實驗一分光光度計的性能檢驗

實驗一分光光度計的性能檢驗第一頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五目的（1）學會使用分光光度計。（2）掌握分光光度計的性能檢驗方法。第二頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五實驗原理（1）分光光度計的性能好壞，直接影響到測定結(jié)果的準確性，因此新購儀器及使用一定時間后，均需進行檢驗調(diào)整。（2）利用KMnO4溶液的最大吸收值來檢驗波長的精度。（3）同種厚度的比色皿，由于材料及工藝等原因，往往造成透光率的不一致，從而影響測定結(jié)果，故在使用時需加以選擇配對。第三頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五儀器和試劑（1）722型分光光度計（2）容量瓶：25ml1支；100ml1支（3）吸量管：1ml1支，10ml1支（4）0.2mol/LKMnO4溶液（5）0.02mol/LK2Cr2O7溶液第四頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五操作步驟1

1．比色皿透光率的檢查

以空氣的透光率為100%，則比色皿的透光率應不低于84%，同時在450nm、650nm處測其透光率，各透光率差值應小于5%。2．比色皿的配對性同種厚度的比色皿之間，透光率誤差應小于0.5%。檢查方法：將0.02mol/L的K2Cr2O7溶液5ml稀釋到25ml,分別注入厚度相同的幾個比色皿中。以其中一個比色皿的溶液做空白，在440nm波長處分別測定其它各比色皿中溶液的透光率，然后選擇相差小于0.5%的比色皿使用。第五頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五操作步驟2

3.重現(xiàn)性儀器在同一工作條件下(440)，用同種溶液連續(xù)測定7次，其透光率最大讀數(shù)與最小讀數(shù)之差(極差)應小于0.5%。檢查方法如下:以蒸餾水的透光率為100%,用同一K2Cr2O7溶液連續(xù)測定7次，求出極差，如小于0.5%，則符合要求。第六頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五操作步驟24.波長精度的檢查為了檢查分光系統(tǒng)的質(zhì)量,可用KMnO4溶液的吸光度最大吸收波長525nm為標準,在待檢查儀器上測繪KMnO4溶液的吸收曲線。檢查方法如下:取0.2mol/L的KMnO4溶液0.3ml,用水稀釋到100ml。以水為空白調(diào)零，在460~570nm處，每隔5nm分別測定吸光度，在坐標紙上繪出吸收曲線。若測得的最大吸收波長在525±10nm以內(nèi)，說明該儀器符合使用要求。第七頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五722型分光光度計使用方法

1.開機后需預熱20分鐘。2.波長設定需從短波向長波方向調(diào)整。3.調(diào)零需在透射比模式下將比色皿架置于調(diào)零檔。4.調(diào)滿度時將空白樣品置于光路，按100%T（OA）鍵。5.按方式鍵可實現(xiàn)透射比，吸光度方式轉(zhuǎn)換。6.波長改變后千萬不能忘了再調(diào)到零和調(diào)滿度。第八頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五注意事項

1.待測溶液裝量應超過比色皿2/3，但也不能裝得太滿。2.實驗過程中，注意不要將溶液撒入機器內(nèi)部，如果發(fā)生上述情況，請及時清理干凈。3.比色皿用后，請洗凈后，用95%乙醇浸泡，長期不用，請擦干后，收好。第九頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五300400500600700/nm350525545Cr2O72-MnO4-1.00.80.60.40.2AbsorbanceCr2O72-、MnO4-的吸收光譜350第十頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五數(shù)據(jù)1．比色皿透光率的檢查4個比色皿在450nm、650nm的透光率2．比色皿的配對性4個比色皿中K2Cr2O7溶液在440nm的透光率3.重現(xiàn)性1個比色皿中K2Cr2O7溶液在440nm的透光率4.波長精度的檢查1個比色皿中KMnO4溶液在460～570nm吸光度第十一頁，共十三頁，編輯于2023年，星期五思考題

1．同種比色皿透光度的差異對測定有何影響？2．檢查分光光度計的波長精度及重現(xiàn)性對測定有什么