微生物診斷技術(shù)

微生物診斷技術(shù)第一頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三學習內(nèi)容免疫學技術(shù)分子生物學技術(shù)細菌檢驗的自動化第二頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三參考書Microbiology

NinaHorne,SamuelSubityTextbookofmedicalmicrobiologyandparasitology

KennethJ.Ryan

科學出版社臨床微生物學與微生物檢驗

張卓然主編人民衛(wèi)生出版社第三頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三細菌感染的實驗診斷感染性疾病的實驗診斷涉及微生物學、免疫學、生化、臨床抗生素學、醫(yī)院感染學、流行病學。臨床細菌實驗室主要工作—從臨床標本中分離出病原菌，并進行準確鑒定，同時指導(dǎo)臨床合理用藥。第四頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三細菌感染的實驗診斷臨床診斷目的：1）以疾病的病原學診斷為目的，一般鑒定細菌種類，必要時進一步鑒定。2）為提供治療方案為目的，進行臨床標本的直接藥物敏感試驗，還可根據(jù)病原菌的種類直接提供抗生素的范圍和種類。3）以流行病學研究為目的，對病原菌做進一步鑒定，往往鑒定到型。4）了解細菌與感染的關(guān)系，感染的類型以及細菌的種類并非具有專一性。第五頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三第一部分免疫學技術(shù)免疫學鑒定和免疫學診斷免疫學鑒定-用已知的抗體檢測標本中或分離培養(yǎng)物中的未知病原生物，確定生物的種或型。免疫學診斷-用已知的病原生物或其特異抗原檢測患者血清中相應(yīng)的特異抗體及效價的變化。第六頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三一、凝集反應(yīng)1玻片凝集反應(yīng)，用已知抗體的診斷血清，在玻片上直接與細菌培養(yǎng)物或細菌懸液混合，若有與抗體相應(yīng)的細菌，出現(xiàn)肉眼看見的凝集塊或顆粒。2反向間接凝集試驗，將已知的細菌抗體直接吸附或通過化學偶聯(lián)方法結(jié)合于RBC表明，制成抗體致敏細胞，再與被檢物混合。第七頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三一、凝集反應(yīng)3乳膠凝集試驗，將已知的抗體吸附在聚苯乙烯顆粒上，可與相應(yīng)抗原產(chǎn)生肉眼可見的乳膠凝集現(xiàn)象，借以堅定細菌。4協(xié)調(diào)凝集試驗，金黃色葡萄球菌細胞壁中的A蛋白（SPA）能夠與人或哺乳動物的IgG-Fc段結(jié)合，使Fc暴露于葡萄球菌的表面，保留其抗體活性和特異性。當金黃色葡萄球菌與已知的IgG抗體連接時，成為致敏的顆粒載體，與相應(yīng)抗原或細菌接觸時，則出現(xiàn)肉眼可見的凝聚現(xiàn)象，借以證明相應(yīng)的細菌或抗原的存在。第八頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三二、免疫熒光技術(shù)1直接法，將已知抗體用化學方法結(jié)合熒光素制成熒光抗體，以此來浸染固定在玻片上的未知細菌。2.間接法，將已知抗體與待檢細菌標本充分反應(yīng)后加入熒光素標記的抗IgG抗體，形成抗原-抗體復(fù)合物，可與隨后加入的熒光標記IgG抗體進一步結(jié)合而固定于玻片上，在熒光顯微鏡下可見熒光出現(xiàn)。第九頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三二、免疫熒光技術(shù)3免疫熒光菌球法，熒光抗體直接染色與增菌培養(yǎng)相結(jié)合的方法，培養(yǎng)基中加入一定量的熒光抗體，然后接種標本，若有相應(yīng)的病原菌，抗體與之結(jié)合而凝聚，聚會后得到的細菌繼續(xù)增殖而聚合成團，在熒光顯微鏡下稱絨球團樣熒光。第十頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三Enzyme-LinkedImmunosorbentAssayIndirectELISAUsetotestAb第十一頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三

Enzyme-LinkedImmunosorbentAssaySandwichELISA

UsetotestAg

DirectELISA第十二頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三1.Enzymology:Modifyingenzymes(1)? DNApolymerases(synthesizeDNA)? DNAligases(joinDNAstrandsbyformingaphosphodiesterbond)? Kinases(phosphorylationof5′-terminusofDNAmolecule)第二部分分子生物學技術(shù)第十三頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三Enzymology:RestrictionendonucleasesBamH1

GGATCCCCTAGGHaeIIIGGCCCCGGCohesiveEnds(5′Overhang)CohesiveEnds(3′Overhang)KpnIGGTACCCCATGGBluntEnds(NoOverhang)第十四頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三Enzymology:Restrictionendonucleases

GATCCTAGDpnI(Requiresmethylation)Methylation-sensitiveEnzymesGGCCCCGGHaeIII(Inhibitedbymethylation)CCCGGGGGGCCCXmaI(59Overhang)CCCGGGGGGCCCSmaI(BluntEnds)IsoschizomersEnzymesGeneratingCompatibleCohesiveEndsGGATCCCCTAGGBamHI(59Overhang)AGATCTTCTAGABglII(59Overhang)CTCGTGGAGCAGBssSI(59Overhang)NNCAGTGNNNNGTCACNNTspRI(39Overhang)EnzymesRecognizingNon-palindromicSequences第十五頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三1.PCRAmplificationPolymeraseChainReactionThepolymerasechainreaction(PCR)isatechniquefortheinvitroamplificationofspecificDNAsequencesbyprimerextensionofcomplementarystrandsofDNA第十六頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三PCRAmplification:AmplificationApproachestoamplificationWantedawaytogeneratelargeamountsofDNAfromasinglecopyInitiallyusedthe“3graduatestudent”methodDenaturingAnnealingExtending第十七頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三PCRAmplification:AnoverviewMechanismofPCRTargetSequencePCRCyclingTaqPolymerasePCRCyclingTaqPolymerasePCRproducts第十八頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三PCRAmplification:AnoverviewPCRcyclingAdditionalCyclesofAmplificationPrimer1Primer2Cycle1Cycle2Cycle3第十九頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三PCRAmplification:PCRreaction(2)PCRcomponents? DNApolymerase(Taq)? dNTPs? Reactionbuffer? Primers(15–25bp)? TargetDNA(ssDNA)PCRThermocycler第二十頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三PCRAmplification:PCRreactionPCRcyclingssDNAannealingdsDNAdenaturationPrimerhybridizationPolymerase/DNAsynthesisextension1PCRCycle(15–30seceach)94°C50–60°C72°C第二十一頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三PCRAmplification:PCRreactionStandardPCRreaction25–100ngDNAtemplate50mMKCl10mMTrisHCl(pH8.4)1.5mMMgCl2gelatin0.25mMeachprimer200mMeachdNTP2.5UTaqpolymerase第二十二頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三3.PCRAmplificationDiagnosticPCRamplificationfrompatientsamplesNegativePositiveSpecimen1Specimen1Specimen2Specimen2DNAMarkerBlankNegativePositiveSpecimen2Specimen1EBV-Actin第二十三頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三HybridizationMethods:ConceptHybridizationistheprocesswhereapieceofnucleicacidisincubatedwithitscomplementarystrand,eitherinsolutionorwithonestrandonasolidsupport,andthetwostrandsbindtogetherbyhydrogenbonding第二十四頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三HybridizationMethods:Concept? HybridizationcanbebetweenDNAandDNA,DNAandRNA,RNAandRNA,oreithernucleicacidandsyntheticoligonucleotids? Southernblot:theprocedurefortransferringdenaturedDNAfromanagarosegeltoanitrocellulosefilterwhereitcanbehybridizedwithacomplementarynucleicacid第二十五頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三HybridizationMethods:SouthernblotSouthernBlotAnalysis第二十六頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三HybridizationMethods:SouthernblotSouthernBlotAnalysis? Vacuumorcapillaryaction:–DNAisdenaturedinsitu(inthegel)–DNAfragmentstransferredfromgeltosolidsupport? Largefragmentstransferslowerthansmallfragments? Geltreatment:–Depurinatewithweakacid(reducesfragmentsizeandincreasestransferefficiency–Denaturewithstrongbase,NaOH(hydrolyzesphosphodiesterbackboneatdepurinatedsites)第二十七頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三HybridizationMethods:SouthernblotSouthernblotanalysisofgenomicDNA23.19.46.6第二十八頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三第三部分細菌檢驗的自動化第二十九頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三第三十頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三第三十一頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三一、微生物鑒定系統(tǒng)發(fā)展概況60年代細菌鑒定方法（手工配制的試劑培養(yǎng)堅定細菌生化反應(yīng)）。70年代根據(jù)細菌生物學性狀和代謝產(chǎn)物的差異，發(fā)展了微量快速和生化反應(yīng)系統(tǒng)，具有簡易化、微量化、系統(tǒng)化、商品化和標準化等優(yōu)點，并實現(xiàn)了從生化模式到數(shù)字模式的轉(zhuǎn)化。形成自動化微生物分析系統(tǒng)。第三十二頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三第三十三頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三第三十四頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三細菌鑒定自動化組別試驗項目代碼結(jié)果結(jié)果代碼總值1葡萄糖酸鹽笨丙氨酸硫化氫124+--10012枸櫞酸鹽甲基紅靛基質(zhì)124++-1203數(shù)字編碼鑒定法第三十五頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三第三十六頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三二、微生物數(shù)碼分類鑒定系統(tǒng)

采用標準化、商品化和配套的生化反應(yīng)試劑條（板），可將細菌鑒定到屬、群、種和亞種或生物型，并可對不同來源的臨床標本進行針對性的鑒定。優(yōu)點：簡易化、微量化、系統(tǒng)化、商品化、標準化。第三十七頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（一）工作原理1．數(shù)據(jù)庫，由許多細菌條目組成。每個條目代表一個細菌種或一個細菌生物型。

2．編碼，將細菌生化反應(yīng)模式轉(zhuǎn)換成數(shù)學模式，可把生化反應(yīng)結(jié)果快速轉(zhuǎn)錄成數(shù)字（編碼），經(jīng)查閱編碼檢索本或電腦分析系統(tǒng)又可將數(shù)字轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的細菌名稱第三十八頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（一）工作原理3．查碼在編碼檢索本內(nèi)尋找數(shù)碼信息：如菌名，鑒定結(jié)果的評價，生化結(jié)果，陽性百分率，必須增加的補充試驗項目，指出注意要點等。第三十九頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（一）工作原理4．解釋如果排序第一的細菌％id≥80.0，則可按值的大小對可信度作出評價，如果第1條目的細菌％id＜80.0，就將前3個條目加在一起；若還不足80.0，則此結(jié)果是不可接受的，既不屬于同一細菌種，又不屬于同一細菌屬。第四十頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（二）數(shù)碼分類鑒定系統(tǒng)組成和操作

1．數(shù)碼分類鑒定系統(tǒng)由試劑條、添加試劑及檢索工具配套形成的鑒定體系。（1）試劑條：常用的生化反應(yīng)有①發(fā)酵試驗；②同化試驗；③同化或發(fā)酵抑制試驗；④酶試驗；⑤其他傳統(tǒng)的生化反。第四十一頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（二）數(shù)碼分類鑒定系統(tǒng)組成和操作（2）添加試劑：有些試驗經(jīng)孵育后需添加試劑才能呈現(xiàn)顏色變化。添加的試劑有配套試劑盒或單種試劑。（3）檢索工具：檢索工具包括鑒定表、編碼本和電腦軟件，可供人工查閱鑒定結(jié)果或由電腦自動處理并報告。每盒試劑條中均附有操作說明書，包括鑒定百分率表。

第四十二頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（二）數(shù)碼分類鑒定系統(tǒng)組成和操作2．操作要點（1）準備1）標本經(jīng)分離培養(yǎng)得到純菌落。2）借助涂片、染色鏡檢、氧化酶等試驗對被測菌進行初步鑒定，以選擇合適的試劑條。3）挑選被測菌的純菌落接種試劑條第四十三頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（二）數(shù)碼分類鑒定系統(tǒng)組成和操作（2）接種1）制備細菌懸液：挑取菌落按試條要求用生理鹽水制備菌懸液。2）調(diào)整菌懸液濃度：按試條要求調(diào)整至1.5億∕ml（0.5麥氏單位）。3）接種的體積：注意接種后液面要平，不凸起也不凹陷，否則將影響觀察結(jié)果。第四十四頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（二）數(shù)碼分類鑒定系統(tǒng)組成和操作（3）觀察及記錄結(jié)果：接種后的試條經(jīng)35℃-37℃孵育18h觀察結(jié)果，并在報告單上記錄結(jié)果。第四十五頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（二）數(shù)碼分類鑒定系統(tǒng)組成和操作（4）結(jié)果的解釋依據(jù)是鑒定百分率表、編碼本和電腦軟件，可將反應(yīng)結(jié)果直接與百分率表核對而得出結(jié)果，或?qū)⑸磻?yīng)的結(jié)果按3個一組得出數(shù)碼，查閱編碼本即可得出解釋。與電腦聯(lián)機，可半自動地得到鑒定的結(jié)果。第四十六頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三ANOXOMATMARKII

厭氧微需氧培養(yǎng)系統(tǒng)

第四十七頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三三、微生物鑒定藥敏分析系統(tǒng)（一）半自動微生物鑒定和藥敏系統(tǒng)，1．VITEK．ATBl）原理：ATB鑒定系統(tǒng)是將肉眼觀察的結(jié)果輸人電腦，計算機數(shù)據(jù)庫由許多細菌條目組成，將輸人結(jié)果與數(shù)據(jù)庫內(nèi)細菌條目比較，自動地得到鑒定結(jié)果。結(jié)果判讀為：敏感，中介或耐藥。

第四十八頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三三、微生物鑒定藥敏分析系統(tǒng)2）儀器組成由讀數(shù)儀和電腦兩部分組成。電腦軟件包括ATB和API的鑒定數(shù)據(jù)庫和ATB的藥敏數(shù)據(jù)庫，數(shù)據(jù)儲存、分析系統(tǒng)以及藥敏專家系統(tǒng)。第四十九頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三

3）操作方法：①標本得到純菌落。②進行初步鑒定選擇試劑條。③按試條要求制備菌懸液。④接種試劑條經(jīng)35℃孵育18小時觀察結(jié)果。⑤將結(jié)果輸人電腦，得到鑒定結(jié)果。第五十頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三三、微生物鑒定藥敏分析系統(tǒng)4）特點：ATB系統(tǒng)是由API金標準改良而成，擁有龐大的細菌資料庫,可鑒定550種細菌。ATB系統(tǒng)操作方便，只需輸入培養(yǎng)結(jié)果，即可得到結(jié)果。第五十一頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三三、微生物鑒定藥敏分析系統(tǒng)2．MicroscanPanell）原理：使用測試板及快速接種系統(tǒng)，人工判讀，將編碼結(jié)果輸人電腦，由電腦軟件得出反應(yīng)結(jié)果。2）操作方法：與ATB相似。3）特點：操作簡便，價格便宜。第五十二頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（二）自動微生物鑒定藥敏系統(tǒng)1.Autoscan.4自動微生物鑒定/藥敏分析儀（1）原理：試劑板在培養(yǎng)箱孵育，然后放主機，用比色法及比濁法對鑒定及藥敏（MIC）進行測定，96條不同波長光導(dǎo)纖維同時測定。（2）儀器組成：主機，電腦和打印機。（3）操作方法：將菌液加人試劑板，孵育24小時。放入主機儀器自動判讀結(jié)果。（4）特點：自動判讀結(jié)果，操作簡便。第五十三頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三2．AutoReader

自動微生物鑒定／藥敏分析儀（1）原理：用熒光檢測技術(shù)，在測定板底物中加人酶介物，使其與細菌生長中的酶結(jié)合生成熒光物質(zhì)。熒光物質(zhì)通過熒光讀數(shù)儀得出的生物編碼來判定菌種。（2）儀器組成：主機，電腦。

第五十四頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三2．AutoReader

自動微生物鑒定／藥敏分析儀（3）操作方法：將菌液加入試劑板，孵育24小時。將試劑板放入主機儀器自動判讀結(jié)果。（4）特點：可同進行鑒定和藥敏，自動判讀結(jié)果，操作簡便。第五十五頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（三）全自動微生物鑒定藥敏系統(tǒng)1．VITEK系統(tǒng)自動微生物鑒定儀（AMS）可做各種細菌的鑒定和藥敏試驗，包括各種腸桿菌科細菌，非發(fā)酵細菌，革蘭陽性球菌，革蘭陰性球菌，厭氧菌及酵母菌的鑒定以及對引起尿路感染的9種最常見的細菌鑒定和計數(shù)。第五十六頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（三）全自動微生物鑒定藥敏系統(tǒng)（l）原理：采用數(shù)碼鑒定原理。組成數(shù)據(jù)庫自動打印實驗報告和病人報告單。（2）分型：分為Vitek-32，讀取32片試驗卡。Vitek-60，容納60片試驗卡。Vitek-120，容納120片試驗卡第五十七頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（3）儀器組成：①充填機／封口機；②讀取器／恒溫箱；③電腦主機；④終端機；⑤打印機；⑥Vitek120。（三）全自動微生物鑒定藥敏系統(tǒng)第五十八頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（三）全自動微生物鑒定藥敏系統(tǒng)（4）配套試劑：配套鑒定和藥敏測試卡。（5）操作方法：稀釋尿標本或準備好的細菌懸液，接種后封閉卡孔，放入讀取器／恒溫箱，于35℃孵育，每隔一小時讀卡1次，于4h內(nèi)打印出結(jié)果。第五十九頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（三）全自動微生物鑒定藥敏系統(tǒng)（6）儀器特點：①自動化；②快速，腸桿菌6h。③準確；④報告完整，包括菌名、最小抑菌濃度（MIC）及成人用藥劑量。第六十頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三3．Sensititre全自動微生物鑒定／藥敏分析儀（1）原理：①細菌鑒定：利用細菌生長產(chǎn)生酶的特性，加人酶介質(zhì)，使其與細菌生長中的酶結(jié)合生成熒光物質(zhì)。在較短的時間判定菌種。②藥敏試驗原理：人工判定時為比濁法，儀器自動判讀時為熒光測定法。第六十一頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三3．Sensititre全自動微生物鑒定／藥敏分析儀（2）儀器組成：①孵育箱及讀數(shù)儀：同時檢測192個菌種樣本。自動孵育，讀數(shù)。②電腦主機：采用最先進穩(wěn)定的UNIX系統(tǒng)作為操作平臺。第六十二頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三3．Sensititre全自動微生物鑒定／藥敏分析儀（3）反應(yīng)板：①鑒定板：革蘭陰性菌，革蘭陽性菌，厭氧菌、苛氧菌及真菌的鑒定板。②藥敏板可提供近300種不同組合的抗生素板。（4）操作方法：制備菌液接種，孵育讀數(shù)。第六十三頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三四、微生物自動鑒定藥敏分析系統(tǒng)展望微生物鑒定和藥敏分析系的要求：①快速鑒定和藥敏試驗最好能在2－8h內(nèi)完成。②檢測準確率高，能檢測一般常規(guī)所有細菌，特別是葡萄球菌，非發(fā)酵菌和鏈球菌等,需提高檢測的準確率和分辨率。第六十四頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三四、微生物自動鑒定藥敏分析系統(tǒng)展望③自動化和電腦的智能化程度強，包括條形碼識別功能，專家系統(tǒng)和便于網(wǎng)絡(luò)化的數(shù)據(jù)分析和儲存系統(tǒng)。④成本更低，使中小型醫(yī)院也能應(yīng)用。第六十五頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三血培養(yǎng)系統(tǒng)1.菌血癥是指細菌侵入血循環(huán)，并在其中生長繁殖，產(chǎn)生毒素引起的急性全身感染，常導(dǎo)致休克和多臟器衰竭。2.有關(guān)的微生物種類多，其毒力、致病性和耐藥性各異，更增加了診斷和治療的復(fù)雜性。因此，及時準確地獲得結(jié)果尤為重要。3.近年來出現(xiàn)自動化、電腦化的智能型血培養(yǎng)系統(tǒng)。第六十六頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三第六十七頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三一、血培養(yǎng)系統(tǒng)的發(fā)展概況自動血培養(yǎng)檢測系統(tǒng)的基礎(chǔ)是檢測細菌和真菌生長時所釋放的二氧化碳來作為有無微生物存在的指標。檢測的技術(shù)有放射標記、顏色變化和熒光技術(shù)等。血培養(yǎng)瓶的種類增加以適應(yīng)臨床的各種需求，有需氧菌、厭氧菌、分枝桿菌、L型菌培養(yǎng)、抗生素瓶等。第六十八頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三第六十九頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三

二、儀器的基本結(jié)構(gòu)與性能

(一）主機l．恒溫孵育系統(tǒng)，設(shè)有恒溫裝置和震蕩培養(yǎng)裝置。2．檢測系統(tǒng)，自動血培養(yǎng)系統(tǒng)設(shè)有相應(yīng)檢測系統(tǒng)。原理：（1）放射性14C標記法：活菌利用標記底物產(chǎn)生14C。BACTEC儀分析培養(yǎng)瓶中氣體，14C標記CO2量超過界限時報告陽性生長。第七十頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（2）二氧化碳感受器：每一血液培養(yǎng)瓶底部都含有Novel顏色感應(yīng)器，當血液培養(yǎng)瓶內(nèi)有微生物生長釋出之CO2后，感應(yīng)器之酸堿值也跟著改變，從深綠色變?yōu)辄S色，電腦報告陽性。

第七十一頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三（3）均質(zhì)熒光技術(shù)：在血培養(yǎng)基內(nèi)含有發(fā)熒光物質(zhì)。微生物生長代謝過程中產(chǎn)生各種帶電荷的原子團，培養(yǎng)瓶發(fā)出的熒光，即可檢測有細菌存在。判斷并發(fā)出陰、陽性結(jié)果的報告，通過條形碼識別標本編號，記錄和打印結(jié)果。第七十二頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三

三、配套試劑及操作要點1．培養(yǎng)瓶有需氧培養(yǎng)瓶、厭氧培養(yǎng)瓶等種類。（l）培養(yǎng)基營養(yǎng)成分：分離需氧及兼性厭氧菌時，國內(nèi)常用酚紅肉湯。分離厭氧菌時，在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中再加人酵母浸膏。（2）抗菌藥物桔抗劑：如加硫酸鎂桔抗某些抗生素。第七十三頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三2．真空采血系統(tǒng)配有一次性使用的無菌塑料管，采得的血液因負壓作用進入培養(yǎng)瓶。第七十四頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三3．取血量成人一次采血量為

5-6ml，嬰幼兒為1-2ml。4．采血方法應(yīng)在發(fā)熱高峰前1小時,或抗菌藥物應(yīng)用之前采集。無菌采集血液后立即注入裝有液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中。第七十五頁，共八十六頁，編輯于2023年，星期三四、常用血培養(yǎng)系統(tǒng)及其性能特點（一）半自動培養(yǎng)儀

專用于快速檢測血液、腦脊液，胸水及其他體液中的細菌。1．原理待測標本接種在含14C底物的專用培養(yǎng)瓶中，若有細菌生長，產(chǎn)生14