培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化內(nèi)容全詳解

培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化內(nèi)容全ppt課件當(dāng)前第1頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)1、血球計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)

血球計(jì)數(shù)板是一種專門用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物數(shù)量的儀器，由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面刻有一個(gè)方格網(wǎng)。

當(dāng)前第2頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)大方格中方格小方格當(dāng)前第3頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)

方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格，其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室，供微生物計(jì)數(shù)用。

大方格的長(zhǎng)和寬各為1mm，深度為0.1mm，即1mm×1mm×0.1mm，其容積為0.1mm3；大方格的長(zhǎng)和寬各為2mm，深度為0.1mm，即2mm×2mm×0.1mm，其容積為0.4mm3當(dāng)前第4頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)計(jì)數(shù)室通常也有兩種規(guī)格16×25型：即大方格內(nèi)分為16中格，每一中格又分為25小格25×16型：即大方格內(nèi)分為25中格，每一中格又分為16小格。

不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造，其每一大方格都是由16×25=25×16=400個(gè)小方格組成。當(dāng)前第5頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)2、計(jì)數(shù)16×25型：

一般取四角的四個(gè)中方格（100個(gè)小方格）計(jì)數(shù)25×16型：一般計(jì)數(shù)四個(gè)角和中央的五個(gè)中方格（80個(gè)小方格）的細(xì)胞數(shù)。

當(dāng)前第6頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)3、計(jì)算

以1mm×1mm×0.1mm型為例

計(jì)數(shù)室容積為0.1mm3，則每個(gè)小方格的容積為1/4000mm3

。100個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/100×400×10000×稀釋倍數(shù)

酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)／1mL=80個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/80×400×10000×稀釋倍數(shù)

當(dāng)前第7頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)例1通常用血球計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，若計(jì)數(shù)室為1mm×1mm×0.1mm方格，由400個(gè)小方格組成。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每個(gè)小方格中平均有5個(gè)酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有

個(gè)。2×108當(dāng)前第8頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)例2檢測(cè)員將1mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計(jì)數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由25×16＝400個(gè)小格組成，容納液體的總體積為0．1mm3。

現(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d、e5個(gè)中格80個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻n個(gè)，則上述水樣中約有藍(lán)藻

個(gè)／mL。5n×105當(dāng)前第9頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化一般步驟:(1)提出問(wèn)題：培養(yǎng)液中酵母菌種群是怎樣隨時(shí)間變化的？(2)作出假設(shè)：

。(3)討論探究思路：?jiǎn)栴}(4)制定計(jì)劃：(5)實(shí)施計(jì)劃：(6)分析結(jié)果，得出結(jié)論：(7)表達(dá)和交流：(8)進(jìn)一步探究：當(dāng)前第10頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)當(dāng)前第11頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)怎樣進(jìn)行酵母菌的計(jì)數(shù)？

對(duì)一支試管中的培養(yǎng)液(可定為10ml)中的酵母菌逐個(gè)計(jì)數(shù)是非常困難的，可以采用抽樣檢測(cè)的方法：先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，稍待片刻，待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算計(jì)算中的酵母菌總數(shù)，蓋玻片下，培養(yǎng)液厚度為0.1mm，可算出10ml培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)的公式：4×107x(x為小方格內(nèi)酵母菌數(shù))

當(dāng)前第12頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，建議你將試管輕輕振蕩幾次。這是為什么？本探究需要設(shè)置對(duì)照嗎？如果需要請(qǐng)討論對(duì)照組應(yīng)怎樣設(shè)計(jì)和操作；如果不需要，請(qǐng)說(shuō)明理由。需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎？

目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布，以保證估算的準(zhǔn)確性，減少誤差。

不需要，本實(shí)驗(yàn)旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定條件下的種群數(shù)量變化，只要分組實(shí)驗(yàn)，獲得平均數(shù)值即可。

不用重復(fù)，只要分組實(shí)驗(yàn)獲得平均值即可。重復(fù)是為了使結(jié)果更準(zhǔn)確。本實(shí)驗(yàn)酵母菌種群數(shù)量足夠多，樣本足夠大。其數(shù)據(jù)是80--100個(gè)小方格的平均值，足夠精確。當(dāng)前第13頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)5、怎樣記錄結(jié)果？記錄表怎樣設(shè)計(jì)？如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以計(jì)數(shù)，應(yīng)采取怎樣的措施？第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天第1組第2組第3組------第n組平均值

搖勻試管取1mL酵母菌培養(yǎng)液稀釋幾倍后，再用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)只計(jì)數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數(shù)。7對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)？當(dāng)前第14頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化一般步驟:(1)提出問(wèn)題：培養(yǎng)液中酵母菌種群是怎樣隨時(shí)間變化的？(2)作出假設(shè)：

。(3)討論探究思路：(4)制定計(jì)劃：(5)實(shí)施計(jì)劃：(6)分析結(jié)果，得出結(jié)論：(7)表達(dá)和交流：(8)進(jìn)一步探究：當(dāng)前第15頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化當(dāng)前第16頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)單細(xì)胞真核生物生長(zhǎng)周期短，增殖速度快還可以用酵母菌作為實(shí)驗(yàn)材料研究

探究酵母菌的呼吸方式判斷細(xì)胞的死活（探究膜的透性）當(dāng)前第17頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)種群數(shù)量的變化包括增長(zhǎng)、波動(dòng)、穩(wěn)定、下降等“S”型曲線有一個(gè)K值，即環(huán)境容納量。種群數(shù)量的增長(zhǎng)也受到許多環(huán)境因素（如溫度、培養(yǎng)液的pH、培養(yǎng)液的養(yǎng)分種類和濃度、代謝產(chǎn)物等）的影響。當(dāng)前第18頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時(shí)間的變化關(guān)系實(shí)驗(yàn)原理：種群的數(shù)量變化有一定的規(guī)律。在理想條件下，種群呈“J”型增長(zhǎng)，在有限的環(huán)境下，種群呈“S”型增長(zhǎng)。酵母菌生長(zhǎng)周期短，增殖速度快，在實(shí)驗(yàn)室條件下，用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌，可以觀察酵母菌種群數(shù)量隨時(shí)間變化的情況。當(dāng)前第19頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)血球計(jì)數(shù)板是一種專門用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物的一種儀器。計(jì)數(shù)時(shí)，常采用樣方法。當(dāng)前第20頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)

對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計(jì)數(shù)。當(dāng)前第21頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)當(dāng)前第22頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)第1天當(dāng)前第23頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)第4

天第6天當(dāng)前第24頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)第7

天死亡當(dāng)前第25頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)活菌數(shù)當(dāng)前第26頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)在計(jì)數(shù)前，還應(yīng)有哪些步驟？需注意些什么？培養(yǎng)液配制滅菌接種培養(yǎng)無(wú)菌操作培養(yǎng)條件當(dāng)前第27頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)試管編號(hào)培養(yǎng)液/mL無(wú)菌水/mL酵母菌母液/mL溫度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128

針對(duì)“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化”，有人提出了新的問(wèn)題，某同學(xué)按下表完成了有關(guān)實(shí)驗(yàn)。當(dāng)前第28頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)溫度、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)酵母菌生長(zhǎng)的影響當(dāng)前第29頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)試管編號(hào)培養(yǎng)液/mL無(wú)菌水/mL酵母菌母液/mL溫度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128當(dāng)前第30頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化探究：當(dāng)前第31頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)探究過(guò)程1．提出問(wèn)題：2．作出假設(shè)：3．設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：4．進(jìn)行實(shí)驗(yàn)：5．分析結(jié)果和表達(dá)交流：6．得出結(jié)論：培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的？酵母菌在開(kāi)始一段時(shí)間呈“J”型增長(zhǎng)，隨著時(shí)間的推移，由于資源和空間有限，呈“S”型增長(zhǎng)。連續(xù)培養(yǎng)5天，每天用顯微鏡和血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)出酵母菌種群密度各小組匯報(bào)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合前4天的結(jié)果，畫出酵母種群增長(zhǎng)的曲線圖并進(jìn)行分析。酵母菌在開(kāi)始一段時(shí)間呈“J”型增長(zhǎng)，但隨著時(shí)間的推移，由于資源和空間有限，將呈“S”型增長(zhǎng)，并最終將全部死亡。當(dāng)前第32頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)3．設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：①將10mL無(wú)菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液加入試管中；②將酵母菌接種入試管中的培養(yǎng)液中混合均勻；③將試管在28℃條件下連續(xù)培養(yǎng)5d；④每天取樣計(jì)數(shù)酵母菌數(shù)量；⑤分析結(jié)果，得出結(jié)論。是否設(shè)置對(duì)照組和多組重復(fù)實(shí)驗(yàn)？為什么要連續(xù)培養(yǎng)？如何取樣計(jì)數(shù)？記錄表怎樣設(shè)計(jì)？計(jì)數(shù)時(shí)有哪些注意事項(xiàng)？當(dāng)前第33頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)室（中間大方格）的長(zhǎng)和寬各為1mm，深度為0.1mm，其體積為_(kāi)_____mm3，合_________mL。1mm0.11×10-4血球計(jì)數(shù)板:一種專門計(jì)數(shù)較大單細(xì)胞微生物的儀器當(dāng)前第34頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)室分為25中格（雙線邊）每一中格又分為16小格計(jì)數(shù)室是由___________個(gè)小格組成25×16=400當(dāng)前第35頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)如何計(jì)數(shù)？五點(diǎn)取樣法樣方法每mL培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量==A(平均每個(gè)中格酵母細(xì)胞數(shù))×25×104×稀釋倍數(shù)A1A2A5A3A4當(dāng)前第36頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22點(diǎn)酵母菌數(shù)量變化記錄表當(dāng)前第37頁(yè)\共有39頁(yè)\編于星期三\22