索氏抽提法實驗報告

索氏抽提法實驗報告一、 實驗?zāi)康牧私馑魇铣樘岱y定粗脂肪含量的原理；掌握索氏抽提法測定粗脂肪含量操作方法；測定脂肪的含量，可以作為鑒別樣品品質(zhì)優(yōu)劣的一個指標。二、 實驗原理脂肪含量的測定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測和核磁共振法等。目前國內(nèi)外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhletextractormethod）是公認的經(jīng)典方法，也是我國糧油分折首選的標準方法。本實驗采用索氏抽提法中的殘余法，即用低沸點有機溶劑（乙醚或石油醚）回流抽提，除去樣品中的粗脂肪，以樣品與殘渣重量之差，計算粗脂肪含量。由于有機溶劑的抽提物中除脂肪外，還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類脂物質(zhì)，因而抽提法測定的結(jié)果只能是粗脂肪。三、 實驗試劑和器材實驗材料油料作物種子（花生）、中速濾紙.

儀器SZF-06A脂肪儀干燥器（直徑15?18cm，盛變色硅膠）不銹鋼鑷子（長20cm）培養(yǎng)皿分析天平稱量瓶恒溫水浴烘箱樣品篩（60目）試劑無水乙醚或低沸點石油醚（A.R.）四、操作步驟準備將濾紙切成4cmX4cm，疊成一邊不封口的紙包，用硬鉛筆編寫順序號，按順序排列在培養(yǎng)皿中。將盛有濾紙包的培養(yǎng)皿移入105±2°C烘箱中干燥2h，取出放入干燥器中，冷卻至室溫；按順序?qū)⒏鳛V紙包稱重（記作a）、（稱量時室內(nèi)相對濕度必須低于70%）。包裝和干燥①將花生研碎，放入105+2C的烘箱中干燥3h，移至干燥器中冷卻至室溫;②稱取約0.5g左右研碎的樣品放入上述已稱重的濾紙包中裝入，封好包口，按順序號依次放入稱量瓶中稱重（記作b）。抽提將裝有樣品的濾紙包用長鑷子放入抽提筒中，向其中注入一次虹吸量的1.67倍的無水乙醚，使樣品包完全浸沒在乙醚中；連接好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恒溫水浴中進行抽提，調(diào)節(jié)水溫為60°C，使冷凝下滴的乙醚成連珠狀（10min-15min虹吸一次），抽提至抽取筒內(nèi)的乙醚用濾紙點滴檢查無油跡為止（約需6?12h，本次實驗1h）；抽提完畢后，用長鑷子取出濾紙包，在通風(fēng)處使乙醚揮發(fā)（抽提室溫以12?25C為宜）。提取瓶中的乙醚另行回收。稱重①待乙醚揮發(fā)之后，將濾紙包置于65C烘箱中干燥15min，放入干燥器冷卻至恒重為止（記作c）。五、實驗結(jié)果粗脂肪含量（％）=b-CX100b-a式中：a：稱量瓶加濾紙包重（g）b：稱量瓶加濾紙包和烘干樣重（g）c：稱量瓶加濾紙包和抽提后烘干殘渣重（g）由實驗得數(shù)據(jù):a：稱量瓶加濾紙包重（g）0.23b：稱量瓶加濾紙包和烘干樣重（g）0.84c：稱量瓶加濾紙包和抽提后烘干殘渣重（g）0.48粗脂肪含量（%）=b-C乂100b-a0.84-0.48e= x1000.84-0.23=59.02%即本次試驗得粗脂肪含量為：59.02%六、注意事項測定用樣品、抽提器、抽提用有機溶劑都需要進行脫水處理。這是因為：第一，抽提體系中有水，會使樣品中的水溶性物質(zhì)溶出，導(dǎo)致測定結(jié)果偏高；第二，抽提體系中有水，則抽提溶劑易被水飽和（尤其是乙醚，可飽和約2%的水），從而影響抽提效率；第三，樣品中有水，抽提溶劑不易滲入細胞組織內(nèi)部，結(jié)果不易將脂肪抽提干凈；試樣粗細度要適宜。試樣粉末過粗，脂肪不易抽提干凈；試樣粉末過細，則有可能透過濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測定結(jié)果；索氏抽提法測定脂肪最大的不足是耗時過長，如能將樣品先回流1?2次，然后浸泡在溶劑中過夜，次日再繼續(xù)抽提，則可明顯縮短抽提時間;YG-II型油分測定器容量大，適合于樣品較多的選種鑒定工作使用，溫度控制在70°C左右，8h可提取完畢；必須十分注意乙醚的安全使用。抽提室內(nèi)嚴禁有明火存在或用明火加熱。乙醚中不得含有過氧化物，保持抽提室內(nèi)良好通風(fēng)，以防燃爆；乙醚中過氧化物的檢查方法是:取適量乙醚，加入碘化鉀溶液，用力搖動，放置1min，若出現(xiàn)黃色則表明存在過氧化物，應(yīng)進行處理后方可使用。處理的方法是：將乙醚放入分液漏斗，先以1/5乙醚量的稀KOH溶液洗滌2?3次，以除去乙醇；然后用鹽酸酸化，加入1/5乙醚量的FeSO4或Na2SO3溶液，振搖，靜置，分層后棄去下層水溶液，以除去過氧化物；最后用水洗至中性，用無水CaCl2或無水Na2SO4脫水，并進行重蒸餾。七、思考與討論如何利用殘余法測定油料作物種子中的粗脂肪含量？答：殘余法測定油料作物種子中的粗脂肪含量，是用低沸點有機溶劑（乙醚或石油醚）回流抽提，除去樣品中的粗脂肪，以樣品與殘渣重量之差，來計算粗脂肪含量。測定過程中為什么需要對樣品、抽提器、抽提用有機溶劑都要進行脫水處理？答：進行脫水處理的原因有三：第一，抽提體系中有水，會使樣品中的水溶性物質(zhì)溶出，導(dǎo)致測定結(jié)果偏高；第二，抽提體系中有水，則抽提溶劑易被水飽和（尤其是乙醚，可飽和約2%的水），從而影響抽提效率；第三，樣品中有水，抽提溶劑不易滲入細胞組織內(nèi)部，結(jié)果不易將脂肪抽提干凈。在實驗過程中安全使用乙酵應(yīng)注意哪些問題？答：抽提室內(nèi)嚴禁有明火存在或用明火加熱。乙醚中不得含有過氧化物，保持抽提室內(nèi)良好通風(fēng)，以防燃爆。測定樣品粒子粗細有什么要求？答：試樣粗細度要適宜。試樣粉末過粗，脂肪不易抽提干凈；試樣粉末過細，則有可能透過濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測定結(jié)果。八、討論經(jīng)過本次利用索氏提取法進行花生中脂肪的粗測定實驗，使我較為熟練的掌握了SZF-06A脂肪儀的使用，并且了解了其工作原理，這對于以后的學(xué)習(xí)是有很大幫助的。經(jīng)查閱資料得，花生中脂肪的含量大概在50%左右，本次實驗的結(jié)果為59.02%，總體來講，本次試驗較為成功，較為粗略地測量出了花生中脂肪的含量。經(jīng)過分析后，得出幾點影響實驗結(jié)果的因素，如下：虹吸現(xiàn)象不發(fā)生。不發(fā)生虹吸現(xiàn)象的原因可能是因為：①儀器虹吸管道頂部有破損，因此水不會出來，空氣會進去，壓強增大，虹吸現(xiàn)象會中斷；②虹吸管道在以前實驗中操作不當(dāng)，有雜質(zhì)殘留在管道中堵塞了管道，影響虹吸現(xiàn)象的發(fā)生；③儀器內(nèi)壓強過大，導(dǎo)致無法造成壓強差，從而不發(fā)生虹吸現(xiàn)象;在使用烘箱烘干剩余殘渣時，烘干時間較短，未將殘渣中存留的水蒸干完全，導(dǎo)致實驗結(jié)果出現(xiàn)誤差；由于有機溶劑的抽提物中除脂肪外，還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類脂物質(zhì)，因而抽提法測定的結(jié)果只能是粗脂肪，即結(jié)果會偏理論值較大；試樣粗細度不夠合適。試樣粉末有些過粗有些過細，研磨不均勻。過粗，脂肪不易抽提干凈；試樣粉末過細，則有可能透過濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測定結(jié)果；在用