凝聚胺交叉配血試驗演示文稿

凝聚胺交叉配血試驗演示文稿本文檔共15頁；當前第1頁；編輯于星期日\10點20分優(yōu)選凝聚胺交叉配血試驗本文檔共15頁；當前第2頁；編輯于星期日\10點20分目的：掌握凝聚胺交叉配血法的原理、方法。

原理：聚凝胺分子是帶高價陽離子多聚季銨鹽，溶解后帶有很多正電荷可以中和紅細胞表面負電荷，有利于紅細胞凝聚，低離子強度溶液也能降低紅細胞的Zeta電位，可進一步增加抗原抗體間的吸引力。

當血清中存在IgM或IgG類血型抗體時，與紅細胞發(fā)生緊密結合，此時加入枸櫞酸鹽解聚液以消除聚凝胺的正電荷，使IgM或IgG類血型抗體與紅細胞產生的凝集不散開；如果血清中不存在IgM或IgG類血型抗體，加入解聚液可使非特異性凝集消失。本文檔共15頁；當前第3頁；編輯于星期日\10點20分試驗分步原理血清紅細胞懸液加入LIM混合液Polybrene受體血型抗原IgG抗體迅速致敏本文檔共15頁；當前第4頁；編輯于星期日\10點20分試驗分步原理Polybrene上海市血液中心血Polybrene分子連接到紅細胞上加入Polybrene本文檔共15頁；當前第5頁；編輯于星期日\10點20分試驗分步原理離心Polybrene拉近紅細胞間的距離并造成凝集1個IgG分子同時連接兩個紅細胞本文檔共15頁；當前第6頁；編輯于星期日\10點20分試驗分步原理加入重懸液減弱了Polybrene的作用重懸液上海市血液中心血加重懸液本文檔共15頁；當前第7頁；編輯于星期日\10點20分試驗分步原理已被血型抗體致敏的紅細胞不會散開陽性結果本文檔共15頁；當前第8頁；編輯于星期日\10點20分試驗分步原理未被血型抗體致敏的紅細胞很快散開陰性結果本文檔共15頁；當前第9頁；編輯于星期日\10點20分試劑:凝聚胺試劑盒；生理鹽水器材：小試管、滴管、試管架、記

號筆、顯微鏡、離心機。

標本：靜脈血。本文檔共15頁；當前第10頁；編輯于星期日\10點20分操作1.取試管兩支，標明主側次側，主側管加受血者血清(血漿)1滴，和供血者3～5％紅細胞懸液(洗滌或不洗滌均可)1滴，次側管受血者3～5％紅細胞懸液(洗滌或不洗滌均可)l滴，加供血者血清(血漿)1滴。2.各加LIM溶液3滴，混合均勻后，再各加Polybrene溶液1滴，并混合均勻，置室溫1分鐘或參照說明書。3．普通離心機1000g離心15秒，然后把上清液倒掉，不要瀝干，讓管底殘留約0.1ml液體。本文檔共15頁；當前第11頁；編輯于星期日\10點20分4．輕輕搖動試管，目測紅細胞有無凝集，如無凝集，則必須重作。5．最后加入Resuspending2滴，輕輕轉動試管混勻并同時觀察結果。6.結果判定：如果在30秒內（或按說明書）凝集散開，代表是由Polybrene引起的非特異性聚集，配血結果相合；如凝集不散開，則為紅細胞抗原抗體結合的特異性反應，配血結果不相合。如反應可疑，可進一步倒在玻片上用顯微鏡觀察。本文檔共15頁；當前第12頁；編輯于星期日\10點20分1.可以用含EDTA抗凝血漿代替血清使用。2.若受血者血清(血漿)含肝素，如洗腎患者，須多加4～6滴Po1ybrene溶液以中和肝素。3.試劑使用前請放置至室溫平衡后再行操作?！咀⒁馐马棥勘疚臋n共15頁；當前第13頁；編輯于星期日\10點20分4.在冬天室溫極低的情況下進行交叉配血試驗操作，由于某些受血者血清中可能含有寒冷凝集素等因素，而導致假陽性的結果出現，建議進行交叉配血試驗操作時室溫保持在22℃左右，最后滴加Resuspending時，將試管立即置入37℃水浴中，輕輕轉動試管混合，并在30秒內觀察結果。5．不同的凝聚胺試劑盒操作方法各不相同，實驗時請嚴格按照說明書操作。本文檔共15頁；當前第14頁；編輯于星期日\10點20分【方法學評價】1.凝聚胺介質配血法反應較鹽水法靈敏度高，能檢測幾乎所有規(guī)則與不規(guī)則血型抗體，適用于各類輸血患者的配血。2.鹽水介