開題報告SE對發(fā)育期大鼠學習記憶、膽堿能系統(tǒng)影響及丹參干預的實驗研究畢業(yè)論文

PAGEPAGE2學號： 大學研究生學位論文開題報告eq\o\ad(及論文工作實施計劃,)院(系、所) 臨床醫(yī)學院 學科(專業(yè)) 科學 研究生姓名 學位門類與學位級別 醫(yī)學碩士 導師姓名 入學年月 開題報告日期 2003年12月制表PAGE12填表須知1、論文開題報告由研究生本人向審議小組報告并聽取意見后，在指導教師或有關教師指導下填寫此表。2、博士生應在入學后第二學期結束前、碩士生應在第三學期結束前完成此開題報告。研究生院培養(yǎng)與學籍管理辦公室收到此開題報告至少半年后才予受理答辯申請，因遲交開題報告影響答辯而超過學制規(guī)定年限，由研究生本人負責；3、研究生開題前宜填寫查新報告。查新報告對理、工、醫(yī)、管等學科博士生作為必要環(huán)節(jié)。博士生查新工作可委托圖書館負責，也可在完成網(wǎng)絡文獻檢索類研究生課程的學習或參加學校組織的網(wǎng)絡文獻檢索培訓后，自行組織查新檢索，自行組織查新需要詳細文獻查新述評作為附件。自行查新報告須經(jīng)導師審查后由開題報告審核專家組審核簽字(或蓋章)。碩士生和文科博士生開題查新參考上述辦法，不作硬性要求。4、本表一式兩份，一份研究生自留放入本人“研究生檔案材料袋”；一份由院(系、所)保存并歸入院(系、所)研究生教學檔案。5、學位門類與學位級別指的是工學(或理學等)博士、碩士。6、本表下載區(qū)：。本表電子文檔打印時用A4紙張，格式不變，內容較多是可以加頁。一、學位論文開題報告論文題目SE對發(fā)育期大鼠學習記憶、膽堿能系統(tǒng)影響及丹參干預的實驗研究研究方向神經(jīng)心理題目來源國家部委省市廠、礦自選有無合同經(jīng)費數(shù)備注題目類型理論研究應用研究工程技術跨學科研究其他論文開題前上網(wǎng)檢索情況(碩士生可不作要求；理、工、醫(yī)、管學科博士生應填寫查新報告)圖書館負責查新圖書館有關部門簽字(或蓋章)研究生自行查新開設網(wǎng)絡檢索課程(或講座)的教師簽字：年月日開題報告內容一．立題依據(jù)癲癇是由多種原因引起的腦功能障礙綜合征，是腦細胞群異常超同步化放電引起的突發(fā)性、暫時性、發(fā)作性腦功能紊亂。世界上癲癇患者超過5‰。癲癇的起病與年齡密切相關，兒童期是癲癇高發(fā)年齡段，我國的調查表明：1歲以內起病患兒占小兒癲癇總數(shù)的29.0%，7歲以內起病患兒占總數(shù)的82.2%，說明小兒癲癇多發(fā)生于學齡前期，即使成年癲癇，起病年齡15歲以下者也接近50%。學習記憶是中樞高級神經(jīng)精神活動的重要功能之一，是人及動物賴以生存的最基本的神經(jīng)精神活動。影響癲癇患兒學習記憶功能的主要因素為：癲癇基礎病因、臨床發(fā)作類型、癲癇發(fā)病年齡、癲癇發(fā)作頻率及持續(xù)時間、癲癇控制情況及抗癲癇藥本身對認知功能的影響。大量研究證實，癲癇發(fā)作尤以癲癇持續(xù)狀態(tài)(statusepilepticus,SE)，不僅可引起暫時性腦功能障礙，且可致嚴重的器質性腦損傷，進而引起學習記憶及行為異常等嚴重后果。動物實驗研究認為,SE對大鼠的情感記憶有近期影響[1]，SE可使大鼠學習記憶功能受損[2]，但機制仍無法完全闡明。SE致學習記憶受損己成為神經(jīng)領域關注的熱點問題。SE導致腦損傷主要表現(xiàn)為海馬CA3區(qū)、齒狀回神經(jīng)元線粒體體積縮小，基質濃縮，嵴模糊不清.并出現(xiàn)空泡、畸形，同時可見高爾基復合體輕－中度擴張等形態(tài)學改變，最終出現(xiàn)神經(jīng)元丟失、膠質細胞浸入病變神經(jīng)元周圍;以及細胞凋亡的形態(tài)學變化[3]。近來有研究證實SE后鼠腦海馬區(qū)樹突的分枝和密度降低[4],齒狀回可見苔鮮樣纖維發(fā)芽[5]。SE發(fā)作后腦神經(jīng)元的損傷有一動態(tài)變化過程[6]。發(fā)作后4h,SE動物即有部分神經(jīng)元變性，繼之出現(xiàn)神經(jīng)元壞死的病理學特征，于發(fā)作后2-3天達高峰。發(fā)作后7天，變性壞死減輕，主要見神經(jīng)元丟失后遺留的“空穴”，膠質細胞浸入病變神經(jīng)元周圍和神經(jīng)元脫失區(qū)，而錐體層神經(jīng)元減少。長期以來人們一直認為SE過程中伴有的缺氧缺血是選擇性神經(jīng)元損傷的主要原因[7]。然而近年動物實驗研究證實，選擇性損傷神經(jīng)元的分布與癲癇活動的傳播密切相關。Holmes等[8]證實SE發(fā)作后的神經(jīng)元丟失是過度興奮的結果。發(fā)作導致神經(jīng)元的大量去極化而致谷氨酸過度釋放，進而引起一系列的生化級聯(lián)反應導致神經(jīng)元損傷或死亡。同時僅有癇性放電但無驚厥行為發(fā)作的動物及患者，同樣發(fā)生驚厥性腦損傷[9-10]。這些現(xiàn)象均證實SE中的神經(jīng)元損傷，除與腦缺氧缺血有關外，主要還與皮層細胞過度興奮和放電有關[8]。尚有研究者認為苔鮮纖維發(fā)芽導致“苔鮮纖維－顆粒細胞樹突”興奮性突觸環(huán)路的形成[5]，然而目前對苔鮮纖維發(fā)芽的機制尚不完全清楚，其也有可能是代償性的和有利的。未成熟腦驚厥閾值低，對驚厥刺激敏感性高。以相當于嬰兒期和成年期Wistar大鼠為對象，發(fā)現(xiàn)在相同致驚劑量下，在成年鼠多誘發(fā)局限性驚厥或短暫全身發(fā)作，而在幼齡鼠則引發(fā)全身痙攣性SE發(fā)作，與臨床小兒時期更易出現(xiàn)癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)作等特征相同[11]。未成熟腦的這種敏感性與多種生理因素有關，特別是與其皮層神經(jīng)元功能發(fā)育不全，較弱刺激也能在大腦引起強烈興奮與擴散，致使神經(jīng)細胞容易大量異常放電，同時神經(jīng)髓鞘發(fā)育也不成熟、沖動易于泛化有關[12]。然而未成熟腦對SE致腦損傷具有更強的耐受性。未成熟腦在相同條件下所出現(xiàn)的腦損傷程度遠較成熟腦輕，同時未成熟腦似乎比成熟腦更能抵抗谷氨酸的興奮毒性[13]。經(jīng)歷相同時間相同類型的癇樣發(fā)作，發(fā)育期腦苔鮮纖維發(fā)芽比成年腦較不突出[14]。但幼鼠的這種抵抗力是不完全的[15]。這種相對抵抗力被認為是與活化突觸的低密度、低能量消耗和導致細胞死亡的生化級聯(lián)反應相對不成熟有關[16]。有研究[17]發(fā)現(xiàn)幼鼠腦內凋亡抑制基因bc1-2和具有細胞保護功能的熱休克蛋白(HSP70)明顯增高，而成年鼠腦內卻有凋亡誘導基因P53的持續(xù)高表達，表明幼齡鼠腦內確實存在一個主動的神經(jīng)元保護機制，但究竟在SE中，幼年機體通過何種分子調控手段來實現(xiàn)這種神經(jīng)元保護作用，還有待進一步深入研究。癲癇引發(fā)記憶障礙的具體機制目前仍不甚清楚。與記憶相關的腦結構的損傷可能是原因之一。然而，并非所有伴有記憶損害的癲癇患者都有腦組織的形態(tài)學改變。而且這些結構性損害的嚴重程度與記憶損害之間缺乏直接聯(lián)系的證據(jù)。因此其他因素，如神經(jīng)化學改變，可能在癲癇發(fā)作后記憶功能損害方面具重要作用。乙酰膽堿(Ach)是一種研究較早的中樞神經(jīng)遞質,對中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)似乎有興奮和抑制雙重作用,以興奮為主。神經(jīng)末梢胞漿中的膽堿和乙酰輔酶A在膽堿乙?；福ˋchT）的作用下生成Ach，并進入囊泡貯存。AchT是Ach合成的限速酶。在鈣離子的參與下，囊泡與突觸前膜相融合，釋放Ach至突觸間隙。然后Ach作用于突出后膜的Ach受體，介導信息的傳遞，并參與多種生理功能的完成。當和受體分開后，就迅速被突觸間隙內的乙酰膽堿酯酶（AchE）降解為膽堿和乙酸。徐格林等證實在大鼠發(fā)育期誘導癲癇發(fā)作可損害大鼠的空間認知能力,而出生前后膽堿補充可以減輕這種損害[18]。Serram等報道PTZ點燃使自由活動的大鼠海馬中乙酰膽堿含量下降至對照組的52％，并維持這水平達4周，至停止PTZ注射后30天恢復至對照組水平[19]。丹參系唇形科鼠尾草屬植物丹參(SalviamiltiorrhizaBge)的根及莖，經(jīng)現(xiàn)代工藝提取的丹參化學成分包括丹參酮Ⅰ、丹參酮Ⅱa、丹參酮Ⅱb,隱丹參酮及原兒茶醛、丹參素、丹參酸乙等?，F(xiàn)代藥理研究證實丹參具有改善缺血再灌注損傷，調節(jié)免疫，降低血液粘稠度，改善微循環(huán)的作用，改善腦損傷造成的遠期認知功能障礙，本課題旨在從組織、細胞水平探討丹參對SE誘發(fā)的發(fā)育期幼鼠記憶損傷是否具有保護作用，以便為臨床探索一種有效治療SE致記憶損傷提供理論依據(jù)?？傊?，本研究以戊四氮(PTZ)誘導發(fā)作的SE發(fā)育期大鼠模型為研究對象，探討了SE對發(fā)育期大鼠學習、記憶等認知功能的影響;采用Y迷宮和曠野試驗對大鼠癲癇發(fā)作后情感和認知功能進行評定;采用免疫組織化學法探討大腦海馬中ChAT、AChE水平在癲癇發(fā)作后認知功能損害過程中可能發(fā)揮的作用;采用比色法對癲癇發(fā)作后腦內ChAT、AChE的活性進行測定，分析SE發(fā)作后認知功能損害與這兩種酶活性的關系;探討了發(fā)育階段SE對腦內膽堿能系統(tǒng)的影響及其與認知功能的相關關系;從預防和治療的角度出發(fā)，評估丹參對SE發(fā)作和對認知功能可能具有的良性作用，并對其神經(jīng)化學機制進行了初步分析?！緟⒖嘉墨I】[1]ErdoganF,GolgeliA,ArmanF,etal.Theeffectsofpentylenetetrazoleinducedstatusepilepticusonbehavior,emotionalmemory,andlearninginrats[J].Epilepsy&Behav,2004,5:388–393.[2]婁燕,王維平，王曉鵬等.持續(xù)癲癇大鼠行為學和神經(jīng)肽YmRNA表達的改變.基礎醫(yī)學與臨床.2005，255（7）：662-666.[3]呂曉明，高旭光，劉芳.鏗-匹羅卡品致痛幼鼠海馬結構損傷的形態(tài)學及苔蘚纖維發(fā)芽研究.中國臨床神經(jīng)科學.2002;10(1):9-12.[4]ChoenfeldJ,SeidenbergM,WoodardA,etal.Neuropsychologicalandbehavioralstatusofchildrenwithcomplexpartialseizures.DevMedChildNeurol1999;41:724-731.[5]MelloLE,CovalanL.Spontaneousseizuresprefentiallyinjuryinterneurousinthepilocarpinemodelofchronicspontaneousseizures.EpilepsyRes,1996,26:123-129.[6]蔣莉，蔡方成，張曉萍，不同成熟期大腦對持續(xù)驚厥的耐受性.中華兒科雜志2002,40(7):429-432.[7]MosheSL.Braininjurywithprolongedseizuresinchildrenandadults.JChildNeurol,1998,13suppl:3-6.[8]ShinC,LeeKH.Epilepsyandcelldeath.In:KoliatsosVE,RatanRRets.CelldeathandDiseasesoftheNeuronSystem.NewJersey:HumanaPress,1999,361-378.[9]BoneRC.Treatmentofconvulsivestatusepilepticus.RecommendationsoftheEpilepsyFoundationofAmerica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丹參組每次隨機取6只，空白組每次隨機取3只，雙側海馬勻漿比色法行AchE、ChAT活性測定行免疫組織化學染色定性和半定量分析比較各組海馬組織ChAT行免疫組織化學染色定性和半定量分析比較各組海馬組織ChAT、AChE的表達情況HE染色，光鏡下觀察海馬組織形態(tài)變化2.可行性分析醫(yī)學院圖書館館藏資源豐富，能完成實驗資料檢索本研究項目組已經(jīng)掌握戊四氮致癲癇動物模型的建立、學習記憶能力測試、大鼠免疫組化等實驗方法。本院中心實驗室有實驗所需設備及部分試劑，本院神經(jīng)生物學研究室擁有實驗所需的實驗設備。有學院相關學科的技術支持和協(xié)助。目前國內有可靠的試劑盒可供本實驗檢測使用HE染色，尼氏染色，光鏡下觀察海馬組織病理形態(tài)變化電鏡觀察免疫組織化學染色檢測HE染色，尼氏染色，光鏡下觀察HE染色3．課題研究的學術和應用價值HE染色，尼氏染色，光鏡下觀察海馬組織病理形態(tài)變化電鏡觀察免疫組織化學染色檢測HE染色，尼氏染色，光鏡下觀察HE染色丹參能改善SE所致學習記憶能力低下，有利于開發(fā)改善SE所致智力障礙的治療藥物；丹參易于通過血腦屏障，有利于發(fā)揮藥效；丹參是祖國傳統(tǒng)藥材，來源廣，給藥方便，具有副作用少、價格低廉等優(yōu)點。4、本課題的創(chuàng)新之處：SE致發(fā)育期大鼠學習記憶能力低下國內外報道少見大鼠SE發(fā)作與學習記憶及ChAT、AChE表達的關系國內外尚無報道丹參治療SE所致發(fā)育期大鼠學習記憶能力低下國內外未見報道5、預期結果本課題通過動物實驗研究能獲得如下結果：SE發(fā)作導致發(fā)育期大鼠學習、記憶等認知功能低下的影響;大腦海馬中ChAT、AChE水平在SE發(fā)作后認知功能損害過程中可能發(fā)揮作用;丹參對SE發(fā)作和對認知功能可能具有的良性作用；研究結果將撰寫論文，預期在本?？坪诵钠诳习l(fā)表論文1-2篇。6、主要研究人員碩士研究生科研設計進行實驗撰寫論文教授指導科研設計組織實施7、經(jīng)費預算合計8000元科研業(yè)務費1000元實驗材料費2000元試劑費4000元其他1000元研究生簽名：年月日 二、學位論文工作實施計劃(一)論文的理論分析與硬件要求及其應達到的水平與結果1、探討SE大鼠學習記憶改變的病理結構基礎和其他相關因素；2、證實丹參能改善癲癇大鼠的學習記憶障礙,并初步探討其機制。(二)論文工作進度與安排起訖日期工作內容和要求備注查閱相關文獻資料，了解國內外研究現(xiàn)狀及實驗的方法、原理、技術路線收集資料，進行預實驗完成正式實驗撰寫論文開題報告審議情況記錄１、審議小組成員(審議小組成員應不少于5人)：組長：成員：２、審議小組意見３、票表決結果審議小組出席人；通過人；不通過人。４、審議小組組長(簽名)審議小組成員(簽名)年月日指導教師對開題報告的綜合意見指導教師(簽名)年月日教研(研究)室(或學科點)意見:教研(研究)室主任(或學科負責人)簽名(或印章)年月院(系、所)意見(對博士研究生需填寫此欄):院(系、所)負責人簽名(或印章)年月日基于C8051F單片機直流電動機反饋控制系統(tǒng)的設計與研究基于單片機的嵌入式Web服務器的研究MOTOROLA單片機MC68HC（8）05PV8/A內嵌EEPROM的工藝和制程方法及對良率的影響研究基于模糊控制的電阻釬焊單片機溫度控制系統(tǒng)的研制基于MCS-51系列單片機的通用控制模塊的研究基于單片機實現(xiàn)的供暖系統(tǒng)最佳啟停自校正（STR）調節(jié)器單片機控制的二級倒立擺系統(tǒng)的研究基于增強型51系列單片機的TCP/IP協(xié)議棧的實現(xiàn)基于單片機的蓄電池自動監(jiān)測系統(tǒng)基于32位嵌入式單片機系統(tǒng)的圖像采集與處理技術的研究基于單片機的作物營養(yǎng)診斷專家系統(tǒng)的研究基于單片機的交流伺服電機運動控制系統(tǒng)研究與開發(fā)基于單片機的泵管內壁硬度測試儀的研制基于單片機的自動找平控制系統(tǒng)研究基于C8051F040單片機的嵌入式系統(tǒng)開發(fā)基于單片機的液壓動力系統(tǒng)狀態(tài)監(jiān)測儀開發(fā)模糊Smith智能控制方法的研究及其單片機實現(xiàn)一種基于單片機的軸快流CO〈,2〉激光器的手持控制面板的研制基于雙單片機沖床數(shù)控系統(tǒng)的研究基于CYGNAL單片機的在線間歇式濁度儀的研制基于單片機的噴油泵試驗臺控制器的研制基于單片機的軟起動器的研究和設計基于單片機控制的高速快走絲電火花線切割機床短循環(huán)走絲方式研究基于單片機的機電產品控制系統(tǒng)開發(fā)基于PIC單片機的智能手機充電器基于單片機的實時內核設計及其應用研究基于單片機的遠程抄表系統(tǒng)的設計與研究基于單片機的煙氣二氧化硫濃度檢測儀的研制基于微型光譜儀的單片機系統(tǒng)單片機系統(tǒng)軟件構件開發(fā)的技術研究基于單片機的液體點滴速度自動檢測儀的研制基于單片機系統(tǒng)的多功能溫度測量儀的研制基于PIC單片機的電能采集終端的設計和應用基于單片機的光纖光柵解調儀的研制氣壓式線性摩擦焊機單片機控制系統(tǒng)的研制基于單片機的數(shù)字磁通門傳感器基于單片機的旋轉變壓器-數(shù)字轉換器的研究基于單片機的光纖Bragg光柵解調系統(tǒng)的研究單片機控制的便攜式多功能乳腺治療儀的研制基于C8051F020單片機的多生理信號檢測儀基于單片機的電機運動控制系統(tǒng)設計Pico專用單片機核的可測性設計研究基于MCS-51單片機的熱量計基于雙單片機的智能遙測微型氣象站MCS-51單片機構建機器人的實踐研究基于單片機的輪軌力檢測基于單片機的GPS定位儀的研究與實現(xiàn)基于單片機的電液伺服控制系統(tǒng)用于單片機系統(tǒng)的MMC卡文件系統(tǒng)研制基于單片機的時控和計數(shù)系統(tǒng)性能優(yōu)化的研究基于單片機和CPLD的粗光柵位移測量系統(tǒng)研究單片機控制的后備式方波UPS提升高職學生單片機應用能力的探究基于單片機控制的自動低頻減載裝置研究基于單片機控制的水下焊接電源的研究基于單片機的多通道數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)基于uPSD3234單片機的氚表面污染測量儀的研制基于單片機的紅外測油儀的研究96系列單片機仿真器研究與設計基于單片機的單晶金剛石刀具刃磨設備的數(shù)控改造基于單片機的溫度智能控制系統(tǒng)的設計與實現(xiàn)基于MSP430單片機的電梯門機控制器的研制基于單片機的氣體測漏儀的研究基于三菱M16C/6N系列單片機的CAN/USB協(xié)議轉換器基于單片機和DSP的變壓器油色譜在線監(jiān)測技術研究基于單片機的膛壁溫度報警系統(tǒng)設計基于AVR單片機的低壓無功補償控制器的設計基于單片機船舶電力推進電機監(jiān)測系統(tǒng)基于單片機網(wǎng)絡的振動信號的采集系統(tǒng)基于單片機的大容量數(shù)據(jù)存儲技術的應用研究基于單片機的疊圖機研究與教學方法實踐基于單片機嵌入式Web服務器技術的研究及實現(xiàn)基于AT89S52單片機的通用數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)基于單片機的多道脈沖幅度分析儀研究機器人旋轉電弧傳感角焊縫跟蹤單片機控制系統(tǒng)基于單片機的控制系統(tǒng)在PLC虛擬教學實驗中的應用研究基于單片機系統(tǒng)的網(wǎng)絡通信研究與應用基于PIC16F877單片機的莫爾斯碼自動譯碼系統(tǒng)設計與研究基于單片機的模糊控制器在工業(yè)電阻爐上的應用研究基于雙單片機沖床數(shù)控系統(tǒng)的研究與開發(fā)基于Cygnal單片機的μC/OS-Ⅱ的研究基于單片機的一體化智能差示掃描量熱儀系統(tǒng)研究基于TCP/IP協(xié)議的單片機與Internet互聯(lián)的研究與實現(xiàn)變頻調速液壓電梯單片機控制器的研究基于單片機γ-免疫計數(shù)器自動換樣功能的研究與實現(xiàn)基于單片機的倒立擺控制系統(tǒng)設計與實現(xiàn)單片機嵌入式以太網(wǎng)防盜報警系統(tǒng)基于51單片機的嵌入式Internet系統(tǒng)的設計與實現(xiàn)單片機監(jiān)測系統(tǒng)在擠壓機上的應用HYP