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文檔簡(jiǎn)介

第二章細(xì)胞工程第三節(jié)(Ⅱ)

動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體(1)(1)(2)(3)(4)植物體細(xì)胞雜交過程A植物細(xì)胞B植物細(xì)胞原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B融合體雜種細(xì)胞愈傷組織雜種小植株(5)雜種植株溫故知新:鼠細(xì)胞人細(xì)胞人工誘導(dǎo)一、動(dòng)物細(xì)胞融合雜交細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合的概念?獲得物理、化學(xué)方法(同左)滅活的病毒(仙臺(tái)病毒)

物理(離心、振蕩、電激)化學(xué)()直接誘導(dǎo)細(xì)胞融合去壁——誘導(dǎo)新壁—雜種植株細(xì)胞膜的流動(dòng)性植物細(xì)胞膜的結(jié)果通常選用的誘導(dǎo)方法步驟融合的原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較獲得雜交細(xì)胞小結(jié)流動(dòng)性與全能性原生質(zhì)體融合聚乙二醇雜種植株問題:抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生?其化學(xué)本質(zhì)是什么?二、單克隆抗體的制備讀下面一段文字資料,找出單克隆抗體的概念

人們發(fā)現(xiàn),在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中,體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體,但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體,必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖,即克隆。單克隆抗體的概念單:單個(gè)細(xì)胞克隆:無性繁殖(多次有絲分裂)單克隆抗體:單個(gè)細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一特異性強(qiáng)的抗體單克隆抗體的制備問題思考Q1Q2細(xì)胞兩兩融合后,有哪些類型?B-B;B-瘤;瘤-瘤哪種是需要的類型,要篩選嗎?單克隆抗體雜交細(xì)胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細(xì)胞第一次篩選用特定的選擇培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體項(xiàng)目單克隆抗體的制備篩選次數(shù)及目的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)獲取抗體的方式單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)制備過程運(yùn)用的技術(shù)2次;第一次,篩選雜交瘤細(xì)胞;第二次,篩選能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞無限增殖,產(chǎn)生單克隆抗體體內(nèi)(腹水);體外(培養(yǎng)液)特異性強(qiáng),靈敏度高,可大量制備動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)三、單克隆抗體的應(yīng)用:?jiǎn)慰寺】贵w的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量大①作為診斷試劑:準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì),并與特異性結(jié)合優(yōu)點(diǎn):準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速②用于運(yùn)載藥物:制成“生物導(dǎo)彈”治療疾病:主要用于癌癥治療。還可用于同位素標(biāo)記單克隆抗體,可診斷腫瘤、心血管畸形等既不損傷正常細(xì)胞,又減少了用藥劑量。課堂小結(jié)兩個(gè)或多一細(xì)胞膜的流動(dòng)性聚乙二醇誘導(dǎo)融合法B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高,并能大量制備1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合,得到雜交細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體,與骨髓瘤細(xì)胞融合的是()A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞

C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞D.沒經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞A鞏固練習(xí)2.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中,正確的是()誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段基本相同C.操作步驟基本相同D.都能形成雜種細(xì)胞D3.單克隆抗體制備過程中培育的雜交細(xì)胞是()A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合B.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成C.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成D.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成D4.只能使動(dòng)物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法是()

A.PEG

B.滅活的病毒C.電刺激D.離心B5.單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后,要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是()①淋巴細(xì)胞②小鼠骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A.②④B.①③⑤

C.①②③④

D.②③C6.“生物導(dǎo)彈”是指 ()A.單克隆抗體B.雜交瘤細(xì)胞C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物

D(1)作為診斷試劑——最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速(如同位素標(biāo)記單克隆抗體,可診斷腫瘤、心血管畸形等)單克隆抗體的應(yīng)用治療疾病和運(yùn)載藥物生物導(dǎo)彈=單克隆抗體+藥物(治療腫瘤)(“生物導(dǎo)彈”—單抗導(dǎo)向,藥物為彈頭)單克隆抗體的應(yīng)用療效高、副作用小有夢(mèng)想,才會(huì)有創(chuàng)造!已成功的動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)例有很多,如人—小鼠、人

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