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文檔簡介
章病毒感染的檢查方法與防治原則詳解演示文稿本文檔共39頁;當前第1頁;編輯于星期一\18點21分(優(yōu)選)章病毒感染的檢查方法與防治原則本文檔共39頁;當前第2頁;編輯于星期一\18點21分標本的采集與送檢
1.標本中常加入抗生素。2.低溫保存,盡快送檢。3.血清學標本:兩份本文檔共39頁;當前第3頁;編輯于星期一\18點21分二、病毒的分離與鑒定標本分離培養(yǎng)動物接種雞胚培養(yǎng)細胞培養(yǎng)病毒形態(tài)觀察光鏡電鏡包涵體病毒體CPETCID50,PFU本文檔共39頁;當前第4頁;編輯于星期一\18點21分(一)病毒的分離培養(yǎng)
1.動物接種
應用:尚無敏感細胞的病毒培養(yǎng)動物:兔、鼠、黑猩猩、猴等優(yōu)點:結(jié)果易觀察,可建立動物模型缺點:有飼養(yǎng)條件要求,費用高,動物體內(nèi)常帶有潛伏病毒本文檔共39頁;當前第5頁;編輯于星期一\18點21分動物接種本文檔共39頁;當前第6頁;編輯于星期一\18點21分2.雞胚培養(yǎng)
采用孵化9-14天的雞胚
絨毛尿囊膜(allantocherion)痘苗病毒、人類皰疹病毒
尿囊腔(allantoiccavity)接種部位流感病毒、腮腺炎病毒
羊膜腔(amnioticcavity)流感病毒的初次分離
卵黃囊(yolksac)嗜神經(jīng)病毒本文檔共39頁;當前第7頁;編輯于星期一\18點21分本文檔共39頁;當前第8頁;編輯于星期一\18點21分優(yōu)點:易管理,不帶微生物,成本較低缺點:操作程序復雜本文檔共39頁;當前第9頁;編輯于星期一\18點21分本文檔共39頁;當前第10頁;編輯于星期一\18點21分3.細胞培養(yǎng)
單層細胞培養(yǎng)(monolayercellculture)懸浮細胞培養(yǎng)(suspendedcellculture)
原代細胞(primarycell)細胞種類二倍體細胞(diploidcell)傳代細胞系(continuouscellline)本文檔共39頁;當前第11頁;編輯于星期一\18點21分病毒的細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)瓶單層細胞本文檔共39頁;當前第12頁;編輯于星期一\18點21分
病毒增殖的指征
1.細胞病變效應(cytopathiceffect,CPE)
①細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等(多數(shù)病毒);②形成多核巨細胞或稱融合細胞(麻疹病毒、巨細胞病毒、呼吸道合胞病毒等);③在培養(yǎng)細胞中形成包涵體(狂犬病病毒、麻疹病毒等)。本文檔共39頁;當前第13頁;編輯于星期一\18點21分本文檔共39頁;當前第14頁;編輯于星期一\18點21分麻疹病毒感染細胞呼吸道合胞病毒感染細胞形成多核巨細胞或稱融合細胞本文檔共39頁;當前第15頁;編輯于星期一\18點21分形成包涵體(inclusionbody)本文檔共39頁;當前第16頁;編輯于星期一\18點21分腮腺炎病毒感染細胞2.紅細胞吸附(hemadsorption)病毒囊膜表面血凝素(HA)+紅細胞表面HA受體本文檔共39頁;當前第17頁;編輯于星期一\18點21分3.干擾現(xiàn)象(interference)4.細胞代謝改變
細胞代謝變慢pH變化減慢本文檔共39頁;當前第18頁;編輯于星期一\18點21分
(二)病毒的鑒定
病毒形態(tài)學鑒定病毒血清學鑒定
病毒分子生物學鑒定本文檔共39頁;當前第19頁;編輯于星期一\18點21分(三)病毒數(shù)量與感染性測定1.血凝試驗:病毒總量(活病毒+死病毒)2.空斑形成試驗(plaqueformationtest)3.50%組織細胞感染量(50%tissuecultureinfectiousdose,TCID50)感染性病毒量本文檔共39頁;當前第20頁;編輯于星期一\18點21分空斑試驗本文檔共39頁;當前第21頁;編輯于星期一\18點21分三、病毒感染的血清學診斷應用:①采取標本分離病毒為時已晚②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒③為證實所分離的病毒的臨床意義④進行血清流行病學調(diào)查等本文檔共39頁;當前第22頁;編輯于星期一\18點21分1.中和試驗(neutralizingtest)病毒+中和抗體病毒失去感染性
特點:特異性高,抗體維持時間長應用:人群免疫情況的調(diào)查臨床診斷少用本文檔共39頁;當前第23頁;編輯于星期一\18點21分
2.血凝抑制試驗(hemagglutinationinhibitiontest)—正粘病毒型與亞型鑒定
病毒+雞紅細胞=凝集(血凝試驗)
病毒+特異性抗體+雞紅細胞=不凝集(血凝抑制試驗)
本文檔共39頁;當前第24頁;編輯于星期一\18點21分3.補體結(jié)合試驗
(complementfixationtest)
用已知病毒可溶性補體抗原檢測病人血清中相應的補體抗體
特點:特異性低,抗體出現(xiàn)早,消失快應用:近期感染指標。本文檔共39頁;當前第25頁;編輯于星期一\18點21分四、病毒感染的快速診斷數(shù)小時內(nèi)出結(jié)果病毒顆粒病毒成分(抗原或核酸)早期抗體檢測(IgM)本文檔共39頁;當前第26頁;編輯于星期一\18點21分(一)形態(tài)學檢查電鏡和免疫電鏡檢查普通光學顯微鏡檢查包涵體本文檔共39頁;當前第27頁;編輯于星期一\18點21分(二)病毒成分檢測1.病毒蛋白抗原檢測
免疫標記技術(shù)2.病毒核酸檢測
核酸擴增技術(shù)核酸雜交技術(shù)基因芯片技術(shù)基因測序本文檔共39頁;當前第28頁;編輯于星期一\18點21分(三)早期抗體檢測
可診斷急性感染特異性IgM抗體:孕婦感染風疹病毒EBV早期抗原抗體
本文檔共39頁;當前第29頁;編輯于星期一\18點21分第二節(jié)病毒感染的特異性預防本文檔共39頁;當前第30頁;編輯于星期一\18點21分人工主動免疫(artificialactiveimmunization):將疫苗(vaccine)或類毒素(toxoid)接種于人體,使機體主動產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施。主要用于預防本文檔共39頁;當前第31頁;編輯于星期一\18點21分疫苗
第一代疫苗第二代疫苗第三代疫苗死疫苗活疫苗亞單位疫苗基因工程疫苗重組載體疫苗合成肽疫苗DNA疫苗轉(zhuǎn)基因植物疫苗本文檔共39頁;當前第32頁;編輯于星期一\18點21分本文檔共39頁;當前第33頁;編輯于星期一\18點21分*載體疫苗
利用非致病微生物
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