎo)書）11.衛(wèi)生行政部門要求的其他相關(guān)文件1.

登陸上海市臨床檢驗(yàn)中心官網(wǎng)/2.

選擇醫(yī)療技術(shù)評估3.

PCR實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收、分子診斷新技術(shù)評估4.

提交材料事中事后監(jiān)督管理各專業(yè)質(zhì)控中心?市醫(yī)療質(zhì)量控制管理事務(wù)中心應(yīng)當(dāng)充分利用醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用信息化管理平臺，定期或不定期組織對轄區(qū)內(nèi)醫(yī)療機(jī)構(gòu)限制類醫(yī)療技術(shù)開展情況數(shù)據(jù)信息進(jìn)行整理和分析，開展質(zhì)量評估工作并及時向醫(yī)療機(jī)構(gòu)、衛(wèi)生健康部門和衛(wèi)生健康監(jiān)督部門進(jìn)行反饋?依托各專業(yè)質(zhì)控中心加強(qiáng)醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理質(zhì)量控制制度和日常監(jiān)測國家和本市限制類技術(shù)全覆蓋兩個質(zhì)控工作“全覆蓋”醫(yī)療機(jī)構(gòu)備案所有開展限制類醫(yī)療技術(shù)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)全覆蓋?

管理要求?

技術(shù)要求1.2.3.4.5.6.7.8.9.組織和管理責(zé)任1.

人員質(zhì)量管理體系文件控制2.

設(shè)施和環(huán)境條件3.

實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、試劑和耗材4.

檢驗(yàn)前過程服務(wù)協(xié)議受委托實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)外部服務(wù)和供應(yīng)咨詢服務(wù)5.

檢驗(yàn)過程投訴的解決6.

檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量的保證7.

檢驗(yàn)后過程不符合項(xiàng)的識別和控制10.

糾正措施11.

預(yù)防措施12.

持續(xù)改進(jìn)13.

記錄控制14.

評估和審核15.

管理評審8.

結(jié)果報告9.

結(jié)果發(fā)布10.

實(shí)驗(yàn)室信息管理?

5.1.2人員資質(zhì)?

實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人：應(yīng)至少具有中級專業(yè)技術(shù)職稱?

實(shí)驗(yàn)室操作人員：至少2名具備相關(guān)資質(zhì)并取得PCR上崗證的本單位人員?

簽發(fā)分子病理報告的醫(yī)師：至少具有中級病理學(xué)專業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格，并有從事分子病理工作的經(jīng)歷?

簽發(fā)分子遺傳報告的醫(yī)師：至少具有中級遺傳學(xué)專業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格，并有從事分子遺傳工作的經(jīng)歷?

新進(jìn)員工輪轉(zhuǎn)培訓(xùn)：包括實(shí)驗(yàn)室工作流程、標(biāo)本接收、運(yùn)送、保存、檢測基本流程、報告準(zhǔn)確率、及時率等。?

員工輪崗培訓(xùn)：包括各類標(biāo)本采集要求、檢測流程、各授權(quán)儀器的使用、維護(hù)、組內(nèi)質(zhì)量控制內(nèi)容和要求、結(jié)果審核的注意事項(xiàng)及標(biāo)本保存等。?

離崗6個月后再上崗人員培訓(xùn)：重點(diǎn)在各授權(quán)的儀器使用、維護(hù)、結(jié)果審核的注意事項(xiàng)等，主要避免因業(yè)務(wù)生疏可能產(chǎn)生的醫(yī)療隱患。培訓(xùn)方法培訓(xùn)效果評估?

口頭提問?

講座，包括小組教學(xué)?

遠(yuǎn)程學(xué)習(xí)?

理論考試?

自學(xué)?

現(xiàn)場操作演示?

特殊樣品的檢驗(yàn)或鑒定?

觀看示例-現(xiàn)場或視頻?

在工作中接受輔導(dǎo)和建議?

實(shí)踐結(jié)果的自我評估?

特殊樣品的檢驗(yàn)或鑒定?

5.1.6能力評估?

應(yīng)每年評估員工的工作能力。對新進(jìn)員工在最初

6個月內(nèi)應(yīng)至少進(jìn)行2次能力評審，保存評估記錄。?

當(dāng)職責(zé)變更時，或離崗

6個月以上再上崗時，或政策、程序、技術(shù)有變更時，應(yīng)對員工進(jìn)行再培訓(xùn)和再評估，合格后才可繼續(xù)上崗，并記錄。?

可采用以下全部或任意方法組合，在與日常工作環(huán)境相同的條件下，對實(shí)驗(yàn)室員工的能力進(jìn)行評估：a、

直接觀察常規(guī)工作過程和程序，包括所有適用的安全操作；b、直接觀察設(shè)備維護(hù)和功能檢查；c、監(jiān)控檢驗(yàn)結(jié)果的記錄和報告過程；d、核查工作記錄；e、評估解決問題的技能；f、檢驗(yàn)特定樣品，如先前已檢驗(yàn)的樣品、實(shí)驗(yàn)室間比對的物質(zhì)或分割樣品。?

5.2.2實(shí)驗(yàn)室?

涉及基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室原則上分四個獨(dú)立的工作區(qū)域：試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)；樣品制備區(qū)；擴(kuò)增區(qū)；擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。如使用自動分析儀（擴(kuò)增產(chǎn)物閉管檢測），

擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并。?

具體實(shí)驗(yàn)室分區(qū)應(yīng)依據(jù)其所使用的技術(shù)平臺及檢驗(yàn)項(xiàng)目和工作量而定。?

開展高通量測序技術(shù)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)置遵循

“工作有序、互不干擾、防止污染”的基本原則。?

開展孕婦外周血胎兒游離DNA產(chǎn)前篩查與診斷的實(shí)驗(yàn)室，標(biāo)本制備區(qū)不能與其他項(xiàng)目的標(biāo)本制備區(qū)共用。工作區(qū)域要求：?

C）各區(qū)應(yīng)配置固定和移動紫外線燈，波長為

254nm，照射時離實(shí)驗(yàn)臺面高度一般為

60～90cm?

e）樣品制備區(qū)應(yīng)配置二級生物安全柜和洗眼器?

所有分子病理實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)設(shè)置獨(dú)立的標(biāo)本前處理區(qū)。脫蠟、水化及染色應(yīng)在通風(fēng)設(shè)施中進(jìn)行?

5.2.3儲存設(shè)施用以保存臨床樣品和試劑的設(shè)施應(yīng)設(shè)置目標(biāo)溫度和允許范圍，并記錄。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有溫度失控時的處理措施并記錄。?

5.2.6設(shè)施維護(hù)和環(huán)境條件?

不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)域應(yīng)當(dāng)有其各自的清潔用具。工作結(jié)束后應(yīng)立即對工作區(qū)進(jìn)行清潔?

應(yīng)依據(jù)所用分析設(shè)備和實(shí)驗(yàn)過程的要求，制定環(huán)境溫濕度控制要求并記錄。應(yīng)有溫濕度失控時的處理措施并記錄。?

分子檢驗(yàn)各工作區(qū)域應(yīng)有明確的標(biāo)記。進(jìn)入基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室各工作區(qū)應(yīng)按照單一方向進(jìn)行，不同的工作區(qū)域宜使用不同的工作服。工作人員離開各工作區(qū)域時，不應(yīng)將工作服帶出。?

總則標(biāo)本制備區(qū)使用的一次性加樣器吸頭應(yīng)帶有濾芯。不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品不能混用。?

組織標(biāo)本前處理區(qū)的設(shè)備通常應(yīng)包括切片機(jī)、切片刀、電熱恒溫箱、脫蠟缸、水化缸及HE染色缸等。?

設(shè)備校準(zhǔn)和計量學(xué)溯源?

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立設(shè)備的校準(zhǔn)程序，相應(yīng)程序中應(yīng)有需校準(zhǔn)的設(shè)備名稱、校準(zhǔn)單位、校準(zhǔn)周期、校準(zhǔn)參數(shù)、參數(shù)符合性的評估標(biāo)準(zhǔn)等內(nèi)容。?

應(yīng)按國家法規(guī)要求對強(qiáng)檢設(shè)備進(jìn)行檢定。應(yīng)進(jìn)行外部校準(zhǔn)的設(shè)備，如果符合檢測目的和要求，可按制造商校準(zhǔn)程序進(jìn)行。?

需對儀器的加樣系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)?

需校準(zhǔn)/檢定儀器：測序儀、擴(kuò)增儀、雜交儀、生物安全柜、高速冷凍離心機(jī)、恒溫金屬浴、移液器、溫度計、溫濕度計等?

頻度：定期校準(zhǔn)（國家計量部門或制造廠商要求進(jìn)行），有校準(zhǔn)報告溫控系統(tǒng)校準(zhǔn)周期校準(zhǔn)單位定期計量院/比對溫度、濕度（檢測過程涉及）相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)參數(shù)判斷標(biāo)準(zhǔn)加樣系統(tǒng)校準(zhǔn)周期校準(zhǔn)單位定期計量院/有資質(zhì)廠家允許誤差、測量重復(fù)性（高、中、低）JJG646-2006校準(zhǔn)參數(shù)判斷標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng)校準(zhǔn)設(shè)備擴(kuò)增儀校準(zhǔn)周期定期校準(zhǔn)單位校準(zhǔn)參數(shù)判斷標(biāo)準(zhǔn)廠家/光路部分、背景熒光、溫控部分（溫度準(zhǔn)確度、均一性、溫度升降速率）產(chǎn)品說明書計量院測序儀定期廠家緩沖液液路、光路、反應(yīng)溫度產(chǎn)品說明書其他設(shè)備校準(zhǔn)設(shè)備生物安全柜高速冷凍離心機(jī)定期校準(zhǔn)周期校準(zhǔn)單位定期計量院/有資質(zhì)第三方計量院/有資質(zhì)第三方高效過濾器完整性、流入氣流流速、下降氣流流速、氣流模式校準(zhǔn)參數(shù)判斷標(biāo)準(zhǔn)溫度、轉(zhuǎn)速相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品說明書校準(zhǔn)設(shè)備校準(zhǔn)周期校準(zhǔn)單位校準(zhǔn)參數(shù)判斷標(biāo)準(zhǔn)溫控系統(tǒng)(溫濕度計、溫度計、雜交儀)定期計量院/比對溫度、濕度（檢測過程涉及）相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)加樣系統(tǒng)（移液器）定期計量院/有資質(zhì)

允許誤差、測量重復(fù)性（檢測過程涉及）JJG646-2006廠家光路部分、背景熒光、溫控部分（溫度準(zhǔn)產(chǎn)品檢測系統(tǒng)（擴(kuò)增儀）檢測系統(tǒng)（測序儀）定期定期廠家/計量院確度、均一性、溫度升降速率）緩沖液液路、光路、反應(yīng)溫度說明書廠家產(chǎn)品說明書生物安全柜定期定期有資質(zhì)第三方機(jī)構(gòu)高效過濾器完整性、流入氣流流速、下降氣流流速、氣流模式產(chǎn)品說明書高速冷凍離心機(jī)廠家/計量院溫度、轉(zhuǎn)速相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)?

校準(zhǔn)給出校準(zhǔn)因子時，正確引入?

校準(zhǔn)參數(shù)是否齊全?

校準(zhǔn)量程是否覆蓋常用檢測量程?

校準(zhǔn)結(jié)果是否符合檢測要求移液器校準(zhǔn)在100

μl

，500

μl和1000

μl三個校準(zhǔn)點(diǎn)的準(zhǔn)確度和精確度完全一致！校準(zhǔn)數(shù)據(jù)真實(shí)性？43一個醫(yī)院兩次的校準(zhǔn)報告！校準(zhǔn)數(shù)據(jù)真實(shí)性44用于比對的溫度計在比對-20℃時應(yīng)該引入校準(zhǔn)因子！45不符合校準(zhǔn)報告未經(jīng)分析，設(shè)備仍在使用46用于比對的溫度計量程不合適47?

設(shè)備維護(hù)與維修設(shè)備故障如影響了方法學(xué)性能，故障修復(fù)后，可通過以下合適的方式進(jìn)行相關(guān)的檢測、驗(yàn)證（a）

可校準(zhǔn)的項(xiàng)目實(shí)施校準(zhǔn)驗(yàn)證，必要時，實(shí)施校準(zhǔn)（b）

質(zhì)控物檢驗(yàn)，其檢驗(yàn)結(jié)果在允許范圍內(nèi)（c）

與其他儀器或方法比對（d）

以前檢驗(yàn)過的樣品再檢驗(yàn)定性項(xiàng)目：選擇陰性和弱陽性樣品各1份，測量結(jié)果與預(yù)期結(jié)果一致。定量項(xiàng)目：選取5

份樣品，覆蓋測量區(qū)間，至少

4份樣品測量結(jié)果偏倚<

7.5%。?

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對關(guān)鍵耗材、不同批號試劑進(jìn)行驗(yàn)收?外觀檢查：包裝完整性、溫度要求、有效期等?性能驗(yàn)證：不同批號試劑間的差異、重要耗材的抑制物(除非已標(biāo)明不含抑制物）a)定性試劑：選擇陰性和弱陽性的樣品，結(jié)果符合預(yù)期b)定量試劑：5個舊批號試劑檢測過的樣品，覆蓋測量區(qū)間(包括陰性、臨界值、低值、中值和高值)，至少4個樣品測量結(jié)果偏倚<±7.5%，其中陰性和臨界值樣品必須符合預(yù)期c)耗材驗(yàn)收(抑制物)：參照試劑定量檢測性能驗(yàn)證方法和要求?

決定性影響因素?

標(biāo)本濃度、穩(wěn)定性和完整性1.

特定標(biāo)本采集的具體方法和步驟2.

明確規(guī)定標(biāo)本的采集容器要求3.

明確標(biāo)本的采集量4.

明確標(biāo)本采集后送到實(shí)驗(yàn)室檢測所能允許的最大時間間隔5.

明確標(biāo)本采集后，在送往實(shí)驗(yàn)室檢測前的保存方式和條件6.

明確標(biāo)本從采集處運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室過程中所要求的運(yùn)送條件7.

明確標(biāo)本接收時，簽收的程序、拒收的標(biāo)準(zhǔn)和標(biāo)本唯一編號的規(guī)則8.

規(guī)定標(biāo)本在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的短期和長期保存條件和要求9.

制定保證標(biāo)本安全，即如何防止標(biāo)本丟失、調(diào)換、變質(zhì)的措施?

常規(guī)樣本：如外周血、血斑、尿液、唾液、口腔拭子等?

特殊標(biāo)本：如組織、肺泡灌洗液、羊水等52樣本類型對應(yīng)核酸全血細(xì)胞(7×106白細(xì)胞)唾液(2ml)DNA：16~50μgDNA：≈100μg口腔拭子(1個拭子）組織

(5mg或0.5×106細(xì)胞)血片(1.2mm直徑)羊水(1~2×106細(xì)胞）絨毛(10mg)DNA：0.2~2μgDNA：0.5~3μg

總RNA：≈10μgDNA：5~20

ngDNA：7μgDNA：5~100μg胎兒游離DNA/RNAN/A53?

外周血：EDTA抗凝血適用于DNA和RNA抽提，肝素抗凝血適用于染色體核型分析和FISH?

血斑：適合用于DNA檢測但不推薦作為完整RNA檢測的樣本?

尿液：主要用于遺傳代謝病的篩查以及線粒體突變檢測?

口腔拭子：用于RNA分析的口腔脫落細(xì)胞須保存在RNA穩(wěn)定試劑中54?

羊水?

孕周?

標(biāo)本量：中孕期

15-20ml（最初1-2ml棄去，更換注射器）?

需排除母體污染，可疑母體污染的羊水樣本需進(jìn)行培養(yǎng)傳代后再行基因檢測?

產(chǎn)前診斷樣本在最終完成實(shí)驗(yàn)報告前，均應(yīng)備份培養(yǎng)55?

獨(dú)立的前處理區(qū)（切片、脫蠟、水化）?

獨(dú)立的切片機(jī)?

不同患者更換新的刀片56?

溫度、時間?

靶核酸為DNA的標(biāo)本：室溫下需24h內(nèi)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室?

靶核酸為RNA的標(biāo)本：需4h內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室，時間長需加冰塊?

冰凍組織樣本：最好保證其在運(yùn)送過程中不發(fā)生融化?

石蠟包埋組織：可常溫下運(yùn)送?

DBS標(biāo)本：可常溫下運(yùn)送?

運(yùn)送容器?

專用儲存箱（防止丟失、污染、過度振蕩、容器破損、唯一性標(biāo)識丟失或混淆、高溫/低溫/陽光直射導(dǎo)致標(biāo)本變質(zhì)）?

靶核酸為DNA的標(biāo)本：2-8℃保存72h；1-2周可保存-20℃；長期保存應(yīng)-70℃?

靶核酸為RNA的標(biāo)本：應(yīng)-20℃保存；長期保存應(yīng)-70℃?

純化后的DNA：可在TE緩沖液中2-8℃保存1年

,-20℃可長期保存?

純化后的RNA：應(yīng)于TE緩沖液中-70℃保存?

DBS標(biāo)本：室溫：不超過2周；

4℃可保存24個月?

基于組織/細(xì)胞學(xué)形態(tài)基礎(chǔ)的分子檢測項(xiàng)目應(yīng)由具有病理診斷資質(zhì)的醫(yī)師確認(rèn)樣品是否滿足檢測要求（腫瘤種類、腫瘤細(xì)胞數(shù)量、腫瘤組織含量等）59?

通用標(biāo)準(zhǔn)?

標(biāo)本信息不正確、不完整、標(biāo)本類型或標(biāo)本容器與檢驗(yàn)?zāi)康牟环?、?biāo)本量過少、無采集時間、標(biāo)本有明顯污染跡象（如已溢灑）、標(biāo)本采集后超過預(yù)處理時間送檢等?

讓步檢驗(yàn)標(biāo)本接收標(biāo)準(zhǔn)?

樣本量較少，但樣品對臨床很重要或樣品不可替代，且患者重新采樣存在困難?

樣本有輕微乳糜或溶血，患者重新采樣存在困難或由于藥物等影響再次采樣仍會存在乳糜或溶血的，可以接收，予以記錄，并在檢驗(yàn)報告的備注中注明樣本情況60?

檢驗(yàn)程序驗(yàn)證???定量檢測方法和程序的分析性能驗(yàn)證內(nèi)容至少應(yīng)包括精密度、正確度、線性、檢出限等。定性檢測項(xiàng)目驗(yàn)證內(nèi)容至少應(yīng)包括精密度、

特異性、準(zhǔn)確度（方法學(xué)比較或與金標(biāo)準(zhǔn)比較）等。驗(yàn)證結(jié)果應(yīng)經(jīng)過授權(quán)人審核。對產(chǎn)前檢驗(yàn)，在完成分子診斷前應(yīng)保留備份培養(yǎng)物并跟蹤監(jiān)測實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性；在檢驗(yàn)胎兒標(biāo)本前，應(yīng)檢驗(yàn)父母一方或雙方的突變狀態(tài)，宜由同一實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)；如有足夠的標(biāo)本，應(yīng)從兩份不同標(biāo)本中提取

DNA

進(jìn)行雙份檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)了解檢驗(yàn)方法受母體細(xì)胞污染的影響，應(yīng)有程序評估并減少這種影響。應(yīng)有明確和統(tǒng)一的原位雜交（ISH）陽性信號的標(biāo)準(zhǔn)，并建立本實(shí)驗(yàn)室的陽性閾值。組織病理

ISH，應(yīng)結(jié)合組織形態(tài)進(jìn)行結(jié)果判讀，并采用國際通用的評分標(biāo)準(zhǔn)。驗(yàn)證(varification)確認(rèn)（validation)定義對象時間通過提供客觀證據(jù)證明特定的要求已得到滿

通過提供客觀證據(jù)證明預(yù)期的使用或應(yīng)用要求已得到足

滿足CFDA批準(zhǔn)試劑、檢測系統(tǒng)（IVDs）實(shí)驗(yàn)室自建檢測方法（LDTs）1、新開項(xiàng)目前應(yīng)完成驗(yàn)證2、對原有項(xiàng)目的儀器、試劑、方法更新時應(yīng)驗(yàn)證1、正式開展項(xiàng)目之前應(yīng)完成確認(rèn)2、儀器或關(guān)鍵試劑更換、檢測樣品類型變化、實(shí)驗(yàn)室必須重新進(jìn)行性能確認(rèn)準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍，參考區(qū)間，分析靈敏度、分析特異性，臨床驗(yàn)證參數(shù)準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍、參考區(qū)間試劑盒或檢測系統(tǒng)說明書提供的參數(shù)判斷標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室自行建立標(biāo)準(zhǔn)（可參考相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或文獻(xiàn)）?為什么做？-

證明一個生物標(biāo)志物（biomarker）的臨床可用性什么時候做？-

使用新的檢測試劑或系統(tǒng)-

更換檢測試劑或系統(tǒng)???哪里做？-

使用該檢測試劑或系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室誰來做？-

使用該檢測試劑或系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室的檢測人員做哪些？-

定量項(xiàng)目：精密度、正確度、線性區(qū)間、測量和/或可報告范圍、抗干擾能力-

定性項(xiàng)目：測定下限、特異性、準(zhǔn)確度（方法學(xué)比較或與金標(biāo)準(zhǔn)比較）、抗干擾能力63CNAS-CL02-A009?

定性：CNAS-GL039

《分子診斷檢驗(yàn)程序性能驗(yàn)證指南》?

定量：CNAS-GL037

《臨床化學(xué)定量檢驗(yàn)程序性能驗(yàn)證指南》64?

PCR

定量：測量正確度、測量精密度（含測量重復(fù)性和測量中間精密度）、測量不確定度、分析特異性（含抗干擾能力）、分析靈敏度、檢出限和定量限、線性區(qū)間（可報告區(qū)間）?

PCR

定性：方法符合率、檢出限、抗干擾能力、交叉反應(yīng)?

Sanger

測序和

NGS

：方法符合率和檢出限?

結(jié)果一致性的驗(yàn)證?

如果檢驗(yàn)程序適用血清與血漿，檢測時同時使用血清與血漿，應(yīng)進(jìn)行血清與血漿結(jié)果一致性的驗(yàn)證?

腫瘤靶向基因檢測，如果檢驗(yàn)程序包括除腫瘤組織/細(xì)胞以外的樣本（如血漿），應(yīng)進(jìn)行與腫瘤組織結(jié)果一致性的驗(yàn)證?

如果檢驗(yàn)程序高度依賴人工操作或判斷，應(yīng)進(jìn)行不

同操作人員間的驗(yàn)證?

驗(yàn)證參數(shù)的選擇?

根據(jù)檢測項(xiàng)目的預(yù)期用途及生產(chǎn)制造商聲明，選擇對檢測結(jié)果質(zhì)量有重要影響的參數(shù)進(jìn)行驗(yàn)證?

不同技術(shù)平臺、樣本類型以及預(yù)期用途不同時，

所需驗(yàn)證的性能指標(biāo)宜有所側(cè)重?

廠商或研發(fā)者在試劑盒或檢測系統(tǒng)說明書中聲明的性能指標(biāo)CMVDNA?

精密度：檢測結(jié)果濃度對數(shù)值CV≤5%。1*2*3*5。?

正確度：收集20份臨床標(biāo)本，3-5天檢測。計算兩者偏倚。?

線性范圍：400-4×109copies/ml5個濃度，5*3檢測，計算r和差異值。?

檢測限：400附近，檢測20次（分至少3天），17次結(jié)果在可接受范圍內(nèi)。?

特異性：常見病原體和干擾物。配對實(shí)驗(yàn)，每個樣本重復(fù)檢測3次。?

注意：覆蓋不同標(biāo)本類型

全血？血漿？尿液？乳汁？CA16核酸檢測?

重復(fù)性（精密度）：陰性/陽性樣本。1*2*5*3，90%結(jié)果符合或Ct值CV≤5%。?

方法學(xué)比較（符合率）：20例臨床樣本，有陰性、陽性，與測序結(jié)果/其他方法/實(shí)驗(yàn)室比較，計算符合率。?

檢測限（靈敏度）：20個200copies/ml附近樣本，重復(fù)檢測20次，17次檢出。?

特異性（交叉）：其他病原體感染樣本各1例重復(fù)3次檢測。?

熟悉驗(yàn)證系統(tǒng)?

質(zhì)控在控，數(shù)據(jù)才可用?

實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計：標(biāo)本選擇（標(biāo)本類型、標(biāo)本數(shù)量、濃度、不同突變或基因型）試驗(yàn)周期、比對方法的選擇、結(jié)果統(tǒng)計和評價?

交叉反應(yīng)：與檢測對象核酸序列具有同源性、易引起相同或相似臨床癥狀?

樣本來源有限、樣本組成復(fù)雜、目的基因在樣本中含量低或懷疑提取試劑有質(zhì)量問題時需進(jìn)行核酸提取效率驗(yàn)證。懷疑

PCR擴(kuò)增系統(tǒng)有問題，應(yīng)進(jìn)行擴(kuò)增效率驗(yàn)證?

NGS，避免因測序深度過低導(dǎo)致的結(jié)果假陰性或測序深度太高引起的假陽性，應(yīng)進(jìn)行測序深度參考區(qū)間、上機(jī)測序的性能和數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)的性能驗(yàn)證驗(yàn)證要求核酸純度、核酸提取產(chǎn)率、完整性核酸純度

分光光度計測定

A260/280

比值待測樣本A加

入一定體積（小于總體積

10%）已知濃度的待測核酸，待核酸測樣本B加入同體積

核酸溶解液，提取核酸，按

公式核酸提取產(chǎn)率=驗(yàn)證方案提取產(chǎn)率

（A-B）/加入的待測核酸量

×100%計算核酸提取得率，重復(fù)三次測定，計算平均值。核酸完整性核酸提取液進(jìn)行瓊脂糖

凝膠電泳，與待測核酸標(biāo)準(zhǔn)物比較DNA

：A260/280比值在

1.7-1.9；RNA

：A260/280

比值在

1.8-2.0不低于廠家聲明或?qū)嶒?yàn)室制定的標(biāo)準(zhǔn)核酸純度判斷標(biāo)準(zhǔn)核酸提取產(chǎn)率核酸完整性相應(yīng)位置有清晰或彌散條帶，

無明顯降解驗(yàn)證要求包括樣本和標(biāo)準(zhǔn)品的擴(kuò)增效率，只有二者擴(kuò)增效率良好且一致時，定量結(jié)果才準(zhǔn)確接近線性范圍上限濃度的樣本

10倍稀釋

4-6個濃度，最低濃度應(yīng)在線性范圍內(nèi)或?qū)?biāo)準(zhǔn)品按照廠家要求處理，然后進(jìn)行擴(kuò)增。將濃度對數(shù)值作為橫軸，

對應(yīng)的

Ct

值作為縱軸，繪制曲線，計算斜率（K），按公式計算擴(kuò)增效率（E）：E=10-1/K-1驗(yàn)證方案判斷標(biāo)準(zhǔn)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品的擴(kuò)增效率均≥90%且≤110%驗(yàn)證要求驗(yàn)證所用測序儀是否正常運(yùn)行和使用，測序儀的各項(xiàng)性能參數(shù)是否符合要求，

保證測序結(jié)果的可靠性使用質(zhì)控品或參考品

DNA制備的文庫樣本進(jìn)行上機(jī)，記錄設(shè)備運(yùn)行結(jié)束后的參數(shù)，根據(jù)性能參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)評價設(shè)備性能是否符合使用要求驗(yàn)證方案判斷標(biāo)準(zhǔn)儀器的各項(xiàng)性能參數(shù)在廠家聲明的正常范圍內(nèi)則驗(yàn)證通過對所有的檢測變異類型進(jìn)行驗(yàn)證，驗(yàn)證應(yīng)包括數(shù)據(jù)分析時所用到的所有硬件和軟件系統(tǒng)，涵蓋數(shù)據(jù)分析的所有步驟驗(yàn)證要求使用已知突變豐度的質(zhì)控品進(jìn)行測序分析，應(yīng)包含所有的檢測變異類型，

如變異類型包含

SNV，分析樣本至少應(yīng)含有同一位點(diǎn)的多個不同點(diǎn)突變的質(zhì)控品；

如變異類型包含indel，則應(yīng)含有在同一序列上有相近兩個

indel驗(yàn)證方案判斷標(biāo)準(zhǔn)檢測結(jié)果符合率均≥95％即為驗(yàn)證通過◆

5.6.2室內(nèi)質(zhì)量控制?

總則?

應(yīng)制定室內(nèi)質(zhì)量控制程序，質(zhì)量控制程序中應(yīng)有針對核酸檢測防污染的具體措施。?

如檢測過程中對被檢基因組DNA質(zhì)量有規(guī)定時，應(yīng)符合制造商規(guī)定的要求，并保留

DNA質(zhì)量評價記錄。?

定量項(xiàng)目質(zhì)控規(guī)則建議采用多規(guī)則控制或6σ質(zhì)控規(guī)則。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)統(tǒng)計學(xué)質(zhì)控方法建立檢測項(xiàng)目的控制限。?

如何選擇合適的質(zhì)控品？?

如何做室內(nèi)質(zhì)控？?

如何分析、判斷？?

失控后如何處理？?

如何填寫失控分析報告？?

如何進(jìn)行周期性評價？質(zhì)控品類型優(yōu)

點(diǎn)缺

點(diǎn)?

真實(shí)樣本，無基質(zhì)效應(yīng)?

可評價整個檢測過程?

來源有限（尤其罕見陽性標(biāo)本）?

具生物傳染性臨床樣本?

包含所需基因序列（分子項(xiàng)

?

可能存在異質(zhì)性（腫瘤組織）目）?

模擬真實(shí)樣本?

能評價整個檢測過程?

生物安全性??穩(wěn)定性較差細(xì)胞株有限細(xì)胞系?

易于制備，成本低?

明確的基因序列?

具有再生性?

無感染性??非“真實(shí)”樣本人工合成質(zhì)粒和轉(zhuǎn)錄RNA不能監(jiān)測提取過程?

定性檢測?

每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)設(shè)置1個陰性、1個弱陽性和/或陽性質(zhì)控品?

如為基因突變、基因多態(tài)性或基因型檢測，則應(yīng)包括最能反映檢測情況的突變或基因型樣品，每批檢測的質(zhì)控品至少應(yīng)有一種基因突變或基因型，并建議在一定周期內(nèi)涵蓋所有的基因型?

定量檢測?

每次檢測至少使用2個濃度質(zhì)控品、1個陰性質(zhì)控品?

質(zhì)控品數(shù)量：已知陰性和弱陽性質(zhì)控品?

陰性質(zhì)控品：不是指突變陰性的樣本，建議采用無模板對照為陰性質(zhì)控品，包含所有擴(kuò)增步驟，證實(shí)樣本和試劑無核酸污染?

陽性質(zhì)控品：包括至少一個已知突變位點(diǎn)，最好變異百分比接近檢測下限，已證實(shí)低百分比的突變可在每批次中檢出?

無需在每批檢測中包括所有突變類型，只需加入一個已知突變位點(diǎn)的質(zhì)控品。但實(shí)驗(yàn)室最好有多個突變的質(zhì)控品，并在日常檢測中輪流使用?

可以采用人基因組DNA或其它合成的帶有突變的基因組DNA?

需評價NGS特征性QC參數(shù)，包括：覆蓋深度、序列覆蓋一致性、用于評價堿基識別和比對的質(zhì)量值、等位基因百分率、鏈偏倚、GC偏倚以及信號密度衰減等，并且與檢測驗(yàn)證過程中的參數(shù)進(jìn)行比較?

過低的測序覆蓋度會導(dǎo)致漏檢真正的變異，造成假陰性?

不能有效過濾一些不真實(shí)的變異及界定不正確的合子狀態(tài),導(dǎo)致假陽性?

根據(jù)美國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)與基因組學(xué)學(xué)會(ACMG)技術(shù)指南，如全外顯子組的測序，對于先證者標(biāo)本，要求90%～95%區(qū)域的平均測序覆蓋度應(yīng)達(dá)到100X??

對于影響臨床決策的核酸變異結(jié)果，在簽發(fā)報告之前，需要另外采用備選方法（如Sanger測序、SNP芯片等）對檢測結(jié)果進(jìn)行確證82DNA質(zhì)量監(jiān)測?DNA評價常用儀器?

QPCR定量檢測儀：定量準(zhǔn)確，但不能檢測片段長度?

2100/2200生物分析儀：既可以檢測文庫的濃度又可以檢測文庫的片段長度。但文庫濃度定量沒有QPCR定量準(zhǔn)確2100檢測儀7500熒光定量PCR儀Qubit濃度檢測儀?

Qubit濃度檢測儀：對文庫的濃度定量，濃度誤差大，成本較前兩種低?

CT

DNA：

1個陰性+1個弱陽性和/或陽性質(zhì)控品?

HPV基因分型：1個陰性+1個基因型(不固定)?

氯吡格雷CYP2C19基因多態(tài)性：1個純合子+1個雜合子(不固定)?

EGFR基因突變：1個野生型(基于組織分子病理陰性質(zhì)控宜能監(jiān)測包括切片在內(nèi)的全過程)+1個突變型(不固定)?

NGS：1個陰性+1個突變型(不固定)?

HBV

DNA定量檢測：2個濃度質(zhì)控品+1個陰性?

注意低值濃度質(zhì)控品的選擇與檢測下限的關(guān)系(HBV

DNA、高敏HBVDNA)?

局限性?

無法監(jiān)控分析前?

無法監(jiān)控核酸提取過程（質(zhì)粒）?

有效補(bǔ)充?

驗(yàn)證內(nèi)部結(jié)果的一致性大腸癌中同時BRAF和KRAS基因突變？肺癌中同時出現(xiàn)EGFR和KRAS基因突變？?

陽性結(jié)果比例的變化8687室內(nèi)質(zhì)控失控分析流于形式88低值質(zhì)控偏倚15.29%2017年第二次室間質(zhì)評五個項(xiàng)目中有一個不符合，1721標(biāo)本我室結(jié)果4.16，低于平均值4.7，檢測結(jié)果偏低，可能是耗材方面原因，更換耗材后看能否提高擴(kuò)增效率

2017.10HBVDNA低值數(shù)據(jù)偏低，可能為耗材原因，更換后看能否提高效率2017.189實(shí)例HPV高危型檢測，發(fā)現(xiàn)強(qiáng)陽和弱陽質(zhì)控均失控；HPV基因分型也出現(xiàn)類似情況上海市臨床檢驗(yàn)中心90?

參加實(shí)驗(yàn)室間比對應(yīng)按照

CNAS-RL02《能力驗(yàn)證規(guī)則》的要求參加相應(yīng)的能力驗(yàn)證/室間質(zhì)評。

應(yīng)保留參加能力驗(yàn)證/室間質(zhì)評的結(jié)果和證書。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或指定人員應(yīng)監(jiān)控室間質(zhì)評活動的結(jié)果，并在結(jié)果報告上簽字。?對沒有開展能力驗(yàn)證/室間質(zhì)評的檢驗(yàn)項(xiàng)目，應(yīng)通過與其他實(shí)驗(yàn)室（如已獲認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室、使用相同檢測方法的實(shí)驗(yàn)室、使用配套系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室）比對的方式確定檢驗(yàn)結(jié)果的可接受性，并應(yīng)滿足如下要求：（a）

規(guī)定比對實(shí)驗(yàn)室的選擇原則；（b）

樣品數(shù)量：至少

5份，包括正常和異常水平或不同常見基因突變或基因型；（c）

頻率：至少每年

2次；（d）

判定標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)有≥80%的結(jié)果符合要求。分子病理、藥物基因組學(xué)、產(chǎn)前篩查與診斷應(yīng)100%符合。?

當(dāng)實(shí)驗(yàn)室間比對不可行或不適用時，實(shí)驗(yàn)室可以采用其他替代方法?

如樣本的盲法重檢、與其他方法比較或者臨床相關(guān)性的分析判斷檢測結(jié)果的可接受性?比對結(jié)果不一致時，應(yīng)分析原因，并采取有效的糾正措施，及時評估糾正措施的有效性。?

5.6.4檢驗(yàn)結(jié)果的可比性?

實(shí)驗(yàn)室使用兩套及以上檢測系統(tǒng)檢測同一項(xiàng)目時，應(yīng)有比對數(shù)據(jù)表明其檢測結(jié)果的一致性，比對頻次每年至少

1次，樣品數(shù)量不少于

20，濃度水平應(yīng)覆蓋測量區(qū)

間；計算回歸方程，系統(tǒng)誤差應(yīng)<

7.5%。?

應(yīng)定期（至少每年

1次，每次至少

5份臨床樣品）進(jìn)行檢驗(yàn)人員的結(jié)果比對、考核并記錄。比對結(jié)果至少

4個樣品測量結(jié)果偏

倚<7.5%，其中陰性和臨界值樣品必須符合預(yù)期。?

比對記錄應(yīng)由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人審核并簽字，并應(yīng)保留至少

2年。?

5.7.1結(jié)果復(fù)核?

應(yīng)制定定性檢測項(xiàng)目臨界標(biāo)本的復(fù)檢制度，復(fù)檢范圍和結(jié)果報告規(guī)則遵從試劑說明書規(guī)定的要求。?

高通量測序檢測顯示為影響臨床決策的核酸變異結(jié)果，在簽發(fā)報告之前，需要另外采用備選方法（如Sanger測序、SNP芯片等）對其進(jìn)行確認(rèn)。?

5.7.2臨床樣品的儲存、保留和處置?

原始樣品、核酸提取物和/或核酸擴(kuò)增產(chǎn)物應(yīng)規(guī)定保存期，便于復(fù)查。為便于追溯，凝膠圖像和斑點(diǎn)雜交條帶和/或通過掃描、拍照等方式保留的結(jié)果應(yīng)作為技術(shù)記

錄保存，保存期限參照相