電子顯微鏡技術及在病理診斷上的作用

關于電子顯微鏡技術及在病理診斷上的作用第1頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三電子顯微鏡技術及在病理診斷上的作用一、電子顯微鏡技術

二、診斷病理學三、電子顯微鏡技術在病理診斷上的作用四、討論第2頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三（一）概念電子顯微鏡技術：也稱電子顯微技術或電子顯微術第3頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三概念電子顯微鏡技術

電鏡精密儀器

樣品制備技術

第4頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三1、電子顯微鏡：是用電子束成像的顯微鏡，電子顯微鏡是一種高精密度的電子光學儀器，它具有較高分辨率本領和放大倍數(shù)，是觀察和研究物質微觀結構的重要工具。

發(fā)明背景：它是在發(fā)現(xiàn)電子束具有波動性質及利用磁場改變電子束行徑，在上述理論的指導下發(fā)明出的。電子顯微鏡主要分為兩種類型：一種是觀察樣品內(nèi)部超微結構的透射電子顯微鏡，另一種是揭示樣品表面形貌的掃描電子顯微鏡。電子顯微鏡特征：電鏡與光鏡的區(qū)別掃描電鏡與透射電鏡比較：（見下表）第5頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三掃描電鏡和透射電鏡比較第6頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三本圖片來自中科科儀第7頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三本圖片來自中科科儀第8頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三2、樣品制備透射電鏡樣品制備的常用方法：包括超薄切片、冷凍復型、負染色等。掃描電鏡樣品制備：比透射電鏡樣品制備簡單。除保存樣品表面形貌結構外，只要求樣品干燥并能導電，而不需包埋和切片。制備方法與透射電鏡樣品制備方法一樣。第9頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三電子顯微鏡技術及在病理診斷上的作用一、電子顯微鏡技術二、診斷病理學三、電子顯微鏡技術在病理診斷上的作用四、討論第10頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三二．診斷病理學概述病理學是研究疾病病因、發(fā)病機制、形態(tài)結構、功能、代謝變化的一門基礎醫(yī)學及其與臨床醫(yī)學之間的橋梁學科。主要包括基礎病理學、實驗病理學及診斷病理學(以往稱外科病理學或臨床病理學)。各級醫(yī)院病理科所從事的工作主要是診斷病理學。病理檢查內(nèi)容通常包括活體組織檢查、手術切除標本檢查、術中冰凍檢查、細胞學檢查、尸體解剖檢查等。病理檢查的手段很多,如:HE常規(guī)檢查、特殊染色(組織化學)、免疫組化、原位分子雜交、聚合酶鏈反應(PCR)、電子顯微鏡檢查、病理圖像分析、流式細胞儀檢查、細胞培養(yǎng)、傳真病理學(telepathology)等。第11頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三電子顯微鏡技術及在病理診斷上的作用一、電子顯微鏡技術二、診斷病理學三、電子顯微鏡技術在病理診斷上的作用四、討論第12頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三三．電子顯微鏡技術在病理診斷上的作用（一）電鏡檢查起決定性作用（二）電鏡檢查起參考和修正作用（三）電鏡檢查起驗正作用第13頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三三．電子顯微鏡技術在病理診斷上的作用（一）電鏡檢查起決定性作用：電鏡發(fā)現(xiàn)特異性超微結構信息做出最后病理診斷。例：男,39歲,發(fā)現(xiàn)右側頸部無痛腫物1年余,花生米大,取腫物做活檢。光鏡:增大的淋巴結,結構紊亂,但仍殘留濾泡與淋巴竇,竇腔及淋巴索充以大量胞質豐富的嗜伊紅細胞,直徑約20μm。核圓,卵圓或扭曲狀。間有增生的淋巴細胞及嗜酸性粒細胞。電鏡:大細胞排列疏松、無連接、胞質寬廣,見有似網(wǎng)球拍或柄的雙膜結構(Birbeck顆粒),證明光鏡下嗜伊紅大細胞為朗格漢斯細胞(圖1)。診斷為淋巴結朗格漢斯細胞組織細胞增生癥。電鏡診斷具有獨特的確診價值。第14頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三圖1朗格漢斯細胞組織細胞增生癥:見雙模構成的似網(wǎng)球拍狀的Birbeck顆粒。EM×10000注：圖片取自張瑞祥,齊潔敏,張潔茹等.235例疑難病理標本的電鏡診斷價值.臨床與實驗病理學雜志;2002;15（5）第15頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三（二）電鏡檢查起參考和修正作用：電鏡獲得的信息對光鏡結果予以補充或修正,最終做出最后病理診斷。

例：男,因左頜下淋巴結腫大就診。經(jīng)淋巴結活檢,病理診斷為淋巴組織增生。不久頜下淋巴結又腫大,再次淋巴結(頜下)活檢病理診斷為惡性淋巴瘤(免疫母細胞型)。電鏡:瘤細胞大、多邊形或不規(guī)則形,核質比大,核膜彎曲,不規(guī)則或奇特的內(nèi)陷,核常染色質豐富,網(wǎng)欄狀大核仁。少許胞質突,胞質內(nèi)核糖體豐富,其他細胞器稀少。質膜間見發(fā)育不良的橋粒樣連接(圖2)。最后病理診斷為頜下淋巴結轉移癌。隨后臨床發(fā)現(xiàn)鼻咽癌原發(fā)灶。此例電鏡有確診價值。第16頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三圖2

轉移癌:瘤細胞大、長圓形,胞核大、梭形,核膜不平滑,顯著增大的核質比質膜間有橋粒樣連接,胞質含少許欠發(fā)達的細胞器,網(wǎng)欄狀大核仁,兩團染色質間顆粒。EM×10000注：圖片取自張瑞祥,齊潔敏,張潔茹等.235例疑難病理標本的電鏡診斷價值.臨床與實驗病理學雜志;2002;15（5）第17頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三（三）電鏡檢查起驗正作用：超微結構信息進一步證實、豐富了光鏡的組織學診斷

例：男,30歲,肝穿活檢。光鏡診斷:慢遷肝。雖未見典型碎屑樣壞死,但不除外活動性變化。電鏡見肝細胞大,疏松,細胞周圍間隙加大,有微絨毛化,滑面內(nèi)質網(wǎng)增生,內(nèi)含管狀體,肝竇內(nèi)充塞膠原纖維。有的區(qū)域見部分肝細胞胞質有胞溶,周圍有淋巴細胞浸潤。最后電鏡診斷:慢性遷延性乙型病毒性肝炎有輕微活動(圖3)。電鏡有確診價值。第18頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三圖3

慢性遷延性乙型病毒性肝炎:滑面內(nèi)質網(wǎng)增生,腔內(nèi)含量多的乙肝表面抗原管狀體。EM×8000注：圖片取自張瑞祥,齊潔敏,張潔茹等.235例疑難病理標本的電鏡診斷價值.臨床與實驗病理學雜志;2002;15（5）第19頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三電子顯微鏡技術及在病理診斷上的作用一、電子顯微鏡技術二、診斷病理學三、電子顯微鏡技術在病理診斷上的作用四、討論第20頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三四、討論國內(nèi)外對電鏡診斷的價值,在腫瘤應用方面報道較多,Gyorkey等65%。文獻中電鏡診斷價值的比率高低不同。主要原因是病例的選擇不太相同,使用標準、統(tǒng)計的方法也不同還有檢查者的光鏡診斷水平或側重點不同等因素也有關第21頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三應用電鏡做最后病理診斷工作,有以下幾點注意：(1)由于電鏡費用較高,制作程序繁雜,應有選擇地送電鏡檢查。有的臨床醫(yī)師,認為電鏡是優(yōu)于光鏡的先進技術而盲目送檢,如胃鏡取胃黏膜活檢無選擇的送電鏡檢查,造成資源、人力和財力的浪費。(2)電鏡標本要求盡可能活體取材,立即投入預冷的固定液中固定,以利完好地保存細胞的超微結構。(3)涉及病原學診斷,特別是懷疑病毒、支原體、衣原體等微生物感染的標本應充分使用電鏡。(4)作為輔助手段應用電鏡時應做到:

第22頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三①在光鏡觀察基礎上有的放矢地做電鏡觀察

②半薄切片選區(qū)定位要求準確③超微結構觀察仍應依次行組織學和細胞學觀察,根據(jù)需要采取不同的放大倍率觀察

④樹立電鏡觀察是為獲得組織細胞的超微結構病理信息的觀念,而不是代替光鏡診斷。第23頁，講稿共26頁，2023年5月2日，星期三因此,如同戰(zhàn)爭