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文檔簡介
乙肝梅毒檢測技術(shù)第一頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五綜合產(chǎn)前檢查服務(wù)+檢測孕產(chǎn)婦參加產(chǎn)前檢查服務(wù)檢測前信息HBV檢測梅毒檢測HIV檢測全血細胞計數(shù)和其它檢測取血樣2第二頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五
梅毒的實驗室檢測3第三頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五梅毒病原體為梅毒螺旋體,屬于密螺旋體屬,蒼白密螺旋體蒼白亞種(Treponemapallidumsubspeciespallidum)
蒼白亞種梅毒蒼白螺旋體地方亞種地方性梅毒極細亞種雅司病密螺旋體屬
品他螺旋體品他病第四頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五梅毒血清學試驗基本實驗室設(shè)備檢方法檢測樣本類型必要設(shè)備血清血漿全血RPR/TRUST√√水平旋轉(zhuǎn)儀TPPA√√震蕩儀ELISA√√酶標儀、洗板機POCT檢測√√√無需特殊設(shè)備5第五頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五篩查時間梅毒檢測方法非梅毒螺旋體抗原血清學試驗(RPR或TRUST檢測)梅毒螺旋體抗原血清學試驗(TPPA、ELISA或梅毒快速檢測)檢測時間第一次產(chǎn)檢(孕早期)或下一次產(chǎn)檢時如有必要,孕晚期再次檢測此前無檢測結(jié)果,則在分娩時檢測6第六頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五梅毒的實驗室檢測方法顯微鏡檢測法(診斷技術(shù)):
(1)暗視野顯微鏡檢查(2)鍍銀染色檢查血清學檢測法(篩查技術(shù))
非梅毒螺旋體抗原血清試驗:檢測非特異性抗體:抗心磷脂抗體、即非特異性抗體、反應(yīng)素梅毒螺旋體抗原血清試驗:檢測特異性梅毒螺旋體抗體
第七頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五
梅毒早期診斷的依據(jù)之一是病原學檢測,即在組織或分泌物中檢測到蒼白螺旋體:暗視野顯微鏡鍍銀染色鏡檢梅毒檢測技術(shù)8第八頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五非梅毒螺旋體抗原血清學試驗RPR(快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗)TRUST(甲苯胺紅不加熱血清試驗)VDRL(性病研究實驗室試驗)梅毒螺旋體抗原血清學試驗TPPA(梅毒螺旋體顆粒凝集試驗)ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)POCT(膠體金技術(shù),快速檢測、一站式檢測)梅毒檢測技術(shù)9第九頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五圍產(chǎn)期梅毒檢測方法特點
用于診斷產(chǎn)檢、臨產(chǎn)及分娩的孕產(chǎn)婦是否感染梅毒梅毒血清學檢測——篩查試驗應(yīng)具有的特點具有較高的靈敏度和特異度操作簡單、容易獲得、便宜盡可能在“當日”獲得結(jié)果10第十頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五非梅毒螺旋體抗原血清學試驗
梅毒螺旋體感染可產(chǎn)生非特異性抗體(非梅毒螺旋體抗體)非梅毒螺旋體抗體又稱之為反應(yīng)素,是抗心磷脂等抗原的抗體隨菌體和宿主細胞的類脂質(zhì)抗原量升高除梅毒外,其他醫(yī)學情況會造成非梅毒螺旋體抗原血清學試驗假陽性結(jié)果,包括結(jié)核、瘧疾、妊娠和風濕關(guān)節(jié)炎、狼瘡及硬皮病等自體免疫性疾病11第十一頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五非梅毒螺旋體抗原血清學試驗的特點非梅毒螺旋體抗原血清學試驗:快速、簡便、便宜
敏感性和特異性較高
硬下疳后1-2周變?yōu)殛栃?/p>
可用于篩查樣本
評估對治療的反應(yīng)
鑒別復燃還是再次感染12第十二頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五確保非梅毒螺旋體抗原血清學試驗
質(zhì)量的關(guān)鍵點按照標準操作程序(SOPs)進行操作推薦使用評價特性較好的試劑*按照統(tǒng)一的標準報告結(jié)果開展實驗室質(zhì)控(QC)和參加室間能力驗證(PT)*由中國疾病預(yù)防控制中心性病中心國家參比實驗室提供13第十三頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五非梅毒螺旋體抗原血清學試驗抗體滴度通常與疾病活動度有關(guān)治療后(可能幾個月)非梅毒螺旋體抗原血清學試驗通常轉(zhuǎn)變?yōu)椴环磻?yīng)如果用同一種實驗,相同試驗滴度4倍變化(如從1:16下降到1:4或從1:8上升到1:32)為臨床顯著變化有些病人,抗體滴度可始終處于較低水平,有時可持續(xù)終生(血清固定)注意:病人血清學監(jiān)測應(yīng)在同一個實驗室使用同一種檢測方法(RPR、TRUST)進行連續(xù)多次檢測;RPR和TRUST方法均有效,但檢測的滴度結(jié)果不能直接進行比較14第十四頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五治療后非梅毒螺旋體抗原血清學試驗
抗體滴度變化的臨床意義一期梅毒和二期梅毒:成功治療,抗體滴度應(yīng)3個月后下降2倍6個月后下降4倍一期梅毒:1年后抗體滴度轉(zhuǎn)陰
二期梅毒:2年后抗體滴度轉(zhuǎn)陰晚期梅毒:治療后抗體滴度緩慢下降50%的病人2年后抗體滴度仍為陽性15第十五頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五梅毒螺旋體抗原血清學試驗梅毒螺旋體抗原血清學試驗檢測梅毒螺旋體抗原特異性抗體可用于確認非梅毒螺旋體抗原血清學試驗的陽性結(jié)果,排除其假陽性
陽性結(jié)果可持續(xù)存在,即使治療后仍可為陽性。*梅毒螺旋體抗原血清學試驗與疾病的活動度無關(guān),不能用于鑒別現(xiàn)癥感染還是既往感染,也不能用于判斷療效*一期梅毒治療病人中,15%-25%可在2-3年后轉(zhuǎn)為血清學陰性16第十六頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五妊娠期梅毒檢測
所有孕產(chǎn)婦應(yīng)進行梅毒篩查檢測:
孕期盡早(如果可能,在孕早期時)以及
如果在分娩前/臨產(chǎn)時沒有篩查檢測結(jié)果,在分娩時檢測篩查檢測可應(yīng)用以下任何一類方法:非梅毒螺旋體抗原血清學試驗(滴度)或
梅毒螺旋體抗原血清學試驗
所有篩查檢測結(jié)果陽性的孕產(chǎn)婦都應(yīng)用另一類檢測方法進行復檢確認是否為現(xiàn)癥
梅毒
所有產(chǎn)婦及所生嬰兒出院前,產(chǎn)婦梅毒檢測結(jié)果都應(yīng)記錄在病歷中,以確保需要時給予治療17第十七頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五孕產(chǎn)婦梅毒檢測流程非梅毒螺旋體抗原血清學試驗梅毒螺旋體抗原血清學試驗孕產(chǎn)婦治療后,隨訪監(jiān)測非梅毒螺旋體抗原血清學試驗非梅毒螺旋體抗原血清學試驗梅毒螺旋體抗原血清學試驗每3個月進行非梅毒螺旋體抗原血清學試驗如果需要進行治療報告:非梅毒螺旋體抗原血清學試驗陰性報告:兩種檢測均陽性治療病人報告:
梅毒螺旋體抗原血清學試驗陰性報告:非梅毒螺旋體抗原血清學試驗陽性梅毒螺旋體抗原血清學試驗陰性報告:梅毒螺旋體抗原血清學試驗陽性非梅毒螺旋體抗原血清學試驗陰性陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)陰性反應(yīng)陽性反應(yīng)陽性反應(yīng)或陰性反應(yīng)陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)陽性反應(yīng)第十八頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HIV感染病人的梅毒血清學試驗一些HIV感染病人,其梅毒血清學試驗結(jié)果不典型,包括滴度超常高或超常低滴度不斷變動如果臨床表現(xiàn)提示早期梅毒,而血清學試驗結(jié)果與此不一致,考慮病灶活檢
或暗視野顯微鏡檢查注意:對于大多數(shù)HIV感染病人而言,梅毒血清學試驗是診斷梅毒感染、隨訪觀察療效準確、可靠的檢測方法19第十九頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五梅毒血清學檢測結(jié)果的解釋非梅毒螺旋體試驗梅毒螺旋體試驗臨床參考意義+
-RPR假陽性–考慮其他醫(yī)學狀況*++現(xiàn)癥梅毒-+既往感染或極早期梅毒--排除梅毒感染由于免疫缺陷,也可發(fā)生于艾滋病晚期*包括結(jié)核、瘧疾、風濕性關(guān)節(jié)炎或妊娠。20第二十頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五暴露嬰兒的梅毒檢測21第二十一頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五梅毒暴露嬰兒先天梅毒檢測
母體非梅毒螺旋體和梅毒螺旋體IgG抗體可通過胎盤,所以應(yīng)謹慎地對嬰兒梅毒血清學試驗結(jié)果進行解釋嬰兒需要接受預(yù)防性治療還是規(guī)范的抗梅毒治療應(yīng)根據(jù):母親確診梅毒感染母親治療情況嬰兒梅毒感染的臨床表現(xiàn)、實驗室或放射線檢查結(jié)果母親及嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學試驗滴度水平的比較(盡可能在同一個實驗室使用相同的試驗方法)22第二十二頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五先天梅毒的診斷先天梅毒的診斷標準:梅毒暴露嬰兒具有以下條件之一:
任何先天梅毒臨床表現(xiàn)暗視野顯微鏡檢梅毒螺旋體陽性(+)梅毒螺旋體IgM抗體陽性*RPR/TRUST檢測陽性,滴度比母親分娩前最近一次滴度高4倍及以上RPR/TRUST監(jiān)測隨訪中,任何一次滴度不下降或反而上升滿18月齡后,TPPA檢測陽性*IgM抗體反映近期感染,可幫助鑒別嬰兒先天梅毒,但我國尚不能廣泛開展23第二十三頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五梅毒暴露嬰兒的評估梅毒暴露嬰兒:嬰兒RPR檢測嬰兒RPR檢測不能使用臍帶血,因其易被母體血液污染,從而出現(xiàn)假陽性結(jié)果檢查先天梅毒臨床表現(xiàn):非免疫性水腫、黃疸、肝脾大、鼻炎、皮疹、末端肢體假性麻痹對可疑病灶或體液進行暗視野顯微鏡檢查24第二十四頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五先天梅毒檢測流程
嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學試驗定量檢測梅毒暴露嬰兒母親、嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學試驗定量檢測(應(yīng)同時進行梅毒螺旋體抗原血清學試驗,用于隨訪診斷)組織或分泌物暗視野顯微鏡檢,有條件進行IgM抗體檢測報告母親、嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學試驗檢測滴度水平報告嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學試驗檢測滴度水平報告暗視野顯微鏡檢或IgM抗體檢測結(jié)果陽性陰性沒有梅毒感染的癥狀有梅毒感染的癥狀25第二十五頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五梅毒檢測小結(jié)早期梅毒診斷可根據(jù)在組織或分泌物樣本中通過顯微檢測到蒼白螺旋體而診斷應(yīng)用梅毒血清學試驗進行梅毒篩查非梅毒螺旋體抗原血清學試驗檢測梅毒感染過程中產(chǎn)生的非特異抗體。滴度通常與疾病的活動度有關(guān),因此可用于監(jiān)測對治療的反應(yīng)梅毒螺旋體抗原血清學試驗檢測對抗梅毒螺旋體抗原的特異性抗體,可用于確認臨床診斷或非梅毒螺旋體抗原血清學試驗的陽性結(jié)果,可反映任何階段的梅毒暴露先天梅毒的診斷復雜,應(yīng)根據(jù):母親梅毒感染狀態(tài)母親梅毒治療情況嬰兒梅毒感染的臨床表現(xiàn)、實驗室或X線檢查結(jié)果母親、嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學試驗滴度水平的比較隨訪26第二十六頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HIV和HBV的實驗室檢測第二十七頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HIV和HBV篩查檢測篩查檢測用于診斷產(chǎn)檢、臨產(chǎn)及分娩的孕產(chǎn)婦是否感染HIV和HBVHIV抗體檢測乙肝表面抗原(HBsAg)檢測
篩查檢測應(yīng)具有較高的靈敏度和特異度操作簡單、容易獲得、便宜盡可能在“當日”獲得結(jié)果28第二十八頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五何時使用何種檢測?HIVHBV檢測方法
HIV快速檢測和/或
ELISA
HBsAg檢測如果有條件,其他乙肝
標記物檢測檢測時間第一次產(chǎn)檢(孕早期)或下一次產(chǎn)檢時此前未檢測,分娩時應(yīng)檢測第一次產(chǎn)檢(孕早期)或下一次產(chǎn)檢時此前未檢測,分娩時應(yīng)檢測29第二十九頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五
HIV試驗和檢測30第三十頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HIV檢測:抗體檢測
一個人感染了HIV病毒后,體內(nèi)將產(chǎn)生特異性抗體
對抗HIV病毒*HIV抗體通常在感染后4–6周出現(xiàn),但也有時也會
在感染后3個月才出現(xiàn)從感染HIV病毒到出現(xiàn)特異的HIV抗體的一段時期
稱為“窗口期”標準的HIV診斷檢測是識別HIV抗體**注意:*與其他大多數(shù)疾病不同,HIV抗體沒有保護性作用。31第三十一頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HIV抗體檢測類型快速檢測ELISA免疫印跡(WB)準確性靈敏度特異度非常高幾乎100%>99%非常高幾乎100%>99%因為特異度極高,用于檢測結(jié)果不確定樣本的確認試驗成本++++++結(jié)果報告時間<1小時<3天<10天需要專門實驗室設(shè)備否是是對檢驗人員技術(shù)要求高否是是32第三十二頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HIV檢測:病毒核酸檢測這些檢測檢測HIV感染者血液或血漿中的病毒必須由經(jīng)過專門培訓的實驗室人員操作實驗室需有資質(zhì),并配備專門設(shè)備昂貴,不是針對所有人進行的常規(guī)檢測方法PCR(多聚酶連反應(yīng)法)檢測HIVDNA定性檢測血液中是否含有病毒,用于診斷18月齡內(nèi)嬰兒是否感染HIVHIVRNA定量檢測病毒載量,用于監(jiān)測對抗病毒治療的反應(yīng)33第三十三頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HIV篩查檢測結(jié)果的含義HIV篩查檢測結(jié)果“陰性(-)”:受檢者沒有感染HIV或者受檢者已經(jīng)感染了HIV,但處于窗口期:3個月后再次進行檢測HIV篩查檢測結(jié)果“陽性(+)”:病人可能已經(jīng)感染HIV,但應(yīng)再次重復檢測、另一種方法復檢或確診檢測34第三十四頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HIV確認試驗結(jié)果的含義
如果篩查檢測結(jié)果陽性,兩次重復檢測中1次或2次檢測結(jié)果為陽性,需要進行確認試驗免疫印跡法(WB)確認試驗結(jié)果:-陽性,病人確認感染HIV陰性,受檢者沒有感染HIV不確定,結(jié)果為“不確定”,受檢者必須在4周后再次采血,重復前述所有步驟進行檢測35第三十五頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五中國預(yù)防艾滋病、梅毒和乙肝母嬰傳播HIV檢測流程在產(chǎn)前檢查服務(wù)中開展整合的檢測咨詢所采用的HIV檢測流程36第三十六頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五產(chǎn)時HIV抗體檢測流程中國預(yù)防艾滋病、梅毒和乙肝母嬰傳播HIV檢測流程37第三十七頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五兒童HIV檢測38第三十八頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HIV暴露嬰兒和兒童的HIV抗體檢測
不是所有HIV感染母親所生兒童都會感染HIV,但是如果對12-18個月以內(nèi)的嬰兒進行HIV抗體檢測,所有HIV感染母親所生嬰兒都有可能是HIV檢測結(jié)果陽性。
即使嬰兒并沒有感染HIV
由于母體自身抗體可通過胎盤進入胎兒體內(nèi)母體傳入的抗體可在嬰兒體內(nèi)持續(xù)18個月,所以12-18月齡以內(nèi)的嬰兒不能應(yīng)用抗體檢測方法進行診斷。39第三十九頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五嬰兒感染早期診斷(EID)
HIV病毒檢測(DNA-PCR)HIV病毒檢測(DNA-PCR)檢測細胞內(nèi)的HIV病毒,
能夠檢測低至1–10拷貝前病毒DNA,以及
可在HIV暴露嬰兒出生后6周內(nèi)診斷HIV感染
用于HIV暴露嬰兒HIV感染早期診斷(EID)40第四十頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五應(yīng)用DNA-PCR方法進行
嬰兒感染早期診斷(EID)(1)
如果可以開展HIVDNA-PCR檢測,應(yīng)用干血斑(DBS)在嬰兒6周齡時進行PCR檢測如果PCR檢測結(jié)果陽性盡快再次采血再次進行DNA-PCR檢測如果第二次PCR檢測結(jié)果陽性,嬰兒確定感染HIV如果PCR檢測結(jié)果陰性嬰兒出生后3個月再次進行PCR檢測41第四十一頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五應(yīng)用DNA-PCR方法進行
嬰兒感染早期診斷(EID)(2)出生后3個月再次進行HIVDNA-PCR檢測如果PCR檢測結(jié)果陽性盡快再次采血再次進行DNA-PCR檢測如果第二次PCR檢測結(jié)果陽性,嬰兒確定感染HIV如果PCR檢測結(jié)果陰性,嬰兒視為未感染HIV考慮在嬰兒滿12月齡時進行HIV抗體檢測(如有必要,在18月齡時再次進行檢測)檢測結(jié)果陰性的嬰兒接受母乳喂養(yǎng),必須在停止母乳喂養(yǎng)后6周再次進行PCR檢測,以確保嬰兒沒有在母乳喂養(yǎng)期間感染HIV。42第四十二頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五嬰兒HIV感染早期診斷流程43第四十三頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HIV暴露嬰兒/兒童的HIV抗體檢測所有HIV感染母親所生兒童,在出生后6周或3個月未接受早期感染檢測者,應(yīng)進行HIV抗體檢測。檢測時間:滿12月齡和滿18月齡(必要時,見HIV抗體檢測流程)出生后3個月(接受早期感染檢測者)檢測結(jié)果為陰性的兒童也應(yīng)接受HIV抗體檢測滿18月齡HIV抗體檢測陽性,可確認兒童HIV感染。44第四十四頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HIV暴露兒童HIV抗體檢測流程45第四十五頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HIV感染的實驗室監(jiān)測46第四十六頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HIV感染的實驗室監(jiān)測實驗室監(jiān)測主要用于:決定開始抗病毒治療還是預(yù)防性應(yīng)用抗病毒藥物是否有抗病毒治療指征?效果監(jiān)測抗病毒治療有效嗎?毒性監(jiān)測抗病毒藥物是否引起了其他問題?47第四十七頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五CD4+T淋巴細胞是HIV病毒攻擊的靶細胞CD4+T淋巴細胞檢測用于:決定開始抗病毒治療還是預(yù)防性應(yīng)用抗病毒藥物
為判斷抗病毒治療成功或失敗提供定量依據(jù)
對調(diào)整抗病毒治療方案提供指導孕期每3個月及產(chǎn)后4–6周應(yīng)進行CD4+T淋巴細胞檢測
急性感染時可適當推遲檢測,(因為在急性感染期,CD4+T淋巴細胞通常會下降)CD4+T淋巴細胞檢測48第四十八頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五病毒載量測量血漿中的病毒數(shù)量病毒載量檢測可用于:是抗病毒治療失敗早期、最可靠的標記物監(jiān)測對抗病毒治療的反應(yīng)診斷HIV感染后和孕晚期各進行一次病毒載量檢測病毒載量(RNA-PCR)檢測49第四十九頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五檢測檢測對象原因臨床指導CD4+T淋巴細胞計數(shù)所有HIV感染孕產(chǎn)婦基線評估是否需要抗病毒治療抗病毒治療:CD4<350個細胞/mm3預(yù)防應(yīng)用抗病毒藥物:CD4≥350個細胞/mm3全血細胞計數(shù)(CBC)所有HIV感染孕產(chǎn)婦AZT(疊氮胸苷)可引起貧血或白細胞計數(shù)降低如果Hb<9g/dl,不用使用AZT轉(zhuǎn)氨酶所有HIV感染孕產(chǎn)婦如果ALT或AST升高,NVP(奈韋拉平)肝損害副作用的風險較高如果ALT/AST升高超過3倍,不要使用NVP尿肌酐所有HIV感染孕產(chǎn)婦如果升高,需要調(diào)整抗病毒藥物的劑量需要參考各種抗病毒藥物劑量說明HIV感染孕產(chǎn)婦常規(guī)實驗室監(jiān)測(1)50第五十頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五檢測檢測對象原因臨床指導血糖所有HIV感染孕產(chǎn)婦PI類藥物可致血糖升高糖尿病人避免應(yīng)用PI(蛋白酶抑制劑)類藥物血脂如果使用PI類藥物PI類藥物可致血脂升高如果血脂升高,避免應(yīng)用PI類藥物梅毒血清學試驗所有HIV感染孕產(chǎn)婦篩查是否同時感染梅毒如果梅毒檢測陽性,治療梅毒HBsAg如果需要,丙肝血清檢測所有HIV感染孕產(chǎn)婦篩查HBV/HCV感染HBV暴露嬰兒出生后24小時內(nèi)給予HBV疫苗和免疫球蛋白注射;如果HBV/HCV陽性,避免使用NVP胸部X線片和/或結(jié)核皮膚試驗所有HIV感染孕產(chǎn)婦篩查結(jié)核進一步調(diào)查如果活動結(jié)核,治療如果必要,考慮異煙肼預(yù)防性治療(IPT)HIV感染孕產(chǎn)婦常規(guī)實驗室監(jiān)測(2)51第五十一頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五
HBV感染的檢測52第五十二頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五妊娠期HBV感染篩查標記物描述作用動力學乙肝表面抗原(HBsAg)
感染過程中位于病毒表面的蛋白血液中可檢測到提示感染無法鑒別急性或慢性感染暴露后3–5周后出現(xiàn),持續(xù)到感染消除
所有孕產(chǎn)婦均應(yīng)在孕期盡早接受HBsAg檢測篩查是否感染HBV如果分娩前尚未有檢測結(jié)果,應(yīng)在分娩前盡快進行檢測
如果HBsAg檢測陽性,有條件可考慮進行其他HBV標記物檢測。
注意,暴露嬰兒的處置不受母親其他HBV標記物檢測結(jié)果的影響53第五十三頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五乙肝標記物列表抗原/抗體解釋
臨床意義
HBsAg 潛在感染出現(xiàn)癥狀前數(shù)周或之后數(shù)月可檢測到慢性感染時持續(xù)存在感染HBVHBeAg病毒復制,傳染性高有傳染性抗HBs抗體對HBV免疫(疫苗或既往感染)對HBV免疫抗HBc抗體(總)急性、慢性或既往感染暴露抗HBcIgM抗體急性感染急性感染54第五十四頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五HBV暴露嬰兒的實驗室檢測HBsAg陽性母親所生嬰兒,出生時高效免疫球蛋白應(yīng)用以及接受乙肝疫苗接種,并在完成全部3劑乙肝疫苗接種后的6個月接受HBsAg和抗HBs抗體檢測(即出生后12個月時)結(jié)果解釋:如果HBsAg陽性并持續(xù)6個月,嬰兒慢性感染
如果抗Hbs抗體陽性(>1000IU/ml),嬰兒有免疫保護如果HBsAg陰性和抗HBs抗體<1000IU/ml,嬰兒應(yīng)再次接受3劑乙肝疫苗接種55第五十五頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五要點-HIV
使用快速篩查試驗診斷HIV感染。篩查檢測結(jié)果陽性進行確認試驗以保證結(jié)果的準確性。HIV感染抗病毒治療應(yīng)根據(jù):CD4+T淋巴細胞計數(shù)檢測結(jié)果,反映HIV對免疫系統(tǒng)的影響HIV病毒載量檢測結(jié)果,反映血液中HIV病毒的數(shù)量如果有條件,應(yīng)用PCR方法檢測HIV-DNA診斷嬰兒是否HIV感染兒童滿12-18月齡,HIV抗體檢測方可確認兒童是否感染56第五十六頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五要點--HBV
通過篩查HBsAg診斷HBV感染
如有條件,篩查HBsAg結(jié)果陽性,可進一步檢測其他HBV標記物
HBsAg陽性母親所生嬰兒,出生時接受乙肝疫苗接種,應(yīng)在出生后12個月接受HBsAg和抗HBs抗體檢測57第五十七頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五嬰兒艾滋病感染早期診斷檢測標本采集、運輸及保存的要求臨床檢驗中心:趙翠生第五十八頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五內(nèi)容
干血斑標本的采集
干血斑標本的制作
干血斑標本的保存
干血斑標本的運輸
合格和不合格的干血斑
注意事項
送樣單的規(guī)范填寫第五十九頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五什么是干血斑(DBS)?干血斑是直接用濾紙收集一滴全血進行干燥用于血樣本的長時間儲存DBS是用HIVDNA-PCR方法進行嬰兒HIV感染早期診斷檢測的最佳采血方法HIVDNA和HIV抗體可穩(wěn)定地保存在干血斑中轉(zhuǎn)運方便:無需冷藏60第六十頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五
干血斑(DriedBloodSpotDBS)
使用Whatman903濾紙片,患者的全血制備末梢血直接用于DBS的制作采集用EDTA抗凝的靜脈血混勻滴在濾紙片上制備DBS;
第六十一頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五采集樣本所需要的設(shè)備末梢采血針或靜脈采血酒精棉血樣本采集卡片(濾紙片可密封的塑料袋濕度指示卡干燥劑(1-2g/袋)第六十二頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五采集末梢血DBS采集部位:足弓(幼兒采血點)第六十三頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五采集末梢血DBS成人或1歲以上兒童手指采血點中指或無名指手掌面,非指尖或側(cè)面第六十四頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五采集末梢血DBS用70%乙醇或酒精棉消毒采血部位用消過毒的針頭小心刺破皮膚第六十五頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五采集末梢血DBS棄去第一滴
末梢血第六十六頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五采集末梢血DBS將第二滴血直接點在濾紙片中央的圓圈而不是用毛細管轉(zhuǎn)移血液第六十七頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五采集末梢血DBS大約每孔需要60-80ul全血保證圓圈滴滿每個樣品應(yīng)點滿一張濾紙片的每個孔
第六十八頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五采集抗凝靜脈血DBS
靜脈血充分與EDTA混合采集后立即制備DB血漿與血細胞分層的全血在制備干血斑前,應(yīng)輕柔地上下顛倒采血管(避免血細胞破裂),血液混勻后制備第六十九頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五用移液槍加代濾芯槍頭移取50-80ul血液槍頭對準印圈的中心緩慢將血液滴于濾紙上避免有氣泡應(yīng)滴滿一張濾紙片的每個孔
采集抗凝靜脈血DBS第七十頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五制作及干燥DBS避免觸摸或涂抹血斑室溫空氣中水平干燥至少4個小時,(在潮濕
氣候下至少24小時)避免陽光直曬
在干燥過程中不允許加熱、疊加或?qū)BS接觸其他物體表面DBS上標記受檢者編號、姓名和收集日期第七十一頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五制作及干燥DBS第七十二頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五DBS的保存方法
最好一個樣本一個包裝,多個樣本一個包裝時,樣本間用稱量紙隔開放入可密封塑料袋中
加2包干燥劑
加1片濕度指示卡標記包裝中的內(nèi)容物并密封第七十三頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五DBS的保存方法
避免陽關(guān)暴曬和加熱完整包裝的DBS樣品可在室溫下避光儲存2周2周后的DBS樣品必須存放在-20℃或以下
第七十四頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五NBS的包裝及運輸?shù)谝粚影b好的DBS放入結(jié)實的紙袋中放入對應(yīng)的送樣單將上述兩樣放入郵寄信封中并密封第七十五頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五NBS的包裝及運輸
包裝運輸時避免折壓濾紙片干血斑樣品如果DBS樣品收集后存放在室溫并在2周內(nèi)運送,可常溫下用特快專遞運送已經(jīng)保存在-20℃或以下的樣品,應(yīng)在冷凍條件下運送第七十六頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五血液充分吸收透過濾紙,填滿印圈,不要在一個圈上重復采血,避免觸摸或涂抹血斑合格的DBS第七十七頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五
合格的DBS第七十八頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五原因:1.血液未滲透濾紙或未填滿圓圈前將濾紙移走用毛細管轉(zhuǎn)移血液在取樣前或后用戴手套或不戴手套的手觸摸濾紙,濾紙上粘有洗手液
原因:毛細管或其他銳器移取血液不合格DBS第七十九頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五樣本在干燥小于4小時前即寄出吸附血液過多雙面貼第八十頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五用力擠壓針刺點周圍采血前或后濾紙面沾染洗手液、滑石粉、酒精、化學試劑、殺毒劑、水等將血斑直接加熱在針刺之前未將采血處酒精擦干4.用毛細管轉(zhuǎn)移血液濾紙沾染酒精,洗手液5.過分擠壓采血處不正確地干燥濾紙第八十一頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五同一采血圈多次滴血雙面貼第八十二頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五不合格DBS第八十三頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五注意事項
僅在濾紙的一面采血在一個印圈上不可追加滴血采末梢血時不要將濾紙片壓迫針刺部位采血2個充分吸附的血液的印圈要比5個不完全吸附的印圈要好第八十四頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五早期診斷檢測標本送樣單
此處由標本采集機構(gòu)填寫標本采集機構(gòu)名稱:
省(直轄市、自治區(qū))
地(市、州)
縣(市、區(qū))
嬰兒編號:□□□□□□—□□□—□□□□—□□□—□(同個案登記卡編號)嬰兒母親姓名:
嬰兒姓名:
性別:
出生日期:□□□□年□□月□□日
采樣情況:第
次采血采血時月齡
采血日期:□□□年□□月□采血人:
標本制備人:
送樣人聯(lián)系電話:
送樣人簽字標本送出日期(指標本送至轄區(qū)婦幼保健機構(gòu)的日期):□□□□年□□月□□日第八十五頁,共九十二頁,編輯于2023年,星期五送樣單的填寫標本采集機構(gòu):
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