第十章分枝桿菌屬諾卡菌屬放線菌屬鑒定

第十章分枝桿菌屬諾卡菌屬放線菌屬鑒定第一頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一第二頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一第十章分枝桿菌屬、諾卡菌屬、放線菌屬鑒定返回總目錄第三頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一本章內(nèi)容第一節(jié)分枝桿菌屬12第三節(jié)放線菌屬3第二節(jié)諾卡菌屬第四頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一學(xué)習(xí)目標(biāo)及重點(diǎn)學(xué)習(xí)目標(biāo)：1.掌握結(jié)核分枝桿菌生物學(xué)特征，痰涂片抗酸染色及報(bào)告。2.熟悉結(jié)核菌素試驗(yàn)的臨床意義；結(jié)核分枝桿菌和麻風(fēng)分枝桿菌；星形諾卡菌的鑒別要點(diǎn)，諾卡菌與分枝桿菌、棒狀桿菌的鑒別。3.了解結(jié)核分枝桿菌的致病物質(zhì)；麻風(fēng)分枝桿菌致病性；放線菌屬的生物學(xué)特性、致病及免疫性本章重點(diǎn)：★結(jié)核分枝菌的生物學(xué)特性、培養(yǎng)特性★結(jié)核分枝菌的微生物學(xué)檢驗(yàn)★結(jié)核分枝菌與其他分枝菌的鑒別第五頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一第一節(jié)分枝桿菌屬分枝桿菌屬（Mycobacterium）概述是一類(lèi)細(xì)長(zhǎng)彎曲的桿菌，因有分枝生長(zhǎng)的趨勢(shì)而得名主要特點(diǎn)細(xì)長(zhǎng)彎曲，分枝狀生長(zhǎng)細(xì)胞壁含有大量脂質(zhì)（分枝菌酸）常用抗酸染色鑒定，呈抗酸染色陽(yáng)性（紅色）引起疾病多呈慢性，且伴肉芽腫第六頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一一、結(jié)核分枝菌(一)生物學(xué)性狀1.形態(tài)與染色：G+（不易著色），細(xì)長(zhǎng)略彎，分枝狀，有莢膜，抗酸染色陽(yáng)性。菌體外有莢膜2.培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)要求較高，最適pH6.5～6.8，在羅氏（Lowenstein-Jensen，L-J）培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好生長(zhǎng)緩慢，14～18h分裂1次，在固體培養(yǎng)基上2～5w才出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的菌落典型菌落為粗糙型，表面干燥呈顆粒狀，不透明，乳白色或淡黃色，如菜花樣第一節(jié)分枝桿菌屬第七頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一結(jié)核菌抗酸染色結(jié)果結(jié)核菌菌落第一節(jié)分枝桿菌屬第八頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一一、結(jié)核分枝菌３.生化反應(yīng)不發(fā)酵糖類(lèi)，觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性，而熱觸酶試驗(yàn)陰性——加熱68℃散失活性（區(qū)別非結(jié)核菌）煙酸合成試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)、吡嗪酰胺試驗(yàn)均陽(yáng)性，可與牛型結(jié)核分枝菌鑒別４.抵抗力對(duì)乙醇、濕熱、紫外線、抗結(jié)核藥物（鏈霉素、異煙肼、利福平等）敏感對(duì)干燥、酸（3%HCl或6%H2SO4)或堿（4%NaOH)、堿性染料（孔雀綠、結(jié)晶紫）、青霉素等抗生素等有抵抗力第一節(jié)分枝桿菌屬第九頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一一、結(jié)核分枝菌５.變異性（１）形態(tài)結(jié)構(gòu)變異：結(jié)核桿菌的L型：顆粒狀（Much顆粒——病灶中革蘭陽(yáng)性非抗酸性）、絲狀（２）毒力變異：卡介苗(BCG)：Calmette和Guérin將牛型分枝桿菌經(jīng)13年230次傳代而獲得的減毒菌株——活疫苗（３）耐藥性變異：耐異煙肼及其他抗結(jié)核藥物的結(jié)核菌株日益增多第一節(jié)分枝桿菌屬第十頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一一、結(jié)核分枝菌（二）微生物檢驗(yàn)1.標(biāo)本：根據(jù)感染部位的不同來(lái)采集不同的標(biāo)本，最常用痰液標(biāo)本2.標(biāo)本前處理目前有酸（4%HCl）處理和堿（4%NaOH）處理兩種方法3.檢驗(yàn)程序第一節(jié)分枝桿菌屬第十一頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一標(biāo)本核酸檢測(cè)接種固體培養(yǎng)基可疑菌落涂片抗酸染色鏡檢抗體檢測(cè)慢性生長(zhǎng)菌快速生長(zhǎng)菌菌種鑒定

標(biāo)本前處理接種液體培養(yǎng)基接種小白鼠豚鼠臟器涂片鏡檢抗酸染色鑒定試驗(yàn)檢驗(yàn)程序第一節(jié)分枝桿菌屬第十二頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一一、結(jié)核分枝菌4.形態(tài)學(xué)檢查（高壓滅菌后進(jìn)行）（1）直接涂片染色鏡檢（2）濃縮集菌涂片檢查法（3）熒光染色：觀察形態(tài)黃綠色、橙色熒光（4）初步報(bào)告：檢出抗酸分枝桿菌（結(jié)核桿菌？）第一節(jié)分枝桿菌屬第十三頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一報(bào)告方式抗酸染色鏡檢結(jié)果-仔細(xì)檢查300個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌±300個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~2條抗酸菌＋100個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌2＋10個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌3＋每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌4＋每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)9條以上抗酸菌一、結(jié)核分枝菌（5）報(bào)告方式第一節(jié)分枝桿菌屬第十四頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一一、結(jié)核分枝菌5.分離培養(yǎng)

L-J斜面或平板：生長(zhǎng)緩慢，涂片抗酸染色快速培養(yǎng)系統(tǒng)：自動(dòng)報(bào)告6.核酸檢測(cè)：PCR法第一節(jié)分枝桿菌屬第十五頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一一、結(jié)核分枝菌(三)臨床意義1.致病物質(zhì)：主要與菌體成份有關(guān)。（1）脂質(zhì)

分枝菌酸：與抗酸性有關(guān)蠟質(zhì)D:具有佐劑作用硫酸腦苷脂:阻礙吞噬磷脂:促類(lèi)上皮細(xì)胞形成索狀因子:與該菌毒力有密切關(guān)系第一節(jié)分枝桿菌屬第十六頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一一、結(jié)核分枝菌（2）蛋白質(zhì)誘發(fā)超敏反應(yīng)（3）糖類(lèi)抵抗吞噬作用2.所致疾?。?）經(jīng)多途徑感染，引起全身各組織結(jié)核病，以肺結(jié)核最多見(jiàn)（2）類(lèi)型原發(fā)感染和繼發(fā)感染3.免疫性抗結(jié)核免疫以細(xì)胞免疫為主※抗結(jié)核免疫屬帶菌免疫或稱(chēng)傳染性免疫※抗結(jié)核免疫與Ⅳ型超敏反應(yīng)同時(shí)出現(xiàn)第一節(jié)分枝桿菌屬第十七頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一一、結(jié)核分枝菌4.結(jié)核菌素試驗(yàn)（1）原理用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)，以檢測(cè)受試者對(duì)結(jié)核桿菌是否有細(xì)胞免疫及遲發(fā)型超敏反應(yīng)的試驗(yàn)。（2）結(jié)核菌素試劑（PPD5單位）舊結(jié)核菌素（oldtuberculin，OT)，純蛋白衍化物(purifiedproteinderivative，PPD)（3）結(jié)果48h-72h,根據(jù)注射部位是否出現(xiàn)紅腫判斷結(jié)果＜5mm為陰性

≥5mm為陽(yáng)性＞15mm為強(qiáng)陽(yáng)性

第一節(jié)分枝桿菌屬第十八頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一一、結(jié)核分枝菌（4）結(jié)核菌素試驗(yàn)意義選擇卡介苗接種對(duì)象、測(cè)定卡介苗接種后的免疫效果了解人群結(jié)核菌的自然感染率作為嬰幼兒結(jié)核病的輔助診斷測(cè)定腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能第一節(jié)分枝桿菌屬第十九頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一二、麻風(fēng)分枝菌1.生物學(xué)特性1873年挪威學(xué)者ArmauerHansen從麻風(fēng)患者皮膚結(jié)節(jié)中發(fā)現(xiàn)，又名Hansen桿菌，具抗酸性細(xì)胞內(nèi)寄生，有麻風(fēng)桿菌寄生的細(xì)胞呈泡沫狀，稱(chēng)為麻風(fēng)細(xì)胞體外人工培養(yǎng)尚未成功犰狳是動(dòng)物感染模型第一節(jié)分枝桿菌屬第二十頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一麻風(fēng)分枝菌犰狳第一節(jié)分枝桿菌屬第二十一頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一二、麻風(fēng)分枝菌2.所致疾病:傳播途徑：主要是密切接觸麻風(fēng)：侵害皮膚、粘膜和神經(jīng)系統(tǒng)臨床分型：（臨床表現(xiàn)、病理特征和菌檢結(jié)果）瘤型麻風(fēng)（占20%~30%，傳染性強(qiáng)）結(jié)核樣型麻風(fēng)（占60%~70%，傳染性弱）界線類(lèi)綜合癥（占5%，可轉(zhuǎn)化為以上兩型）3.防治原則：早發(fā)現(xiàn)（檢驗(yàn)時(shí)，標(biāo)本通常采用刮片），早隔離、早治療，治療藥物主要有砜類(lèi)（氨苯砜、苯丙砜、醋氨苯砜）、利福平、氯苯吩嗪及丙硫異煙胺第一節(jié)分枝桿菌屬第二十二頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一麻風(fēng)“獅面”第一節(jié)分枝桿菌屬第二十三頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一三、非典型分枝菌1.非典型分枝桿菌：除人型結(jié)核分枝桿菌、牛型結(jié)核分枝桿菌與麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌菌群，也稱(chēng)為非結(jié)核分枝桿菌2.致病性：多存在于自然界，為條件致病菌3.分類(lèi)：根據(jù)菌落色素和生長(zhǎng)速度分為4組第Ⅰ組（RunyonⅠ群）：光產(chǎn)色菌第Ⅱ組（RunyonⅡ群）：暗產(chǎn)色菌第Ⅲ組（RunyonⅢ群）：不產(chǎn)色菌第Ⅳ組（RunyonⅣ群）：迅速生長(zhǎng)菌光產(chǎn)色菌第一節(jié)分枝桿菌屬第二十四頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一4.代表菌種第Ⅰ組（RunyonⅠ群）：光產(chǎn)色菌：堪薩斯分枝桿菌、猿猴分枝桿菌第Ⅱ組（RunyonⅡ群）：暗產(chǎn)色菌：蟾蜍分枝桿菌、蘇加分枝桿菌、瘰疬分枝桿菌第Ⅲ組（RunyonⅢ群）：不產(chǎn)色菌：鳥(niǎo)分枝桿菌復(fù)合群(Mlviumcomplex,MAC)、瑪爾摩分枝桿菌、潰瘍分枝桿菌第Ⅳ組（RunyonⅣ群）：迅速生長(zhǎng)菌：龜分枝桿菌、膿腫分枝桿菌、偶發(fā)分枝桿菌返回章內(nèi)容第一節(jié)分枝桿菌屬第二十五頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一第二節(jié)諾卡菌屬一、諾卡菌屬（一）種類(lèi)：諾卡菌屬（Nocordio）中有22個(gè)種，廣泛分布于土壤，與醫(yī)學(xué)有關(guān)的13個(gè)菌種：膿腫諾卡菌星形諾卡菌新星諾卡菌非洲諾卡菌豚鼠耳炎諾卡菌少食諾卡菌巴西諾卡菌假巴西諾卡菌短鏈諾卡菌南非諾卡菌肉色諾卡菌老兵諾卡菌皮瘟諾卡菌諾卡菌屬主要形成基內(nèi)菌絲，菌絲纖細(xì)，一般無(wú)氣生菌絲。少數(shù)菌產(chǎn)生一薄層氣生菌絲，成為孢子絲?；鶅?nèi)菌絲和孢子絲均有橫隔，斷裂后形成不同長(zhǎng)度的桿形第二十六頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一一、諾卡菌屬（二）生物學(xué)特性1.專(zhuān)性需氧2.菌體內(nèi)含分枝菌酸3.分布：土壤中，多數(shù)為非致病菌4.常見(jiàn)致病菌：星形諾卡菌（N.asteroides）巴西諾卡菌（N.brasiliensis）豚鼠諾卡菌（N.caviae）5.培養(yǎng)：菌落表面多皺、致密、干燥或濕潤(rùn)，呈黃、黃綠、橙紅等色。用接種環(huán)一觸即碎第二節(jié)諾卡菌屬第二十七頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一（三）星形諾卡菌1.形態(tài)：球形、絲狀（與以色列放線菌相似，但末端不膨大）革蘭染色：陽(yáng)性抗酸染色：陽(yáng)性脫色時(shí)間延長(zhǎng)→陰性(與TB區(qū)別)2.類(lèi)似“硫磺樣顆?！保ǚQ(chēng)色素顆粒）

滲出液、痰或膿汁中有時(shí)可見(jiàn)淡黃、紅色或黑色小顆粒美藍(lán)染色G+絲狀，弱抗酸性第二節(jié)諾卡菌屬第二十八頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一（三）星形諾卡菌3.培養(yǎng)：營(yíng)養(yǎng)要求：不高（沙氏或普通瓊脂培養(yǎng)基）氣體環(huán)境：需氧，有氣生菌絲培養(yǎng)溫度：室溫或37℃生長(zhǎng)速度：緩慢生長(zhǎng)，約1w色素：星形諾卡菌：黃色或深橙色，無(wú)白色菌絲巴西諾卡菌：有白色菌絲菌絲斷裂：5d后→鏈球狀或鏈桿狀（放線菌屬：24h開(kāi)始)培養(yǎng)特征：菌落：有皺褶、顆粒狀液體：菌膜第二節(jié)諾卡菌屬第二十九頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一（三）星形諾卡菌4.鑒定：（1）“硫磺樣顆?！眽浩?）取痰、腦脊液、膿汁涂片→革蘭染色及抗酸染色（3）分離培養(yǎng)沙保弱或普通瓊脂培養(yǎng)基（4）生化試驗(yàn)第二節(jié)諾卡菌屬第三十頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一（四）巴西諾卡菌巴西諾卡菌及星形諾卡菌因侵入皮下組織，引起慢性化膿性肉芽腫，表現(xiàn)為皮下腫脹、膿腫及多發(fā)性瘺管，如發(fā)生于足部或腿部，稱(chēng)足分枝菌?。∕ycotoma）。

本病也可能由馬杜拉放線菌及某些真菌引起該菌七葉苷、黃嘌呤、肌醇、甘露醇均陽(yáng)性，可與星形諾卡菌區(qū)別返回章內(nèi)容第二節(jié)諾卡菌屬第三十一頁(yè)，共三十四頁(yè)，編輯于2023年，星期一第三節(jié)放線菌屬一、放線菌屬1.致?。悍啪€菌能引起牛和人的放線菌?。ˋctinomycosis）的病原菌，屬于內(nèi)源性感染。因菌落生長(zhǎng)呈放射狀而得名。2.常見(jiàn)種類(lèi)：

衣氏放線菌(A.israelii)(最多見(jiàn))牛放線菌(A.bouis)內(nèi)氏放線菌（A.naeslundii)黏液放線菌(A.viscous)齲齒放線菌（A.adontoly