過(guò)碘酸希夫反應(yīng)

化學(xué)反應(yīng)過(guò)碘酸希夫反應(yīng)01概況應(yīng)用實(shí)驗(yàn)效果原理方法目錄03050204基本信息過(guò)碘酸希夫反應(yīng)，簡(jiǎn)稱(chēng)為PAS反應(yīng)（periodicacidSchiffreaction〕。其化學(xué)反應(yīng)的基本過(guò)程多糖分子一般含有羥基，通過(guò)過(guò)碘酸的氧化作用，使多糖暴露出醛基，醛基與無(wú)色堿性品紅結(jié)合反應(yīng)，于多糖存在的部位形成新的紫紅色復(fù)合物，通過(guò)顯微鏡觀察而對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)的糖原、糖蛋白或粘多糖等化學(xué)成分進(jìn)行定位、定性和定量的研究。概況概況PAS染色法（PeriodicAcid-Schiffstain）在組織學(xué)上，主要用來(lái)檢測(cè)組織中的糖類(lèi)。過(guò)碘酸把糖類(lèi)相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。原理原理PAS染色又稱(chēng)糖原染色。一般用來(lái)顯示糖原和其它多糖物質(zhì)。原理：過(guò)碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成乙二醛，再與Schiff氏液的無(wú)色品紅結(jié)合，紅色，定位于胞漿上。應(yīng)用應(yīng)用隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，糖原染色應(yīng)用的范圍更加廣泛，如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì)，心肌病變及其他心血管疾病的診斷，糖原累積病診斷和研究，糖尿病的診斷和研究，用于某些腫瘤的診斷等。除用于糖原的鑒定和黏液的顯示外，還可以觀察腎小球基底膜、結(jié)腸杯狀細(xì)胞中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色。臨床診斷、分類(lèi)和治療提供了重要的依據(jù)。方法固定液液配制染色步驟結(jié)果方法固定液Carnoy固定液：純酒精60ml冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以選用75%酒精.液配制1.過(guò)碘酸酒清夜配法:過(guò)碘酸(HIO.2HO)0.4g95%酒精35mlM/5醋酸鈉(2.72g+蒸餾水100ml)5ml蒸餾水10ml保存于冰箱內(nèi),用棕色瓶,可用兩周.2.Schiff氏液:0.5克堿性品紅加入100毫升蒸餾水中,時(shí)時(shí)搖動(dòng)三角瓶5分鐘,使之充分溶解.冷卻至50℃后過(guò)濾加入10毫升1N鹽酸.冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室溫中至少靜置24小時(shí),然后密封冰箱保存.3.Schiff氏酒精液配置Schiff氏液11.5ml1NHCI0.5ml純酒精23ml4.亞硫酸水1%偏重亞硫酸鈉10ml1NHCI10ml蒸餾水180ml的樹(shù)膠溶解。5.哈瑞或邁耶蘇木精略染色步驟1.石蠟切片脫蠟至水（細(xì)胞涂片，冰凍切片直接水洗）2.蒸餾水洗3.過(guò)碘酸酒清夜10min4.自來(lái)水沖洗10min5.Schiff氏液10min6.流水沖洗5min7.用哈瑞蘇木精或邁耶蘇木精染核3min(細(xì)胞核染色過(guò)深可用鹽酸酒精分化）8.流水沖洗5min9.常規(guī)脫水、透明、封固結(jié)果PAS陽(yáng)性為紅色，細(xì)胞核藍(lán)色。實(shí)驗(yàn)效果準(zhǔn)備結(jié)果流程實(shí)驗(yàn)效果準(zhǔn)備1、10g/L過(guò)碘酸液2、Schiff染液：堿性品紅0.5gDH2O100ml煮沸后，待片刻，加入堿性品紅，振蕩數(shù)分鐘使品紅溶解，冷至50℃加入1M的鹽酸20ml，混勻。待冷卻至25℃加入偏重亞硫酸鈉0.5g，混合，置于帶塞的棕色瓶中，放于暗處24小時(shí)，染液為無(wú)色，如為微紅則加活性炭1－2g，混合過(guò)濾，如過(guò)濾液仍有紅色，應(yīng)再加少許活性炭，時(shí)紅色完全被吸收為止。制成后置于棕色瓶?jī)?nèi)保存在冰箱備用，如變?yōu)榧t色，則不能使用。4、蘇木素液：蘇木素0.9g流程1、將新鮮血片或骨髓片用95%乙醇固定10分鐘。2、10g/L過(guò)碘酸液作用20分鐘3、DH2O洗滌幾次，晾干4、Schiff染液，60分鐘5、用自來(lái)水洗滌15分鐘（細(xì)水長(zhǎng)流沖洗）6、蘇木素染液10分鐘。7、自來(lái)水沖洗15分鐘，待干。結(jié)果陽(yáng)性反應(yīng)，胞漿呈紅色，陰性反應(yīng)，胞漿呈無(wú)色；在正常血片中RBC不染色；PLT染成深紅色；中性粒細(xì)胞胞漿染成紅色或深紅色，有些細(xì)胞有陽(yáng)性顆粒；單核細(xì)胞的胞漿染成淡紅色，可含有細(xì)小或粗大陽(yáng)性顆粒；少數(shù)淋巴