食品微生物課程實習(xí)

實驗八食品中含菌總數(shù)的檢測（新修改）一、實驗?zāi)康?.掌握食品安全國家標準GB4789.2—2023食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定方法。2.掌握國家標準GB4789.2—2023菌落總數(shù)的計算方法與報告方式。3.學(xué)習(xí)食品中檢驗菌落總數(shù)的意義與方法。二、實驗原理菌落總數(shù)aerobicplatecount，食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間等）培養(yǎng)后，所得每g（mL）檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)。PCA平板分離法：該方法操作簡便，其基本原理：胰蛋白胨提供碳源和氮源；酵母膏粉提供B族維生素；葡萄糖提供能源；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。選擇恒溫36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h（水產(chǎn)品30℃±1℃培養(yǎng)72h±3h）普遍用于微生物的分離與純化。檢樣25g檢樣25g(mL)樣品+225mL稀釋液，均質(zhì)10倍系列稀釋選擇2～3個適宜稀釋度的樣品勻液，各取1mL分別加入無菌培養(yǎng)皿內(nèi)每皿中加入15mL～20mL平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，混勻培養(yǎng)計數(shù)各平板菌落數(shù)計算菌落總數(shù)報告圖菌落總數(shù)的檢驗程序英四、禁實驗承結(jié)果丘（結(jié)勞果可甩手寫早或者繩打印緞?wù)迟N鐘）新20剪09商食品堂集團量有限警公司索一/懲二圾分公鐵司剪產(chǎn)品奶檢驗莖原始訴記錄溉（菌杠落總顛數(shù)）起（每龜組檢溫測3靈個樣骨品，桶模擬東）扣（一穿/二工分公遙司頓=1矮/2閑班）嘴系田僻躲第輕n總組頓仙20宿10貨年犬月董肚日京品名闖1竹生產(chǎn)溫批號甘規(guī)格冬型號遣檢驗從員巧感官敗評測師色澤下：堵形態(tài)輕：腥組織立：羞氣滋督味：主受雜質(zhì)姐：移菌落留總數(shù)妙(G尖B素47漂89檢.2蜘-2槍01聽0)憤稀釋上度廚10賓-？牌10熊-？甜10嚴-？村空白和對照廣CF偵U棄平均習(xí)數(shù)剃報告久值（縫A孤PC貸）賽培養(yǎng)怪條件尿培養(yǎng)伯溫度晝培養(yǎng)敲時間成備注球：濁品名折2粘生產(chǎn)算批號不規(guī)格翁型號籍檢驗師員鏈感官阻評測伏色澤解：睡形態(tài)龍：迎組織傳：倡氣滋個味：導(dǎo)怕雜質(zhì)梳：畢菌落城總數(shù)壁(G蠟B償47評89楊.2豬-2濃01混0)身稀釋醫(yī)度夕10繼-？拴10充-？漁10適-？路空白藏對照農(nóng)CF悶U己平均候數(shù)藏報告棵值（突A柄PC肆）蜻培養(yǎng)漢條件壁培養(yǎng)疑溫度聯(lián)培養(yǎng)斜時間菜備注備：碧品名墊3優(yōu)生產(chǎn)頭批號趁規(guī)格帳型號浪檢驗卡員夜感官新評測贈色澤蓄：常形態(tài)道：戀組織身：吵氣滋臣味：奧搶雜質(zhì)疤：住菌落擋總數(shù)鍋(G終B嬸47防89所.2題-2序01努0)殖稀釋束度分10慣-？鑼10游-？巨10袋-？客空白孟對照蹤CF咐U捷平均允數(shù)識報告悔值（鄭A舌PC短）殊培養(yǎng)偽條件睛培養(yǎng)首溫度土培養(yǎng)哄時間斜備注料：剩五耐、么討論禿分析南1.猶試簡扎述奧GB釀4占78宣9.申2-迅20俯10振菌落苗形成沾單位盯（c頃ol著on需y-牽fo浮rm率in障gu迷ni巴ts把,c瓦fu攜）踢的計渴算方料法焦與報鋼告方懶式梁（暫參考退GB幻4揀78潮9.岡2-疼20氏10準7喬結(jié)果硬與報務(wù)告朱縮刷寫）碰2.性試簡蟻述食丑品中揪細菌縫數(shù)量鑼的食叔品衛(wèi)物生學(xué)旅意義慈一是慘可作赤為食燈品被拔微生吊物污忙染程拒度的肢標志待。食淘品中桂細菌竿數(shù)量欠越多近，說守明食控品被鴉污染煉的程算度越圾重、徑越不輝新鮮旦、對姑人體厲健康監(jiān)威脅絨越大逆。相沃反，州食品絹中細曲菌數(shù)廁量越賢少，封說明睬食品調(diào)被污清染的楚程度叛越輕市，食霧品衛(wèi)究生質(zhì)智量越區(qū)好。尤在我勝國的怕食品幸衛(wèi)生撲標準隔中，尚針對腐各類墳不同嗚的食字品分付別制塌定出允了不勺允許銀超過環(huán)的數(shù)亂量標晶準，姻借以造控制養(yǎng)食品柔污染繼的程彎度。密二是武可以鍵用來蓬預(yù)測奔食品膠可存懶放的合期限辛，食有品中鐵細菌角數(shù)量遍越少突，食燃品可材存放彈的時碌間就嘉越長母，相股反，居食品心的可混存放膚時間掙就越俗短。迎由于衡食品納的性份質(zhì)、對處理接方法合及存氧放條闊件的核不同萌，以丘致對華食品雞衛(wèi)生貴質(zhì)量言具有幼重要謊影響冬的細頸菌種謎類和可相對濁數(shù)量需比也接不一陪致，購因而掀目前嶺在食劣品細戰(zhàn)菌數(shù)費量和駐腐敗敞變質(zhì)快之間拳還難怠于找吧出適帖用于侍任何哨情況君的對文應(yīng)關(guān)斑系。絹同時姻，用校于判哈定食丙品腐惑敗變好質(zhì)的扯界限精數(shù)值嗓出入災(zāi)也較珠大。息……賓六、難改進廈實驗跪建議曬實驗邀九缸儉食品獵中大晃腸桿踢菌群墻的檢鼓測（踐新修蔥改）澡一、迎實驗茄目的更1.塑掌握丈食品已安全澡國家惱標準劃GB沸4兔78嫌9.銷3摸-2軌01足0響食品仆微生楚物學(xué)時檢驗謀——帶大腸侍菌群青計數(shù)溪第二域法—裹—大統(tǒng)腸菌嫂群平阿板計旨數(shù)法推。聲2.歷了解殊食品挨中大測腸桿歡菌群仍檢測篩的意逗義。蜂二、辯實驗漸原理附平板隔稀釋塘分離嚴：應(yīng)待用先結(jié)晶帝紫中療性紅腸膽鹽保瓊脂柳（V兼RB丘A）嘉與死檢際樣液浮充分撿混勻邊，待臣瓊脂趁凝固蹤后再薯加3哪m溫L～膚4兇mL旁VR使BA神覆蓋狠平板絲表層顫，恒翻轉(zhuǎn)擔(dān)平板看置于禽36聾炊℃歇±阿1闊℃旁培養(yǎng)偷18參h箏～2步4朽h損培養(yǎng)茄。朽選取律菌落遙數(shù)在神15吸C徒FU槍～1捧50貌C嫌FU區(qū)之猴間的訓(xùn)平板聚，分搶別計像數(shù)平厘板上抬出現(xiàn)升的典崇型和準可疑森大腸目菌群大菌落預(yù)。典蔑型菌晉落為紗紫紅偽色，維菌落窮周圍滅有紅點色的品膽鹽要沉淀貓環(huán)，巾菌落柏直徑碰為昂0.戲5柿mm響或咬更大36℃±1℃48h±2h36℃±1℃48h±2h檢樣25g(mL)樣品+225mL稀釋液，均質(zhì)10倍系列稀釋選擇2個~3個適宜稀釋度的樣品勻液，接種VRBA平板計數(shù)典型和可疑菌落BGLB肉湯報告結(jié)果圖2大腸菌群平板計數(shù)法檢驗程序科證實松試驗并：難從V飼RB斬A扮平板桃上挑懼取1怨0個襪不同李類型羨的典弄型和棗可疑右菌落桂，分賣別移恭種于乒BG涉LB掃肉爹湯管罷內(nèi)，鑼36解考℃瓜±飯1門℃害培養(yǎng)頃24革h油～4腎8疫h，介觀察痛36℃±1℃48h±2h36℃±1℃48h±2h檢樣25g(mL)樣品+225mL稀釋液，均質(zhì)10倍系列稀釋選擇2個~3個適宜稀釋度的樣品勻液，接種VRBA平板計數(shù)典型和可疑菌落BGLB肉湯報告結(jié)果圖2大腸菌群平板計數(shù)法檢驗程序紅三、任實驗塑步驟徒四、揀實驗的結(jié)果醒（結(jié)宇果可短手寫碗或者努打印雕粘貼出）壩20恥09蟲食品慶集團薄有限園公司誠一/顧二塞分公止司侮產(chǎn)品擱檢驗照原始黃記錄伴（大團腸菌捷群）沈（每伯組檢唐測3凈個樣冒品，搭模擬唉）桿第n佩組壤20謎10胳年快月建約日種品名靠1鄰生產(chǎn)林批號秩規(guī)格軟型號艦檢驗城員且大腸污菌群鳥(G市B寄47姑89浪.3藍-2鏡01禽0)勺第二吸法屯：罷大腸昏菌群票平板戲計數(shù)罰法詠稀釋矛度榨10距-？反10庫-？乓10宅-？濃空白蛋對照迎CF仙U廁典型久菌落射平均心數(shù)（候個）陸證實躲試驗載：木10指個不亮同類秘型的意典型瞇和可科疑菌書落于客BG桿LB漁產(chǎn)氣東管數(shù)喪（管吉）含報告榜值（旦CF倆U）敵培養(yǎng)蛛條件較培養(yǎng)否溫度駱培養(yǎng)礦時間輛備注減：此品名嫂2涼生產(chǎn)惡批號炸規(guī)格越型號榨檢驗汪員為大腸殘菌群迷(G朗B夫47才89碎.3忙-2厭01渠0)旺第二邁法宣：隔大腸懇菌群丟平板廚計數(shù)煩法百稀釋飲度增10蹦-？敲10偶-？尋10薄-？貨空白搭對照貪CF榆U咐典型幅菌落愚平均買數(shù)（也個）什證實啟試驗莊：誤10撕個不摔同類遷型的厘典型秋和可兄疑菌奪落于足BG聚LB擾產(chǎn)氣趙管數(shù)怖（管皇）亮報告鍬值（肉CF財U）端培養(yǎng)枝條件痛培養(yǎng)牙溫度回培養(yǎng)煌時間梁備注錯：沈品名貧3槽生產(chǎn)喜批號爐規(guī)格喊型號劫檢驗擇員劃大腸讓菌群飛(G耕B賤47促89氏.3逗-2料01廳0)昆第二床法賴：討大腸昏菌群鍵平板禽計數(shù)電法狀稀釋禮度視10鍵-？瘦10勵-？移10秧-？艦空白喜對照致CF多U愈典型徑菌落妖平均飯數(shù)（圈個）福證實問試驗瓣：酬10引個不甘同類納型的決典型大和可榜疑菌搜落于比BG陜LB汁產(chǎn)氣召管數(shù)政（管屑）職報告礦值（勻CF診U）發(fā)培養(yǎng)滾條件插培養(yǎng)簽溫度飽培養(yǎng)賞時間丹備注魂：奉五眉、共討論迅分析慧1.擔(dān)大腸輪菌群優(yōu)指什壞么？細分布默有如密何？尺大腸鹿菌群云并非漲細菌洗學(xué)分宴類命磚名，政而是告衛(wèi)生嫩細菌賴領(lǐng)域奉的用鐵語，組它不檔代表餃某一眨個或艘某一媽屬細毛菌，合而指貧的是城具有課某些疲特性噴的一棚組與切糞便抗污染突有關(guān)么的細駛菌，洞這些刪細菌秩在生哲化及蒼血清去學(xué)方首面并京非完折全一求致，聰其定仁義為零：需傘氧及誦兼性終厭氧詳、在肝37根℃修能分棚解乳歐糖產(chǎn)文酸產(chǎn)展氣的縱革蘭崗氏陰欲性無予芽胞計桿菌理。一能般認紅為該激菌群痕細菌咳可包傳括大概腸埃下希氏棉菌、辦檸檬磚酸桿霞菌、念產(chǎn)氣抗克雷認白氏慘菌和需陰溝販腸桿塘菌等竄。大銅腸菌煎群分液布較蹲廣，后在溫子血動艱物糞虹便和恥自然亡界廣樸泛存糠在。舍調(diào)查暈研究標表明萬，大輩腸菌殖群細染菌多淺存在卵于溫有血動舟物糞茄便、適人類槽經(jīng)常帖活動響的場帆所以躲及有役糞便塌污染勻的地玻方，辛人、西畜糞違便對摟外界閣環(huán)境習(xí)的污駱染是夾大腸達菌群橡在自飽然界暴存在漆的主深要原匙因。巡糞便離中多污以典孝型大疊腸桿畝菌為警主，犬而外瞎界環(huán)超境中著則以貝大腸覆菌群債其他笨型別膝較多音。耕2.曬在本媽實驗潔中，寄你是烤采用股何標勿準與反何步罰驟檢腎測大筑腸菌敬群？懶參考你(擴GB載4蔥78溝9.古3-頑20均10讀)第閉二法翼：大甜腸菌頓群平絕板計設(shè)數(shù)法劉縮巧寫眼三、旁步驟萌3.碼1、案酒曲森中酵搬母菌椒的分盡離（耍劃線姓分離思法和嫂稀釋報涂布脅平板坡法）予3.燕1.皆1悶倒平僑板灑右手酬持盛伐培養(yǎng)勒基的錘試管乒或三附角瓶趴置火撤焰旁幻邊，廉用左催手將鞏試管若塞或票瓶塞故輕輕革地拔寧出，求試管販或瓶伸口保迫持對導(dǎo)著火劇焰；刊然后書左手腦拿培迎養(yǎng)皿荒并將黎皿蓋范在火顆焰附宋近打浪開一沙縫，爐迅速桌倒入領(lǐng)PD譽A培珍養(yǎng)基智約1盲0晶ml困，加全蓋后史輕輕奇搖動震培養(yǎng)預(yù)皿，麗使培痰養(yǎng)基柔均勻說分布看在培差養(yǎng)皿集底部岔，然敢后平宗置于棕桌面殊上，邊待凝暗后即渠為平縱板。棍3.遮1.卻2途稀奸釋碌酒曲雞分別膏稱取乓酒曲迷1氏g送，放燕入盛擾49武ml震無菌逼水，神考慮敵成本血，本瓣實驗橋采用嫁定性蘿方法阿，陡在實貼際檢掠測中與應(yīng)以抬5抵g眾，放掛入盛梯45慰ml但無菌部水）脆并帶慚有玻穿璃珠消的三自角燒呢瓶中框，振翅搖約踏20沒mi定n，坑使望酒曲件與水榆充分獻混合頓，將蜘細胞個分散季。用戶一支岔1創(chuàng)ml便無菌黎吸管冊從中瘡吸取訊1m疾l酒響曲懸但液加翁入盛洋有9萄ml播無菌泳水的哄大試頸管中釀充分殊混勻況，然婆后用捆無菌得吸管懶從此粉試管閃中吸絮取1駛m銳l(弊無菌影操作黨)加量入另杯一盛換有9伐ml子無菌怖水的史試管暴中，蒙混合松均勻炮，以久此類盲推制碗成1富0乞-1社、1談0獎-2置、1鐵0后-3忽、1強0苦-4貿(mào)、1侄0產(chǎn)-5啞、1額0默-6么不同岔稀釋太度的炕酒曲洞溶液瞎(注野意：劣操作言時管跌尖不羽能接拾觸液邪面，視每一勾個稀復(fù)釋度鄉(xiāng)換一忘支試頂管)卷。民3.怖1.唐2肅.1醉涂布斬將上維述每返種培皂養(yǎng)基胳的3姨個平樓板底嘉面分狡別用柔記號驅(qū)筆寫雅上1縮0慰-4升、1選0畏-5后和1覽0簡-6陽3種丸稀釋品度，鬧然后杜用無蛾菌吸俯管分糠別由鉆10劑-4伍、1賓0害-5淹和1鹽0曠-6泉三管序酒曲行稀釋船液中跌各吸搶取0開.1街或0綠.2所ml肆，小回心地鄙滴在李對應(yīng)棄平板葡培養(yǎng)拋基表影面中上央位磁置。山用無超菌玻扁璃涂喇棒（況或者宰棉簽過）平洞放在質(zhì)平板左培養(yǎng)肌基表喇面上寺，將截菌懸欲液先蛋沿同慧心圓勒方向窗輕輕歡地向裹外擴鑰展，兆使之惹分布娛均勻滿。室浩溫下商靜置鮮5～濟10癢mi道n，覺使菌菜液浸乒入培芹養(yǎng)基升。爛3.鍵1.途2愁.1俯平板柔劃線社分離低法當將一批個平南板分棗成四拆個不叼同面壟積的倍小區(qū)芳進行充劃線欲,第砍一區(qū)屠(A鮮區(qū))霸面積豐最小級，作限為待研分離婆菌的盈菌源私區(qū)，柿第二胸和第遲三區(qū)橡(B腰、C泉區(qū))均是逐慧級稀剖釋的燕過渡挎區(qū)，傳第四感區(qū)(礎(chǔ)D區(qū)襖)，摧則是辱關(guān)鍵旗區(qū)，案使該袋區(qū)出而現(xiàn)大毅量的困單菌巧落以場供挑梳選純簽種用曉。為尚了得零到較遺多的晌典型馳單菌個落，鑄平板三上四針區(qū)面誓積的王分配勺應(yīng)是枕D＞羅C＞嗎B＞餐A。沿3.芽1.童3任培勿養(yǎng)墨將培胸養(yǎng)基鋪平板竹倒置監(jiān)于符28咸℃曠溫室鏡中培刻養(yǎng)3旗～5破d美，肉啄膏蛋仿白胨哄平板蔑倒置傷于跟37膽℃傾溫室替中培各養(yǎng)2銷～3乳d。舍好3.戀1.樣4盆挑取奴菌落呀多凍將培牌養(yǎng)后程長出贊的單籌個菌嘉落分篇別挑慨取少抬許細涂胞接替種到低PD括A銷培養(yǎng)語基斜干面上芳，分森別置萄于堪28檔℃米和燭37戒℃倦溫室鮮培養(yǎng)槳。若優(yōu)發(fā)現(xiàn)秤有雜練菌，欄需再齒一次陶進行禮分離爽、純桂化，擴直到筆獲得效純培噴養(yǎng)。羞3.介2食盤品微異生物裁學(xué)檢立驗—銷—核菌落波總數(shù)朗（A醬er手ob鞏ic腫p塘la匯te經(jīng)c勻ou券nt勤）的譽測定艦方法園（抱GB豎4設(shè)78盒9.夾2-販20廈10成)畜（檢招驗程膨序指圖疊可打湖印粘郊貼）朋樣品錘：水紋、調(diào)說味品哨、醬薯鹵肉差、蛋為制品唱、飲憶料、衛(wèi)糕點模、面課包、繳糖果名、乳勺制品悉、水握產(chǎn)食耍品、潑冷食僻菜、責(zé)豆制錦品、擾罐頭惹食品枯、酒圓、果秋蔬、藝糧谷逃制品辨、干如果、暈膨化卵食品該、保臭健食范品、敬食用貨螺旋啞藻粉乳、嬰葡幼兒據(jù)食品翅等）區(qū)（鍋材料總不限確于此管，噴報告蒙中需脊要寫陰明具罵體的龍檢測鋒樣品律）檢樣檢樣25g(mL)樣品+225mL稀釋液，均質(zhì)10倍系列稀釋選擇2～3個適宜稀釋度的樣品勻液，各取1mL分別加入無菌培養(yǎng)皿內(nèi)每皿中加入15mL～20mL平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，混勻培養(yǎng)計數(shù)各平板菌落數(shù)計算菌落總數(shù)報告圖菌落總數(shù)的檢驗程序檢樣25g(mL)樣品+225mL稀釋液，均質(zhì)36℃±1℃48h±2h10倍系列稀釋48h±2h36℃±1℃選擇適宜3個連續(xù)稀釋度的樣品勻液，接種LST肉湯管產(chǎn)氣BGLB肉湯產(chǎn)氣不產(chǎn)氣大腸菌群陽性大腸菌群陰性查MPN表報告結(jié)果燕3.喇3鍬食品闖微生掠物學(xué)賄檢驗珍——按大腸檢樣25g(mL)樣品+225mL稀釋液，均質(zhì)36℃±1℃48h±2h10倍系列稀釋48h±2h36℃±1℃選擇適宜3個連續(xù)稀釋度的樣品勻液，接種LST肉湯管產(chǎn)氣BGLB肉湯產(chǎn)氣不產(chǎn)氣大腸菌群陽性大腸菌群陰性查MPN表報告結(jié)果矛（檢殃驗程澆序偽圖鼻可三手滔繪蘆或塌打印戀粘貼慰）斃四、喝數(shù)據(jù)斷記錄還與處委理僵4.孩1來酒曲槍中酵轟母菌她分離簽結(jié)果蛛酒曲柔中酵毫母菌箏分離那結(jié)果訪20槽10經(jīng)年贏月科于日戒品名尼生產(chǎn)農(nóng)批號只規(guī)格鉆型號續(xù)分離蹦人員勢酒餅摸粉鳴稀釋析度魄10勵-蜂？編10嬌-酬？肝10趙-斯？漫空白蜘對照宴CF原U值菌落豪特征皆參考燕以下膠內(nèi)容御根據(jù)頭實際場描述吼：樓菌落原特征鐵與細辮菌相蠻似，禮但比彩細菌溉菌落昂大