免疫學(xué)技術(shù)原理演示文稿

免疫學(xué)技術(shù)原理演示文稿本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第1頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分

主要內(nèi)容抗原抗體反應(yīng)的原理抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)影響抗原抗體反應(yīng)的因素免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的類型思考題小結(jié)本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第2頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分（一）抗原抗體反應(yīng)的原理

抗原抗體反應(yīng):指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。

抗原表位與抗體高變區(qū)間的互補(bǔ)結(jié)合抗原表位與抗體高變區(qū)的溝槽分子表面的結(jié)合抗原抗體之間的結(jié)合力親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體物質(zhì)基礎(chǔ):本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第3頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分體內(nèi)：表現(xiàn)為溶菌、殺菌、促進(jìn)吞噬或中和毒素或引起免疫病理的損傷體外：凝集、沉淀、細(xì)胞溶解和補(bǔ)體結(jié)合等反應(yīng)本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第4頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分（二）抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)特異性可逆性比例性階段性本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第5頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分特異性：抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)的專一性抗原抗體反應(yīng)特異性示意圖分子基礎(chǔ):抗原表位與抗體分子高變區(qū)之間空間構(gòu)型的互補(bǔ)性（1）特異性本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第6頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原表位，可與彼此相應(yīng)的抗血清發(fā)生反應(yīng)交叉反應(yīng)（crossreactions）抗原抗體交叉反應(yīng)示意圖AgB本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第7頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分(2)可逆性可逆性：抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合成復(fù)合物后，在一定條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性影響因素：抗體對(duì)相應(yīng)抗原的親合力－親合力越高，結(jié)合越牢固，越不易解離環(huán)境因素對(duì)復(fù)合物的影響－pH、離子強(qiáng)度

本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第8頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分前帶(prezone)：抗體過(guò)量后帶(postzone)：抗原過(guò)量等價(jià)帶(equivalencezone)：

抗原抗體比例合適

抗原抗體反應(yīng)比例性示意圖比例性：抗原與抗體發(fā)生可見(jiàn)反應(yīng)需遵循一定的量比關(guān)系(3)比例性本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第9頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分第一階段：特異性結(jié)合階段，反應(yīng)快，不可見(jiàn)第二階段：反應(yīng)可見(jiàn)階段，反應(yīng)慢，出現(xiàn)凝集、沉淀和細(xì)胞溶解等現(xiàn)象(4)階段性本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第10頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分A.抗原、抗體反應(yīng)物的自身因素環(huán)境因素（三）影響抗原抗體反應(yīng)的因素抗原:理化性狀、表位種類和數(shù)目抗體:來(lái)源、特異性、親和性、效價(jià)本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第11頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分B.環(huán)境因素電解質(zhì):生理鹽水或緩沖液酸堿度:pH6～pH9溫度:15℃～40℃，37℃最適本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第12頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分反應(yīng)類型實(shí)驗(yàn)技術(shù)結(jié)果判斷凝集反應(yīng)直接凝集試驗(yàn)觀察凝集現(xiàn)象間接凝集試驗(yàn)同上抗球蛋白試驗(yàn)同上沉淀反應(yīng)液相沉淀試驗(yàn)觀察沉淀，檢測(cè)濁度免疫電泳技術(shù)觀察掃描沉淀峰、沉淀弧補(bǔ)體參與的反應(yīng)補(bǔ)體溶血試驗(yàn)觀察測(cè)定溶血現(xiàn)象補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)同上(四）免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的類型本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第13頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分反應(yīng)類型實(shí)驗(yàn)技術(shù)結(jié)果判斷中和反應(yīng)病毒中和試驗(yàn)檢測(cè)病毒感染性毒素中和試驗(yàn)檢測(cè)外毒素毒性標(biāo)記免疫反應(yīng)熒光免疫技術(shù)檢測(cè)熒光現(xiàn)象放射免疫技術(shù)檢測(cè)放射性強(qiáng)度酶免疫技術(shù)檢測(cè)酶底物顯色發(fā)光免疫技術(shù)檢測(cè)發(fā)光強(qiáng)度金免疫技術(shù)檢測(cè)金顆粒沉淀本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第14頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分按實(shí)際用途分為:e①免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistrytechniqu,IHCT)②免疫測(cè)定(immunoassay)標(biāo)記免疫技術(shù)：用熒光物質(zhì)、放射性核素、酶或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)等標(biāo)記抗原或抗體，進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)后，通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記物對(duì)抗原或抗體進(jìn)行定性、定位或定量分析本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第15頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分按測(cè)定反應(yīng)體系的物理狀態(tài)分為:①均相免疫測(cè)定(homogenousimmunoassay）②非均相免疫測(cè)定(heterogenousimmunoassay)

按檢測(cè)現(xiàn)象分為:①放射免疫技術(shù)②熒光免疫技術(shù)③酶免疫技術(shù)④化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)⑤金免疫技術(shù)本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第16頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分1．什么是抗原抗體反應(yīng)？抗原抗體反應(yīng)的原理是什么？2.抗原抗體反應(yīng)有哪些特點(diǎn)？3.如何理解抗原抗體反應(yīng)的特異性？4．什么是抗原抗體反應(yīng)的可逆性？有何應(yīng)用？5．抗原抗體反應(yīng)體系中為何要確定抗原、抗體的最適比例？6．抗原抗體反應(yīng)有哪些影響因素？7．基于抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)有哪些？思考題本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第17頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分小結(jié)

抗原抗體反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。

抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)是特異性、可逆性、比例性和階段性。

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影響抗原抗體反應(yīng)的因素包括反應(yīng)物的自身因素和環(huán)境因素。免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，免疫學(xué)技術(shù)有凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、補(bǔ)體參與的反應(yīng)、中和反應(yīng)和標(biāo)記免疫反應(yīng)五種類型。

本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第19頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分抗原抗原排斥抗原抗體Y抗原抗原抗原YYYYYYYYYYYYYYYYY

顆粒性抗原（細(xì)菌、紅細(xì)胞等）與相應(yīng)抗體結(jié)合，在電解質(zhì)參與下所形成的肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象，稱為凝集反應(yīng)。第二節(jié)凝集反應(yīng)本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第20頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分分類直接凝集反應(yīng)--顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。細(xì)胞性抗原：細(xì)菌和紅細(xì)胞本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第21頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分凝集原(agglutinogen)：凝集反應(yīng)中的抗原。凝集素(agglutinin)：凝集參與反應(yīng)的抗體本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第22頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分顆粒性抗原凝集素

直接凝集反應(yīng)本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第23頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分1、玻片凝集反應(yīng):

已知抗原+未知抗體凝集團(tuán)塊混濁?2、試管凝集反應(yīng)：定量抗原+系列稀釋抗體不同程度的凝集反應(yīng)YESNO確定抗體的滴度本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第24頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。試管凝集試驗(yàn)本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第25頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第26頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分鮮血者紅細(xì)胞受血者血清O型(抗A、抗B)A型(抗B)B型(抗A)AB型(無(wú))O型----A型+-+-B型++--AB型+++-注:“+”表示有凝集反應(yīng),“-”表示無(wú)凝集反應(yīng)本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第27頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分間接凝集反應(yīng)(indirectagglutination):

將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面，然后與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象.本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第28頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分載體可溶性抗原致敏致敏顆粒NS凝集顆粒

間接凝集試驗(yàn)示意圖本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第29頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分

載體種類及其處理方法紅細(xì)胞：

新鮮紅細(xì)胞吸附蛋白質(zhì)的能力差。一般先醛化后應(yīng)用。聚苯乙烯膠乳顆粒：

可物理吸附蛋白質(zhì)；常制備帶有化學(xué)活性基團(tuán)的顆粒本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第30頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分1.正向間接凝集試驗(yàn)2.反向間接凝集試驗(yàn)3.間接凝集抑制試驗(yàn)間接凝集反應(yīng)的類型本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第31頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分用抗原致敏載體--檢測(cè)抗體正向間接凝集試驗(yàn)本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第32頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分反向間接凝集試驗(yàn)用抗體致敏載體----檢測(cè)抗原本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第33頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分間接凝集抑制試驗(yàn)用抗原致敏載體--檢測(cè)抗原本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第34頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分間接血凝試驗(yàn)本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第35頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分間接乳膠凝集試驗(yàn)概念金黃色葡萄球菌協(xié)同凝集試驗(yàn)本文檔共38頁(yè)；當(dāng)前第36頁(yè)；編輯于星期二\9點(diǎn)47分間接凝集反應(yīng)的應(yīng)用抗原的檢測(cè)反向間接凝集試驗(yàn)可用于檢測(cè)病原體的可溶性抗