短期、亞慢性和慢性毒性

短期、亞慢性(mànxìng)和慢性(mànxìng)毒性作用第一頁，共七十六頁。1編輯課件急性毒性試驗(yàn)的局限性：1.外源性化學(xué)物在長期重復(fù)染毒時(shí)可產(chǎn)生與急性毒性試驗(yàn)完全不同的毒作用。如：苯2.動(dòng)物的衰老(shuāilǎo)可影響毒作用的性質(zhì)和程度3.許多重要疾病均與年齡增長有關(guān)一、概述第二頁，共七十六頁。2編輯課件分類1.重復(fù)劑量毒性(dúxìnɡ)作用（短期）2.亞慢性毒性作用3.慢性毒性作用第三頁，共七十六頁。3編輯課件（一）蓄積(xùjī)作用

1.蓄積作用(accumulation)：當(dāng)外源化學(xué)物連續(xù)地、反復(fù)地進(jìn)入機(jī)體，而且吸收速度（或總量）超過代謝轉(zhuǎn)化(zhuǎnhuà)和排泄的速度（或總量）時(shí)，化學(xué)毒物或其代謝物在機(jī)體內(nèi)逐漸增加并貯留，這種現(xiàn)象為化學(xué)毒物的蓄積作用。蓄積作用是發(fā)生亞慢性、慢性毒作用的前提第四頁，共七十六頁。4編輯課件

2.儲(chǔ)存庫（depot）：化學(xué)毒物容易蓄積的組織和器官稱為儲(chǔ)存庫。機(jī)體常見的儲(chǔ)存庫有血漿蛋白、脂肪組織、肝臟、腎臟、骨骼(gǔgé)等。如骨骼為鉛的儲(chǔ)存庫。蓄積形式:原形代謝產(chǎn)物結(jié)合形式第五頁，共七十六頁。5編輯課件3.蓄積(xùjī)的分類：物質(zhì)(wùzhì)蓄積功能蓄積

第六頁，共七十六頁。6編輯課件3.1物質(zhì)蓄積（materialaccumulation）：化學(xué)毒物反復(fù)(fǎnfù)多次染毒實(shí)驗(yàn)動(dòng)物后，用化學(xué)分析方法能測得機(jī)體內(nèi)或某些器官組織內(nèi)存在該化合物的原型或其代謝產(chǎn)物。第七頁，共七十六頁。7編輯課件3.2功能蓄積（functionalaccumulation）：化學(xué)毒物反復(fù)多次染毒實(shí)驗(yàn)動(dòng)物后，機(jī)體內(nèi)雖不能檢出化學(xué)毒物，然而機(jī)體可以出現(xiàn)慢性(mànxìng)中毒現(xiàn)象。注：功能蓄積是損害效應(yīng)累計(jì)的結(jié)果。也可能是由于存留的化學(xué)毒物或代謝物數(shù)量極微，目前技術(shù)方法尚不能檢出的一種物質(zhì)蓄積，或者物質(zhì)蓄積與功能蓄積兼而有之第八頁，共七十六頁。8編輯課件（二）蓄積(xùjī)作用的意義

毒理學(xué)中，評(píng)價(jià)化學(xué)毒物有無蓄積作用，有助于：1.化學(xué)毒物是否引起潛在的慢性毒性依據(jù)2.制定(zhìdìng)衛(wèi)生限量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)選擇安全系數(shù)的一種依據(jù)第九頁，共七十六頁。9編輯課件（三）蓄積(xùjī)作用的研究方法

1、蓄積系數(shù)(xìshù)法（accumulationcoefficient）

2、生物半減期法（biologicalhalf-life,t1/2）第十頁，共七十六頁。10編輯課件1蓄積(xùjī)系數(shù)法

1.1蓄積系數(shù)法：以生物效應(yīng)為指標(biāo)，用經(jīng)驗(yàn)系數(shù)（K）評(píng)價(jià)蓄積作用的方法，即將多次染毒與一次染毒所產(chǎn)生的毒性效應(yīng)（或死亡）進(jìn)行比較

K是指多次接觸達(dá)到(dádào)預(yù)期效應(yīng)的累計(jì)劑量與一次接觸能出現(xiàn)相同效應(yīng)劑量的比值。K=ED50（n）/ED50(1)如果以動(dòng)物死亡一半為效應(yīng)指標(biāo)，則K=LD50（n）/LD50(1)

第十一頁，共七十六頁。11編輯課件

K值越小：表示化學(xué)物的蓄積性越大K<1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)化學(xué)毒物發(fā)生過敏

K=1化合物在體內(nèi)完全蓄積(xùjī)或每次染毒后毒效應(yīng)疊加

K>=5化合物蓄積性弱第十二頁，共七十六頁。12編輯課件蓄積(xùjī)系數(shù)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)蓄積系數(shù)（K）蓄積毒級(jí)分級(jí)<1高度蓄積1～明顯蓄積3～中等蓄積5～輕度蓄積第十三頁，共七十六頁。13編輯課件1.2蓄積(xùjī)系數(shù)法常用試驗(yàn)方案

A固定(gùdìng)劑量法B劑量遞增法

C劑量固定的20天蓄積法第十四頁，共七十六頁。14編輯課件A固定(gùdìng)劑量法

在事先求出毒物的LD50的前提下，選取相同條件的40只（或更多）動(dòng)物，隨即(suíjí)分為2組：實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。每組至少20只，雌雄各半。在1/20～1/5LD50之間選擇一個(gè)固定劑量，每日固定劑量、定時(shí)和相同途徑染毒試驗(yàn)組累計(jì)發(fā)生一半動(dòng)物死亡。如接觸劑量已累計(jì)達(dá)5個(gè)LD50，也可終止。實(shí)驗(yàn)期限最短為25天（1/5LD50），最長100天（1/20LD50）第十五頁，共七十六頁。15編輯課件常用大鼠或小鼠染毒途徑多用灌胃或者腹腔(fùqiāng)注射第十六頁，共七十六頁。16編輯課件B劑量(jìliàng)遞增法

動(dòng)物及分組：常用大或小鼠，40（或更多）分染毒組和對(duì)照組，每組至少20只，雌雄各半。終止時(shí)間：試驗(yàn)組累計(jì)發(fā)生(fāshēng)一半動(dòng)物死亡。在第21天也可結(jié)束，因累計(jì)劑量已達(dá)5.26LD50。第十七頁，共七十六頁。17編輯課件C劑量(jìliàng)遞增20天法：

動(dòng)物分組：1/20LD50、1/10LD50、1/5LD50、1/2LD50和對(duì)照組5個(gè)組，每組10只，雌雄各半。每日染毒一次，連續(xù)20天評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：（1）各劑量(jìliàng)組均無死亡，蓄積性不明顯；（2）僅1/2LD50劑量組有死亡，其他組無死亡，則為弱蓄積性；（3）若1/20LD50劑量組無死亡，其他各組間死亡數(shù)有劑量反應(yīng)關(guān)系，則為中等蓄積性；（4）若1/20LD50劑量組有死亡，且有劑量反應(yīng)關(guān)系，則為強(qiáng)蓄積性。第十八頁，共七十六頁。18編輯課件1.4局限性

1.對(duì)于具有免疫毒性的物質(zhì)不適用2.不能判斷化學(xué)毒物的蓄積是物質(zhì)蓄積或功能蓄積3.蓄積系數(shù)法，以死亡為指標(biāo)，用LD50表示生物效應(yīng)，有急性(jíxìng)試驗(yàn)的局限性，可能漏檢某些指標(biāo)。

第十九頁，共七十六頁。19編輯課件2、生物(shēngwù)半減期法是利用毒物動(dòng)力學(xué)原理闡明化學(xué)毒物在機(jī)體內(nèi)的蓄積作用(zuòyòng)特征。原理：機(jī)體內(nèi)蓄積的速度和量與單位時(shí)間內(nèi)吸收該物質(zhì)的速度和量，以及清除的速度和量有關(guān)。t1/2反映物質(zhì)從機(jī)體內(nèi)清除速度的參數(shù)，理論上，在等間距離接觸下，6個(gè)生物半減期即可達(dá)極限值98.4%。第二十頁，共七十六頁。20編輯課件t1/2越大，在機(jī)體內(nèi)蓄積的可能性越大t1/2越小，到達(dá)極限(jíxiàn)的時(shí)間越短蓄積極限值＝1.44×t1/2×每日接觸量第二十一頁，共七十六頁。21編輯課件（二）基本概念

第二十二頁，共七十六頁。22編輯課件1.短期重復(fù)劑量毒性指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人連續(xù)接觸(jiēchù)外源化學(xué)物14-30天所產(chǎn)生的中毒效應(yīng)。第二十三頁，共七十六頁。23編輯課件2.亞慢性毒性（subchronictoxicity）：是指人或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物連續(xù)較長期(chángqī)接觸某一外源化學(xué)毒物所出現(xiàn)的中毒效應(yīng)。一般在相當(dāng)于1/10左右生命時(shí)間（壽命）內(nèi)亞慢性毒性試驗(yàn)：指在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的1/10左右（如大鼠3個(gè)月）的生命時(shí)間內(nèi)，反復(fù)多次給予低劑量化學(xué)毒物，觀察試驗(yàn)動(dòng)物有無引起有害作用的試驗(yàn)過程。第二十四頁，共七十六頁。24編輯課件

3.慢性毒性（chronictoxicity）：是指人或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物長期（甚至終生）反復(fù)接觸低劑量的化學(xué)毒物所產(chǎn)生(chǎnshēng)的毒性效應(yīng)。一般2年慢性毒性試驗(yàn)：在受試動(dòng)物生命的大部分或終生，連續(xù)長期給予低劑量的受試物，觀察有無引起有害作用的試驗(yàn)過程。第二十五頁，共七十六頁。25編輯課件第二十六頁，共七十六頁。26編輯課件試驗(yàn)(shìyàn)目的1.觀察長期(chángqī)接觸受試物的毒性效應(yīng)譜、毒作用特點(diǎn)和靶器官；了解其毒性機(jī)制。

2.觀察受試物亞慢性毒性作用的可逆性第二十七頁，共七十六頁。27編輯課件可逆毒性:是指停止接觸后可逐漸消失的毒性作用。一般情況下，機(jī)體接觸毒物的濃度越低、時(shí)間越短、損傷越輕，則脫離接觸后其毒性作用消失的越快。不可逆毒性是指停止接觸后其毒性作用依然存在甚至對(duì)機(jī)體造成的損害作用進(jìn)一步加深。注：

一種毒物引起的組織病理學(xué)損傷，其再生能力在很大程度上決定于毒性效應(yīng)的可逆和不可逆性有些毒物所造成的損害是不可逆的，如損傷中樞神經(jīng)系統(tǒng)多數(shù)是不可逆的，因?yàn)?yīnwèi)已分化的中樞神經(jīng)細(xì)胞不能再分裂

第二十八頁，共七十六頁。28編輯課件4.確定(quèdìng)不同動(dòng)物對(duì)受試物的毒效應(yīng)的差異，為將研究結(jié)果外推到人提供依據(jù)。3.研究重復(fù)接觸受試物毒性作用的劑量-反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系，從初步了解到確定未觀察到有害作用的劑量（NOAEL）和觀察到有害作用的最小劑量（LOAEL），為制定(zhìdìng)人類接觸的安全限量提供參考值第二十九頁，共七十六頁。29編輯課件二、研究(yánjiū)方法（一）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)第三十頁，共七十六頁。30編輯課件

1實(shí)驗(yàn)(shíyàn)動(dòng)物選擇

（1）物種(wùzhǒng)和品系

第三十一頁，共七十六頁。31編輯課件急性原則：*盡量選擇急性毒性反應(yīng)(fǎnyìng)與人近似的動(dòng)物；*易于飼養(yǎng)管理、試驗(yàn)操作方便的動(dòng)物；*繁殖生育能力較強(qiáng)，數(shù)量較大能夠保障供應(yīng)；*價(jià)格較低，易與獲得的動(dòng)物。亞慢性原則：*理論上，選取對(duì)化學(xué)毒物代謝過程、生理反應(yīng)和生化特性基本上與人接近，且在急性試驗(yàn)中證明是對(duì)化學(xué)毒物敏感(mǐngǎn)的物種和品系實(shí)際上，常用大鼠犬豚鼠第三十二頁，共七十六頁。32編輯課件

（2）性別、年齡和數(shù)量雌雄各半；剛斷乳的動(dòng)物：大鼠6－8周齡（80-100g），同組動(dòng)物體重不超過10%、組間平均(píngjūn)體重不超過5%大鼠、小鼠每組不少于20只，犬、猴不少于6只，要求試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，活的動(dòng)物數(shù)能保證統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。第三十三頁，共七十六頁。33編輯課件

亞慢性毒性試驗(yàn)

年齡(niánlíng)：大鼠80~100g狗8~12月小鼠10~15g數(shù)量：小動(dòng)物≥20大動(dòng)物≥6性別：雌雄各半

慢性毒性試驗(yàn)?zāi)挲g：大鼠50~70g狗<8月小鼠初斷乳數(shù)量：小動(dòng)物≥40大動(dòng)物≥8性別：雌雄(cíxióng)各半第三十四頁，共七十六頁。34編輯課件（3）微生物學(xué)寄生蟲學(xué)等級(jí)和飼養(yǎng)(sìyǎng)環(huán)境應(yīng)選擇清潔(qīngjié)級(jí)及以上等級(jí)動(dòng)物動(dòng)物室：清潔、溫度22oC±3，濕度30-70%，人工控制晝夜交替籠具：大小適中、動(dòng)物能自由活動(dòng)飼料：營養(yǎng)合理飲用水：清潔、充足第三十五頁，共七十六頁。35編輯課件

2染毒方式(fāngshì)與期限

染毒方式(fāngshì)原則：1）盡量選用與人群實(shí)際接觸相同的途徑和方式食品、藥品、環(huán)境污染物2）并與預(yù)期進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)的接觸途徑一致。一般以經(jīng)口、經(jīng)呼吸道和經(jīng)皮膚三種途徑染毒，每日一次，連續(xù)給予第三十六頁，共七十六頁。36編輯課件染毒期限

取決于實(shí)驗(yàn)具體(jùtǐ)要求和所選擇的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

工業(yè)毒理學(xué)——3－6個(gè)月食品毒理學(xué)——6個(gè)月－1年環(huán)境毒理學(xué)——6個(gè)月－1年致癌試驗(yàn)——接近(jiējìn)或等于動(dòng)物的預(yù)期壽命第三十七頁，共七十六頁。37編輯課件注意的問題：（1）小動(dòng)物：灌胃或喂飼法大動(dòng)物：膠囊法或灌胃法喂飼法注意：混合均勻受試物穩(wěn)定保證營養(yǎng)受試物摻入量嚴(yán)格(yángé)規(guī)定第三十八頁，共七十六頁。38編輯課件（2）呼吸道染毒(rǎndú)染毒時(shí)間：2-6h/d亞慢性：4小時(shí)慢性試驗(yàn)：間歇性：工業(yè)毒物6-8小時(shí)連續(xù)性：環(huán)境接觸22-24小時(shí)第三十九頁，共七十六頁。39編輯課件（3）注射(zhùshè)（4）最好結(jié)合毒物動(dòng)力學(xué)血藥濃度的監(jiān)測，以保持生物學(xué)效應(yīng)的每日相似性第四十頁，共七十六頁。40編輯課件3劑量(jìliàng)選擇和分組

（1）分組：原則：一般設(shè)3個(gè)試驗(yàn)組和1個(gè)陰性（溶劑）對(duì)照組。

最高劑量組：要求出現(xiàn)明顯(míngxiǎn)的中毒癥狀或某些觀察指標(biāo)發(fā)生明顯(míngxiǎn)變化，但動(dòng)物不死亡，即使有死亡，不超過10%

最低劑量組：應(yīng)無中毒反應(yīng)或極輕微反應(yīng)（NOAEL)。

中劑量組相：當(dāng)于觀察到有害作用的最低劑量(LOAEL)

高、中、低劑量組距以3－10倍為宜，不少于2倍第四十一頁，共七十六頁。41編輯課件（2）劑量(jìliàng)設(shè)計(jì)：

①以相同物種的短期毒性資料為依據(jù)。

亞慢性毒性試驗(yàn)可依據(jù)急性毒性的閾劑量或以1/20～1/5LD50確定；慢性毒性試驗(yàn)以亞慢性毒性試驗(yàn)效應(yīng)的最大耐受量（MTD）為最高劑量。

劑量選擇步驟：急性亞急性亞慢性慢性

第四十二頁，共七十六頁。42編輯課件

②對(duì)于人群(rénqún)主動(dòng)攝入的食品和藥品，可采用人體可能接觸的最高劑量為劑量設(shè)計(jì)依據(jù)大鼠：3個(gè)劑量組：1030100非嚙齒類：3個(gè)劑量組：51550根據(jù)(gēnjù)專業(yè)特殊性和管理部門有所區(qū)別第四十三頁，共七十六頁。43編輯課件亞慢性毒性的劑量選擇(xuǎnzé)陰性對(duì)照組低劑量組中劑量組高劑量組急性毒性的閾劑量1/20~1/5LD50組距：3~10倍，最低不小于2倍慢性毒性的劑量(jìliàng)選擇陰性對(duì)照組低劑量組中劑量組高劑量組亞慢性閾劑量或其1/5~1/2

1/10

LD50組距：2~5倍，最低不小于2倍第四十四頁，共七十六頁。44編輯課件4觀察(guānchá)指標(biāo)第四十五頁，共七十六頁。45編輯課件（1）一般(yībān)觀察1）進(jìn)食量、外觀體征、行為活動(dòng)綜合性指標(biāo)初步判斷作用(zuòyòng)部位、損害程度第四十六頁，共七十六頁。46編輯課件2）動(dòng)物體重：

體重的增長情況是綜合反映動(dòng)物健康狀況最基本的靈敏指標(biāo)之一，受食欲、消化功能、代謝和能量消化變化的影響。如發(fā)現(xiàn)(fāxiàn)實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物體重增長減慢，停止或減輕，在排除由于異味引起食欲不佳的前提下，可說明化學(xué)毒物的毒性效應(yīng)。表示方法：（1）體重絕對(duì)增長量（2）體重增長百分率（10％）（3）劑量-反應(yīng)關(guān)系第四十七頁，共七十六頁。47編輯課件

3）飼料消耗量：食物利用率：動(dòng)物每攝入100g飼料所增長的體重克數(shù)（g體重/100g飼料）評(píng)價(jià)：食物利用率有助于了解化合物毒性效應(yīng)觀察(guānchá)內(nèi)容：影響食欲影響食物的吸收、代謝食物利用率＝體重增長/進(jìn)食量

第四十八頁，共七十六頁。48編輯課件（2）實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測項(xiàng)目血、尿常規(guī)和血液生化指標(biāo)目的：發(fā)現(xiàn)受試物所致(suǒzhì)器官損傷和器官紊亂檢查重點(diǎn)：肝臟、腎臟、血液第四十九頁，共七十六頁。49編輯課件1）血液學(xué)檢查包括紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白含量、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類、凝血時(shí)間(shíjiān)等2）血液生化檢查（針對(duì)肝臟、腎臟及相關(guān)可能靶部位選擇）注：一般只需在實(shí)際結(jié)束后處死動(dòng)物采血檢驗(yàn)如需在實(shí)驗(yàn)過程中采集血樣，最大采血量不能超過總血量的10%3）尿液第五十頁，共七十六頁。50編輯課件（3）系統(tǒng)尸解和組織病理學(xué)1）臟器重量和臟器系數(shù)：臟器系數(shù)（比）：指某個(gè)臟器的濕重與單位體重的比值，通常是每100g體重中某臟器所占的質(zhì)量。在不同的年齡期，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物各個(gè)臟器與體重比值有一定(yīdìng)規(guī)律，若化學(xué)毒物使某個(gè)臟器受損，其比值會(huì)發(fā)生變化，是一項(xiàng)靈敏、有效和經(jīng)濟(jì)的指標(biāo)。第五十一頁，共七十六頁。51編輯課件臟器系數(shù)增大：增生、充血(chōngxuè)、水腫

臟器系數(shù)減?。号K器發(fā)育不良、萎縮第五十二頁，共七十六頁。52編輯課件尸解對(duì)象：實(shí)驗(yàn)過程中死亡的或者(huòzhě)試驗(yàn)結(jié)束后未死亡的觀察的主要臟器：心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、卵巢（睪丸）、腦等第五十三頁，共七十六頁。53編輯課件2）病理學(xué)檢查(jiǎnchá)

目的：確定化合物對(duì)毒作用的靶部位，損傷的性質(zhì)和程度，從病理學(xué)角度尋找化學(xué)毒物與病理改變的劑量－效應(yīng)關(guān)系，為了解化合物的毒效應(yīng)及機(jī)制提供依據(jù)(yījù)。檢查內(nèi)容：大體檢查、常規(guī)病理組織學(xué)檢查、酶組織化學(xué)化學(xué)檢查、免疫組織化學(xué)檢查、細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)檢查。

第五十四頁，共七十六頁。54編輯課件常規(guī)病理(bìnglǐ)組織學(xué)檢查

HE染色原理(yuánlǐ)：蘇木素-伊紅染色，又叫常規(guī)染色和普通染色。主要用來顯示各種組織正常成分和病變的一般形態(tài)，進(jìn)行總體觀察。第五十五頁，共七十六頁。55編輯課件免疫(miǎnyì)組織化學(xué)法

間接(jiànjiē)免疫熒光法親合素-生物素技術(shù)第五十六頁，共七十六頁。56編輯課件間接(jiànjiē)免疫熒光法原理抗原與一抗結(jié)合和，再用標(biāo)記熒光色素(sèsù)的二抗與第一抗結(jié)合，在熒光顯微鏡下發(fā)出熒光來間接顯現(xiàn)抗原。第五十七頁，共七十六頁。57編輯課件第五十八頁，共七十六頁。58編輯課件親合素-生物素技術(shù)(jìshù)原理

親合素又稱卵蛋白素，是從卵蛋白中提取的一種糖蛋白，每個(gè)親合素上有4個(gè)與生物素分子結(jié)合力極高的位點(diǎn)，兩者間的親和力比抗原抗體大100萬倍。第二抗體結(jié)合上生物素，變?yōu)樯锼鼗贵w。再將親合素與過氧化酶標(biāo)生物素結(jié)合在一起(yīqǐ)，形成親合素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物（ABC復(fù)合物）。

第五十九頁，共七十六頁。59編輯課件親合素-生物素技術(shù)(jìshù)第六十頁，共七十六頁。60編輯課件第六十一頁，共七十六頁。61編輯課件（4）可逆性檢查

最后一次給藥后24h，每組活殺部分動(dòng)物（如2/3），檢測(jiǎncè)各項(xiàng)指標(biāo)，余下動(dòng)物停止染毒，繼續(xù)觀察2-4周。重點(diǎn)觀察毒性反應(yīng)器官，以了解毒性反應(yīng)的可逆性和可能出現(xiàn)的遲緩性毒性第六十二頁，共七十六頁。62編輯課件（5）指標(biāo)觀察(guānchá)時(shí)間

一般狀況和癥狀，每天觀察一次每周記錄飼料消耗量和動(dòng)物體重各一次實(shí)驗(yàn)時(shí)間≤3個(gè)月實(shí)驗(yàn)時(shí)間＞3個(gè)月第六十三頁，共七十六頁。63編輯課件（6）特異性指標(biāo)及其它特異性指標(biāo)是指能反映(fǎnyìng)毒物對(duì)機(jī)體毒作用本質(zhì)的特征性指標(biāo)，常與其毒作用機(jī)制有關(guān)，有時(shí)可作為效應(yīng)生物學(xué)標(biāo)志。對(duì)神經(jīng)行為的檢查神經(jīng)系統(tǒng)心電圖、血壓心血管系統(tǒng)

第六十四頁，共七十六頁。64編輯課件（二）長期(chángqī)毒性試驗(yàn)的注意事項(xiàng)第六十五頁，共七十六頁。65編輯課件重視實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目管理合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)劑量設(shè)置(shèzhì)合理獲得明確的劑量-反應(yīng)關(guān)系，理想的NOAEL、LOAEL第六十六頁，共七十六頁。66編輯課件3.試驗(yàn)(shìyàn)動(dòng)物環(huán)境的要求4.檢測條件的控制第六十七頁，共七十六頁。67編輯課件三、結(jié)果評(píng)價(jià)

（一）明確觀察指標(biāo)(zhǐbiāo)是否有差異1.劑量相關(guān)性分析2.反應(yīng)重現(xiàn)性第六十八頁，共七十六頁。68編輯課件3.相關(guān)指標(biāo)的變化4.差異(chāyì)大小和性別差異(chāyì)5.歷史性對(duì)照的作用第六十九頁，共七十六頁。69編輯課件（二）差異是否代表(dàibiǎo)有害效應(yīng)第七十頁，共七十六頁。70編輯課件化學(xué)品毒性鑒定(jiàndìng)程序和方法

1）第一階段（急性毒性試驗(yàn)、眼刺激試驗(yàn)和皮膚刺激試驗(yàn)）

主要是急性毒性參數(shù)的測定和了解受試樣品對(duì)皮膚、粘膜的刺激性以及致敏性，為毒性分級(jí)和標(biāo)簽(biāoqiān)管理提供依據(jù)。同時(shí)，可了解受試樣品對(duì)機(jī)體造成急性損害的可能性和嚴(yán)重程度，并為第二階段各項(xiàng)試驗(yàn)的劑量設(shè)計(jì)提供依據(jù)。在測定LD50時(shí)，一般要求用兩種動(dòng)物，染毒途徑應(yīng)包括所有人體可能的接觸途徑。

第七十一頁，共七十六