微生物與人類健康實驗報告-酸奶中的微生物

試驗報告 酸奶微生物的檢測與計數(shù)：對酸奶中的乳酸菌進(jìn)展初步分別和計數(shù)試驗原理：利亞乳桿菌為發(fā)酵劑，局部酸奶中還添加有雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌等益生菌。06l其中CFU〔菌落形成單位〕指單位體積中的細(xì)菌群落總數(shù)，CFU/g指的是每克樣品中含有的細(xì)菌菌落總數(shù)，CFU/ml指的是每毫升樣品中含有的細(xì)菌菌落總數(shù)。通過稀釋涂布平板法，利用MRS培育基，分別得到超市可購酸奶樣品中的CFU／g；通過菌落形態(tài)的觀看，對酸奶中的乳酸菌進(jìn)展初步分別和計數(shù)。試驗材料和用具：1、 培育基〔MRS〕蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母膏5.0g，檸檬酸氫二銨2.0g，葡萄糖20.0g，吐瓊脂15.0--20.0g，蒸餾水1000mL，pH6.2~6.6，121℃，滅菌15min2、 樣品干酪乳桿菌；乳酸菌數(shù)1×106CFU/g球菌；乳雙歧桿菌數(shù)≥4×107CFU/g養(yǎng)樂多：添加干酪乳桿菌，活菌數(shù)1×108CFU/g3、 材料無菌1.5mlEP管、無菌棉棒、mark筆4、 儀器37℃恒溫培育箱、高壓滅菌鍋、電子天平、微量移液器試驗方法與步驟：在超凈臺中，以無菌操作稱取0.1g酸奶樣品，至無菌1.5mLEP管中，以無菌PBS定容至1ml，以微量移液器輕輕反復(fù)吹打，使之充分混勻，制成1:10樣品勻液；以微量移液器吸取100uL1:10900ul無菌PBS的1.5mLEP管中，以微量移液器輕輕反復(fù)吹打，使之充分混勻，制成1:100樣品勻液；依據(jù)步驟2)操作挨次，10倍系列稀釋，獲得不同稀釋度的樣品溶液；依據(jù)待測酸奶樣品的活菌總數(shù)，選擇2個連續(xù)的適宜稀釋度，各以0.1mL參與到MRS平板中進(jìn)展涂布；在MRS6名同學(xué)共同完成3種不同酸奶，各2個連續(xù)稀釋度的涂布；于37℃恒溫低氧倒置培育48h；觀看MRS培育基外表菌落形態(tài)；CFU/g。試驗結(jié)果：〔30-300之外的未經(jīng)準(zhǔn)確計數(shù)〕結(jié)果分析：算可得單位體積中的細(xì)菌群落總數(shù)分別為：光明： 約為4.0×106CFU/g碧悠： 約為1.5×107CFU/g2.1×107CFU/g1×106CFU/g；達(dá)能碧悠風(fēng)味發(fā)酵數(shù)≥4×107CFU/g；養(yǎng)樂多：添加干酪乳桿菌，活菌數(shù)1×108CFU/g。存在明顯的差異，可能緣由有：布到培育基上。樣液本身有大量殘留于容器中，不能被棉簽完全吸取。培育溫度不適合某些菌種生長。依據(jù)資料，保加利亞乳桿菌最適培養(yǎng)溫度為44-45℃，25-35℃生長不良1，嗜熱鏈球菌最適培育溫度為試驗條件為37℃。pH值為6.8〔試驗者試驗設(shè)置pH梯度為：6.5,6.8,7.0〕2，乳酸桿菌的最pH6.2-6.6。能受到較大的抑制。就難以推斷以上假設(shè)是否成立。不過依據(jù)試驗結(jié)果能性，該菌落應(yīng)當(dāng)為保加利亞乳桿菌、干酪乳桿菌等桿菌。之所以不是嗜熱鏈球菌是由于“養(yǎng)樂多”標(biāo)示中沒有提到嗜熱鏈球菌，但是依據(jù)相關(guān)資料，乳桿菌屬在MRS培育基上菌落直徑為3.0mm±1.0mm，嗜熱鏈球1.0±1.0mm，這與“光明”樣品的結(jié)果相沖突，由于占絕大多數(shù)的菌落比另外兩種菌落都要小。小“較小〔和“光明”樣品中的相近，和乳桿菌屬較符合，而稀釋度低的培育徑“微小”的菌落確實是乳桿菌，但某些緣由導(dǎo)致其菌落大小受到限制，可能是要確定試驗結(jié)果產(chǎn)生的真正緣由，只能依靠更專業(yè)的檢測。1百度百科.保加利亞乳桿菌2023-01-18.王建芳等.嗜熱鏈球菌適宜培育條件爭論[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報2023,17〔2〕：56-58.溫建等.不同品牌酸奶活性乳酸菌的檢測[J].山東畜牧獸醫(yī)2023,〔5〕：5-7.思考題解答：1LB培育基明顯是不行行的。比照可以覺察MRS培育基中添加了含鉀、含鎂等的物質(zhì)，應(yīng)當(dāng)是為乳酸菌供給必需的無機鹽，另外隨著乳酸菌的生長生殖培育基的pH值會降低，進(jìn)而抑制其他很多微生物的生命活動，MRS培育基對于pH值也提出了要求。只是MRS培育基中各成分分別的作用是什么還沒能查找到相應(yīng)的信息。的pH值和培育前后的成分變化，推斷其是否與乳酸菌的生命活動相全都；微