血細(xì)胞分析在臨床中的應(yīng)用

血細(xì)胞分析在臨床中的應(yīng)用

當(dāng)前第1頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)血細(xì)胞分析的發(fā)展近年來,隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展及計(jì)算機(jī)在血液分析儀中的廣泛應(yīng)用,各種先進(jìn)的血液分析儀逐漸普及.當(dāng)前第2頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)1953年，第一臺血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀問世，標(biāo)志著這一項(xiàng)目拋棄了作坊式手段；1913-1998ModelAHighspeedautomaticbloodcellcountandcellsizeanalyzer當(dāng)前第3頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)

原理血液分析儀主要是利用阻抗原理進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)的.不同體積的血細(xì)胞,因其電阻大小不同,而產(chǎn)生相應(yīng)大小的脈沖,分別進(jìn)入到儀器設(shè)置的不同通道當(dāng)前第4頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)當(dāng)前第5頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)CBC(全血細(xì)胞計(jì)數(shù))+DIFF(WBC分類)模式下WBC計(jì)數(shù)分類WBC/DIFF通道對WBC計(jì)數(shù)和分類時(shí),使用的兩個(gè)信號:細(xì)胞經(jīng)半導(dǎo)體激光激發(fā)產(chǎn)生側(cè)向熒光強(qiáng)度側(cè)向散射光強(qiáng)度信號當(dāng)前第6頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)使用的兩種試劑:溶血素(4DL):將RBC完全溶解,同時(shí)在WBC膜表面打孔熒光染料(4DS,聚次甲基熒光染料)通過小孔進(jìn)入WBC內(nèi),對胞漿和胞核中的核酸物質(zhì)進(jìn)行染色當(dāng)前第7頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)測定經(jīng)過核酸熒光染色后的WBC在633nm激光的照射下,產(chǎn)生側(cè)向熒光信號和側(cè)向散射光信號。側(cè)向熒光強(qiáng)度與WBC的核酸(DNA/RNA)含量成正比,側(cè)向散射光強(qiáng)度反映了細(xì)胞內(nèi)容物的復(fù)雜程度(核的分葉,胞漿顆粒的大小,數(shù)量,分布均勻程度)。當(dāng)前第8頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)123459鞘流技術(shù)激光計(jì)數(shù)原理示意圖1流通池2梭頭3樣本頭4鞘流頭5透鏡6吸收光7低角度散射光檢測8高角度散射光檢測9光源876當(dāng)前第9頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)當(dāng)前第10頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)當(dāng)前第11頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)SideScatter(Internalstructure)淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞嗜中性細(xì)胞

嗜酸細(xì)胞

Fluorescence(RNA,DNA)RBCghost嗜堿細(xì)胞當(dāng)前第12頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)RBC和PLT檢測原理全血標(biāo)本稀釋后分配到RBC/PLT計(jì)數(shù)池,鞘流技術(shù)產(chǎn)生的層流使這個(gè)電阻信號轉(zhuǎn)化為脈沖信號記錄下來,脈沖的高度反映了細(xì)胞的大小,每個(gè)脈沖信號代表一個(gè)細(xì)胞,收集信號得到RBC和PLT的直方圖。當(dāng)前第13頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)當(dāng)前第14頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)當(dāng)前第15頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)SLS血紅蛋白檢測方法檢測使用的主要成份為十二烷基磺酸鈉表面活性劑先將RBC溶解，釋放出Hb分子Hb分子中的Fe2+被氧化為Fe3+，與SLS結(jié)合形成SLS-Hb有色基團(tuán)，在535nm有最大吸收峰。當(dāng)前第16頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)SLS血紅蛋白檢測方法特點(diǎn)不含氰化物，無毒具有環(huán)保性SLS是一種脂溶性試劑，可減少脂血和高WBC總數(shù)造成的濁度對血紅蛋白檢測的影響當(dāng)前第17頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)數(shù)據(jù)異常信息當(dāng)前第18頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)中性粒細(xì)胞增多感染（急性細(xì)菌感染）組織損傷（心肌梗塞.手術(shù)）惡性血液病藥物使用(腎上腺素.類固醇)生理性增高當(dāng)前第19頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)淋巴細(xì)胞增多惡性血液病感染(百日咳.傳單.病毒性風(fēng)疹)應(yīng)激狀態(tài)(急性心衰.心臟梗塞.過敏反應(yīng))自身免疫性疾病.腫瘤.吸煙當(dāng)前第20頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)單核細(xì)胞增多感染(細(xì)胞性.敗血癥)膠原病妊娠性WBC增多霍奇金氏病惡性腫瘤當(dāng)前第21頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)嗜酸性細(xì)胞增多過敏反應(yīng)(藥物.尋麻疹)寄生蟲病皮膚病纖維瘤內(nèi)分泌病感染(結(jié)核病)當(dāng)前第22頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)中性粒細(xì)胞減少嚴(yán)重的細(xì)菌感染白血病.腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移藥物血液惡液質(zhì)過敏性休克.酒精中毒當(dāng)前第23頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)淋巴細(xì)胞減少流行性感冒.敗血病藥物(抗腫瘤藥物.腎上腺皮質(zhì)激素)腫瘤晚期.霍奇金氏病膠原性疾病(系統(tǒng)性紅斑狼瘡.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)當(dāng)前第24頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)干擾因素造成假性增高(降低)當(dāng)前第25頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)WBC假性增高PLT聚集冷凝集有核紅細(xì)胞難溶紅細(xì)胞冷球蛋白當(dāng)前第26頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)PLT假性增高紅細(xì)胞碎片小紅細(xì)胞冷白蛋白當(dāng)前第27頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)PLT假性降低血小板聚集巨大血小板當(dāng)前第28頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)RBC假性增高白細(xì)胞增多巨大血小板當(dāng)前第29頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)RBC假性降低紅細(xì)胞碎片冷凝集小紅細(xì)胞當(dāng)前第30頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)急性粒細(xì)胞白血病Auer小體當(dāng)前第31頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)出現(xiàn)原始粒細(xì)胞DIFF散點(diǎn)圖顯示:淋巴細(xì)胞.單核細(xì)胞和原始細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)大量散點(diǎn)且連成一片,大部分原始細(xì)胞由于異常增殖含有過多的DNA/RNA當(dāng)前第32頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)出現(xiàn)異常淋巴細(xì)胞散點(diǎn)圖顯示:有大量的異常淋巴細(xì)胞,熒光強(qiáng)度較弱而側(cè)向散射光強(qiáng)度稍強(qiáng)當(dāng)前第33頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)RBC雙峰分布表示出現(xiàn)大小不同的兩群紅細(xì)胞當(dāng)前第34頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)缺鐵性貧血診斷與鐵劑治療后

直方圖動(dòng)態(tài)變化-療效觀察

鐵劑治療2周后鐵劑治療4周后當(dāng)前第35頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)特發(fā)性PLT減少性紫癲(ITP)PLT直方圖分布上,在40fl附近出現(xiàn)一個(gè)高峰,提示有大型PLT,因此反映細(xì)胞大小的直方圖無法將PLT準(zhǔn)確檢測出來,許多大的PLT被計(jì)數(shù)成RBC當(dāng)前第36頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)需要鏡檢的情況當(dāng)前第37頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)、國際血液學(xué)復(fù)檢專家組推薦的41條自動(dòng)CBC和DC復(fù)檢規(guī)則：

1.新生兒：（1）復(fù)檢條件：首次檢測標(biāo)本；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

2.WBC、RBC、Hb、PLT、網(wǎng)織紅細(xì)胞（Ret）：（1）復(fù)檢條件：超出線性范圍；（2）復(fù)檢要求：稀釋標(biāo)本后重新測定。

3.WBC、PLT：（1）復(fù)檢條件：低于實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)的儀器線性范圍；（2）復(fù)檢要求：按實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）進(jìn)行。當(dāng)前第38頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)4.WBC、RBC、Hb、PLT：（1）復(fù)檢條件：無結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：①檢查標(biāo)本是否有凝塊，②重測標(biāo)本，③如果維持不變，用替代方法計(jì)數(shù)。

5.WBC：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

6.WBC：（1）復(fù)檢條件：3天內(nèi)Delta值超限，并<4.0x10e9/L或>30.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

當(dāng)前第39頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)7.PLT：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果<100x10e9/L或>1000.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

8.PLT：（1）復(fù)檢條件：Delta值超限的任何結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

9.Hb：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果<70g/L或>其年齡和性別參考范圍上限20g/L；（2）復(fù)檢要求：①涂片鏡檢，②確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求。

10.平均紅細(xì)胞體積（MCV）：（1）復(fù)檢條件：24h內(nèi)標(biāo)本的首次結(jié)果<75fl或>105fl（成人）；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

當(dāng)前第40頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)11.MCV：（1）復(fù)檢條件：24小時(shí)以上的成人標(biāo)本>105fl；（2）復(fù)檢要求：①涂片鏡檢觀察大紅細(xì)胞相關(guān)變化，②如無大紅細(xì)胞相關(guān)變化，要求重送新鮮血標(biāo)本，③如無新鮮血標(biāo)本，報(bào)告中注明。

12.MCV：（1）復(fù)檢條件：24h內(nèi)標(biāo)本的Delta值超限的任何結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求。

13.平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）：（1）復(fù)檢條件：≥參考范圍上限20g/L；（2）復(fù)檢要求：檢查標(biāo)本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形紅細(xì)胞。

當(dāng)前第41頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)16～22條為白細(xì)胞分類的復(fù)檢規(guī)則：

16.無白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)（DC）結(jié)果或DC結(jié)果不全：（1）復(fù)檢條件：無條件復(fù)檢；（2）復(fù)檢要求：人工分類和涂片鏡檢。

17.中性粒細(xì)胞絕對計(jì)數(shù)（Neut＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果<1.0x10e9/L或>20.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

18.淋巴細(xì)胞絕對計(jì)數(shù)（Lym＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>5.0x10e9/L（成人）或>7.0x10e9/L（<12歲）；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

當(dāng)前第42頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)19.單核細(xì)胞絕對計(jì)數(shù)（Mono＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>1.5x10e9/L（成人）或>3.0x10e9/L（<12歲）；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

20.嗜酸粒細(xì)胞絕對計(jì)數(shù)（Eos＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>2.0x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

21.嗜堿粒細(xì)胞絕對計(jì)數(shù)（Baso＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>0.5x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

當(dāng)前第43頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)22.有核紅細(xì)胞絕對計(jì)數(shù)（NRBC＃）：（1）復(fù)檢條件：首次出現(xiàn)任何結(jié)果；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

23條為網(wǎng)織紅細(xì)胞的復(fù)檢規(guī)則：

23.網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對計(jì)數(shù)（Ret＃）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果>0.10x10e9/L；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

當(dāng)前第44頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)24～41條為可以提示的復(fù)檢規(guī)則：

24.懷疑性報(bào)警[不成熟粒細(xì)胞(IG)/桿狀核中性粒細(xì)胞（Band）報(bào)警提示除外]：（1）復(fù)檢條件：首次成人結(jié)果出現(xiàn)陽性報(bào)警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

25.懷疑性報(bào)警：（1）復(fù)檢條件：首次兒童結(jié)果出現(xiàn)陽性報(bào)警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

26.WBC結(jié)果不可靠報(bào)警：（1）復(fù)檢條件：陽性報(bào)警；（2）復(fù)檢要求：①確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求并重測標(biāo)本，②如出現(xiàn)同樣報(bào)警提示，檢查儀器，③如需要，進(jìn)行人工分類。

27.RBC碎片：（1）復(fù)檢條件：陽性報(bào)警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

28.雙形RBC：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報(bào)警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。

當(dāng)前第45頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)注意事項(xiàng)儀器為篩選試驗(yàn),不能從測定結(jié)果直接診斷疾病遇到異常提示時(shí)及時(shí)鏡檢儀器定期保養(yǎng),保證日常工作正常進(jìn)行當(dāng)前第46頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)當(dāng)前第47頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)當(dāng)前第48頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)（二）血細(xì)胞形態(tài)變化的一般規(guī)律1.細(xì)胞大小及形態(tài)大小：由大到小。2個(gè)例外：巨核細(xì)胞及早幼粒細(xì)胞。形態(tài)：紅細(xì)胞始終圓形，粒細(xì)胞圓形或橢圓形，單核細(xì)胞由圓形、橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形，巨核細(xì)胞由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。2.細(xì)胞核大?。河纱蟮叫　＞藓思?xì)胞除外。核形：各系細(xì)胞有不同表現(xiàn)。核位置：紅系核居中，粒、單系核偏位，淋巴細(xì)胞核一側(cè)著邊，僅一側(cè)有胞漿。當(dāng)前第49頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)核染色質(zhì)：顏色由淺到深，染色質(zhì)由細(xì)致疏松到粗糙密集，最后緊縮成塊。核膜：不明顯到明顯。核仁：清晰、模糊、消失。3.細(xì)胞漿量：由少到多。顏色：粒、紅、巨核由深藍(lán)或淺藍(lán)到淺紅；淋巴、單核保持淺藍(lán)或灰藍(lán)色；漿細(xì)胞由灰藍(lán)變?yōu)樯钏{(lán)。顆粒：從無到有，由非特異性到特異性。當(dāng)前第50頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)當(dāng)前第51頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)㈢、血細(xì)胞的正常形態(tài)學(xué)特征1、紅細(xì)胞系統(tǒng)原紅（normoblast）早幼紅（basophilicnormoblast）中幼紅（polychromaticnormoblast）晚幼紅（orthochromaticnormoblast）原紅細(xì)胞：早幼紅細(xì)胞：中幼紅細(xì)胞當(dāng)前第52頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)2、粒細(xì)胞系統(tǒng)原粒（myeloblast）早幼粒（promyelocyte）中幼粒（myelocyte）：中性、嗜酸、嗜堿晚幼粒（metamyelocyte）桿狀核粒（stabgranulocyte,bandgranulocyte）分葉核（Segmenteelgranulocyte）原粒細(xì)胞早幼粒細(xì)胞中性中幼粒細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞桿狀核粒細(xì)胞當(dāng)前第53頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)嗜酸粒細(xì)胞（中幼、晚幼、桿狀核、分葉核當(dāng)前第54頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)嗜堿粒細(xì)胞（早幼、中幼、晚幼、桿狀核、分葉核）當(dāng)前第55頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)3、淋巴細(xì)胞系統(tǒng)原淋（Lymphoblast）幼淋（prolymphocyte）淋巴（lymphocyte）大淋巴細(xì)胞小淋巴細(xì)胞原淋巴細(xì)胞幼淋巴細(xì)胞：大淋巴細(xì)胞小淋巴細(xì)胞當(dāng)前第56頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)4、漿細(xì)胞系統(tǒng)原漿（plasmablast）幼漿（proplasmacyte）漿細(xì)胞（plasmacyte）原漿細(xì)胞幼漿細(xì)胞漿細(xì)胞當(dāng)前第57頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)5、單核細(xì)胞系統(tǒng)A.原單（monoblast）B.幼單（promonocyte）C.單核（monocyte）D.吞噬（maerophage）ABC原單核細(xì)胞幼單核細(xì)胞單核細(xì)胞當(dāng)前第58頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)6、巨核細(xì)胞系統(tǒng)原巨（megakaryoblast）幼巨（promegakaryocyte）顆粒巨（granularmegakaryocyte）產(chǎn)板巨（thrombacytogenousmegakaryocyte）裸核（nakednucleous）原巨核細(xì)胞幼巨核細(xì)胞顆粒型巨核細(xì)胞產(chǎn)血小板型巨核細(xì)胞當(dāng)前第59頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)推片推片、染片的質(zhì)量

當(dāng)前第60頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)正常骨髓象（油鏡）當(dāng)前第61頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)缺鐵性貧血骨髓象當(dāng)前第62頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)溶血性貧血骨髓象當(dāng)前第63頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)巨幼細(xì)胞性貧血骨髓象當(dāng)前第64頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)地中海貧血

當(dāng)前第65頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)慢性ITP骨髓象（高倍鏡）當(dāng)前第66頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)幼紅細(xì)胞形態(tài)異常當(dāng)前第67頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)核間橋（細(xì)胞內(nèi)）當(dāng)前第68頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)當(dāng)前第69頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)核間橋（細(xì)胞外）當(dāng)前第70頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)當(dāng)前第71頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)核出芽當(dāng)前第72頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)不對稱雙核當(dāng)前第73頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)三核幼紅當(dāng)前第74頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)多核幼紅、點(diǎn)彩當(dāng)前第75頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)不對稱核分裂象當(dāng)前第76頁\共有93頁\編于星期四\12點(diǎn)核碎裂當(dāng)前第77頁\共有93頁\編于星