13種傘形科中藥抗氧化能力研究

13種傘形科中藥抗氧化能力研究

作者：潘海宇，韓剛，姜輝，王傳美

【關(guān)鍵詞】超氧自由基；抗氧化；傘形科；化學(xué)發(fā)光法

摘要：目的對(duì)13種傘形科中藥的抗超氧陰離子(O2)能力進(jìn)行了研究。方法采用黃嘌呤-黃嘌呤氧化酶-魯米諾化學(xué)發(fā)光體系測(cè)定了中藥乙醇提取物對(duì)O2自由基的清除作用。結(jié)果羌活對(duì)超氧自由基清除能力最強(qiáng)。結(jié)論13種傘形科中藥對(duì)超氧自由基均有清除作用。提取液的加入量與抑制O2自由基的能力呈現(xiàn)明顯量效關(guān)系。

關(guān)鍵詞：超氧自由基；抗氧化；傘形科；化學(xué)發(fā)光法

StudyonAntioxidationofUmbelliferaeChineseHerbs

Abstract：ObjectiveTheabilityofantioxidationfor13kindsofUmbelliferaehasbeenantioxidantactivitiseoftheethanolextractionsof13UmbelliferacChineseherbmedicineweremeasuredbychemiluminescence.ResultsTheabilitythatscavengessuperoxideradical(O2)wasNotopterygiumforbesiiBoiss.Conclusion13kindsofUnbelliferaeChineseherbmedicinescanscavengesuperoxideradical.

Keywords：Superoxidefreeradical;Antioxidation;Umbelliferae;Chemiluminescence

隨著自由基醫(yī)學(xué)的發(fā)展，人們認(rèn)識(shí)到多種疾病與自由基有關(guān)。機(jī)體在代謝過程中產(chǎn)生超氧陰離子自由基，過量的超氧陰離子自由基如不及時(shí)清除，在體內(nèi)積累會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性［1］，破壞生物膜的結(jié)構(gòu)和功能，引發(fā)多種疾病。尋找抗自由基活性成分的研究非常活躍［2］。我國(guó)植物資源非常豐富，許多中藥有抗自由基作用［3］。我國(guó)約有傘形科植物95屬，600種，已知藥用的有230種［4］。傘形科植物常含揮發(fā)油、香豆素、三萜及黃酮類化合物。自古以來傘形科植物多用于活血，美白等方劑中。本研究對(duì)13種常用傘形科中藥的乙醇提取液進(jìn)行了抗超氧自由基能力的研究，為篩選抗衰老藥物奠定基礎(chǔ)。

1儀器與材料

儀器FA4000電子天平，WDD2型發(fā)光儀，KDC1042離心機(jī)，電熱恒溫水浴鍋，PHS3C型酸度計(jì)。

試劑魯米諾，黃嘌呤，黃嘌呤氧化酶購(gòu)自Sigma公司，Vc購(gòu)自北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠，其余試劑均為分析純。

中藥材羌活Notopterygiumforbesiiboiss，川芎LigusticumchuangxiongHort，柴胡BupleurumfalcatumL.，獨(dú)活A(yù)ngclicapubescensmaxim.，蛇床子Cnidiummonnieri(Li)Cusson，小茴香FoeniculumVulgareMill.，當(dāng)歸AngelicaSinensisdiels，北沙參GlehniaLittoralisFR.，白芷AngelicaDahuricabenth.Hook，藁本LigusticumsinenseDuver，白花前胡PeucedanumpraeruptorumDunn，防風(fēng)Saposhnikoviadivaricata，川黨參CodonopsistangshenOliv［5］以上中藥材均購(gòu)自河北安國(guó)中藥材市場(chǎng)，經(jīng)藥學(xué)系生藥教研室鑒定，符合2000版藥典標(biāo)準(zhǔn)。

2方法與結(jié)果

中藥提取液的制備取中藥材適量，粉碎，干燥器中干燥1d，過40目篩。準(zhǔn)確稱取10g中藥粉末，于回流裝置中，加入95%乙醇50ml，電熱套加熱，兩次回流提取；第1次回流2h，第2次回流時(shí)乙醇用量與加熱時(shí)間均減半。合并兩次提取液，3000r?min1離心5min，取上清液于100ml容量瓶中定容，作為樣品測(cè)試液。另取Vc配成5mmol?L1作為對(duì)照液備用。

清除超氧自由基作用采用黃嘌呤黃嘌呤氧化酶魯米諾產(chǎn)生O2自由基的發(fā)光體系進(jìn)行測(cè)定［6］。在發(fā)光杯中依次加入pH=，1mol?L1Na2CO3NaHCO3緩沖溶液ml,1mmol?L1魯米諾50μl,1mol?L1黃嘌呤200μl，中藥提取液適量，最后加入mol?L1黃嘌呤氧化酶啟動(dòng)反應(yīng)，記錄10s積分發(fā)光強(qiáng)度。以Vc做對(duì)照。同上述方法以不加中藥提取液做空白測(cè)定10s積分發(fā)光強(qiáng)度，重復(fù)上述測(cè)定。

乙醇提取物對(duì)O2自由基的抑制率抑制率=/I0×100%式中I0為空白發(fā)光強(qiáng)度，I為樣品發(fā)光強(qiáng)度。樣品對(duì)O2自由基的清除能力，一般用抑制率為50%時(shí)的樣品加入量IC50來表示。IC50越小，對(duì)自由基清除能力越強(qiáng)。13種傘形科中藥醇提取物對(duì)O2自由基的清除能力見表1。

表1不同用量乙醇提取物對(duì)O2的清除作用

［1］SimonianNA,CoyleJT.OxidativeStressinneurodegenerativedisease［J］.AnnuRevpharmacolToxicol,1996,36:83.

［2］丁長(zhǎng)海.抗氧化自由基藥物研究進(jìn)展［J］.中國(guó)藥理通報(bào)，1992，8；21.

［3］段鳳蓮，趙克然.寧玉，等.中藥清除氧自由基近況［J］.中國(guó)中藥，1999，24：106.

［4］鄭少臣，蔡少青.藥用植物學(xué)與生藥學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2004:354.

［5］韓立，徐國(guó)鈞.漢拉英中草藥名稱［M］.福州