第二章藥物的鑒別試驗

第二章藥物的鑒別試驗第一頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一基本要求一、掌握一般鑒別試驗的原理。二、熟悉一般鑒別試驗的基本方法。三、了解一般鑒別試驗的條件和靈敏度第二頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一

是藥檢工作的首項任務(wù)，只有在藥物鑒別無誤的情況下，才能進(jìn)行藥物的雜質(zhì)檢查、含量測定。藥物鑒別試驗是用來證實貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物是否為其所表示的藥物，而非對未知物進(jìn)行定性分析，因其雖有一定的專屬性，但不具備進(jìn)行未知物確證的條件，故不能鑒別未知物。

鑒別試驗的定義鑒別試驗的對象一、概述第三頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一二、藥物鑒別的項目Testitems

性狀項和物理常數(shù)確認(rèn)

鑒別項下規(guī)定的試驗

原料藥鑒別制劑鑒別第四頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一二、藥物鑒別的項目（一）性狀（definition)定義：

反映藥物特有的物理性質(zhì)，如外觀、溶解度和物理常數(shù)等。外觀溶解度物理常數(shù)第五頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一二、藥物鑒別的項目（一）性狀（definition)聚集狀態(tài)、晶形1、外觀色澤臭、味第六頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一卡莫司汀

【性狀】本品為無色或微黃或微黃綠色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無臭。撲米酮

【性狀】本品為白色結(jié)晶性粉末；無臭，味微苦。

卡波姆【性狀】本品為白色疏松狀粉末；有特征性微臭；有引濕性。

第七頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一

極易溶：1份溶質(zhì)在不到1份溶劑中溶解

易溶：1份溶質(zhì)在1份~不到10份溶劑中溶解溶解:1份溶質(zhì)在10份~不到30份溶劑中溶解2、溶解度

略溶:1份溶質(zhì)在30份~不到100份溶劑中溶解

微溶:…..在100份~不到1000份溶劑中溶解極微溶解:在1000份~不到10000份溶劑中溶解

幾乎不溶或不溶：…10000份溶劑中不完全溶

二、藥物鑒別的項目（一）性狀（definition)（反映純度）第八頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一去乙酰毛花苷

本品在甲醇中微溶，在乙醇中極微溶解，在水或氯仿中幾乎不溶丙硫氧嘧啶（抗甲亢）

本品在乙醇中略溶，在水中極微溶解，在氫氧化鈉試液或氨試液中溶解。丙酸氯倍他索

本品在氯仿中易溶，在醋酸乙酯中溶解，在甲醇和乙醇中略溶，在水中不溶。第九頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一3、物理常數(shù):

相對密度、餾程、熔點、比旋度、吸收系數(shù)、折光率、黏度、酸值、碘值、皂化值、羥值3.1、熔點（分為三法）1測定易粉碎的固體藥品3測定不易粉碎的固體藥品(如脂肪、脂肪酸、石蠟、羊毛脂等)。

2測定凡士林或其他類似物質(zhì)。（鑒別與純雜）第十頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一3.2、比旋度：指在一定波長下，偏振光透過1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液時測得的旋光度?？捎糜阼b別藥物、檢查藥物的純度和含量測定。

[α]20D=100α/CL維生素C

【性狀】比旋度取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋使成每1ml中約含0.10g的溶液，依法測定(附錄ⅥＥ)，比旋度為+20.50～

+21.50。第十一頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一摩爾吸收系數(shù)ε=A/CL3.3、吸收系數(shù)

百分吸收系數(shù)（Ch.P收載的方法）E1%1cm=A/CL

替硝唑吸收系數(shù)

取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含12μg的溶液，照分光光度法(附錄ⅣA)，在317nm的波長處測定吸收度，吸收系數(shù)為352～378。第十二頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一

是指依據(jù)藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)或理化特性，通過化學(xué)反應(yīng)來鑒別藥物的真?zhèn)巍hP附錄中有：丙二酰脲類、托烷生物堿類、芳香第一胺類、有機(jī)氟類、無機(jī)金屬類（Na,K,Li,Ca,Ba,Fe.,Al,Zn,Cu,Ag,Hg等）、有機(jī)酸鹽類（水楊酸鹽）、無機(jī)酸鹽類。

（二）一般鑒別試驗

（generalidentificationtest）第十三頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一１．有機(jī)氟化物６．無機(jī)酸根２．有機(jī)酸鹽３．芳香第一胺５．無機(jī)金屬鹽４．托烷生物堿類藥品第十四頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一1.有機(jī)氟化物有機(jī)氟氧瓶燃燒無機(jī)氟離子pH4.3

茜素氟藍(lán)硝酸亞鈰藍(lán)紫色絡(luò)合物例：氟康唑（抗真菌）【鑒別】(1)取本品，加乙醇制成每1ml中含200μg的溶液，照分光光度法(附錄ⅣA)測定，在261nm與267nm的波長處有最大吸收，在264nm的波長處有最小吸收。(2)本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照品的圖譜一致。(3)本品顯有機(jī)氟化物的鑒別反應(yīng)(附錄Ⅲ)。第十五頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一2.有機(jī)酸鹽(1)水楊酸水楊酸+FeCl3

中性條件弱酸性條件紅色配位化合物紫色配位化合物例：水楊酸鎂

【鑒別】(1)取含量測定項下的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定。在296nm的波長處有最大吸收。(2)本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集60圖）一致。

(3)本品的水溶液顯鎂鹽與水楊酸鹽的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。

第十六頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一(2)酒石酸鹽供試品溶液（中性）+氨制硝酸銀水浴中

銀鏡例：酒石酸美托洛爾（降血壓）

【鑒別】(1)取本品，加乙醇制成每1ml中含20μg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在224nm的波長處有最大吸收。

(2)取本品約0.3g，置潔凈的試管中，加水10ml溶解，加硝酸銀試液過量，即生成白色沉淀，滴加氨試液恰使沉淀溶解后，將試管置水浴中加熱，銀即游離并附在管的內(nèi)壁成銀鏡。第十七頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一3.芳香第一胺類供試品+

稀鹽酸亞硝酸鈉堿性-萘酚試液紅色到猩紅色例：氨苯砜（）【鑒別】(1)本品顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）

(2)取本品，加甲醇制成每1ml中含5μg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在261nm與296nm的波長處有最大吸收。其吸收度分別為0.35～0.38與0.59～0.62。第十八頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一4.托烷生物堿類

此類生物堿中具有莨菪酸結(jié)構(gòu)，有Vitali反應(yīng),顯紫色。

例：氫溴酸山莨菪堿

【鑒別】

(1)本品顯托烷生物堿類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）(2)本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集287圖）一致。(3)本品的水溶液顯溴化物的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。第十九頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一

5.無機(jī)金屬鹽（Na,K,Ca)

焰色反應(yīng)：Na顯鮮黃色；K顯紫色；Ca顯磚紅色

銨鹽：

供試品+NaOH

氨臭使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍(lán)使硝酸亞汞試液濕潤的濾紙顯黑色例：氨芐西林鈉

【鑒別】(1)在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液的主峰保留時間應(yīng)與對照品溶液的主峰保留時間一致。(2)取本品0.25g，加水5ml溶解，加2mol/L醋酸溶液0.5ml，搖勻后，于冰浴靜置10分鐘，用垂熔漏斗濾取析出物，用丙酮－水(9:1)混合溶液2～3ml洗滌，置60℃干燥30分鐘，照紅外分光光度法（附錄ⅣC）測定。本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與氨芐西林三水物的對照圖譜（光譜集658圖）一致。

(3)本品顯鈉鹽的火焰反應(yīng)（附錄Ⅲ）。第二十頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一6.無機(jī)酸根氯化物：Cl-+Ag+

AgCl

乳白色硫酸鹽：SO42-+Ba2+

BaSO4

白色例1：鹽酸妥卡尼【鑒別】(1)取本品約50mg，加水4ml溶解后，加鹽酸溶液(9→100)1ml、重氮對硝基苯胺試液2ml、氫氧化鈉試液4ml與正丁醇2ml，振搖，靜置俟分層，正丁醇層顯紅色。

(2)本品的水溶液顯氯化物的鑒別反應(yīng)(附錄Ⅲ)。硫酸特布他林

第二十一頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一6.無機(jī)酸根例2：硫酸特布他林（呼吸道解痙）

【鑒別】(1)取本品約1mg，置試管中，加水1ml溶解，加緩沖液(pH9.5)(取二羥甲基氨基甲烷36.3g，加水溶解并稀釋至1000ml，用1mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至9.5)5ml，加新鮮制備的2％4-氨基安替比林溶液0.5ml及新鮮制備的鐵氰化鉀溶液(2→25)2滴，混和，置水浴中加熱，溶液顯紫紅色。(2)取本品，加0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含0.1mg的溶液，照分光光度法(附錄ⅣA)測定，在276nm的波長處有最大吸收。(3)本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照品的圖譜一致(附錄ⅣC)，如不一致時，再取本品適量，溶于無醛甲醇中，置水浴蒸干后測定。(4)本品的水溶液顯硫酸鹽的鑒別反應(yīng)(附錄Ⅲ)。第二十二頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一（三）專屬鑒別試驗(specificidentificationtest)

是證實某一種藥物的依據(jù)，是根據(jù)每一種藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異或理化性質(zhì)的不同，選用某些特有的靈敏的定性反應(yīng)，來鑒別藥物的真?zhèn)巍?/p>

1）化學(xué)鑒別法2）光譜鑒別法3）色譜法4）生物學(xué)法方法第二十三頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一三、鑒別方法（一）化學(xué)鑒別法

三氯化鐵呈色反應(yīng)(Ar-OH,Ar-OCOCH3)

異羥戊酸鐵反應(yīng)(Ar-COOH;-COOR)

1.顯色反應(yīng)鑒別法茚三酮呈色反應(yīng)(脂肪氨基，α－氨酸）重氮化-偶合呈色反應(yīng)(Ar-NH2;-NHCOR)

氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng)與金屬離子的沉淀反應(yīng)第二十四頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一與硫氰化鉻銨的沉淀反應(yīng)其它沉淀反應(yīng)(如生物堿沉淀劑）

例：呋塞米（速尿）

【鑒別】(1)取本品約25mg，加水5ml，滴加氫氧化鈉試液使恰溶解，加硫酸銅試液1～2滴，即生成綠色沉淀。(2)取本品25mg，置試管中，加乙醇2.5ml溶解后，沿管壁滴加對二甲氨基苯甲醛試液2ml，即顯綠色，漸變深紅色。

(3)取本品，加0.4％氫氧化鈉溶液制成每1ml中含5μg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在228nm與271nm的波長處有最大吸收。

2.沉淀生成鑒別法

第二十五頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一

藥物本身在可見光下發(fā)射熒光藥物溶液加硫酸后在可見光下發(fā)射熒光

3.熒光反應(yīng)鑒別法藥物與溴反應(yīng)后，在可見光下發(fā)出熒光藥物與間苯二酚溴反應(yīng)后，發(fā)射出熒光藥物其它反應(yīng)后，發(fā)射出熒光

制備衍生物：藥物＋試劑具有熒光的衍生物第二十六頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一例：硫酸奎寧

【鑒別】(1)取本品約20mg，加水20ml溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使成酸性，即顯藍(lán)色熒光。

(2)取鑒別(1)項剩余的溶液5ml，加溴試液3滴與氨試液1ml，即顯翠綠色。(3)取鑒別(1)項剩余的溶液5ml，加鹽酸使成酸性后，加氯化鋇試液1ml，即發(fā)生白色沉淀。(4)本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集488圖）一致。第二十七頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一

①胺類、酰脲類、酰胺類藥物經(jīng)強(qiáng)堿處理生成氨氣(NH3

；NH(C2H5)2)

②含硫藥物經(jīng)強(qiáng)酸處理后，加熱，生成硫化氫氣體(H2S+Pb2+PbS+2H+)

③含碘有機(jī)藥物，加熱，生成紫色碘蒸汽含醋酸酯和乙酰胺類藥物酸水解后加乙醇可產(chǎn)生乙酸乙酯4.氣體生成反應(yīng)鑒別法第二十八頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一例：氯氮平

【鑒別】(1)取本品約100mg，加碳酸鈉等量攪拌均勻，置干燥試管中灼燒，管口覆以用1％1,2-萘醌-4-磺酸鈉溶液濕潤的試紙，試液顯紫藍(lán)色。

(2)本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集504圖）一致。

第二十九頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一制備衍生物測定熔點法

藥物＋試劑新化合物有一定mp;

藥物酸化或堿化生成游離酸或堿。操作繁瑣費時間，應(yīng)用較少。m.p.約182℃（分解）例：縮氨基脲的生成苯丙酸諾龍苯丙酸諾龍縮氨脲H2NCONHNH2第三十頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一（二）光譜鑒別法

測定最大吸收波長，或同時測定最小吸收波長規(guī)定濃度的供試液在最大吸收波長測定吸收度

1.紫外光譜鑒別法規(guī)定吸收波長和吸收系數(shù)法規(guī)定吸收波長和吸收度比值法經(jīng)化學(xué)處理后,測定其反應(yīng)產(chǎn)物吸收光譜特性

第三十一頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一例：維生素Ｂ2

【鑒別】(1)取本品約1mg，加水100ml溶解后，溶液在透射光下顯淡黃綠色并有強(qiáng)烈的黃綠色熒光；分成二份，一份中加無機(jī)酸或堿溶液，熒光即消失；另一份中加連二亞硫酸鈉結(jié)晶少許，搖勻后，黃色即消褪，熒光亦消失。

(2)取含量測定項下的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在267nm、375nm、與444nm的波長處有最大吸收。375nm波長處的吸收度與267nm波長處的吸收度的比值應(yīng)為0.31～0.33；444nm波長處的吸收度與267nm波長處的吸收度的比值應(yīng)為0.36～0.39。第三十二頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一

壓片法2.紅外光譜鑒別法糊法膜法溶液法例：棕櫚氯霉素【鑒別】(1)取本品，加無水乙醇制成每1ml中含20μg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在271nm的波長處有最大吸收，其吸收度為0.35。(2)取本品（Ａ晶型或Ｂ晶型），用糊法測定，其紅外光吸收圖譜應(yīng)與同晶型對照的圖譜（光譜集37圖或38圖）一致。(3)取本品約0.1g，加乙醇制氫氧化鉀試液2ml使溶解，注意防止乙醇揮散，置水浴中加熱15分鐘，溶液顯氯化物的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。

第三十三頁，共三十六頁，編輯于2023年，星期一

TLC法（Rf樣＝Rf對）

3.色譜鑒別法

PC法

HPLC法（tR樣＝tR對