紫甘薯脫毒苗高效繁育技術規(guī)程

紫甘薯脫毒苗高效繁育技術規(guī)程1范圍本文件規(guī)定了紫甘薯脫毒苗繁育的術語與定義、甘薯脫毒、脫毒組培苗繁育及移栽、脫毒種薯生產(chǎn)及種苗繁育、病蟲害預防等技術要求。本文件適用于XX省紫甘薯脫毒種苗的繁育。2規(guī)范性引用文件下列文件內(nèi)容對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T8321農(nóng)藥合理使用準則GB7413-2009甘薯種苗產(chǎn)地檢疫規(guī)程NY/T402-2000脫毒甘薯種薯（苗）病毒檢測技術規(guī)程NY/T1200甘薯脫毒種薯NY/T496-2010肥料合理使用通則3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1甘薯脫毒組培苗應用植物莖尖分生組織培養(yǎng)技術獲得的再生組培苗，經(jīng)檢測確認不帶甘薯羽狀斑駁病毒（SPFMV）、甘薯潛隱病毒（SPLV）和甘薯（SPVD）病毒，在容器內(nèi)繁殖的種苗。3.2甘薯原原種（苗）利用脫毒甘薯組培苗在符合NY/T1200標準要求的防蚜蟲網(wǎng)棚或溫室生產(chǎn)的一代脫毒種薯（苗）。3.3甘薯原種（苗）利用甘薯原原種在隔離條件好的網(wǎng)棚生產(chǎn)出的二代脫毒種薯（苗）。3.4甘薯生產(chǎn)用種由原種在常規(guī)XX條件下生產(chǎn)而得的優(yōu)良種薯。生產(chǎn)用種根據(jù)應用年限分為一代生產(chǎn)用種、二代生產(chǎn)用種。4甘薯脫毒4.1品種選擇選擇通過國審家或省審（認）定（登記）的適宜于本生態(tài)區(qū)種植、花青素含量高的紫甘薯品種。在留種田塊挑選具有本品種特征特性，莖葉生長健壯，葉片無葉斑、無皺縮、無花葉、無卷葉等病癥表現(xiàn)的薯塊。4.2催芽用清水清洗薯塊，濕潤紗布覆蓋，置于32℃培養(yǎng)箱中催芽，待芽長到2cm以上使用。4.3消毒4.3.1組培實驗室消毒提前一周對實驗室進行全面空間消毒，如每1m3用40%甲醛20mL、高錳酸鉀15g，先將高錳酸鉀放入容器內(nèi)，再注入甲醛溶液，密閉熏蒸24h，徹底通風后使用。4.3.2器具消毒用于組培的所有器具在1.1kg/cm2、121℃條件下高壓滅菌20min；超凈工作臺使用前應用紫外燈照射20min，接種時打開風機，臺面及內(nèi)壁用75%酒精消毒；操作過程中鑷子、剪刀、接種針、手術刀等工具，每次使用前接觸植物材料的部分應灼燒消毒或插入高溫滅菌器中滅菌，冷卻后使用。4.3.3操作人員消毒操作前用肥皂清洗雙手，更換消過毒的工作服、工作鞋、工作帽、無菌口罩。進入操作臺用75%酒精嚴格擦拭雙手，戴無菌手套進行操作。4.4脫毒組培苗培育4.4.1莖尖消毒處理種薯催芽后，剪取2cm左右的頂芽，加洗滌液用自來水沖洗20min，用75%酒精、0.1%升汞在超凈工作臺下分別消毒30s、8min~10min，然后用無菌水沖洗3次~4次。4.4.2莖尖剝離與接種將處理后的莖尖置于40倍解剖鏡下，用消毒過的鑷子、手術刀和接種針剝離帶1~2葉原基的莖尖分生組織，迅速接種于添加0.5mg/L6-BA+0.5mg/L6-KT+0.1mg/LNAA的MS莖尖培養(yǎng)基上。用酒精燈灼燒容器口并封口，在容器上注明編號、品種名稱及接種時間。4.4.3培養(yǎng)條件甘薯組織培養(yǎng)最適溫度保持在27℃~30℃，相對濕度70%~80%，光照時間12h/d~14h/d，光照強度2000lx~3000lx。4.4.4組培苗繁殖培養(yǎng)50~60d后，莖尖成苗，以一個莖尖分生組織發(fā)育來的植株為一個株系進行繁殖，每品種應保證20個以上株系。4.4.5組培苗病毒檢測單個組培苗株系在MS培養(yǎng)基中擴繁至40株左右時進行病毒檢測。按NY/T402-2000的規(guī)定采用血清學方法或分子生物學方法進行甘薯主要病毒（SPFMV、SPLV、SPVD）檢測。5脫毒組培苗繁育及移栽5.1組培苗繁育將經(jīng)過鑒定不帶病毒的脫毒試管苗株系在超凈工作臺內(nèi)切段快繁。切成一葉一節(jié)或兩葉兩節(jié)的莖段，扦插至不含激素的1/2MS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件同4.4.3，30~35d進入下一輪擴繁，重復繼代培養(yǎng)至移栽。5.2網(wǎng)棚繁育5.2.1苗圃準備移栽圃應覆蓋60~100目的防蟲網(wǎng)棚，隔離條件好，周邊無其他級別種薯和其他易引誘粉虱、蚜蟲的作物。中等肥力地塊每畝施尿素17kg，磷酸二銨22kg~27kg，硫酸鉀20kg~22kg，深翻、整細、耙平。5.2.2煉苗將長至5片~7片葉的組培苗用鑷子輕輕從培養(yǎng)瓶中夾出，去掉老葉、脫落葉、殘留培養(yǎng)基，剪掉過長的根系栽植于營養(yǎng)缽或穴盤中，基質為蛭石：泥炭=2:1，在植物生長室內(nèi)培養(yǎng)2周左右，培育壯苗。5.2.3移栽防蟲網(wǎng)棚內(nèi)撒施生石灰進行土壤消毒（一般每畝不超過100kg），旋耕起壟。煉苗后的組培苗移栽入防蟲網(wǎng)棚。組培苗按株距20cm、行距30cm、深度2cm~3cm移栽，澆水保濕。按NY/T1200的規(guī)定淘汰感染病蟲害的植株。氣溫上升至30℃以上時覆蓋遮陽網(wǎng)。6脫毒種薯生產(chǎn)及種苗繁育6.1脫毒種薯生產(chǎn)6.1.1原原種生產(chǎn)5月上旬至6月上旬將移栽成活的試管苗剪成20cm長，栽插至60目的生產(chǎn)原原種的防蟲網(wǎng)棚內(nèi)，采用起壟栽培，壟距80cm~90cm，整地同5.2.1。在田間管理中，注意棚內(nèi)控溫、控水、控濕。繁育系數(shù)一般為10-20倍。6.1.2原種生產(chǎn)在60目的防蟲網(wǎng)棚或大于1000m隔離區(qū)，用原原種苗生產(chǎn)原種。采用起壟栽培，壟距80cm~90cm，加強水肥管理，及時噴灑殺蟲藥劑。繁育系數(shù)一般為10-20倍。6.1.3生產(chǎn)用種生產(chǎn)在無病田塊，用原種苗繁育生產(chǎn)用種，管理同6.1.2。繁育系數(shù)一般為10-20倍。從脫毒試管苗到生產(chǎn)用種擴繁系數(shù)達到1000倍以上。6.2脫毒種苗繁育選用各級別脫毒種薯，其質量符合NY/T1200要求，在防蟲網(wǎng)棚排種育苗生產(chǎn)脫毒種苗。種苗繁育方法按照GB7413-2009執(zhí)行。7病蟲害預防各級脫毒種薯生產(chǎn)及貯存中，病蟲害防治方法見附錄A。8生產(chǎn)檔案詳見附錄B。附錄A（規(guī)范性附錄）主要病蟲害防治方法防治對象為害時期防治方法蚜蟲苗期防蟲網(wǎng)棚可懸掛黃色粘蟲板，1個/m2。化學防治：3%啶蟲脒微乳劑1500倍液，10%吡蟲啉可濕性粉劑2000倍液或25%噻蟲嗪水分散粒劑4000倍液噴霧。煙粉虱苗期、膨大期2.5%氯氟氰菊酯2000~3000倍液、50%吡蚜酮2000~3000倍液葉背噴施。紅蜘蛛膨大期1.8%阿維菌素乳油2000~3000倍液，15%噠螨靈乳油1000~2000倍液，73%克螨特乳油2000~3000倍液噴霧。甜菜夜蛾斜紋夜蛾膨大期30%甲維?毒死蜱1500倍液、2.5%高效氯氰菊酯乳油1000倍液、40%毒死蜱乳油1000倍液。蠐螬、金針蟲膨大期土壤處理：50%辛硫磷乳油200g~250g，加水稀釋10倍，拌細土25kg~30kg或2%甲基異硫磷2kg~3kg拌細土25kg~30kg撒地面后翻耕。黑斑病膨大期貯存期種薯育秧：①溫水浸種。50℃~54℃溫水處理10min。②藥劑浸種。50%多菌靈可濕性粉劑800~1000倍液浸種5min。薯苗移栽：50%甲基托布X可濕性粉劑500~700倍液或50%多菌靈2500~3000倍液蘸根5min。種薯入窖：50%多菌靈可濕性粉劑500倍液浸3min~5min后晾干入窖。軟腐病貯存期①適時收獲。應在霜降前后收完，避免凍害。②精選薯塊。挑選健康的薯塊，晾干入窖。貯存窖提前硫磺熏蒸，每1m3用硫磺15g。③加強管理。維持溫度在12℃~14℃，濕度80%。附錄B生產(chǎn)檔案B.1繁育基本情況表種植戶姓名種植地點（含經(jīng)緯