多種動(dòng)物共患傳染病-布魯氏菌?。▌?dòng)物疫病防治技術(shù)）

第3-5節(jié)布魯氏菌病能力單元三多種動(dòng)物共患病《動(dòng)物疫病防治技術(shù)》2023/5/252概要布魯氏菌病是由布魯氏菌屬的細(xì)菌引起的一種人畜共患的慢性傳染病。在家畜中，牛、羊、豬最常發(fā)生，并可傳染于人和其他動(dòng)物。臨診特征是生殖器官和胎膜發(fā)炎，導(dǎo)致流產(chǎn)、不育和各種組織的局部病灶。本病廣泛分布于世界各地。在我國人和動(dòng)物中有牛、羊、豬和犬布魯氏菌病存在，特別是西北和東北地區(qū)流行較為嚴(yán)重。2023/5/253病原布魯氏菌屬有6個(gè)種，即馬耳他布魯氏菌、流產(chǎn)布魯氏菌、豬布魯氏菌、林鼠布魯氏菌、綿羊布魯氏菌和狗布魯氏菌。習(xí)慣上稱馬耳他布魯氏菌為羊布魯氏菌，流產(chǎn)布魯氏菌為牛布魯氏菌。各個(gè)種與生物型菌株之間，形態(tài)及染色特性等方面無明顯差別。2023/5/254豬布魯氏菌生物1型和3型易感宿主是豬，對(duì)人有強(qiáng)的致病性。本菌為球狀短桿菌，用病料涂片、染色、鏡檢時(shí)，常單個(gè)排列或密集成堆。成對(duì)，不形成莢膜和芽孢，無鞭毛，不能運(yùn)動(dòng)。革蘭氏染色陰性，姬姆薩染色呈紫色。由于本菌吸收染料過程較慢，較其他細(xì)菌難于著色，所以，常用科茲洛夫斯基染色法染色，布魯氏菌呈紅色，其他細(xì)菌呈綠色。染色的方法是：病料涂片干燥后，滴加2％沙黃液，加熱至蒸汽l～2min，水洗，再滴加1％孔雀綠溶液復(fù)染(不加熱)l～2min，水洗、干燥后鏡檢。2023/5/255布魯氏菌的抵抗力和其他不能產(chǎn)生芽胞的細(xì)菌相似。例如，巴氏滅菌法10～15min殺死，0.1％升汞數(shù)分鐘，1％來蘇兒或2％福爾馬林或5％生石灰乳15min，而直射日光需要0.5～4h。在布片上室溫干燥5d，在干燥土壤內(nèi)37d死亡，在冷暗處，在胎兒體內(nèi)可活6個(gè)月。2023/5/256流行病學(xué)

本病的傳染源是病畜及帶菌者(包括野生動(dòng)物)。最危險(xiǎn)的是受感染的妊娠母畜，它們?cè)诹鳟a(chǎn)或分娩時(shí)將大量布魯氏菌隨著胎兒、胎水和胎衣排出。流產(chǎn)后的陰道分泌物以及乳汁中都含有布魯氏菌。布魯氏菌感染的睪丸炎精囊中也有布魯氏菌存在。人的傳染源主要是患病動(dòng)物，一般不由人傳染于人。在我國，人布魯氏菌病最多的地區(qū)是羊布魯氏菌病嚴(yán)重流行的地區(qū)，從人體分離的布魯氏菌大多數(shù)是羊布魯氏菌。一般牧區(qū)人的感染率要高于農(nóng)區(qū)。患者有明顯的職業(yè)特征。2023/5/257本病的主要傳播途徑是消化道。有實(shí)驗(yàn)證明，通過無創(chuàng)傷的皮膚，使牛感染成功，如果皮膚有創(chuàng)傷，則更易為病原菌侵入。通過結(jié)膜、交配，也可感染。吸血昆蟲可以傳播本病。實(shí)驗(yàn)證明，布魯氏菌在蜱體內(nèi)存活時(shí)間較長，且保持對(duì)哺乳動(dòng)物的致病力，通過蜱的叮咬，可以傳播此病。2023/5/258流產(chǎn)布魯氏菌主要宿主是牛，而羊、猴、豚鼠有一定易感性。馬耳他布魯氏菌，主要宿主是山羊和綿羊，可以由羊傳人牛群，也可由牛傳播于牛，而其他動(dòng)物對(duì)它的易感性則與流產(chǎn)布魯氏菌相同。豬布魯氏菌主要宿主是豬，而對(duì)其他動(dòng)物也同于流產(chǎn)布魯氏菌。綿羊布魯氏菌主要引起公綿羊附睪炎，也可侵犯孕母綿羊?qū)е绿ケP壞死，而對(duì)未孕母綿羊則常是一過性。狗是狗布魯氏菌的主要宿主，牛、羊、豬對(duì)狗布魯氏菌的感受性低。林鼠布魯氏菌對(duì)小鼠的病原性比對(duì)豚鼠強(qiáng)。易感動(dòng)物2023/5/259發(fā)病機(jī)理布魯氏菌侵入牛體后，在幾日內(nèi)到達(dá)侵入門戶附近的淋巴結(jié)內(nèi)，由此再進(jìn)入血液中發(fā)生菌血癥，菌血癥引起體溫升高，其時(shí)間長短不等，菌血癥消失，經(jīng)過長短不等的間歇后，可再發(fā)生菌血癥。侵入血液中的布魯氏菌散布至各器官中，可在停留器官中引起病理變化同時(shí)可能有細(xì)菌由糞、尿中排出。布魯氏菌在胎盤、胎兒和胎衣組織中特別適宜生存繁殖，其次是乳腺組織、淋巴結(jié)(特別是乳腺組織相應(yīng)的淋巴結(jié))、骨骼、關(guān)節(jié)、腱鞘和滑液囊，以及睪丸、附睪、精囊等。

2023/5/2510布魯氏菌進(jìn)入絨毛膜上皮細(xì)胞內(nèi)增殖，產(chǎn)生胎盤炎，并在絨毛膜與子宮黏膜之間擴(kuò)散，產(chǎn)生子宮內(nèi)膜炎。在絨毛膜上皮細(xì)胞內(nèi)增殖時(shí)，使絨毛發(fā)生漸進(jìn)性壞死，同時(shí)產(chǎn)生一層纖維素性膿性分泌物，逐漸使胎兒胎盤與母體胎盤松離。布魯氏菌還可進(jìn)入胎衣中，并隨羊水進(jìn)入胎兒引起病變。由于胎兒胎盤與母體胎盤之間松離，及由此引起胎兒營養(yǎng)障礙和胎兒病變，使母畜可能發(fā)生流產(chǎn)。

2023/5/2511布魯氏菌可寄生在細(xì)胞內(nèi)，能在宿主的巨噬細(xì)胞及上皮細(xì)胞內(nèi)生存發(fā)育。有毒菌株菌體外有蛋白外衣，保護(hù)它在細(xì)胞內(nèi)生存并產(chǎn)生全身傳染。這種能力可使細(xì)菌逃避宿主免疫結(jié)構(gòu)而長期生存。赤蘚醇是布魯氏菌的有力生長刺激物。易感動(dòng)物如牛、綿羊、山羊及豬胎盤內(nèi)的赤蘚醇水平要比人、家兔、大鼠及豚鼠的高。雄性動(dòng)物的生殖器也含有赤蘚醇，對(duì)睪丸內(nèi)傳染局限化有了解釋。2023/5/2512牛感染的臨床癥狀潛伏期2周至6個(gè)月。母牛最顯著的癥狀是流產(chǎn)。流產(chǎn)可以發(fā)生在妊娠的任何時(shí)期，最常發(fā)生在第6至第8個(gè)月，流產(chǎn)時(shí)除在數(shù)日前表現(xiàn)分娩預(yù)兆象征，如陰唇乳房腫大，薦部與脅部下陷，以及乳汁呈初乳性質(zhì)等外，還有生殖道的發(fā)炎癥狀，即陰道黏膜發(fā)生粟粒大紅色結(jié)節(jié)，由陰道流出灰白色或灰色黏性分泌液。2023/5/2513流產(chǎn)時(shí)，胎水多清朗，但有時(shí)混濁含有膿樣絮片。常見胎衣滯留，特別是妊娠晚期流產(chǎn)者。流產(chǎn)后常繼續(xù)排出污灰色或棕紅色分泌液，有時(shí)惡臭，分泌液遲至1-2周后消失。早期流產(chǎn)的胎兒，通常在產(chǎn)前已經(jīng)死亡。發(fā)育比較完全的胎兒，產(chǎn)出時(shí)可能存活但衰弱，不久死亡。2023/5/2514木乃伊胎兒2023/5/2515公牛常見睪丸炎及附睪炎。急性病例則睪丸腫脹疼痛。還可能有中度發(fā)熱與食欲不振，以后疼痛逐漸減退，約3周后，通常只見睪丸和附睪腫大，觸之堅(jiān)硬。臨診上常見的癥狀還有關(guān)節(jié)炎，甚至可以見于未曾流產(chǎn)的牛只，關(guān)節(jié)腫脹疼痛，有時(shí)持續(xù)躺臥。通常是個(gè)別關(guān)節(jié)患病，最常見于膝關(guān)節(jié)和腕關(guān)節(jié)。腱鞘炎比較少見，滑液囊炎特別是膝滑液囊炎則較常見。有時(shí)有乳房炎的輕微癥狀。2023/5/2516感染牛關(guān)節(jié)炎，關(guān)節(jié)腫脹疼痛2023/5/2517常不表現(xiàn)癥狀，而首先被注意到的癥狀也是流產(chǎn)。流產(chǎn)前，食欲減退，口渴，萎頓，陰道流出黃色黏液等。流產(chǎn)發(fā)生在妊娠后第3或第4個(gè)月。有的山羊流產(chǎn)2～3次，有的則不發(fā)生流產(chǎn)，但也有報(bào)道山羊群中流產(chǎn)40％～90％者。其他癥狀有乳房炎、支氣管炎、關(guān)節(jié)炎及滑液囊炎而引起跛行。公羊睪丸炎、乳山羊的乳房炎常較早出現(xiàn)，乳汁有結(jié)塊，乳量可能減少，乳腺組織有結(jié)節(jié)性變硬。綿羊布魯氏菌可引起綿羊附睪炎。

綿羊及山羊感染的臨床癥狀2023/5/2518感染羊陰囊腫大、水腫2023/5/2519最明顯的癥狀也是流產(chǎn)，多發(fā)生在妊娠第4～12周。有的在妊娠第2～3周即流產(chǎn)，有的接近妊娠期滿即早產(chǎn)。早期流產(chǎn)常不易發(fā)現(xiàn)，因母豬常將胎兒連同胎衣吃掉。流產(chǎn)的前兆癥狀常見沉郁，陰唇和乳房腫脹，有時(shí)陰道流出黏性或黏膿性分泌液。流產(chǎn)后胎衣滯留情況少見，子宮分泌液一般在8d內(nèi)消失。少數(shù)情況因胎衣滯留，引起子宮炎和不育。公豬常見睪丸炎和附睪炎。有時(shí)在開始即表現(xiàn)全身發(fā)熱，局部疼痛不愿配種，但通常則是逐漸發(fā)生，即睪丸及附睪的不痛腫脹。較少見的癥狀還有皮下膿腫、關(guān)節(jié)炎、腱鞘炎等，如椎骨中有病變時(shí)，還可能發(fā)生后肢麻痹。豬布魯氏菌病臨床癥狀2023/5/2520公豬睪丸腫脹2023/5/2521皮下膿腫、關(guān)節(jié)炎、腱鞘炎2023/5/25222023/5/2523病理變化牛：孕牛子宮的病變以壞死性胎盤炎為特征。胎兒主要為敗血癥變化。流產(chǎn)之后常繼發(fā)子宮炎，輸卵管和卵巢也常出現(xiàn)病變，乳腺也常受害，表現(xiàn)為間質(zhì)性乳腺炎，淋巴結(jié)、脾臟有程度不同的腫脹。公?？砂l(fā)生化膿一壞死性睪丸炎和附睪炎。羊：胎兒與胎盤的病變與?；鞠嗤?，但淋巴結(jié)、肝和脾的變化較牛明顯，表現(xiàn)為網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)細(xì)胞增生，導(dǎo)致腫大，有時(shí)表現(xiàn)為大量的結(jié)節(jié)性肉芽腫，結(jié)節(jié)中心常出現(xiàn)壞死灶。病公羊也出現(xiàn)睪丸和附睪腫大、堅(jiān)硬，并有多量壞死灶和膿腫。豬：豬流產(chǎn)后子宮黏膜很少發(fā)生化膿性病變，但常有許多灰黃色針頭大到芝麻大的小結(jié)節(jié)，結(jié)節(jié)中央有膿汁或干酪樣物質(zhì)。胎盤布滿出血點(diǎn)，表面覆蓋黃色滲出物。淋巴結(jié)水腫，切面也可見小的結(jié)節(jié)。肝有時(shí)腫大、充血。關(guān)節(jié)的病變和公豬睪丸病變與牛的布魯氏菌病相似。2023/5/2524流產(chǎn)胎盤、水腫及子葉出血、壞死2023/5/25252023/5/25262023/5/25272023/5/25282023/5/25292023/5/25302023/5/25312023/5/2532診斷以流行病學(xué)、癥狀和病變?yōu)閰⒖?；以?xì)菌學(xué)、血清學(xué)反應(yīng)和變態(tài)反應(yīng)為依據(jù)進(jìn)行綜合判定。流行病學(xué)及臨診診斷大批孕畜流產(chǎn)，流產(chǎn)胎兒多為死胎或弱胎，流產(chǎn)后有胎衣滯留現(xiàn)象，流產(chǎn)母畜出現(xiàn)子宮內(nèi)膜炎；公畜發(fā)生睪丸炎、附睪炎；有的病畜出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎、腱鞘炎，馬騾在頸部常發(fā)生腫脹或瘺管等癥狀，就應(yīng)考慮是否有布魯氏菌病發(fā)生。2023/5/2533細(xì)菌學(xué)診斷病料抹片、染色、鏡檢:

流產(chǎn)胎兒、胎衣、分泌物中常有大量細(xì)菌，采集胎衣分泌物、流產(chǎn)胎兒的胃內(nèi)容物、脾、肝、淋巴結(jié)、子宮壞死部分等組織做抹片，用革蘭氏染色法染色見到革蘭氏陰性菌，用柯茲洛夫斯基染色法染色，?？梢姷奖蝗境傻t色的小球桿狀菌，其他細(xì)菌或組織呈綠色。分離培養(yǎng)：采取病料接種于10％馬血清的馬丁瓊脂斜面。如病料有雜菌污染時(shí)，可用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)。接種病料后，37℃培養(yǎng)，每3天觀察一次。如有細(xì)菌生長，挑選可疑的菌落做細(xì)菌鑒定，如抹片、染色、鏡檢。將疑似菌落進(jìn)行純培養(yǎng)，進(jìn)一步做布魯氏菌生物學(xué)特性檢驗(yàn)，用抗血清做玻片凝集試驗(yàn)等。動(dòng)物接種：無菌取胎兒脾、肝、胃內(nèi)容物，加生理鹽水磨碎，取兩只豚鼠，腹腔或皮下注射1～2mL。接種前采血做布魯氏菌凝集反應(yīng)檢查，接種后從第2周開始，每隔7～10天采血一次，做布魯氏菌凝集反應(yīng)，觀察凝集反應(yīng)滴度是否升高，若接種后凝集反應(yīng)血清滴度達(dá)到1：5～1：10或更高時(shí)，即為陽性。同時(shí)撲殺豚鼠，可見淋巴結(jié)腫大，肝、脾腫大，并有灰白色細(xì)小的壞死結(jié)節(jié)。取脾、肝和淋巴結(jié)做細(xì)菌分離培養(yǎng)，若分離培養(yǎng)有可疑菌落，則用已知布魯氏菌陽性血清做凝集反應(yīng)，凝集反應(yīng)為陽性，則可確定為布魯氏菌。2023/5/2534免疫學(xué)診斷用血清學(xué)反應(yīng)和變態(tài)反應(yīng)方法診斷布魯氏菌病。血清學(xué)反應(yīng)方法較多，如凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和全乳環(huán)狀反應(yīng)等，具有較高的特異性和敏感性，臨診上以凝集反應(yīng)應(yīng)用最為廣泛。鑒別診斷：本病的主要臨診癥狀是流產(chǎn)，須與發(fā)生相同癥狀的疾病鑒別，如彎桿菌病、滴蟲病、鉤端螺旋體病、乙型腦炎、沙門氏菌病、飼料中毒等都可能引起流產(chǎn)，必須做細(xì)菌學(xué)檢查和免疫學(xué)試驗(yàn)才能最后確診。2023/5/2535防制本病目前尚無有效的治療方法，應(yīng)以預(yù)防為主。在未感染的動(dòng)物群中，控制本病傳入的最好方法是自繁自養(yǎng)，必須引進(jìn)時(shí)，要嚴(yán)格進(jìn)行檢疫，即先隔離飼養(yǎng)兩個(gè)月，同時(shí)進(jìn)行布魯氏菌病的檢查，全群兩次免疫學(xué)檢查陰性者，方可與原有畜群接觸。清凈的動(dòng)物群還應(yīng)定期檢疫（至少一年1次），一經(jīng)發(fā)現(xiàn)陽性者，應(yīng)立即淘汰。在配種前要對(duì)種公畜進(jìn)行檢疫，確認(rèn)健康者方能應(yīng)用。在本病常發(fā)地區(qū)每年都要進(jìn)行定期預(yù)防接種。2023/5/2536技術(shù)人員為奶牛采血2023/5/2537動(dòng)物群中如果發(fā)現(xiàn)流產(chǎn)，除隔離流產(chǎn)畜、消毒環(huán)境及處理流產(chǎn)胎兒、胎衣外，應(yīng)盡快作出診斷。確診為布魯氏菌病或在動(dòng)物群檢疫中發(fā)現(xiàn)本病，均應(yīng)采取綜合防疫措施，檢疫、隔離、控制傳染源，切斷傳播途徑，培養(yǎng)健康動(dòng)物群及主動(dòng)免疫接種。免疫接種是控制本病的有效措施。已經(jīng)證實(shí)，本病以細(xì)胞免疫為主，在目前情況下，只有免疫接種引起機(jī)體主動(dòng)免疫，才是控制布病的較好措施。豬布魯氏菌2號(hào)弱毒活疫苗（簡稱豬型2號(hào)苗）可供防羊、豬、牛布魯氏菌病之用。該苗毒力穩(wěn)定，使用安全，免疫力好，在生產(chǎn)中已經(jīng)收到了良好效果。馬耳他布魯氏菌5號(hào)弱毒活疫苗（筒稱羊型5號(hào)苗），可用于綿羊、山羊和牛的免疫。2023/5/2538我國用于預(yù)防豬布魯氏菌病的是用豬種布魯氏菌弱毒S2株制成的活疫苗。該苗毒力穩(wěn)定、使用安全、免疫力好，是我國選育的一種優(yōu)良布魯氏菌菌苗。本疫苗適于口服免疫和肌肉注射。

①口服免疫：每頭豬200億菌，間隔1個(gè)月再口服一次。口服菌苗不受懷孕限制，可在配種前1～2個(gè)月進(jìn)行，亦可在懷孕期使用。

②注射免疫：每頭豬200億菌，間隔1個(gè)月再注射一次。妊娠母豬不宜注射。所用菌應(yīng)稀釋后當(dāng)天用完。無論豬是口服還是注射，免疫期為1年。2023/5/2539公共