小鼠口服和吸入復(fù)方蒼術(shù)油急性毒性研究

小鼠口服和吸入復(fù)方蒼術(shù)油急性毒性研究【摘要】目的觀察小鼠灌胃和吸入復(fù)方蒼術(shù)油后的急性毒性反應(yīng)及死亡情況。方法小鼠通過灌胃和靜式染毒柜小鼠吸入接觸給藥，觀察小鼠口服和吸入復(fù)方蒼術(shù)油急性毒性。結(jié)果吸入染毒實(shí)驗(yàn)過程中，小鼠均出現(xiàn)自發(fā)活動減少、靜臥、嗜睡等癥狀。灌胃給藥h后出現(xiàn)小鼠死亡，大多發(fā)生于給藥后24h以內(nèi)。恢復(fù)期小鼠無異常表現(xiàn)。結(jié)論小鼠口服和吸入復(fù)方蒼術(shù)油后，其急性毒性較低。

【關(guān)鍵詞】復(fù)方蒼術(shù)油急性毒性小鼠

蒼術(shù)為菊科植物蒼術(shù)Atractylodeslancea(Thumb.)DC的干燥根莖。具有燥濕健脾、祛風(fēng)散寒、明目之功效。臨床上用于濕滯中焦證、風(fēng)濕痹證及外感風(fēng)寒挾濕之表證的治療。復(fù)方蒼術(shù)油技術(shù)提取的蒼術(shù)油，所含的蒼術(shù)素約15%。按《中藥新藥審批辦法》的規(guī)定，有效成分或其有效部位之和應(yīng)達(dá)到50%以上。目前，尚沒有關(guān)于復(fù)方蒼術(shù)油對小鼠口服和吸入急性毒性研究的報(bào)道，因此，本實(shí)驗(yàn)觀察復(fù)方蒼術(shù)油對小鼠的口服和吸入急性毒性，為臨床合理用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1器材1動物NIH小鼠120只，SPF級，體重18～22g，雌雄各半，由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，合格證書：SCXK2003-0002，粵監(jiān)證字2007A004。實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)3d。2試藥與儀器復(fù)方蒼術(shù)油由廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥中心提供，每毫升相當(dāng)于g生藥量，批號20070911。HOPE-MED8050-3型染毒柜(60L)，合普機(jī)電工程(天津)有限公司生產(chǎn)。金龍魚調(diào)和油(稀釋藥液用)：南海油脂工業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號20070726。

2方法

吸入急性毒性的研究［2］將60只NIH小鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，雌雄各半。將各組小鼠分別置于m3玻璃染毒柜內(nèi)，根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，以組間距倍數(shù)設(shè)置系列染毒濃度，即分別為111，67，40，24，14g/m3調(diào)節(jié)電加熱器為80℃加熱揮發(fā)，靜式吸入2h；對照組染毒柜不加復(fù)方蒼術(shù)油。染毒后連續(xù)觀察14d，觀察小鼠中毒的表現(xiàn)，記錄死亡時(shí)間和死亡數(shù)，對死亡動物及時(shí)進(jìn)行尸檢，其它動物在觀察期結(jié)束之后進(jìn)行尸檢，觀察內(nèi)臟器官體積、顏色及質(zhì)地有無改變，若有肉眼可見病變進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。結(jié)果表明采用新藥統(tǒng)計(jì)軟件處理，用Bliss法計(jì)算LC50及95%的可信限。

口服給藥急性毒性的研究［3］將60只NIH小鼠隨機(jī)分為6組同“”項(xiàng)，每組10只，雌雄各半，給藥途徑為灌胃給藥，給藥量均為20ml/kg。復(fù)方蒼術(shù)油1組予%復(fù)方蒼術(shù)油，相當(dāng)于生藥量g/kg；復(fù)方蒼術(shù)油2組予%復(fù)方蒼術(shù)油，相當(dāng)于生藥量g/kg；復(fù)方蒼術(shù)油3組予%復(fù)方蒼術(shù)油，相當(dāng)于生藥量g/kg；復(fù)方蒼術(shù)油4組予%復(fù)方蒼術(shù)油，相當(dāng)于生藥量g/kg；復(fù)方蒼術(shù)油5組予%復(fù)方蒼術(shù)油，相當(dāng)于生藥量g/kg；溶劑對照組灌服調(diào)和油。給藥后觀察小鼠體重變化、飲食、外觀、行為、分泌物、排泄物、死亡情況及中毒反應(yīng)等，觀察14d。對瀕死及死亡動物及時(shí)進(jìn)行尸檢，其它動物在觀察期結(jié)束之后進(jìn)行尸檢，觀察內(nèi)臟器官體積、顏色及質(zhì)地有無改變，若有肉眼可見病變進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。結(jié)果表明采用新藥統(tǒng)計(jì)軟件外理，用Bliss法計(jì)算LD50及95%的可信限。

3結(jié)果

吸入急性毒性實(shí)驗(yàn)吸入染毒實(shí)驗(yàn)

LC50為24g/m3，95%的可信限是16～33g/m3；n=10

口服給藥急性毒性實(shí)驗(yàn)口服急性毒性的實(shí)驗(yàn)小鼠灌胃給藥后，主要毒性癥狀為：行動遲緩、靜臥、昏睡、呼吸減弱、心跳減慢，直至死亡。毒性癥狀的輕重與劑量成正相關(guān)。小鼠死亡開始于給藥后h，大多發(fā)生于給藥后24h以內(nèi)?；謴?fù)期限小鼠無異常表現(xiàn)。死亡動物及觀察期結(jié)束處死動物經(jīng)尸檢，肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎、腦等器官，未見明顯病理改變。結(jié)果見表2。

表2復(fù)方蒼術(shù)油小鼠口服給藥急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

LD50為g/kg，95%的可信限是～g/kg；n=10

4討論

近年來，對中藥復(fù)方的安全性研究日趨重視，臨床前的藥效毒理學(xué)研究工作已作為是否有進(jìn)一步開發(fā)意義的依據(jù)。本研究發(fā)現(xiàn)：①小鼠口服復(fù)方蒼術(shù)油的LD50為g/kg，95%的可信限是～g/kg。按空氣清新劑毒性定標(biāo)準(zhǔn)，小鼠口服急毒LD50≥5g/kg，判定為無毒。本受試物的LD50高于無毒標(biāo)準(zhǔn)的76倍，因此判定為無毒。②小鼠急性吸入復(fù)方蒼術(shù)油的LC50為24/m3，95%的可信限是16～33g/m3。按空氣清新劑毒性判定標(biāo)準(zhǔn)，小鼠急性吸入：476.

［2］徐叔云