病理生理學實驗指導

病理生理學實驗指導汪思應(yīng) 鄭紅 鄧松華安徽醫(yī)科大學基礎(chǔ)醫(yī)學院病理生理教研室1/68目錄一，概論┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈1二，病理生理實驗基本操作方法┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈2三，實驗性肺水腫┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈3四，兔小腸灌溉的水腫模型復制┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈3五，缺氧┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈4六，再吸入式缺氧┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈5七，鉀代謝障礙┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈5八，失血性休克┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈5九，喜樹堿誘導細胞凋亡┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈6十，急性左心衰竭┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈7十一，急性右心衰┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈8十二，病例討論—肝性腦病┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈8十三，病例討論—急性腎功能不全┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈9十四，病例討論—MODS┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈10十五，病理生理學實驗教學大綱┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈11十六，病理生理學教學大綱┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈122/68概 論病理生理學（Pathophysiology）是一門聯(lián)系基礎(chǔ)醫(yī)學和臨床醫(yī)學的重要橋梁學科之一。它在理論課程中主要介紹了在致病因素作用下機體的機能代謝： ①發(fā)生何種改變（即臨床癥狀及體征）；②為何發(fā)生改變（即臨床癥狀及體征出現(xiàn)的機制）；③這些改變的規(guī)律性及與疾病的關(guān)系； ④預防和處理這些改變的機理（即疾病防治措施的原理）。因此，病理生理學是一門理論性科學。同時它又是一門實驗性科學。病理生理學的實驗方法有兩種， 即臨床研究和動物實驗研究。 臨床研究的結(jié)果雖能直接應(yīng)用于患者， 但有很大的局限性。所以，病理生理學主要采取動物實驗研究方法。在動物身上復制各種疾病或病理過程， 作為人類相應(yīng)疾病的模型。實驗者可控制或改變實驗條件，以研究疾病的病因、發(fā)病環(huán)節(jié)、發(fā)病機制等。還可用于疾病的實驗性預防、治療及新型藥物和治療手段的開發(fā)研究等。人類疾病動物模型的復制有很多方法。 大致歸納為以下幾種：①從自然界中選擇發(fā)病動物（如選擇生長有腫瘤的鼠、狗等）作為疾病動物模型。但該動物模型個體間差異很大，且發(fā)病條件及病程等不易控制， 已很少被直接采用。現(xiàn)主要用經(jīng)人工選擇培育的不同品系的發(fā)病動物如由 Okamoto和Aoki選育成功的SHR大鼠，其成年后 100%發(fā)生高血壓，常用作自發(fā)性高血壓的動物模型。我國天津醫(yī)學院培育成功的津白-Ⅱ小鼠，成年后易發(fā)生乳腺癌等 ;②根據(jù)疾病發(fā)生原因來復制疾病的動物模型。如用二乙基亞硝胺、二甲基偶氮苯來復制大鼠肝癌動物模型；我室張載福教授用盲腸結(jié)扎穿孔法造成小鼠腹腔感染來復制全身性炎癥反應(yīng)綜合癥（SIRS）的動物模型；③根據(jù)疾病發(fā)生機制復制動物模型。如本指導中用大劑量快速輸液提高家兔肺毛細血管流體靜壓以復制的實驗性肺水腫模型， 動脈控制性放血造成的失血性休克模型。 ④根據(jù)疾病的發(fā)生環(huán)節(jié)復制疾病的動物模3/68型。本室將Lewis肺癌(Lewislungcarcinoma,LLC)接種小鼠足掌復制的腫瘤自發(fā)肺轉(zhuǎn)移模型，將 LLC及B16黑色素瘤（B16Melanoma,B16M）細胞直接注入小鼠眼球后靜脈所復制的腫瘤血道轉(zhuǎn)移模型。 ⑤轉(zhuǎn)基因動物(TransgenicAnimal)或基因敲除(GeneKnock-out)復制疾病動物模型。主要用于遺傳性疾病、重要基因功能的研究。一，病理生理的實驗目的病理生理學實驗課的主要目的是：①通過教學實驗指導學生初步掌握人類疾病動物模型復制的基本方法；②通過典型臨床病例的課堂討論， 培養(yǎng)學生分析病例的能力，為臨床思維和臨床決策打下基礎(chǔ)； ③幫助學習者鍛煉操作技能、 驗證和復習理論知識；④通過實驗與課堂討論的具體環(huán)節(jié)， 使學生初步具有進行醫(yī)學研究與臨床思維所必備的 “嚴肅的科學態(tài)度、嚴密的科學方法和嚴謹?shù)目茖W作風 ”等。二，病理生理學實驗課的要求實驗前 ①認真復習實驗有關(guān)理論及預習實驗指導， 了解實驗的大致情況;②專心聽取指導教師對實驗內(nèi)容的講解，熟悉實驗的具體方法及操作規(guī)程 ;③領(lǐng)取并檢查實驗器材和藥品是否齊全 ;④小組成員應(yīng)有分工，但同時應(yīng)注意合作，使每人都能得到應(yīng)有的技能訓練。實驗時 ①每人應(yīng)確立嚴謹、實事求是的科學態(tài)度，正規(guī)和準確的技能操作耐心、細致地觀察實驗中出現(xiàn)的每個現(xiàn)象；而且要準確、及時、客觀地記錄。整個實驗過程都不得敷衍、馬虎和主觀臆測 ;②必須伴隨整個實驗過程進行科學思維，力求了解每個步驟和每個現(xiàn)象的意義 ;③要注意盡量減少對實驗動物的不必要損傷;④愛護實驗器材，使用藥品應(yīng)注意節(jié)約。4/68實驗后 ①認真整理和分析實驗結(jié)果 ;②儀器和藥品用完后要清點，并放回原處。應(yīng)清洗者必須及時清洗干凈。每個實驗組，應(yīng)保持自己桌面的清潔，每次下課后，打掃、整理好實驗室 ;③按時完成實驗報告，交老師評閱。三，病理生理實驗報告應(yīng)書寫的項目和內(nèi)容1，姓名、班次、組別、日期。2，實驗名稱。3，實驗目的及原理。4,實驗動物及材料：包括種類、數(shù)量、性別、體重。5,實驗的具體步驟：簡要寫出主要實驗方法。6,實驗結(jié)果。根據(jù)實驗目的將原始記錄系統(tǒng)化、條理化。其表達方式有： ①敘述式：用文字將觀察到的、與實驗目的有關(guān)的現(xiàn)象客觀地加以描述， 描述時需要有時間概念與順序。②表格式：能夠較為清楚地反映觀察內(nèi)容， 有利于相互對比。每一圖表應(yīng)說明一定的中心問題。 圖表應(yīng)由學生自己設(shè)計。表內(nèi)的項目及計量單位應(yīng)填明。③曲線式：實驗中描記的血壓、呼吸等曲線應(yīng)寫于實驗報告中。書寫時，須根據(jù)原始的描記圖，取其明顯變化的有關(guān)各段連接而成。7,實驗結(jié)果分析或討論。由于實驗指導中的每一個實驗，都經(jīng)過編寫單位反復試做，結(jié)果可靠。同學所做實驗，次數(shù)雖少，若與這結(jié)果基本一致，即可作為分析的依據(jù)。討論要包括：①運用所學理論，討論和解釋實驗結(jié)果，論證實驗目的。②實驗結(jié)果提示了哪些新問題。如果出現(xiàn) “異?，F(xiàn)象”，應(yīng)加以分析。8,結(jié)論：根據(jù)實驗結(jié)果簡要地寫明。(汪思應(yīng))5/68實驗一 基本實驗操作訓練[實驗目的]了解病理生理學動物實驗的基本用途、技術(shù)；掌握氣管、頸動脈、靜脈及股動脈插管，輸液及血壓測量技術(shù)。[藥品和器材]生理鹽水（0.9%NaCl），10.0%NaCl、0.1%肝素、普魯卡因。小動物手術(shù)器械一套（每套大號止血鉗各兩把，中號采止血鉗兩把，彎直小號止血鉗各兩把，有齒鑷各一把，眼科剪和鑷各一把，組織剪和粗剪各一把，手術(shù)刀片的刀柄一副）、粗細縫線各一卷，2ml和5ml和30ml注射器（第6號針頭），標本架（彈簧夾）一個，搪瓷搪瓷碗（ 25ml）和方盤各一個。[實驗動物]家兔，體重2.5kg。[主要內(nèi)容]病理生理學教學常用實驗動物簡介病理生理學實驗研究采用何種動物，是決定研究成功與否的一個重要問題。一般應(yīng)針對實驗目的，根據(jù)各種實驗動物疾病模型的經(jīng)驗， 逐一考慮下述一系列問題：所要求的基本模型能否復制成功， 成功率大小，采用的方法和所觀察指標是否簡單易行，實驗結(jié)果穩(wěn)定一致的程度如何， 動物是否便于管理，所獲得的實驗結(jié)果和人的臨床情況相比相似性的大小，需耗費的人力、物力、財力等。只有對這些因素進行綜合考慮，比較以后，才能確定采用何種動物較為合適。 在教學上，不但要考慮以上這些問題，還應(yīng)考慮教學效果，才能滿足實驗的目的和要求。6/68病理生理學實驗常用的動物有：兔、大白鼠、小白鼠、狗等。它們和人一樣，都屬于哺乳類動物。它們的生理特性與人接近。現(xiàn)將病理生理學實驗常用的動物用途簡介如下：（一）家兔家兔能用于復制許多病理過程和疾病，如：水腫、炎癥、電解質(zhì)紊亂、酸堿平衡紊亂、出血性休克、 DIC、肺癌、動脈粥樣硬化、高脂血癥、心律失常、慢性肺心病、慢性肺動脈高壓、肺水腫、肝炎、膽管炎、阻塞性黃疸、腎性高血壓、腎小球腎炎、急性腎功能衰竭等。特點：①價格較低，性溫順，易飼養(yǎng)，繁殖率高，容易選到調(diào)節(jié)類似的對照組兔。因此，當實驗中必須用較大動物時，常用家兔； ②在血液循環(huán)方面，家兔血管雖較狗略細，但很容易做到直接描記頸動脈壓、股動脈壓、肺小動脈契壓、中心靜脈壓等。兔的心血管系統(tǒng)機能較貓、狗為差，用來觀察血壓反應(yīng)不如狗。手術(shù)時，兔易發(fā)生反射性衰竭，血壓反應(yīng)不穩(wěn)定，故給兔做手術(shù)時，動作要輕。兔的減壓神經(jīng)是獨立走向的， 便于觀察減壓神經(jīng)對心、血管系統(tǒng)的作用。家兔心臟在離體情況下，搏動很久，是觀察有害因子對哺乳類動物心臟直接作用較合適的一個模型。離體兔耳，又可作為觀察有害因子對血管直接作用的一個模型； ③家兔適用于研究發(fā)熱、解熱藥和檢查致熱源；④消化系統(tǒng)方面：家兔系草食動物，消化系統(tǒng)與人類相差較遠，缺乏嘔吐反射，所以不能用家兔作消化系統(tǒng)方面的研究；⑤其他：家兔對組織胺不敏感，對注射組織胺并不產(chǎn)生血壓下降，甚至出現(xiàn)升壓反應(yīng)；因此，對家兔注射大量組織胺，并不能造成過敏性休克模型。實驗用家兔體重必須 2.5公斤以上。（二）小鼠7/68小鼠能用于復制許多病理過程和疾病，如：水腫、炎癥、缺氧、多種癌、肉瘤、白血病、多種傳染病、慢性氣管炎等。特點：①小鼠是實驗室最常用的一種動物，價格低廉，便于大量繁殖，對動物實驗同種、純種、性別和年齡的要求，比較容易滿足，生活條件也容易控制。因而只要符合實驗要求，應(yīng)盡量采用。它適合于需要大量動物的實驗， 容易滿足統(tǒng)計學的要求。例如：胰島素、促腎上腺皮質(zhì)激素的生物效價測定，毒物半致死量的測定；②小鼠對許多疾病有易感性，因而適用于研究這類疾病，例如：血吸蟲病、瘧疾、流感、腦炎等病。小鼠的純種品系甚多，每系有其獨特的生物特性，對某些疾病易感，例如： C3HA系對癌瘤敏感，C58系則抗癌；因此，純系小鼠廣泛應(yīng)用于各種腫瘤的研究；③當研究指標主要為組織學特別是電鏡觀察時， 應(yīng)用小鼠因器官較小，可節(jié)約人力、物力。例如：用于研究慢性氣管炎時肺的變化；④小鼠具有發(fā)達的神經(jīng)系統(tǒng)，能應(yīng)用于復制神經(jīng)官能癥模型； ⑤小鼠對外界環(huán)境適應(yīng)性差，不耐冷熱，經(jīng)不起饑飽，比較嬌嫩；因此，做實驗時要耐心細致，動作要輕，不然會干擾實驗結(jié)果。實驗用小鼠常用品系有昆明種小鼠、 BALB/C、C57BL/6等,必須6-8周齡，18-20克?？筛鶕?jù)實驗要求選擇性別。（三）大白鼠大白鼠能用于復制許多病理過程和疾病，如：水腫、炎癥、缺氧、休克、DIC、心肌梗塞、肝炎、腎性高血壓、各種腫瘤等。特點：①大白鼠和小白鼠相似，便于大量繁殖、對動物實驗同種、純種、性別和年齡的要求，比較容易滿足，生活條件也容易控制，適合于需要大量動物而小白鼠不能滿足實驗要求時，如：間斷亞硝胺口服或胃腸道外給藥能誘發(fā)大白鼠8/68食道癌，而在小白鼠則很少引起食道癌；因而，在這種情況下，采用大白鼠較為合適；②大白鼠較小白鼠體大，對需要作大體型的實驗，用大白鼠較為合適，例如：可用于直接記錄血壓，其血壓反映較家兔為好，大白鼠可用于研究休克，DIC時血液循環(huán)變化，大白鼠后肢可用作肢體血管灌流實驗， 其心臟可用作離體心臟實驗，從大白鼠胸導管采取淋巴能研究疾病時淋巴的變化； ③大白鼠無膽囊，因此，常用大白鼠膽管收集膽汁，進行疾病時膽汁功能研究； ④大白鼠的垂體-腎上腺系統(tǒng)功能很發(fā)達，常用作應(yīng)急反應(yīng)和腎上腺、垂體等內(nèi)分泌功能實驗，大白鼠的高級神經(jīng)活動發(fā)達，因此，也廣泛用于神經(jīng)官能癥的研究。大白鼠常用品系有 SD、Wister，常用6-8周齡，體重250克的大鼠。動物的捉拿和固定及其他操作方法動物的捉拿和固定是進行動物實驗的基本操作之一， 實驗者應(yīng)當掌握嫻熟，首先，應(yīng)對動物的一般習性有所了解， 然后依其習性的不同，采用相應(yīng)溫順的方法，迅速將其固定在便于實驗操作和觀察記錄的體位。 下面介紹幾種常用動物的捉拿和固定方法。（一）家兔的捉拿和固定 ,頸部手術(shù)、股動脈分離及插管1，家兔的捉拿和固定：家兔習性溫順，除腳爪銳利應(yīng)避免被其抓傷，較易捕捉，捉拿時切忌以手提兔耳。拖拉四肢或提拿腰背部。正確的方法是用右手抓住其項背部皮毛， 輕提動物，再以左手托住其臀部，使兔的體重主要落在左手掌心。家兔的固定，依不同的實驗需要，常用兔盒固定或兔臺固定。我室采用兔臺固定：在需要觀察血壓、呼吸和進行頸、胸、腹部手術(shù)時，應(yīng)將家兔以仰臥位固定于兔手術(shù)臺上，固定方法是，先以四條 1.0cm寬的布帶做成活的圈套，分別9/68套在家兔的四肢腕或踝關(guān)節(jié)上方， 抽緊布帶的長頭，將兔仰臥位放在兔臺上，再將兔頭固定器固定。然后將兩前肢放平直，把兩前肢的系帶從背部交叉穿過， 使對側(cè)的布帶壓住本側(cè)的前肢，將四肢分別系在兔臺的木樁上。練習耳緣靜脈注射。2，家兔頸部手術(shù)、股動脈分離及插管：家兔稱重固定于兔臺后，剪去其頸部兔毛，在取 5.0-7.0ml1%普魯卡因皮下浸潤麻醉，沿頸正中切開頸部皮膚約 10.0cm，分離皮下筋膜組織，可見三塊肌肉：即頸正中的胸骨舌骨肌，兩側(cè)的胸鎖乳突肌。在胸鎖乳突肌外緣與皮瓣交界處是頸外靜脈，鈍性分離光滑一側(cè)頸外靜脈， 在下面穿兩條線，結(jié)扎頸外靜脈遠心端，在近心端靠近結(jié)扎處剪一小口插入靜脈導管 （靜脈導管連接靜脈輸液裝置，注意排除管道的氣體），結(jié)扎固定，打開靜脈輸液裝置的螺旋夾，如果輸液暢通時，即調(diào)整螺旋夾使液體維持 5-10滴/分鐘以保持插管通暢。分離開胸骨舌骨肌，其下方是氣管，分離并“倒T型”切開氣管，插入氣管插管及結(jié)扎。準備描計呼吸。在氣管的左右后方，各有一條與交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)伴行的頸動脈，分離頸動脈并穿線兩條，結(jié)扎頸動脈遠心端，用動脈夾夾住近心端，在近心端靠近結(jié)扎處剪一小口插入動脈導管（動脈導管內(nèi)充含肝素的生理鹽水，并與血壓計相連，血壓計壓力140mmHg左右），結(jié)扎并固定導管，松開動脈夾可測量血壓。剪去一側(cè)腹股溝兔毛，觸摸股動脈搏動以確定其位置，在 1.0%普魯卡因皮下浸潤麻醉下，沿股動脈走行方向切開皮膚， 分離皮下組織，在股動脈隱窩處找出并小心分離出股動脈，穿線兩條，結(jié)扎股動脈遠心端，用動脈夾夾住近心端，在近心端靠近結(jié)扎處剪一小口插入動脈導管 （動脈導管與50mL注射器相連，并用肝素抗凝），結(jié)扎并固定導管，松開動脈夾可放血。10/68（二）大白鼠的捉拿和固定大白鼠牙齒鋒利，要提防被其咬傷，從鼠籠內(nèi)捉拿時右手最好帶手套，捉住其尾巴，提出置于實驗臺上，以左手拇指和食指、中指抓住兩耳后項背部皮膚，將鼠固定在左手掌中，右手進行操作，也可伸開左手之虎口，敏捷地從背部插向腋下，使食指位于左前肢前，拇指、中指位于左前肢之后，一把抓住，右手進行操作，如操作時間較長，可參照家兔固定方法將其固定在大白鼠固定板上。（三）小鼠的捕捉和固定小鼠較大白鼠溫和，雖也要提防被其咬傷手指，但勿需帶手套捕捉。可先用右手抓住鼠尾提起，置于鼠籠或?qū)嶒炁_上，用左手的拇指和食指抓住小鼠兩耳后項背部皮膚，將鼠體置于左手心中，拉直后肢，以無名指及小指按住鼠尾。同時右手可手持注射器作小鼠腹腔等注射。（汪思應(yīng)）實驗二 實驗性肺水腫［目的要求］復制實驗性肺水腫結(jié)合理論掌握肺水腫的表現(xiàn)及其發(fā)生機理［實驗原理］大劑量快速輸液導致兔肺毛細血管流體靜壓升高，肺組織液生成大于回流，引11/68起肺水腫的發(fā)生。［實驗動物］家兔，體重2.5kg。[藥品及器材]1.0%普魯卡因，腎上腺素,生理鹽水（0.9%NaCl）,常規(guī)小動物實驗用器材。[步驟及觀察]一 實驗組1. 取兔一只，稱體重后仰臥固定于兔臺上、剪去頸部被毛，在 1%普魯卡因局麻下切開頸部皮膚，按常規(guī)操作，分離氣管和一側(cè)頸外靜脈，在下面穿一線。切開氣管，插入氣管插管。準備描計呼吸。把靜脈導管連接靜脈輸液裝置，注意排除管道的氣體。結(jié)扎頸外靜脈遠心端，在近心端靠近結(jié)扎處剪一小口插入靜脈導管，結(jié)扎固定，打開靜脈輸液裝置的螺旋夾，如果輸液暢通時，即擰緊螺旋夾。描計一般正常呼吸，并用聽診器聽肺的呼吸音，然后輸入37℃生理鹽水（輸入總量按100-120ml/kg,輸記速度為180-200滴/分）待滴注將近完畢立即從輸液瓶中加入稀釋腎上腺素生理鹽水（按腎上腺素0.45mg/kg體重）。密切觀察呼吸改變和氣管插管是否有粉紅色泡沫液體流出，并用聽診器聽診肺部有無濕性羅音出現(xiàn)，當證明肺水腫出現(xiàn)時，則夾住氣管，處死動物，打開胸腔，用線在氣管分叉處結(jié)扎（防止肺水腫液流出）在結(jié)扎處上方切斷氣管，小心把心臟及其血管分開，（勿損傷肺）把肺取出，用濾紙吸去肺表面的水分后稱取肺重，計算肺系數(shù)，用排水法測肺體積。然后肉眼觀察肺大體的改變，并切開肺，觀察肺水腫和正常肺組織切片。12/68肺系數(shù)=肺重（克）/兔體重（千克）正常肺系數(shù)4.0-5.0二對照組與實驗組基本相同，除不加腎上腺素外。[注意事項]1. 實驗兔和對照兔的輸記速度應(yīng)基本一致，輸液不要太快，以控制在 180-200滴/分為宜。解剖取出肺時，注意勿損傷肺表面和擠壓肺組織，以防止水腫液流出，影響肺的數(shù)值。（鄭紅、汪思應(yīng)）參考實驗一 兔小腸灌溉的水腫模型復制[實驗目的]1．學會小腸灌溉標本的制作。2．了解毛細血管壓，膠體滲透壓，晶體滲透壓在水腫發(fā)生中的作用。[實驗目的]利用血管機械阻斷與否，使局部組織液生成增加或減少。[藥品和器材]生理鹽水（0.9%NaCl），10.0%NaCl、0.1%肝素、普魯卡因。小動物手術(shù)器械一套（每套大號止血鉗各兩把，中號采止血鉗兩把，彎直小號止血鉗各兩把，有齒鑷各一把，眼科剪和鑷各一把，組織剪和粗剪各一把，手術(shù)刀片的刀柄一13/68副）、粗細縫線各一卷，2ml和5ml和30ml注射器（第6號針頭），標本架（彈簧夾）一個，搪瓷碗（25ml）和搪瓷方盤各一個。[實驗動物]家兔，體重2.5kg。[實驗步驟]（一） 兔小腸灌流標本的制作1.取家兔一只，稱重后背位固定于兔板， 1%普魯卡因局部麻醉后，自劍突下2.0cm做腹部正中切口約 8.0cm，打開腹腔，用溫鹽水紗布覆蓋切口及周圍皮毛。2.在左腹側(cè)腔將小腸輕輕牽出，并一側(cè)（使動脈位于靜脈之上） 。找到腸系膜前動、靜脈（相當于人的腸系膜上 A、V），管徑較細，色紅且有搏動的一根為動脈，另一根為靜脈。3.在靠近腸系膜前動脈的根部用小彎止血鉗分離動脈約 1.5cm，分離時注意不要損傷動脈的分支。然后穿兩根細線備用。自耳緣靜脈注射0.1%肝素1.0ml/kg，1-2分鐘后結(jié)扎腸系膜前動脈的近心端，向遠心方向插入細塑料管約1.0cm。扎牢后，將此線在細塑料管上再做一次結(jié)扎以防脫落。于動脈插管結(jié)扎線下第一根動脈分支的上方，動脈和靜脈之間穿一根粗線將腸管和靜脈一并結(jié)扎，然后在第一根分支的上方再穿一線將腸管單獨結(jié)扎，并從兩扎線間將腸管和靜脈切斷。注意標本側(cè)的靜脈是游離的，其內(nèi)的液體可以自由流出。6.自扎線處開始向下排空小腸約 25.0cm，在小腸20.0cm和離動脈插管5.0cm14/68的血管處穿兩根粗線，將腸管和血管一并結(jié)扎兩次， 然后在兩結(jié)扎線間剪斷，最后沿圖中虛線所示游離標本。將標本懸掛在標本架上，在腸游離緣上支腸長垂直剪3-4個小口，以腸腔內(nèi)容物能流出為度。以5ml注射器吸取生理鹽水，經(jīng)動脈插管沖去血管中的血液，該標本即可用于灌溉。（二） 灌流裝置的準備。（三） 灌流:①0.9%NaCl;②中分子右旋糖苷灌流,25cm水柱壓力加壓灌流;③0.9%NaCl灌流;④10.0%NaCl灌流;⑤100cm水柱壓力加壓灌流。[結(jié)果與討論]（鄭紅、汪思應(yīng)）實驗三 缺 氧[實驗目的]：1，在動物身上復制缺氧性、血液性等缺氧模型；2，并觀察缺氧動物呼吸，活動狀態(tài)、皮膚及內(nèi)臟顏色的變化，分析不同類型缺氧的發(fā)病機理；3，觀察麻醉、年齡等因素對缺氧耐受性的影響。[實驗原理]：人為制造小白鼠處于密閉環(huán)境， 由于不斷用氧，使其吸入氣體氧分壓下降，復制小鼠低張性缺氧動物模型， 腹腔注射亞硝酸鹽、吸如CO復制小鼠等張性缺氧動物模型。[實驗動物]：小白鼠（18-22g,雌性或雄性）。15/68[藥品器材]：碳酸氫鈉、甲酸、濃硫酸、 5%亞硝酸鈉、1%美蘭、10%烏拉坦，0.1%氰化鉀、生理鹽水、凡士林、 25ml廣口瓶、一氧化碳發(fā)生裝置、手術(shù)剪刀、鑷子、30ml、5ml及1ml注射器、氧氣袋。低張性低氧血癥：取體重相似，性別相同的小白鼠三只分別裝入三個廣口瓶內(nèi)，觀察小白鼠正常活動情況，呼吸頻率（次/10秒），深度、皮膚和口唇的顏色，然后塞緊瓶塞，記錄時間，以后每三分鐘重復觀察上述指標一次（如有其他變化則隨時記錄）直到動物死亡為止。動物尸體在實驗做完后，依次打開腹腔，比較血液或肝臟顏色。2，麻醉對機體耐受缺氧的影響：體重相近的小白鼠兩只，其中一只腹腔內(nèi)注入10.0%烏拉坦0.1ml/10g。分別放在廣口瓶中，塞緊瓶塞后，開始記時。以下步驟同實驗1。3，年齡對機體耐受缺氧的影響：取 1只成年鼠和一只新生紅皮鼠，同放在一個廣口瓶（紅皮小鼠放入一小青霉素瓶中） 蓋緊瓶塞，觀察小鼠活動等情況，記錄生存時間。4，亞硝酸的中毒缺氧：取體重相近小鼠 3只，甲鼠腹腔內(nèi)注射 5.0%亞硝酸鈉0.2ml，乙鼠在注射亞硝酸鈉后（同劑量），再注射1%美蘭0.2ml，丙鼠腹腔內(nèi)注射生理鹽水 0.2ml對照。觀察各鼠呼吸、皮膚顏色和全身活動，存活時間。5，一氧化碳中毒缺氧：取小鼠兩只，觀察正?；顒樱诖?、鼻、尾部皮膚顏色，呼吸頻率。取1只小鼠放入250ml廣口瓶內(nèi)，用注射器抽 10ml一氧化碳注入瓶內(nèi)，立即蓋上瓶蓋，注意動物行為狀態(tài)和皮膚顏色變化， 呼吸頻率。待小鼠痙攣跌倒時，迅速打開瓶蓋，取出小鼠并進行通氧等急救措施，觀察16/68恢復情況；另一只小鼠重復 CO中毒實驗，但不進行搶救，死后進行解剖，觀察皮膚、內(nèi)臟和血液的顏色。6，請自己設(shè)計一實驗，觀察環(huán)境溫度對小鼠缺氧耐受性的影響 （附于實驗報告中）。（汪思應(yīng)、鄭紅）參考實驗二 再吸入式缺氧[實驗目的]：1．在動物身上復制乏氧性缺氧模型；2．并觀察缺氧動物血氧指標變化，分析不同類型缺氧的發(fā)病機理；[實驗原理]：人為制造家兔處于密閉環(huán)境，使其吸入氣體氧分壓下降，復制家兔低張性缺氧動物模型，并觀測血氧指標的變化。[實驗動物]：家兔，體重2.5kg。[藥品器材]：生理鹽水（0.9%NaCl），20.0%NaOH、0.1%肝素、普魯卡因。小動物手術(shù)器械一套（每套大號止血鉗各兩把，中號采止血鉗兩把，彎直小號止血鉗各兩把，有齒鑷各一把，眼科剪和鑷各一把，組織剪和粗剪各一把，手術(shù)刀片的刀柄一副）、粗細縫線各一卷，2ml和5ml和30ml注射器（第6號針頭），標本架（彈簧夾）一個，搪瓷碗（ 25ml）和搪瓷方盤各一個，氧氣袋，17/68血壓計，血紅素測定裝置等。[實驗步驟]：1，稱重后背位固定于兔臺上，手術(shù)部位去毛。2，1%普魯卡因局麻下，切開頸部正中皮膚約 5-8cm，分離氣管并作氣管插管，于氣管兩側(cè)分離頸總 A穿線備用。3，局麻下，切開腹股溝部皮膚，分離一側(cè)股動脈，穿線備用。4，耳緣V注入肝素2.0ml/kg(500u/ml),使全身肝素化。5，側(cè)頸總A做動脈插管結(jié)扎固定并與血壓描計相連。氣管插管與呼吸描計相連，股A內(nèi)插入通針頭的細塑料管，結(jié)扎備用。6，描計正常呼吸曲線（包括血壓曲線）。以另一側(cè)頸總 A行夾閉反射。7，自股A放血數(shù)滴于表面器皿上測動物 HB含量。8，用吸管吸取20.0%NaOH10-20ml于再吸入式缺氧瓶內(nèi)，塞緊瓶塞。將瓶之端與氣管插管之側(cè)管相連，使兔的呼吸只能與缺氧瓶水柱壓記相通，立即記錄開始缺氧時間，缺氧過程中，不斷搖動缺氧瓶，使兔呼出氣之CO2充分為NaOH所吸收。9，意動物血壓及呼吸變化，當血壓降至原水平 1/2時，立即自股動脈采血（開始幾滴血液棄去），測定HB含量，并行頸A夾閉反射。10， 血壓降至20mmHg時，停止缺氧，觀察其恢復情況改良沙利氏血色素測定法①于血色素稀釋管內(nèi)加 1%鹽酸至10.0%刻度處。②用血紅蛋白吸管于表面皿內(nèi)吸血至 20立方毫米刻度處，用脫脂棉擦去管口周圍的血液。18/68③將吸管迅速浸入稀釋管中的鹽酸內(nèi)，輕輕將管內(nèi)血液吹出，反復吸入上部之鹽酸將吸管的血洗凈，將稀釋管插入血色素比色架內(nèi)，靜止 10分鐘。10分鐘后于比色管內(nèi)緩慢加入蒸餾水稀釋，邊加邊混勻，當管內(nèi)顏色接近于標準比色柱時，加水的速度要慢。⑤當管內(nèi)顏色與標準比色柱一致時，從管壁刻度記下讀數(shù)，即為 100ml血壓所含血紅蛋白的克數(shù)。（鄭紅、汪思應(yīng)）參考實驗三 鉀代謝障礙[目的要求]觀察高血鉀對心臟的毒性作用了解和掌握高血鉀心電圖改變的特征。[實驗原理]腹腔或靜脈注射鉀，造成動物血清鉀增高。[實驗動物]鼠(SD或Wister,250.0g)或家兔(體重2.5kg)。[藥品與器材]20.0%烏拉坦溶液、2.0%、5.0%、10.0%氯化鉀溶液。5ml注射器、小兒頭皮針、手術(shù)剪、心電圖機或二導生理記錄儀。[實驗步驟與觀察]鼠高血鉀1）動物稱重、仰臥固定，用20.0%烏拉坦0.5ml/100g體重腹腔注射麻醉。2）在心電圖機原有的電極檢緊包鋁皮，套上6號注射針頭（勿松動）。然后將19/68電極分別入四肢踝部皮下，導線按右前肢（紅） ，左前肢（黃）、右后肢（黑）、左后肢（綠）順序。（如用生理二導記錄儀，則按二導儀導線聯(lián)后方式連接） 。（3）記錄一段正常心電圖，紙長以每實驗小組內(nèi)每人分到 4-5個園形為度。4）由腹腔推入5.0%氯化鉀1.0ml，注射后5分鐘記錄一次心電圖變化。（或注射2.0%氯化鉀2.0ml）5）從首次推注氯化鉀起，每5分鐘再注射5.0%氯化鉀0.5ml。每次注后5分鐘記錄一次心電圖改變（有可能要隨時記錄）發(fā)生室顫時，立即開胸觀察心跳狀態(tài)。兔高血鉀（1）稱重后仰臥固定，可不麻醉，若躁動可用 20.0%烏拉坦5.0ml/kg耳緣靜脈麻醉。2）局麻下由胸壁正中線切開皮膚，切口約4-5厘米，分離左側(cè)胸壁肌肉，用粗剪刀在靠近胸骨緣處剪斷第二及第三肋骨，用擴胸器撐開胸腔切口，暴露心臟。3）連接心電圖導線，按右前肢（紅）、左前肢（黃）、右后肢（黑）、左后肢（綠）順序。4）記錄一段正常心電圖。（或二導儀）5）用小兒頭皮針插入耳緣靜脈，并用膠布固定，經(jīng)耳緣靜脈推注2.0%氯化鉀1.0ml/kg1分鐘注完，注射后 5分鐘記錄一次心電圖或二導儀的變化。（6）以后每5分鐘由耳緣靜脈注入 2.0%氯化鉀2ml，間斷記錄心電變化，若在30分鐘仍未出現(xiàn)室顫，可由耳緣靜脈緩慢注入 10%氯化鉀，并觀察心電變化情況，直至家兔心臟停博。[注意事項]20/681.腹腔注射氯化鉀，應(yīng)選擇下腹部前 1/4處，以避免將溶液注入膀胱內(nèi)。2.盡可能避免導線縱橫交錯，動物固定臺上保持干燥，每次使用針形電極時要用酒精或鹽水擦凈，以保持良好的導電狀態(tài)。（鄭紅、汪思應(yīng)）實驗四 失血性休克[實驗目的]1，復制失血性休克的動物模型；檢測休克時部分體液因子的變化；2，通過比較擴血管藥和縮血管藥對失血性休克的療效，分析休克發(fā)生機制。[實驗原理]用控制性動脈放血造成家兔急性失血，復制失血性休克的動物模型。[實驗動物]家兔，體重2.5kg。[藥品和器材]動物手術(shù)器械一套，呼吸血壓描記裝置，靜脈輸液裝置一套，三通開關(guān)，50ml、20ml、10ml注射器各一個，肝素（500μ/ml），1%普魯卡因，生理鹽水，低分子右旋糖苷，山莨菪堿，去甲腎上腺素。[實驗方法和步驟]1.家兔一只稱重，麻醉，剪去頸部、股部兔毛。2.1%普魯卡因局麻下頸部正中切開皮膚， 分離氣管，分離左側(cè)頸動脈及右側(cè)頸靜脈，穿線備用，分離一側(cè)股動脈穿線備用。3.耳緣靜脈注入肝素（2.0ml/kg）21/684.作氣管插管；頸靜脈插管連接中心靜脈壓裝置；頸動脈插管（內(nèi)有含肝素的生理鹽水）并連接血壓描記裝置；股動脈插入帶有三通開關(guān)的乳膠管備用。5.劍突下2.0cm處于腹正中線切開皮膚 4.0-5.0cm，將腹白線輕輕拖起，切開腹白線，注意止血，用手輕輕將一段二十指腸和系膜拉出腹前用溫生理鹽水紗布包裹，然后將家兔向左側(cè)位固定，把腸系膜放在置于微循環(huán)裝置的觀察孔上， 用大頭針固定，用顯微鏡直接觀察血前后的腸系膜毛細血管的血流狀況。6.打開連接股動脈的三通開關(guān)，一次快速放血于 50ml注射器內(nèi)，待血壓降到40mmHg水平，取血4.0ml備用。維持血壓40mmHg30分鐘，每隔10分鐘取血4.0ml，分別檢測休克不同時間 TNF，MDF，兒茶酚胺等的水平。休克搶救——實驗分組（1） 對照組：動脈血壓降至 40mmHg后維持1小時，然后將放出的血自頸靜脈全部快速點滴輸回，必要時加低分子右旋糖苷 30.0ml，觀察輸液過程中各項指標變化。（呼吸、血壓）（2） 去甲腎上腺素組：放血后血壓降至 40mmHg后，維持30分鐘，然后自頸靜脈緩慢滴入去甲腎上腺素生理鹽水 25.0ml（含去甲腎上腺素 1.0mg），在20-30分鐘內(nèi)滴完，將放出的血快速自頸靜脈輸回，觀察 20分鐘，觀察各項指標。3）654-2組：在動脈血壓降至于40mmHg30分鐘后，自頸靜脈緩慢滴入654-2生理鹽水25.0ml（含654-22.0mg）于30分鐘內(nèi)滴完，再將放出的血自頸靜脈快速回，必要時加低分子右旋糖苷，觀察20分鐘各項指標。分析各組實驗結(jié)果討論：失血性休克過程中，微循環(huán)變化特點。22/68（鄭紅、汪思應(yīng)）實驗五喜樹堿誘導K562細胞凋亡[實驗目的]：1，初步掌握檢測細胞凋亡（ Apoptosis）這一特殊的細胞生命活動現(xiàn)象；2，結(jié)合理論討論細胞凋亡與疾病的關(guān)系。[實驗原理]：喜樹堿（camptothecin）是一種抗腫瘤藥物，研究發(fā)現(xiàn)其可以誘導多種腫瘤細胞發(fā)生凋亡。本實驗用含一定量喜樹堿的培養(yǎng)液培養(yǎng) K562細胞，誘導培養(yǎng)3小時后，提取 K562細胞的DNA，用凝膠電泳法分析其是否發(fā)生凋亡，并用正常及壞死的 K562細胞DNA作對照。[實驗器材]：100mA電泳儀，電泳槽，紫外觀察儀，高速離心機， OLYPMUS顯微鏡，水浴箱，K562細胞，喜樹堿，瓊脂糖，溴化乙錠， 1.0mg/ml蛋白酶K，10.0mMEDTA，NP40，0.1MPBS(PH7.5)，RNase，1×TBE緩沖液，上樣緩沖液， TE緩沖液,DL2000Marker.[實驗步驟]：取指數(shù)生長期的K562細胞2.0×106個，用含喜樹堿的培養(yǎng)液培養(yǎng)3小時(對照組不加喜樹堿)，取少許細胞滴片，染色后高倍鏡觀察；用含2.0mMEDTA、PH7.5的PBS離心洗兩遍（1200rpm），棄上清，。23/68加400.0μlTBE（臨用時加0.25%NP40），10.0μlRNase至1.0mg/ml，37℃，30分鐘。加蛋白酶K（1.0mg/ml）10.0μl，37℃，30分鐘。14000rpm，4離心15分鐘，收集上清（-70℃）。取上清50.0μl，加上樣緩沖液5.0μl，1.5%瓊脂糖凝膠電泳30分鐘，紫外線透視儀下觀察，凋亡細胞出現(xiàn) DNALadder，DNA 多為100-300bp。下圖為示教結(jié)果：凋亡細胞DNA“梯帶”現(xiàn)象in+1hin+3herrolhectothecarktotMont2.0KcampcampNAC1.0KbD0.75Kb0.4Kb0.2Kb0.1Kb（汪思應(yīng)）實驗六 急性右心衰竭[實驗目的]復制急性右心衰竭動物模型；觀察急性右心衰竭時血液動力學的主要改變。[實驗目的]24/68利用液體石臘阻塞兔大部分肺毛細血管，造成右心后負荷增加；大劑量快速輸液增加右心前負荷，誘發(fā)家兔急性右心衰。[實驗動物]家兔，體重2.5kg。[藥品和器材]3.0%戊巴比妥鈉溶液；1.0%普魯卡因溶液；3.0%肝素溶液、液體石蠟、山梗菜堿。手術(shù)器械一套： 1ml、5ml、10ml注射器；中心靜脈壓測量裝置、輸液裝置、二導儀、秒表[實驗步驟]家兔稱重，仰臥固定。頸部正中皮下注射1.0%普魯卡因局部麻醉，作頸部正中切口，游離出兩側(cè)頸外靜脈和一側(cè)頸總動脈。由耳緣靜脈注入3.0%肝素液（2.0ml/kg），經(jīng)右側(cè)頸外靜脈插入中心靜脈壓導管；測量中心靜脈壓，經(jīng)左側(cè)頸外靜脈插管連接輸液裝置，經(jīng)頸總動脈插管連接二導儀描記血壓，劍突下皮下穿大頭針一只，連接二導儀記錄呼吸。測量實驗前各種指標動脈血壓：呼吸；中心靜脈壓；循環(huán)時間側(cè)記。（自耳緣靜脈快速注入 0.3%山梗菜堿1.0ml，計由注入至出現(xiàn)呼吸變深變快的時間） 。5. 實驗過程（1） 實驗前各項指標觀察完畢，即用 1ml注射器，由耳緣靜脈注入液體石蠟（0.5ml/kg），注射速度要慢（注射到血壓下降到 70mmHg為度），10分鐘后再觀察上述指標有何變化。25/682）待動物血壓、呼吸穩(wěn)定后，加快輸液速度（180-200滴/分）快速輸入生理鹽水后，再重復上述指標測定。3）待動物死之后，剖開胸、腹腔，觀察有無腹水及其量，腸壁有無水腫，肝臟體積、心臟體積有無胸水，肺臟外觀及切面變化，最后剪破靜脈，放出血液，注意肝臟和心臟體積變化。（鄭紅、汪思應(yīng)）機能綜合實驗三、急性中毒性腎功能不全【實驗目的】（1）觀測正常家兔尿量及 ADH對尿量的影響；（2）急性中毒性腎功能不全的動物模型；（3）觀察比較急性腎功能不全與正常動物血氣、酸堿、血清鉀及尿的變化，分析其發(fā)生機制；（4）運用相關(guān)藥物對急性腎功能進行初步治療?！緦嶒炘怼坎捎媚I毒物重金屬 HgCl2溶液造成家兔急性腎小管壞死，復制急性腎功能不全的動物模型，通過觀察動物的血氣、酸堿、血尿素氮（ BUN）、血清鉀及尿的變化，學習急性腎衰時內(nèi)環(huán)境的變化。【實驗動物】26/68家兔3只，體重2.5kg。【實驗藥品與器材】1.0%HgCl2溶液，3.0%戊巴比妥鈉溶液或 20.0%氨基甲酸乙醇溶液，1.0%普魯卡因溶液，生理鹽水，1.0%肝素生理鹽水溶液；兔臺，手術(shù)器械， 1ml和5ml注射器，試管，滴管，漏斗，吸管，試管夾，酒精燈，試管架，頸動脈插管，血氣分析儀，生化分析儀，離心機，光電比色儀，水浴鍋?！居^察指標】全血血氣分析儀測定-、++-。2、HCO3K、Na和ClpH值、PaCO血清 生化分析儀測定BUN。尿 尿量、尿蛋白定性和鏡檢。腎 大體、剖面?！緦嶒灧椒ㄅc步驟】（1）取家兔三只，一只為正常對照（ A），一只為中毒實驗兔（B），另一只為ADH處理兔（C）。于實驗前一天稱重后，實驗兔皮下或肌內(nèi)注射 1.0%HgCl2（按1.5~1.7ml/kg，一次注射），造成急性中毒性腎功能不全模型，C兔注射ADH對照兔則在相同部位注射同量的生理鹽水， 作為對照。將三只兔籠分別置于大漏斗上，收集尿液，測量 24h尿量。（2）實驗開始，家兔稱重后，20.0%氨基甲酸乙酯溶液（0.5~1.0g/kg體重）或3.0%戊巴比妥鈉（30.0mg/kg體重）耳緣靜脈注入麻醉后，仰臥固定于兔臺。下腹部剪毛，在恥骨聯(lián)合上2.0±cm處做長約5.0cm的正中切口，分離皮下組織，沿腹白線切開腹膜，暴露膀胱，插管取出全部尿液，供尿蛋白定性和尿液鏡檢。（3）頸部正中切口，分離一側(cè)頸總動脈，頸動脈插管內(nèi)注入肝素生理鹽水27/68溶液，進行頸動脈插管。（4）抽取0.5ml動脈血做血氣分析，取 3.0ml動脈血（滴入肝素數(shù)滴后）離心（1500r/min,5~10min）,取血清供BUN測定用。（5）尿常規(guī)檢查。1）將尿液1500r/min離心5~10min。2）顯微鏡檢查 取尿沉渣，涂在玻片上，觀察有無異常成分（細胞和管型）。3）尿蛋白定性檢查 取大試管盛尿液，傾斜試管于酒精燈上，將試管中的尿加熱至沸騰，觀察有無混濁，加數(shù)滴醋酸，再加熱至沸騰，混濁不退為蛋白陽性，按其混濁程度以-、+、++、+++、++++表示之?！?”表示尿液清晰無混濁“+表”示尿液出現(xiàn)輕度白色混濁（含蛋白 0.1~0.5g/L）“++表”示尿液稀薄乳樣混濁（含蛋白質(zhì) 0.5~2.0g/L）“+++表”示尿液乳濁或有少量絮片存在（含蛋白 2.0~5.0g/L）“++++表”示尿液出現(xiàn)絮狀混濁（含蛋白質(zhì)>5.0g/L）如加醋酸后混濁消失，是因加醋酸可除去磷酸鹽或碳酸鹽所形成的白色混濁。（6）血清BUN的測定。取三只試管分別標號后按下表操作：試劑（ml）1(空白管)2（標準管）3（樣品管）BUN試劑5.05.05.0二乙酰單肟試劑5.05.05.0蒸餾水0.1尿素標準液0.128/681∶5稀釋的血清0.1將上述各管充分搖勻，置沸水浴中加熱 15min，用自來水冷卻3min，在540nm波長下比色，記錄標準管的光密度讀數(shù)（D標）及樣品管的光密度讀數(shù)（D樣）。計算每100ml血清中BUN的含量（mg）=（D樣/D標）×0.002(5××100/0.1)/0.1=（D樣/D標）×10=血清BUN（mg%） (12-1)原理：血清尿素在強酸條件下與二乙酰單肟和氨硫脲煮沸， 生成紅色復合物（二嗪衍生物）（7）藥物處理（8）形態(tài)學觀察1）將對照及中毒家兔一并處死，取出腎臟，稱重，計算腎重與體重之比。2）觀察并比較3只家兔腎臟的大體形態(tài)、顏色、光澤、條紋等。3）組織切片示教：于顯微鏡下觀察皮質(zhì)腎小管上皮有無明顯的變化、壞死、脫落；管腔有無蛋白、紅細胞、管型等?！緦嶒灲Y(jié)果與分析】將實驗結(jié)果填入下表。實驗結(jié)果全血血清尿腎2-3N+Na+K+PHPaCOHCO尿蛋鏡值BUN大解量白檢體剖29/68ABC【思考題】（1）根據(jù)什么判斷急性腎功能不全模型復制成功？（2）各指標變化的機制是什么？附錄 血清BUN測定試劑的配制（1）2.0%二乙酰單肟試劑 稱取二乙酰單肟2.0g，蒸餾水溶解并加至 100.0ml。（2）BUN試劑 取濃H2SO444.0ml,85.0%H3PO466.0ml, 溶于100.0ml蒸餾水中，冷至室溫依次加硫氨脲 50.0mg，溶解后再加硫酸鎘 1620.0gμ3CdSO4·8H2O）或2.0g(3CdSO4·6H2O),溶解后加蒸餾水至1.0L，存冰箱，可保存6月。（3）BUN標準儲備液（20.0mg%） 精確稱取尿素42.8mg，溶于50ml蒸餾水中加氯仿 6滴，再用蒸餾水稀釋至 100.0ml，可儲存冰箱6個月。（4）BUN標準液（每毫升含20.0微克）取上述BUN標準儲備液100.0ml，加蒸餾水至1000.0ml。30/68參考實驗四 急性左心衰竭[實驗目的]復制急性左心衰的動物模型。觀察心肌梗塞前、后的心率高低以及血液動力學的改變。[實驗原理]運用冠狀動脈結(jié)扎術(shù)，結(jié)扎家兔冠狀動脈左室支，造成急性心肌梗塞，誘發(fā)急性左心衰。[實驗動物]家兔[藥品和器材]3.0%戊巴比妥鈉溶液、1.0%普魯卡因溶液、3.0%肝素溶液、碳素墨水。手術(shù)器械一套、小拉鉤一付、 2ml、5ml、10ml注射器，固定支架、大木夾、大頭針、二導儀。31/68[實驗步驟]稱重、麻醉，按30.0mg/kg由家兔耳緣靜脈注入3.0%戊巴比妥鈉，仰臥固定。在1%普魯卡因局部麻醉下，作頸部正中切口，分離出兩側(cè)頸總動脈。胸部局部麻醉后，沿胸骨中線自胸節(jié)平線到劍突上切開皮膚，暴露胸骨和肋軟骨，分離胸肌，沿胸骨左緣在肋軟骨部位切斷第 2-4肋骨，用小拉鉤輕輕撐開胸腔切口，即可見心包及搏動的心臟，提起并剪開心包，充分暴露心臟和外主動脈。用濕紗布包裹手指，將心臟略向右旋，暴露左心耳和左室大部，在左心耳下緣仔細找出冠狀動脈左室支的行走位置，用細園針（0號線）在左心耳下緣0.5cm處繞左室縫穿一線，暫不結(jié)扎。從耳緣靜脈注入3.0%肝素液（2.0mg/kg），經(jīng)左側(cè)頸動脈插管，描記動脈血壓，于劍突部位皮下穿一大頭針，連接二導儀描記呼吸。經(jīng)右側(cè)頸動脈插入充滿3.0%肝素液的左心室導管，經(jīng)傳感器和二道儀記錄左室內(nèi)壓，插管時邊插邊觀察壓力曲線，等出現(xiàn)左室內(nèi)壓力曲線時表示已插入左室、插入導管約8.0cm左右，固定導管。觀察指標：心率、動脈血壓、呼吸和強度、左心室內(nèi)壓。實驗過程：手術(shù)完成后，記錄麻醉安靜下指標數(shù)值。結(jié)扎冠狀動脈左室支前，觀察各項指標變化，每隔2分鐘記錄一次，結(jié)扎左室30分鐘后，若仍無心律紊亂發(fā)生，可在頸部位結(jié)扎或再于室間溝處結(jié)扎前降枝。動物死之后，觀察心臟各部位體積高低，剪下心、肺，在離主動脈走始部位1.5cm處，剪斷主動脈，插入塑料管，將動脈壁和塑料管壁結(jié)扎，并從左房根部32/68結(jié)扎左房，由塑料管向外主動脈注入碳素墨水 2.0ml，邊觀察心室壁墨染范圍，估測未墨染面積約占左室游離壁面積百分比。（鄭紅、汪思應(yīng)）病例討論一患者男性，52歲。十年前因上腹部不適，伴有腹痛及食欲不振住入某醫(yī)院。住院檢查肝大肋下 1.0cm，肝功能正常，經(jīng)護肝治療好轉(zhuǎn)出院。四年前上述癥狀加重并伴有皮膚、鞏膜黃染，進食時上腹部不適感加劇、腹脹，有時伴惡心、嘔吐、便稀，癥狀反復持續(xù)至今。近四個月來，病人呈進行性消瘦，四肢無力，面色憔悴，皮膚粗糙，皮膚、鞏膜黃染加深，鼻和齒齦易出血，有時有血便。三天前因吃牛肉后出現(xiàn)惡心、嘔吐，神志恍惚，煩躁不安急診入院?；颊咦阅贻p時起，性喜飲酒，日飲酒量均在半斤以上，常年不斷，既往無瘧疾史，亦無吸蟲疫水接觸史。體檢：神志恍惚，步履失衡，煩躁不安，皮膚、鞏膜黃染，腹壁靜脈曲張，面部及胸部有蜘蛛痣。腹稍隆，肝可觸及，質(zhì)硬，邊緣較鈍。脾大肋下 3指，質(zhì)較硬，有腹水征。心肺無特殊發(fā)現(xiàn)。食道吞鋇 X線顯示食道下段靜脈曲張。實驗室檢查：黃疸指數(shù) 24.0單位，谷丙轉(zhuǎn)氨酶 120.0單位，腦鱗脂膽固醇絮狀試驗（++），麝香草酚濁度試驗 15.0單位，血氨150.0μg%。入院后，經(jīng)補液，靜脈注入葡萄糖、谷氨酸鈉、酸性溶液灌腸，限制蛋白飲食，補充維生素及大量抗生素等治療措施搶救后， 神志逐漸清楚，病情好轉(zhuǎn)。33/68五日后，患者大便時突覺頭暈、虛汗、法力，繼之暈厥廁所中。被發(fā)現(xiàn)時患者面色蒼白，脈博細速，血壓下降，經(jīng)輸血，補液搶救后，血壓回升，病情似有好轉(zhuǎn)。次日，患者再度出現(xiàn)神志恍惚，煩躁不安，尖叫。檢查發(fā)現(xiàn)雙手有撲翼樣震顫，大便呈柏油樣。繼后發(fā)生昏迷，血壓，瞳孔中度散大，對光反射減弱，皮膚、鞏膜深度黃染，黃疸指數(shù) 60.0單位，谷丙轉(zhuǎn)氨酶 160.0單位，血氨180.0μg%。經(jīng)各種降氨治療后，血氨降至 107.0μg%，但上述癥狀無明顯改善，病人仍處于昏迷狀態(tài)，隨即靜脈滴注左旋多巴治療，癥狀逐漸減輕，神志緩慢恢復，于住院后第 47天，臨床癥狀基本消失出院休養(yǎng)。討論題1，對本病的初步印象是什么；有那些診斷依據(jù)？2，人主要臨床癥狀產(chǎn)生的病理基礎(chǔ)是什么？3，針對病人主要臨床表現(xiàn)采用的治療措施的理論依據(jù)何在？4，鑒別診斷主要補充檢查哪些項目？5，請告訴病人出院后的注意事項。（鄭紅、汪思應(yīng)）病例討論二34/68患者， 男，33歲。入院前4個月經(jīng)胸片診斷為結(jié)核性胸膜炎。予異煙肼、利福平、已胺丁醇三聯(lián)抗結(jié)核治療。入院前一月雙下肢水腫，尿量約 1000ml/d,尿中泡沫增多，尿常規(guī)蛋白 +++，大量RBC，SCr212.2μmol/L，診斷為急性腎小球腎炎，經(jīng)治療 1個月無效于1990年9月8日轉(zhuǎn)我院。入院查體 血壓150/100mmHg，眼瞼輕微水腫，左下肺叩診濁音及呼吸音低，心率100次/分，律齊。腹平軟，肝脾未及，雙下肢可凹陷性水腫。9 9輔助檢查HB90g/L，WBC8.3×10，PLT162.010×。尿常規(guī)蛋白++++，尿沉渣RBC3-5/HPF，24小時尿蛋白定量3.2-9.6g。尿滲透濃度298.0mmol/L。血生化：K+5.5mmol/L，SCr963.6μmol/L，BUN33.2mmol/L，TP45.0g/L，ALB25.0g/L，CHO9.4mmol/L，TG1.3mmol/L。B超：左腎12.5cm×6.7cm×5.3cm，右腎B超：12.2cm×5.8cm×4.7cm，腎盂、腎盞無擴張。免疫檢查ANA（-），抗-dsDNA抗體（-），補體C3119.0mg/dl,CH5091.0U/ml,IgG7.4g/L,IgA2.2g/L,IgM1.1g/L?？鼓I抗體（-），ANCA（-）。腎穿刺活檢病理光鏡： 5個腎小球內(nèi)可見 3個細胞纖維新月體，腎小球內(nèi)細胞數(shù)增多，系膜區(qū)增寬，系膜細胞基質(zhì)增多，毛細血管襻受壓，多數(shù)管腔閉塞，近端腎小管濁腫，部分腎小管上皮細胞脫落及管腔完全閉塞，腎間質(zhì)廣泛纖維化，符合新月體腎炎。免疫熒光： IgG+++沿GBM彌漫顆粒樣沉積。IgA++、IgM++沿GBM和系膜區(qū)彌漫顆粒樣沉積， C3++、C1q、FI+沿GBM彌漫顆粒樣沉積。入院后，在給予利尿、降壓等支持治療的同時，予甲基強的松龍 0.5g/d沖擊治療5天，沖后予強的松 50.0mg/qd維持，尿量漸增至 1500-2500ml/d,停用利福平，繼續(xù)使用異胭肼，乙胺丁醇抗結(jié)核治療。 2月后SCr降至168.0μmol/L，帶藥出院回當?shù)乩^續(xù)治療。35/68討論：1，結(jié)合病理解剖和病理生理所學知識，該疾病的診斷是什么？2，該疾病的發(fā)病機制是什么？3，病人為何出現(xiàn)水腫？（鄭紅、汪思應(yīng)）病例討論三患者，女，22歲，因“腹痛9日，少尿4日”急診?；颊哂?2周前曾行人工流產(chǎn)術(shù)。9日前感腹痛、胸悶、惡心，嘔吐胃內(nèi)容物。腹部持續(xù)性隱痛，陣發(fā)性加重，在外院對癥治療（具體不詳）病情無好轉(zhuǎn)。4日前尿量減少，每日約50.0ml。既往身體健康。來診時查體：體溫37.0℃，脈搏60次/分，呼吸19次/分，血壓14.7/10.0kPa1KPa=7.5mmHg）。意識清楚，皮膚、粘膜、鞏膜、結(jié)膜、淺表淋巴結(jié)、扁桃體、雙肺呼吸無異常。心界向左擴大，律齊，未聞及雜音。腹平軟，全腹輕壓痛，雙側(cè)上腹部為著，無反跳痛及肌緊張，肝臟于肋緣下及邊，脾未及，肝區(qū)叩擊痛、雙腎區(qū)叩擊痛均為陽性，移動性濁音陰性，雙踝部輕度凹陷性水腫。36/68實驗室檢查：血常規(guī)：紅細胞 3.010×12/L, 血紅蛋白 91.0g/L，血小板151.0×109/L，白細胞11.1×109/L，中性粒細胞0.82，淋巴細胞0.12。尿常規(guī)：紅細胞滿視野/高倍視野，白細胞3-5個/高倍視野，上皮細胞 9-11個/高倍視野。糞常規(guī)：黃色稀便，潛血試驗（+）。動脈血氣：PH7.493，PO214.37kPa，PCO23.00kPa，HCO3—16.9mmol/L，堿剩余—4.1mmol/L，肝功能：丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶 13119.29nmols··L，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶 10235.38nmols·L，總膽紅素33μmol/L，直接膽紅素28μmol/L，血清肌酐806μmol/L，尿素氮52.44mmol/L。血Ca2+1.87mmol/L,K+3.8mmol/L,Na+131mmol/L,Cl－90mmol/L,。凝血功能檢查：凝血酶原時間PT）18.1s，PA0.46，纖維蛋白原（FIB）6g/L，活化部分凝血激酶時間（APTT）40s。心電圖示竇性心動過緩，I度房室傳導阻滯，普遍 T波低平或倒置。心臟超聲：左房增大，二尖瓣、三尖瓣、主動脈瓣輕度反流，少量心包積液。 X線胸片示：兩肺紋理增粗，心影明顯增大，雙側(cè)胸腔積液。腹部 B超檢查：肝腫大，呈淤血改變，脾大，雙腎實質(zhì)彌漫性損害，少量腹水。診斷：多臟器功能障礙綜合癥（ MODS）。給予維持水、電解質(zhì)、酸堿平衡，抗感染，利尿，營養(yǎng)支持，制酸，保護肝臟，對癥治療等。2周后患者癥狀明顯緩解，各項輔助檢查指標較前明顯改善或恢復正常出院。討論：1，該病人出現(xiàn)幾個器官功能障礙，依據(jù)是什么？2，該患者MODS的發(fā)病機制可能是什么？3，該患者呼吸系統(tǒng)有無受損，為什么？37/68（鄭紅、汪思應(yīng)）38/68病理生理學教學大綱（實驗部分）安徽醫(yī)科大學基礎(chǔ)醫(yī)學院病理生理教研室39/68病理生理實驗教學大綱病理生理學是一門理論學科，同時又是一門實驗學科。通過臨床研究尤其是動物實驗，使病理生理理論得到了極大的充實和發(fā)展。 同時病理生理的實驗教學不僅初步指導學生初步了解人類疾病動物模型復制的基本方法，鍛煉了操作技能、驗證和復習理論知識；還通過實驗與課堂討論的具體環(huán)節(jié)， 使學生初步具有進行醫(yī)學研究與臨床思維所必備的 “嚴肅的科學態(tài)度、嚴密的科學方法和嚴謹?shù)目茖W作風”等。因此實驗課是病理生理教學的重要組成部分。隨著人類社會知識更新速度的加快、分子生物學的發(fā)展及研究手段的進步，病理生理學在近年也有飛速的發(fā)展。 為配合規(guī)范教材第五版的使用， 我們根據(jù)本校的教學特點，對病理生理實驗進行了部分調(diào)整。 為此特修訂《病理生理實驗教學大綱》。使其更適合我們教學需要。概 論目的與要求：4，掌握病理生理實驗課的要求，實驗報告的書寫格式；5，熟悉病理生理實驗目的；6，了解人類疾病動物模型復制的方法。主要內(nèi)容：4，病理生理理論與實驗課的特點，人類疾病動物模型復制的大致方法；5，病理生理實驗課的目的和要求；6，病理生理實驗報告的書寫規(guī)范。實驗一 基本實驗操作技能訓練40/68目的與要求：1，掌握小鼠的捉拿、腹腔注射技術(shù)；2，掌握家兔的固定，耳緣靜脈注射，頸部、腹股溝手術(shù)操作規(guī)程及氣管、動脈、靜脈插管技術(shù)；3，熟悉實驗室常規(guī)器件、儀器的使用，大鼠的捉拿及腹腔注射技術(shù)；4，了解實驗動物的特點。主要內(nèi)容：1，介紹了病理生理動物實驗的主要對象 ——家兔、大鼠、小鼠的大致生理特點；2，重點進行家兔的稱重、固定，術(shù)前皮膚準備，麻醉，頸部及腹股溝手術(shù)；3，頸部手術(shù)主要分離氣管、頸外靜脈、頸動脈并做相應(yīng)的插管，進行呼吸描記，靜脈輸液及血壓測量；4，腹股溝手術(shù)主要分離股動脈并插管以進行股動脈放血；5，大、小鼠的捉拿及腹腔注射等技術(shù)。實驗二 實驗性肺水腫目的與要求：1，掌握用大劑量快速輸液法復制實驗性肺水腫的家兔模型；2，復習水腫理論知識，解釋家兔肺水腫時癥狀、體征的發(fā)生機制；3，討論本水腫發(fā)生的可能機制及腎上腺素的應(yīng)用意義。主要內(nèi)容：1，家兔稱重、固定及頸部手術(shù)進行氣管、頸外靜脈插管后，由靜脈大劑量41/68（100-120ml/kg體重）快速輸液（180-200滴/分鐘）復制肺水腫模型；2，在液體輸入后，由耳緣靜脈注射腎上腺素 （0.45mg/kg體重）;3，觀察輸液前、輸液后、注射腎上腺素后，家兔的呼吸、心率、呼吸音有何變化及有無氣管分泌物出現(xiàn)；4，結(jié)合理論，討論水腫家兔呼吸、心率、呼吸音變化及氣管分泌物出現(xiàn)的機制；腎上腺素的作用；5，討論除大劑量快速輸液使肺毛細血管靜水壓增加導致本水腫發(fā)生外，有無其它機制參與，為什么？6，書寫實驗報告。實驗三 缺 氧目的與要求：1，掌握小鼠乏氧性缺氧、血液性缺氧的模型復制；2，根據(jù)實驗，熟悉亞硝酸鹽、 CO中毒的臨床搶救原理；3，結(jié)合理論，討論麻醉、年齡對缺氧耐受性的影響機制；設(shè)計簡單實驗，驗證環(huán)境溫度對小鼠缺氧耐受性的影響。主要內(nèi)容：1，用250ml磨口廣口瓶復制低張性缺氧的小鼠模型，并簡介設(shè)立對照在醫(yī)學研究中的意義；2，使腹腔注射適量烏拉坦的小鼠處低張性缺氧狀態(tài)、新生紅皮鼠與成年鼠對比以觀察麻醉、年齡對缺氧耐受性的影響；3，用腹腔注射亞硝酸鹽法復制等張性缺氧的小鼠模型，并觀察中毒小鼠的表42/68現(xiàn)及美蘭對亞硝酸鹽中毒的作用；4，使小鼠處于高濃度 CO環(huán)境復制煤氣中毒模型，觀察中毒小鼠的表現(xiàn)及了解CO中毒的搶救原則和原理；5，觀察不同類型缺氧小鼠皮膚、內(nèi)臟出現(xiàn)的特殊顏色；6，書寫實驗報告，包括設(shè)計實驗驗證環(huán)境溫度對缺氧耐受性的影響。實驗四 失血性休克目的與要求：1，掌握股動脈放血法復制失血性休克的動物模型；2，熟悉休克的搶救措施及原理；3，結(jié)合理論，討論休克家兔癥狀、體征的發(fā)生機制。了解休克不同時間 TNF、MDF等變化及意義。主要內(nèi)容：1，常規(guī)手術(shù)分離家兔氣管、頸動脈、頸外靜脈并插管，分離股動脈并插管。2，由股動脈導管控制性放血使家兔血壓維持在 40mmHg左右30分鐘，觀察及檢測放血前后、放血不同時間家兔活動、血壓、心率、四肢溫度及TNF、MDF、兒茶酚胺等變化；3，分組采取輸血、給去甲腎上腺素、654-2等不同措施對休克家兔進行搶救；4，結(jié)合理論分析休克家兔出現(xiàn)各種 “變化”的機制；5，TNF、MDF、兒茶酚胺檢測試劑盒的使用。實驗五 喜樹堿誘導K562細胞凋亡目的與要求：43/681，掌握用電泳法檢測細胞凋亡；2，熟悉喜樹堿誘導細胞凋亡的大致方法及凋亡細胞的顯微鏡下改變；3，了解細胞凋亡的其他檢測手段；4，結(jié)合理論討論細胞凋亡的發(fā)生機制；主要內(nèi)容：1，用含喜樹堿的培養(yǎng)液培養(yǎng) K562細胞以誘導其凋亡。鏡檢觀察凋亡細胞和正常K562的區(qū)別；2，用NP40裂解細胞，結(jié)合蛋白酶 K、RNASE消化細胞蛋白和 RNA以提取細胞DNA；3，用1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測凋亡、正常K562細胞的DNA，誘導凋亡細胞的DNA應(yīng)出現(xiàn)DNALadder.4，結(jié)合實驗，討論細胞發(fā)生凋亡的可能機制。實驗六 實驗性右心衰目的與要求：1，掌握家兔實驗性右心衰模型的復制；2，熟悉心衰的常見癥狀、體征及診斷標準；3，結(jié)合理論，復習心衰的發(fā)生機制及機體的代償措施。主要內(nèi)容：1，經(jīng)頸部手術(shù)分離家兔氣管、頸動脈、頸外靜脈并插管后，由耳緣靜脈注射液體石蠟部分阻塞肺血管以增加后負荷、經(jīng)頸外靜脈大劑量快速輸液提高前負荷造成家兔右心急性衰竭；44/682，觀察并比較注射石蠟油前后、大劑量輸液后家兔呼吸、心率、心音、中心靜脈壓（CVP）的變化；3，分析以上“變化”出現(xiàn)的機制；4，觀察家兔急性右心衰是否引起其發(fā)生心源性休克；5，解剖家兔尸體，觀察右心及有無胸、腹水出現(xiàn)；6，書寫實驗報告。實驗七 病例討論一目的與要求：1，掌握病例討論時病歷匯報的思路和方法；2，熟悉肝功能不全及肝性腦病患者的臨床表現(xiàn)；3，了解臨床疾病診斷及治療的原則。主要內(nèi)容：1，一男性患者，52歲，年輕時日飲酒半斤，十年前開始，不斷出現(xiàn)消化道不適癥狀，近期加重且有血便。無血吸蟲及肝炎病史。三天前因吃牛肉后出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀入院求治；2，體檢發(fā)現(xiàn)病人神智恍惚，有黃膽、肝硬化腹水及側(cè)枝循環(huán)建立的典型體征，且實驗室檢察示肝功能受損，血氨升高；3，入院經(jīng)積極治療病情好轉(zhuǎn)，但病人出現(xiàn)上消化道大出血，導致休克。搶救休克使之好轉(zhuǎn)后，又出現(xiàn)典型的肝性腦??；經(jīng)降血氨等治療，癥狀基本消失后出院；4，要求給病人診斷病情、討論其癥狀和體征出現(xiàn)的機制、臨床治療原理。并45/68提示病人出院注意事項。實驗八 病例討論二目的與要求：1，掌握急性腎功能不全少尿期的機能代謝改變；2，熟悉急性腎炎的診斷標準及發(fā)病機制；3，了解急性腎炎的臨床治療。主要內(nèi)容：1，患者因結(jié)核性胸膜炎服用異煙肼等抗結(jié)核藥，服用兩月后出現(xiàn)水腫、尿少等癥狀，曾在其他醫(yī)院診斷為 “急性腎炎”，治療無效后轉(zhuǎn)入我院；2，入院體檢發(fā)現(xiàn)明顯水腫及左下肺實變，實驗室檢查提示符合急性腎炎、腎功能不全的診斷；3，要求討論該疾病的發(fā)病機制和水腫出現(xiàn)的機制。實驗九 病例討論三目的與要求：1，理解MODS的臨床病因是多種多樣的；2，掌握SIRS/CARS尤其是白細胞與 MODS發(fā)病的關(guān)系；3，熟悉MODS的臨床表現(xiàn)。主要內(nèi)容：1，患者因人工流產(chǎn)術(shù)后出現(xiàn)劇烈腹痛且近五日出現(xiàn)無尿而入院；2，入院體檢及各項實驗室檢查提示患者白細胞明顯升高，腎功能不全處少尿期，同時伴有肝、心功能不全，肺臟也有受損；46/683，要求討論該病人 MODS的發(fā)生機制、各器官受損后有什么表現(xiàn)及考慮肺臟有無受累。（汪思應(yīng)）47/68病理生理學教學大綱（理論部分）安徽醫(yī)科大學基礎(chǔ)醫(yī)學院病理生理教研室48/68附二 病理生理學教學大綱前 言病理生理學是醫(yī)學基礎(chǔ)理論學科之一。它的任務(wù)是研究疾病的機制并結(jié)合機體機能代謝的變化。闡明疾病發(fā)生、發(fā)展的基本規(guī)律，揭示疾病的本質(zhì)，為疾病的防治提供理論根據(jù)。病理生理學的基本內(nèi)容分總論和各論兩部分?？傉撝饕v述疾病中帶有共性的規(guī)律及基本病理過程，各論主要講述機體各系統(tǒng)疾病發(fā)生規(guī)律以至每一種疾病的特殊規(guī)律。但是根據(jù)當前我國醫(yī)學教育情況，我們只能選擇若干重要章節(jié)作為教學內(nèi)容。在教學過程中，以辯證唯物主義為指導，正確理解機體與環(huán)境，內(nèi)因和外因、局部與整體、機能與形態(tài)、損傷與抗損傷等辯證關(guān)系，通過教學，培養(yǎng)學生運用辯證唯物主義的世界觀和方法論觀察問題、分析問題和解決問題的能力，掌握病理生理學的基礎(chǔ)理論和基本技能，為以后臨床實踐和科學研究打下牢固基礎(chǔ)。在教學中必須堅持理論聯(lián)系實際（臨床），應(yīng)用啟發(fā)式教學方法，充分調(diào)動學生學習的主動性和積極性，培養(yǎng)學生獨立自學，科學思維，在學好理論課的同時學會和應(yīng)用實驗方法，分析實驗結(jié)果，得出實驗結(jié)論。根據(jù)教學計劃，病理生理學教學共安排 87學時，其中理論課為 58學時，實驗課為29學時，主要以臨床醫(yī)學、全科醫(yī)學、康復醫(yī)學、婦幼保健、口腔醫(yī)學等本科學生為教學對象。第一章 緒 論目的：1．掌握病理生理學主要研究方法2．熟悉病理生理學的任務(wù)、性質(zhì)以及在醫(yī)學教育中的地位49/683．了解病理生理學進展主要內(nèi)容：1．病理生理學主要探討疾病發(fā)生發(fā)展的規(guī)律與機制， 應(yīng)用正常人體的形態(tài)、功能、代謝方面的各種知識加以綜合、分析、再通過科學思維運到患病的機體，從而正確認識疾病中出現(xiàn)的各種變化。其性質(zhì)為一門與基礎(chǔ)醫(yī)學中多學科密切相關(guān)的綜合性邊緣學科。也是一門溝通基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床的橋梁學科。2．病理生理學既是理論性較強的學科，又是一門實驗性學科，動物實驗或復制實驗動物模型、臨床觀察、疾病流行病學調(diào)查為其基本研究方法，從群體和整體水平、器官水平，細胞水平和分子水平上獲得研究結(jié)果，為探討疾病的病因，機制及防治提供依據(jù)3．病理生理學作為一獨立新興學科，隨著整個醫(yī)學實踐的需要逐漸發(fā)展的，目前已由中國科協(xié)批準成立國家一級學會 ——中國病理生理協(xié)會。病生工作者在教學、科研中做出了重要貢獻第二章 疾病概論目的：1．掌握疾病發(fā)生的一般規(guī)律和基本機制2．熟悉疾病發(fā)生的原因和條件3．熟悉疾病和健康的概念4．了解疾病經(jīng)過、轉(zhuǎn)歸和機體的衰老主要內(nèi)容：50/681．健康包括強壯的體魄和健全的精神狀態(tài)，疾病是在內(nèi)外內(nèi)素作用下，機體“自穩(wěn)態(tài)”破壞，發(fā)生一系列功能代謝和形態(tài)結(jié)構(gòu)的異常變化，出現(xiàn)一定的癥狀，體征和社會行為導常2．病因的種類，病因和條件的相對性3．把握機體損傷抗損傷、疾病中因果交替、局部與整體的關(guān)系等規(guī)律，促進疾病往好的方向發(fā)展、從神經(jīng)體液機制細胞機制和分子機制了解疾病的發(fā)生4．疾病分期，康復與死亡，腦死亡的概念第三章 水、電解質(zhì)代謝障礙目的：1．掌握水和電介質(zhì)代謝紊亂時的機體變化規(guī)律2．熟悉水和電介質(zhì)代謝紊亂時的概念及病因3．了解水和電解質(zhì)代謝紊亂時的處理原則主要內(nèi)容：1．脫水（高滲性脫水、低滲性脫水、等滲性脫水） ，水中毒的概念2．高滲性脫水，低滲性脫水和水中毒的機能代謝變化， 臨床特點和防治原則3．高鉀血癥，低鉀血癥的基本概念；原因和機制；機體機能代謝變化和防治原則。強調(diào)高鉀對心臟的作用4．高鎂和低鎂血癥的原因機制及對機體的影響第四章 酸堿平衡紊亂51/68目的：1．掌握酸堿中毒及混合性酸堿平衡紊亂的病因發(fā)病學，機體變化規(guī)律及中毒對機體影響熟悉機體對酸堿平衡的調(diào)節(jié)機制2．熟悉機體對酸堿平衡的調(diào)節(jié)機制3．了解反映酸堿平衡常用的指標和意義主要內(nèi)容：1．機體通過體液緩沖系統(tǒng)的緩沖、肺的調(diào)節(jié)、腎的調(diào)節(jié)和細胞內(nèi)外離子交換來維持酸堿的相對穩(wěn)定2．代謝性酸中毒；（AG增高型和AG正常型）概念、原因和機制、機體變化（代償和失代償）及其對機體影響、防治原則3．呼吸性酸中毒：概念、原因和機制、機體變化（代償和失代償）和防治原則4．代謝性堿中毒和呼吸性堿中毒的概念、原因和機制，機體的代償性變化和失代償、防治原則5．混合性解酸堿平衡紊亂：呼吸性酸中毒合并代謝性酸中毒呼吸性酸中毒合并代謝性堿中毒呼吸性堿中毒合并代謝性堿中毒呼吸性酸中毒合并代謝性酸中毒代謝性酸中毒合并代謝性堿中毒第五章 水 腫目的：52/681．掌握水腫發(fā)生的基本機制2．熟悉各類水腫的發(fā)病機制和特點3．了解水腫液對肌體的影響主要內(nèi)容：1．概念2．基本機制：1）血管內(nèi)外液體交換失衡：毛細管流體靜壓升高、毛細血管壁通透性增血漿膠體滲透壓降低、淋巴回流受阻（2）體內(nèi)外液體交換失衡：鈉、水潴留3．心性水腫、腎性水腫、肝性水腫、肺水腫、腦水腫的發(fā)生機制和臨床特點4．水腫液分布特點和對機體影響第六章 缺 氧目的：1． 掌握各種類型缺氧的特點2． 熟悉缺氧時機體機能化謝變化及其機制3．了解缺氧的病因及處理原則主要內(nèi)容：1．基本概念2．常用血氧指標53/683．低張性缺氧、等張性缺氧、循環(huán)性缺氧、組織中毒性缺氧的血氧變化4．缺氧時機體功能代謝變化1）代償性反應(yīng)（呼吸系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、組織細胞的適應(yīng)）2）功能代謝障礙（細胞損傷、中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙、外呼吸功能障礙、循環(huán)系統(tǒng)功能障礙）5．影響機體對缺氧耐受性的因素6．氧療及氧中毒第七章 發(fā) 熱目的：1．掌握發(fā)熱的機制及肌體的機能代謝變化2．熟悉熱代謝特點3．了解發(fā)熱的原因和處理原則主要內(nèi)容：1．發(fā)熱、致熱原、內(nèi)源性致熱原、發(fā)熱激活物基本概念2．發(fā)熱激活物的種類與性質(zhì)：細菌及其毒素、病毒和其他微生物、抗原抗體復合物、類固醇、致炎物3．內(nèi)生致熱原種類及作用部位4．發(fā)熱時相：體溫上升期、高峰期或稽留期、體溫下降期5．發(fā)熱時肌體機能代謝變化和處理原則54/68第八章 應(yīng) 激目的：1．掌握應(yīng)激時機體機能代謝變化2．熟悉應(yīng)激與疾病的關(guān)系3．了解應(yīng)激時機體激素水平變化主要內(nèi)容：1．應(yīng)激、應(yīng)激原、全身適應(yīng)綜合癥基本概念2．應(yīng)激時神經(jīng)內(nèi)分泌反應(yīng)：交感—腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)下丘腦—垂體—腎上腺皮質(zhì)激素系統(tǒng)其他激素：胰高血糖素和胰島素、 β—內(nèi)啡肽、生長素、催乳素等3．急性期反應(yīng)蛋白和熱休克蛋白的構(gòu)成、來源及生物學功能4．應(yīng)激時各系統(tǒng)功能變化：代謝變化、心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等5．應(yīng)激與疾病：應(yīng)激性潰瘍、原發(fā)性高血壓、心律失常、結(jié)腸激惹綜合癥等第九章 彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）目的：1．掌握DIC發(fā)病原理及臨床表現(xiàn)發(fā)生發(fā)展規(guī)律2．熟悉DIC發(fā)生發(fā)展規(guī)律55/683．了解DIC基本病因、誘因及防治原則主要內(nèi)容：1．基本概念2．病因和機制：血管內(nèi)皮損傷啟動內(nèi)源性凝血、 組織因子入血啟動外源性凝血、紅細胞、白細胞大量破壞、血小板激活、酶激活凝血系統(tǒng)、蛋白缺乏、纖溶活性的變化3．DIC發(fā)生發(fā)展因素：單核吞噬細胞系統(tǒng)功能受損、血液高凝狀態(tài)、促凝物質(zhì)入血、肝功能嚴重受損，微循環(huán)障礙，不恰當?shù)貞?yīng)用纖溶抑制劑4．DIC分為高凝期、消耗性低凝期、繼發(fā)性纖溶亢進期。按發(fā)生速度分急性、亞急性、慢性三型5．DIC臨床表現(xiàn)：出血、休克、器官功能障礙和和微血管內(nèi)溶血性貧血6．DIC防治原則：防治原發(fā)??；改善微循環(huán)重建凝血和纖溶間動態(tài)平衡第十章 休 克目的：1．掌握休克的發(fā)病機制2．熟悉休克時重要器官功能變化3．了解各類休克特點和治療原則主要內(nèi)容：1．休克的基本