2023學(xué)年完整公開課版胚胎工程2

3.3胚胎工程的應(yīng)用及前景胚胎工程技術(shù)：胚胎移植體外受精胚胎分割胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)目前應(yīng)用較多的是：胚胎移植、胚胎分割、體外生產(chǎn)胚胎技術(shù)。二、體外受精和胚胎體外培養(yǎng)1、體外受精（1）概念：采取雌性動物的卵細(xì)胞和雄性動物的精子，使其在試管受精。（2）過程：搜集卵細(xì)胞培養(yǎng)使其成熟搜集精子培養(yǎng)使其獲能將卵細(xì)胞和精子在適宜條件下共同培養(yǎng)使其受精。體外受精1.卵母細(xì)胞的收集和培養(yǎng)對不同動物,采取卵母細(xì)胞的方法不同2.精子的收集和獲能

1)收集的方法:假陰道法,手握法和電刺激等2)獲能處理:培養(yǎng)法：嚙齒動物、家兔和豬化學(xué)誘導(dǎo)法：牛、羊3.受精

在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程試管動物技術(shù)

是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。胚胎體外培養(yǎng)培養(yǎng)液:

水、無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動物血清等.英國人W·希普于1890年在劍橋大學(xué)將純種安哥拉兔的早期胚胎移植到一只已和同種交配、毛色特征完全不同的比利時兔的輸卵管內(nèi)。結(jié)果生出4只比利時仔兔和2只由胚胎發(fā)育而成的安哥拉仔兔。這是世界上第一例胚胎移植，胚胎移植技術(shù)由此創(chuàng)始。比利時兔安哥拉兔如何利用普通的比利時兔，快速地獲得大量的具有性狀優(yōu)良的安哥拉兔呢？你能說出胚胎移植的概念？

1.概念:

將雌性動物的早期胚胎,或者通過其他方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi),使之發(fā)育為新個體的技術(shù)。一胚胎移植胚胎的來源：雌性動物的早期胚胎或體外受精及其他方式得到的胚胎。供體：提供胚胎的個體。受體：接受胚胎的個體。受體的條件：同種、生理狀態(tài)相同。

2.胚胎移植的現(xiàn)狀和意義1)加速育種工作和品種改良；2)大量節(jié)省購買種畜的費用；3)一胎多產(chǎn)；4)保存品種資源和瀕危物種；5)可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力,縮短繁殖周期,增加一生繁殖的后代數(shù)量。3.胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)1)供體和受體相同的生理環(huán)境；2)早期胚胎處于游離狀態(tài),為胚胎的收集提供了可能；3)受體對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥；4)胚胎與受體建立正常的聯(lián)系,但遺傳物質(zhì)沒有改變。4、胚胎移植的基本程序

（1）供體、受體的選擇和處理（2）配種或進(jìn)行人工受精（3）胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（4）胚胎移植（5）移植后的檢查（1）對供體、受體進(jìn)行選擇供體：

遺傳性能和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的個體；受體：

健康和正常繁殖能力的個體處理：

同期發(fā)情具體做法：

注射相關(guān)激素。（2）采集卵母細(xì)胞方法：

超數(shù)排卵具體做法：

注射促性腺激素（3）配種或人工受精精子來源：

同種優(yōu)良的雄性動物。（4）胚胎的收集

在配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來。

（5）對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查

（6）胚胎的保存或移植

（7）胚胎的移植方法一：手術(shù)法具體做法：引出受體子宮和卵巢，將胚胎注入子宮角，縫合創(chuàng)口。方法二：非手術(shù)法將裝有胚胎的移植管送入受體母牛子宮的相應(yīng)部位，注入胚胎。（8）對受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查（9）受體母牛產(chǎn)下胚胎移植的犢牛選擇供體母牛受體母?！诎l(fā)情處理……超數(shù)排卵供體公牛配種沖卵質(zhì)量檢查、培養(yǎng)胚胎移植妊娠檢查分娩（胚胎移植的犢牛）總結(jié)：1.概念:

采用顯微手術(shù)（機械方法）的方法將早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng)后植入受體，以得到同卵雙胎或同卵多胎的技術(shù)。二、胚胎分割2.特點：后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。3、理論基礎(chǔ)動物胚胎細(xì)胞的全能性。所以胚胎分割的時期為：

囊胚或桑椹胚。4、選擇的胚胎：發(fā)育良好的,形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。5、使用的主要儀器：

實體顯微鏡和顯微操作儀。6、具體操作用分割針或分割刀片將胚胎切開，吸出其中的半個胚胎，注入預(yù)先準(zhǔn)備好的空透明帶中，或直接將裸半胚移植給受體。

胚胎分割移植的顯微操作7、操作注意事項：①對囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時，要將內(nèi)細(xì)胞團均等分割。原因：內(nèi)細(xì)胞團一般到囊胚階段才出現(xiàn)，它是發(fā)育為胚胎本身的基礎(chǔ)細(xì)胞，其他細(xì)胞為滋養(yǎng)細(xì)胞，只為胚胎和胎兒發(fā)育提供營養(yǎng)。若分割時不能將內(nèi)細(xì)胞團均等分割，會出現(xiàn)含內(nèi)細(xì)胞團多的部分正常發(fā)育的能力強，少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良，甚至不能發(fā)育等問題。7、操作注意事項：

②胚胎分割的份數(shù)越多，操作的難度會越大，移植的成功率也越低。早期胚胎的體積很小，只有在顯微鏡下才能看到；再者，細(xì)胞數(shù)目是有限的。分割的份數(shù)越多，不但難以做到均等分割，每一份的細(xì)胞數(shù)會越少，而且作為囊胚期的胚胎內(nèi)細(xì)胞團細(xì)胞所受的影響會更大。因此，分割的份數(shù)越多，技術(shù)的難度會越大，移植后的恢復(fù)和發(fā)育的難度會越大，移植成功率自然會降低。8、胚胎分割技術(shù)的缺陷（1）剛出生動物的體重偏低，毛色和斑紋還存在差異；（2）采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胎的可能性是有限的。1.概念：簡稱ES或EK細(xì)胞,是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞。

三.胚胎干細(xì)胞2.特點:

（1）形態(tài)：體積小,細(xì)胞核大,核仁明顯；（2）功能：具有發(fā)育的全能性,可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞;

（3）在體外培養(yǎng)的條件下，ES細(xì)胞可以增殖而不發(fā)生分化。對它可以進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行遺傳改造。胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞核移植（1）治療人類的某些頑癥。利用ES細(xì)胞可以誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞的特性，移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能。目前，在動物實驗方面，用ES細(xì)胞誘導(dǎo)分化出的某些組織細(xì)胞已成功地治愈糖尿病、肝衰竭、心衰竭和成骨不良等疑難病癥。3.主要用途（2）培育出人造組織器官，用于器官移植。

隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展，通過ES細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化，還可以培育出人造