臨床檢驗主管技師全微生物講義

據(jù)《伯杰系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊》（1984）20形態(tài)與染色腸桿菌科的細(xì)菌均為革蘭桿菌，其菌體大小為（1.0～6.0）μm×（0.3～1.0）μ培養(yǎng)和生化反應(yīng)需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在普通瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上均能生長抗原構(gòu)造腸桿菌科細(xì)菌的抗原構(gòu)造復(fù)雜。包括菌體（O）抗原，鞭毛（H）抗原和表面抗原（Vi抗原、K抗原）3種。0抗原和H抗原是腸桿菌科學(xué)分群和分型的依據(jù)。表面抗原為包繞在0抗原外的0S～RH～0腸道桿菌易出現(xiàn)變異菌株，表現(xiàn)為耐藥性或生化反應(yīng)抵抗力不強(qiáng)。加熱60℃，30分鐘即被殺死。不耐干燥，對一般化學(xué)劑敏感。對低溫有耐受（V-P）將腸肝菌＋＋--＋--＋--＋-＋------------*細(xì)菌性痢疾由志賀菌引起其他由大腸埃希菌、變形桿菌及克雷伯菌等條件致病菌可引起泌尿生殖道、傷口等部位的感5形態(tài)與染色為革蘭短桿菌，（1.0～3.0）μm×（0.4～0.7）μm。多數(shù)有周鞭毛，能運(yùn)動，2～3mm。血瓊脂平板上，少數(shù)菌株產(chǎn)生溶血環(huán)。在伊紅亞甲藍(lán)瓊脂上，由于發(fā)酵乳SS生化反應(yīng)性，吲哚、甲基紅、V-P、枸櫞酸鹽試驗（IMViC），有些菌株如堿性異型菌群，微產(chǎn)堿，不產(chǎn)氣，無動力，易與志賀菌。雙糖鐵瓊脂（KIA）上斜面和底層均產(chǎn)酸產(chǎn)氣，H2S，動力、吲哚、尿素（MIU）培養(yǎng)基的生化反應(yīng)為＋＋－。（O）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三種構(gòu)成?，F(xiàn)已知171O，100K56種H0、KH示，其型別的方式是按0:K:H排列，例如O111:K58（B4）:H2。 腸道外以泌尿系統(tǒng)常見，嚴(yán)重與特殊型大腸埃希菌有關(guān)。還有菌血腸道引起腸道的大腸埃希菌有下列五個病原群性腹瀉，伴發(fā)熱、等。嚴(yán)重者可發(fā)展為急性腎衰竭。CDC將大腸菌O157:H7列為常規(guī)檢測項目EHEC的型＞50種，最具代表性的衰的主要病原菌，所以CDC提出應(yīng)將大腸菌0157:H7列為常規(guī)檢測項目。標(biāo)本腸道可糞便；腸道外可根據(jù)臨床情況中段尿液、血液、膿汁、膽氧化酶、發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸氣或只酸、發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣或遲緩發(fā)酵產(chǎn)、不發(fā)酵肌醇、IMViC反應(yīng)為＋＋－－（占94.6%）、脲酶、H2S、苯丙氨酸脫氨酶、硝酸鹽還原陽動力多數(shù)陽性。（ESBLs）的主要產(chǎn)酶株，ESBLs性的抗生素進(jìn)行治療。對ESBLs產(chǎn)酶株所致需要采用碳青酶烯類β-內(nèi)酰胺類抗生素／酶抑制劑或頭霉菌素類進(jìn)行治療。腸道內(nèi)還需做分型、毒素測定或毒力試驗。食物、飲料、水等衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢ETECElekLTST。EHEC的學(xué)鑒定。為痢疾、福氏、鮑氏和宋內(nèi)志賀菌四群，CDC（1989）A、B、C統(tǒng)稱為A、B、C群，將鳥氨酸脫羧酶和β-半乳糖苷酶均陽性的宋內(nèi)志賀菌單列出來。我國以福氏和形態(tài)與染色短小桿菌，（2～3）μm×（0.5～0.7）μm，無莢膜，無芽胞，無鞭毛，有SS生化反應(yīng)志賀菌屬的細(xì)菌分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖（宋內(nèi)志賀菌可遲緩分解乳糖），吲哚試驗，H2S，MR試驗陽性，VP試驗，不產(chǎn)生賴氨酸脫羧酶，不能利用檸檬酸鹽，氧化酶試驗，動力檢驗。OKO抗原和型特異性抗原兩類。根據(jù)抗原構(gòu)造可將志賀菌分為四個群，40余種型（包括亞型）。K抗原存在時能阻斷O抗原與相應(yīng)抗的凝集作用。加熱100℃、60分鐘可消除K抗原對O抗原的阻斷作用，S-R標(biāo)本盡可能在發(fā)病早期及治療前新鮮糞便，選擇膿血便或便，必要時可用肛拭子采離培養(yǎng)取糞便或血部）肛拭標(biāo)本行分離養(yǎng)。一同時接強(qiáng)弱選性不（SS）；藍(lán)培養(yǎng)基。培養(yǎng)18～24h（一）、苯丙氨酸脫氨酶（一）、ONPG（一）（宋內(nèi)志賀菌為陽性）；用志賀菌屬的診斷作群型鑒定。A群痢疾志賀菌，甘露醇，10個型。B群福氏志賀菌，有6個型和X、Y2個變種。C群鮑特志賀菌，15個型。D群宋內(nèi)志賀菌，僅有一個型，有光滑型（S）和粗糙型無動力，不發(fā)酵乳糖，靛基質(zhì)，賴氨酸 志賀鄰單胞菌為陽性。傷寒沙門菌硫化氫和動力陽性，能與沙門菌屬因子（O多價A-F群或Vi）凝集致病因素為侵襲力、內(nèi)毒素及外毒素（A素、神經(jīng)毒）?？梢鹑祟惣?xì)菌性痢疾，其中可分急性、慢性兩種，小兒易引起急性性痢疾。慢性菌質(zhì)平衡。對于性菌痢患者應(yīng)采取綜合性治療措施，如升壓、抗休克、抗呼吸衰竭等。治療細(xì)菌性痢疾形態(tài)與染色本屬菌為（0.7～1.5）μm×（2.0～5.0）μm無芽胞，無莢膜的直桿菌。除SSSS驗。大多數(shù)菌株產(chǎn)生H2S，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣（傷寒沙門菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣）。ViA、B、C……ZO16～O67A02、BO4、DO9沙門菌Ha、b、c…1、2、（3）Vi、M5Vi6030破壞，Vi抗原存在時可O抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生凝集。H致病因素有侵襲力、內(nèi)毒素和腸毒素3種。臨可引起胃腸炎、腸熱癥、菌血癥或敗血癥等。其中腸熱癥即傷寒與副傷寒病。由傷寒與副傷寒沙門菌所引起的慢性發(fā)熱癥狀。為法定傳染病之一食物引起食物的沙門菌以鼠傷寒、腸炎、湯卜遜、豬霍亂、乙型及丙型副傷寒沙門菌為敗血癥標(biāo)本根據(jù)不同疾病采取不同的標(biāo)本進(jìn)行分離與培養(yǎng)。腸熱癥的第1、2周采血液，第2、3周進(jìn)行增菌，48h將培養(yǎng)物移種到血平板和腸道鑒別培養(yǎng)基上，若有細(xì)菌生長取菌涂片染色并報告結(jié)果。對增菌培養(yǎng)物連續(xù)培養(yǎng)7天，仍無細(xì)菌生長時，則報告。清作定量凝集試驗，以檢測患者中抗體的含量，來判斷機(jī)體是否受沙門菌而導(dǎo)致腸熱癥并判別沙加強(qiáng)飲食衛(wèi)生，防止污染食品及水源經(jīng)口，攜帶者的積極治療，皮射死菌苗或口服減毒活菌P.rustigianii。摩根這三個屬的細(xì)菌為腸道寄居的正常菌群，在一定條件下能引起各種，也是醫(yī)源染的重要條件形態(tài)與染色為桿菌。兩端鈍圓，有明顯的多形性，呈球狀或絲狀，有周身鞭毛，運(yùn)動活30℃以上培養(yǎng)條件下不形成鞭毛，無芽胞，無莢膜。10～43℃。在營養(yǎng)瓊脂和血瓊脂平板上普通生化反應(yīng)三個屬菌共同特點是氧化酶，苯丙氨酸脫氨酶陽性的桿菌。三個屬菌的區(qū)變形桿菌屬的種鑒別：普通變形桿菌靛基質(zhì)和麥芽糖均陽性，鳥氨酸脫羧酶；奇異變形桿菌靛基質(zhì)和麥芽糖均，鳥氨酸脫羧酶陽性；產(chǎn)黏變形桿菌靛基質(zhì)和鳥氨酸脫羧酶均，麥芽糖陽性。菌脲酶可可陽性，蕈糖陽性，側(cè)金盞花醇；雷氏普羅威登斯菌脲酶和側(cè)金盞花醇均陽性，蕈糖陰變形桿菌屬普通變形桿菌和奇異變形桿菌引起、、燒傷的。普通變形桿菌還可引起多種及食物；奇異變形桿菌還可引起嬰幼兒腸炎。產(chǎn)黏變形桿菌尚無引起人類的。本菌OHOX19、OX2、0Xk的菌體抗原與某些立克次體有共同抗原，這就是普羅威登斯菌屬本屬菌可引起燒傷、與摩根菌屬本屬細(xì)菌為醫(yī)源染的重要病原菌之一標(biāo)本根據(jù)病情尿液、膿汁、傷口分泌物及嬰兒糞便等行染色后，觀察形態(tài)及染色性。分離培養(yǎng)：將各類標(biāo)本分別接種于血瓊脂平板和麥康凱或伊紅亞甲藍(lán)（EMB）SSEMB35～37℃18～24h1g／L0.25%，這并不影響其他細(xì)菌的分耶爾森菌俗稱桿菌，是烈性傳染病的病原菌。是自然疫源性傳染病，通過直接接觸染疫動物或節(jié)肢動物叮咬而。臨床常見腺、敗血型和肺。4mm。在液體培養(yǎng)基中生長良好，可形成絮狀沉淀和菌膜。底部絮狀沉淀堆積呈“鐘乳石”狀。每毫無動力，不產(chǎn)生靛基質(zhì)，尿素酶試驗。標(biāo)本：主要血液、痰和淋穿刺液求有設(shè)施，防鼠、防蚤和嚴(yán)密的個人防護(hù)措施；用過的實驗器材及物品隨時處理。精與乙醚各半之混合固定液固定10分鐘，待干后染色。一般制片兩張，分別用于染色和亞甲藍(lán)染分培養(yǎng)：菌檢驗分離養(yǎng)驟十分重，分離養(yǎng)時未染標(biāo)本直接接血平經(jīng)28～3℃培養(yǎng)4～48h定。鑒定：根據(jù)菌落特征，細(xì)菌形態(tài)，3%氯化鈉瓊脂上生長呈多形性形態(tài)和肉湯中呈“鐘乳石”狀發(fā)育，KIA結(jié)果利用葡萄糖，不利用乳糖，不產(chǎn)H2S，MIU均為反應(yīng)，丙氨酸脫氨酶試驗呈SS生化反應(yīng)：分解葡萄糖和蔗糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，絕大多數(shù)菌株不發(fā)酵乳糖，硫化氫，脲酶陽性，靛基質(zhì)不定。VP試驗25℃陽性，37℃，鳥氨酸脫羧酶陽性。本菌引起人畜共患病，動物后多無癥狀，通過消化道引起人類腸道性疾病。根據(jù)后部位不同，可分為小腸結(jié)腸炎、末端回腸炎、胃腸炎、闌尾炎和腸系膜淋炎。除腸道5ml、pH7.4，15mmol／L（PBS）10PBS，置4℃7、14、21PBS0.1ml25℃24～48h鑒定：根據(jù)菌落形態(tài)，染色的典型形態(tài)特點，氧化酶試驗，30℃以下培養(yǎng)液暗視野觀察，其動力呈翻滾狀態(tài)，KIAMIU22℃動力陽性，37℃無動力，脲酶試驗陽性，即可（三）假結(jié)核。人類少見，偶見腸道及腸系膜淋炎。30℃，pH6.0～8.0。普通營養(yǎng)瓊脂上易生長，發(fā)育較快，37℃24圓形，中心凸起，呈顆粒狀，灰黃色，半透明的菌落，血瓊脂平板上不溶血，SS尼亞菌屬、愛德華菌屬和歐文菌屬。前四個屬在臨床標(biāo)本中具有較高的分離率。大多屬于條件致2～4mm，不溶血，在腸道選擇培養(yǎng)基上大多數(shù)菌株發(fā)酵乳生化反應(yīng)是屬內(nèi)種的分類依據(jù)。三種枸櫞酸桿菌，只有弗勞地枸櫞酸桿菌靛基質(zhì)，硫化氫陽性，本屬細(xì)菌共有7個種，引起的醫(yī)院日見增多，其中以克雷伯菌最為多見。產(chǎn)酸（催娩）克雷 3℃培養(yǎng)24h，成3～4mm圓形，起，灰色不溶血的菌落有時菌呈現(xiàn)型，用接種環(huán)挑取時呈長狀生化反應(yīng)：本屬的生化反應(yīng)特征是觸酶陽性、脲酶陽性、氧化酶、鳥氨酸脫羧酶。大致病性克雷伯菌亞種引起嬰兒腸炎、、腦膜炎、腹膜炎、外傷、敗血癥和成人醫(yī)源性。本菌對氨芐西林天然耐藥。非ESBLs菌株一般對頭孢菌素、阿米卡星等敏感。對產(chǎn)ESBLsβ-內(nèi)酰胺類抗生素／酶抑制劑或頭霉菌素類進(jìn)行治療。標(biāo)本：腸炎患者糞便，敗血癥者血液，其他根據(jù)病癥分別尿液、膿汁、35℃培16～24h，取腸道選擇鑒別培養(yǎng)基上乳糖發(fā)酵的黏性菌落或血瓊脂上灰白色大而黏的菌落進(jìn)行涂片，染色鏡檢。莢膜的菌，氧化酶反應(yīng)，則移種KIA、MIU、葡萄糖蛋白胨水和枸櫞酸鹽培養(yǎng)基KIA、MIU，結(jié)合甲基紅試驗、V-P屬的鑒定：關(guān)鍵是克雷伯菌屬動力和鳥氨酸脫羧酶均為反應(yīng)25℃生長。腸桿菌屬包括陰溝腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌、聚團(tuán)腸桿菌、日勾維腸桿菌、腸桿菌、中間型腸桿菌及1130℃，營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上即可生長。在普通瓊脂上形成大而濕潤的狀菌落；在血瓊脂板上不溶血；腸道菌選擇培養(yǎng)基上多數(shù)形成乳糖發(fā)酵菌落，生化反應(yīng)：腸桿菌屬的生化反應(yīng)特點是氧化酶，大多數(shù)菌株發(fā)酵乳糖，鳥氨酸脫羧酶（聚團(tuán)腸桿菌除外）和枸櫞酸鹽利用均陽性，DNA酶，河生腸桿菌和中間型腸桿菌不存在人類臨床標(biāo)本中，兩者的區(qū)別是前者精氨酸雙水解酶陽性，后者；5種腸桿菌可用脲酶、鳥氨酸和賴氨酸脫羧酶及致病性本菌屬廣泛分布于自然界，在土壤、水和日常食品中常見。陰溝、產(chǎn)氣、聚團(tuán)、日勾維等腸桿菌常導(dǎo)致條件致病，引起呼吸道、泌尿生殖道，亦可引起菌血癥，引起新生兒腦膜炎。與克雷伯菌的鑒別：產(chǎn)氣腸桿菌、陰溝腸桿菌和克雷伯菌的IMVC結(jié)果均為－－＋＋，區(qū)別是前兩者動力陽性，后者動力。（1）形態(tài)與染色：為細(xì)小桿菌，（0.9～2.0）μm×（0.5～O.8）μm，有周鞭毛，能運(yùn)5%～10%氯化鈉。營養(yǎng)要求不高，在普通營養(yǎng)瓊脂上生長良好，呈白色、紅色或粉紅色菌落，直1.5～2.0mm。各種沙雷菌株可以產(chǎn)生兩種色素：靈菌紅素（非水溶性）和吡羧酸（水溶性）。酸、明膠和鄰位-β-半乳糖苷。本屬的關(guān)鍵生化反應(yīng)是DNA酶陽性、葡萄糖酸鹽陽性。致病性黏質(zhì)沙雷菌可導(dǎo)致呼吸道與泌。液化沙雷菌存在于植物和嚙齒類動物的消化道中，是人的條件致病菌，主要引起呼吸道。微生物檢驗血液、尿液、痰、膿液等標(biāo)本的檢驗程序和方法可參照克雷伯菌。沙雷菌與其他菌屬DNA對多黏菌素和頭孢菌素天然耐藥。山梨醇和DNA酶均。致病性：蜂窩尼亞菌存在于人和動物糞便中，河水和土壤亦有分布，